期刊文献+
共找到108篇文章
< 1 2 6 >
每页显示 20 50 100
NS基因克隆及人成骨肉瘤细胞和人胚胎肾细胞NS基因的表达 被引量:17
1
作者 刘思金 蔡子微 +2 位作者 胡国法 魏影允 劳为德 《牡丹江医学院学报》 2003年第2期5-7,共3页
目的 :研究nucleostemin(核干细胞因子 ,NS)基因在人成骨肉瘤细胞 (OS - 732 )和人胚胎肾细胞 (HEK -2 93)的表达情况 ,并克隆该基因的部分片段。方法 :以OS - 732细胞和HEK - 2 93细胞为实验材料 ,进行细胞总RNA的提取、反转录反应、PC... 目的 :研究nucleostemin(核干细胞因子 ,NS)基因在人成骨肉瘤细胞 (OS - 732 )和人胚胎肾细胞 (HEK -2 93)的表达情况 ,并克隆该基因的部分片段。方法 :以OS - 732细胞和HEK - 2 93细胞为实验材料 ,进行细胞总RNA的提取、反转录反应、PCR反应、NS基因片段的克隆及测序等。结果 :(1)提取的总RNA质量很高 ,基本上无降解 ;(2 )OS - 732细胞和HEK - 2 93细胞中均有NS基因的表达 ,并且在相同量底物的情况下 ,OS- 732细胞NS基因的表达量明显高于HEK - 2 93细胞 ;(3)将PCR产物成功地与pGEM -T克隆载体连接 ,构建为pGEM -T -NS质粒 ,测序结果表明NS基因片段序列与基因库中登陆的序列完全一致。结论 :本文成功地从OS - 732细胞和HEK - 2 93细胞克隆到NS基因片段 ,OS - 732细胞NS基因的表达量明显高于HEK- 2 展开更多
关键词 核干细胞因子 人成骨肉瘤细胞 NS 基因 克隆 胚胎 肾细胞 反转录反应 PCR反应
下载PDF
Nucleostemin特异性RNA干扰对HeLa细胞体内外增殖能力的影响 被引量:14
2
作者 蔡子微 刘思金 +1 位作者 孙丽秋 劳为德 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第7期1331-1335,共5页
目的:检测肿瘤细胞Nucleostemin(NS)的表达,研究NS特异性RNA干扰对HeLa细胞体内外增殖的影响。方法:提取6种肿瘤细胞总RNA,用RT-PCR和Northernblot方法检测NS的表达。用NS特异性siRNA表达载体转染HeLa细胞,观察转染的HeLa细胞(简称NS-si... 目的:检测肿瘤细胞Nucleostemin(NS)的表达,研究NS特异性RNA干扰对HeLa细胞体内外增殖的影响。方法:提取6种肿瘤细胞总RNA,用RT-PCR和Northernblot方法检测NS的表达。用NS特异性siRNA表达载体转染HeLa细胞,观察转染的HeLa细胞(简称NS-siRNA-HeLa细胞)体内外增殖的变化。结果:6种肿瘤细胞中NS明显高表达。体外培养的NS-siRNA-HeLa细胞中NS表达显著低于对照组,G0/G1期细胞百分率显著升高。体内致瘤实验显示,NS-siRNA-HeLa细胞在裸鼠体内增殖显著低于对照组。结论:NS在肿瘤细胞中高表达具有普遍性。NS特异性RNA干扰使HeLa细胞进入S期受阻,并可明显降低HeLa细胞体内外的增殖能力。 展开更多
关键词 nucleostemin 干细胞 HELA细胞 细胞周期
下载PDF
NS特异性siRNA真核表达载体的构建 被引量:15
3
作者 蔡子微 刘思金 +2 位作者 胡国法 魏影允 劳为德 《牡丹江医学院学报》 2003年第3期1-4,共4页
目的 :构建nucleostemin(核干细胞因子 ,NS)特异性siRNA真核表达载体。方法 :以小鼠组织基因组DNA为模板 ,PCR方法克隆小鼠编码U6snRNA基因的启动子 ,将NS -siRNA表达序列、PolⅢ识别的终止信号与U6启动子连接起来 ,并将其插入 pcDNA4 /... 目的 :构建nucleostemin(核干细胞因子 ,NS)特异性siRNA真核表达载体。方法 :以小鼠组织基因组DNA为模板 ,PCR方法克隆小鼠编码U6snRNA基因的启动子 ,将NS -siRNA表达序列、PolⅢ识别的终止信号与U6启动子连接起来 ,并将其插入 pcDNA4 /C载体中。 结果 :(1 )从小鼠基因组DNA中克隆到编码U6snRNA基因的启动子 ,(2 )构建了含有U6启动子、NS -siRNA表达序列和PolⅢ识别终止信号的NS -siRNA表达的片段 ,(3)将NS -siRNA表达片段插入了 pcDNA4 /C真核表达载体。 结论 :构建了针对NS特异性的siRNA真核表达载体 pcDNA4 /C -NS -Silencer。 展开更多
关键词 核干细胞因子 NS SIRNA 特异性真核表达载体 小鼠 U6启动子 基因 克隆
下载PDF
Expression of nucleostemin in prostate cancer and its effect on the proliferation of PC-3 cells 被引量:12
4
作者 LIU Ran-lu ZHANG Zhi-hong +6 位作者 ZHAO Wei-ming WANG Meng QI Shi-yong LI Jing ZHANG Yue LI Sheng-zhi XU Yong 《Chinese Medical Journal》 SCIE CAS CSCD 2008年第4期299-304,共6页
Background Nucleostemin is essential for the proliferation and survival of stem and cancer cells, but it is unknown whether this newly identified molecule is involved in prostate cancer pathogenesis.Methods Total RNA ... Background Nucleostemin is essential for the proliferation and survival of stem and cancer cells, but it is unknown whether this newly identified molecule is involved in prostate cancer pathogenesis.Methods Total RNA and protein were extracted from prostate cancer tissues and PC-3, LNCap and DU145 cell lines. The nucleostemin mRNA and protein expression were measured by RT-PCR and Western blot. Immunohistochemistry was also used to detect the nucleostemin protein expression in prostate cancer tissues and PC-3 cells. A nucleostemin specific, short hairpin RNA, expression plasmid was used to transfect PC-3 cells. The changes of nucleostemin gene were detected and the oroliferative capacitv of the cells was determined. Results Nucleostemin was highly expressed in prostate cancer tissues and cell lines. Nucleostemin expression level in the silencer group PC-3 cells remarkably reduced. The proliferation rate of silencer group PC-3 cells decreased and the percentage of G1 stage cells increased. The neoplasm forming capacity in nude mice of the silencer group PC-3 cells decreased significantly. Conclusions Nucleostemin is highly expressed in prostate cancer tissues and cell lines. The proliferative capacity of PC-3 cells is remarkably reduced after silencing nucleostemin gene expression. 展开更多
关键词 nucleostemin prostatic neoplasms PC-3 RNA interference
原文传递
乳腺肿瘤组织nucleostemin基因表达与临床病理表现的关系 被引量:13
5
作者 蔡子微 郑学芝 胡静 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第11期2191-2194,共4页
目的:研究nucleostemin(NS)基因在人类乳腺肿瘤组织中的表达及其与恶性程度、组织类型和TNM分期的关系。方法:提取肿瘤组织RNA,用电泳与半定量RT-PCR方法检测肿瘤组织中NS基因的表达及表达量;比较NS基因表达量与乳腺肿瘤恶性程度、组织... 目的:研究nucleostemin(NS)基因在人类乳腺肿瘤组织中的表达及其与恶性程度、组织类型和TNM分期的关系。方法:提取肿瘤组织RNA,用电泳与半定量RT-PCR方法检测肿瘤组织中NS基因的表达及表达量;比较NS基因表达量与乳腺肿瘤恶性程度、组织类型和TNM分期的关系。结果:正常组织中未检测到NS基因表达,良性乳腺肿瘤组织NS基因的表达量低于恶性肿瘤(P<0.01),乳腺恶性肿瘤分级越高,NS基因的表达量越高(P<0.01);TNM分期越高,NS基因的表达量越高(P<0.01);NS基因的表达量高低与乳腺肿瘤组织类型无关(P>0.05)。结论:NS基因表达量与乳腺肿瘤组织类型无关,而与肿瘤分级、TNM分期有关,随着肿瘤分级的提高、TNM分期的提高,NS基因表达量也提高。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 基因 nucleostemin 基因表达
下载PDF
Millimeter-wave Exposure Promotes the Differentiation of Bone Marrow Stromal Cells into Cells with a Neural Phenotype 被引量:9
6
作者 童叶青 杨朝辉 +5 位作者 杨迪 楚慧款 曲敏 刘冠兰 吴艳 刘胜洪 《Journal of Huazhong University of Science and Technology(Medical Sciences)》 SCIE CAS 2009年第4期409-412,共4页
This study investigated the ability of millimeter-wave (MMW) to promote the differentiation of bone marrow stromal cells (BMSCs) into cells with a neural phenotype. The BMSCs were primarily cultured. At passage 3,... This study investigated the ability of millimeter-wave (MMW) to promote the differentiation of bone marrow stromal cells (BMSCs) into cells with a neural phenotype. The BMSCs were primarily cultured. At passage 3, the cells were induced by β-mercaptoethanol (BME) in combination with MMW or BME alone. The expressions of nucleostemin (NS) and neuron-specific enolase (NSE) were detected by immunofluorescent staining and Western blotting respectively to identify the differentiation. The untreated BMSCs predominately expressed NS. After induced by BME and MMW, the BMSCs exhibited a dramatic decrease in NS expression and increase in NSE expression. The differentiation rate of the cells treated with BME and MMW in combination was significantly higher than that of the cells treated with BME alone (P〈0.05). It was concluded that MMW exposure enhanced the inducing effect of BME on the differentiation of BMSCs into cells with a neural phenotype. 展开更多
关键词 bone marrow stromal cells β-mercaptoethanol MILLIMETER-WAVE nucleostemin neuron specific enolase
下载PDF
食管鳞状细胞癌组织中核干细胞因子蛋白的表达 被引量:9
7
作者 张功员 尹磊 +6 位作者 李晟磊 赵秋民 刘宗文 陈奎生 高冬玲 张云汉 张钦宪 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2007年第6期1088-1090,共3页
目的:检测食管鳞状细胞癌组织中核干细胞因子(NS)蛋白的表达。方法:应用免疫组化SABC法检测62例食管鳞状细胞癌组织、31例癌旁不典型增生组织及62例正常食管黏膜组织中NS蛋白的表达,并分析其与食管鳞状细胞癌患者病理分级、淋巴结转移... 目的:检测食管鳞状细胞癌组织中核干细胞因子(NS)蛋白的表达。方法:应用免疫组化SABC法检测62例食管鳞状细胞癌组织、31例癌旁不典型增生组织及62例正常食管黏膜组织中NS蛋白的表达,并分析其与食管鳞状细胞癌患者病理分级、淋巴结转移等临床指标的关系。结果:食管鳞状细胞癌组织、癌旁不典型增生组织和正常食管黏膜组织中NS蛋白的阳性表达率分别为69.4%,41.9%和17.7%,3组间比较差异有统计学意义(χ2=33.676,P<0.01)。NS蛋白阳性表达率与食管鳞状细胞癌的组织学分级、浸润深度及淋巴结转移有关(P均<0.05),与年龄、性别无关(P>0.05)。结论:NS在食管癌的发生发展和增殖过程中起重要作用,NS蛋白检测可望成为食管鳞状细胞癌早期诊断的重要指标之一。 展开更多
关键词 食管肿瘤 鳞状细胞癌 核于细胞因子 增殖
下载PDF
姜黄素对胃癌SGC-7901细胞Nucleostemin基因表达的影响及意义 被引量:8
8
作者 郑学芝 周冬云 +3 位作者 徐秋玲 张绪东 念红 李丽 《中国药师》 CAS 2010年第3期355-357,共3页
目的:研究姜黄素对胃癌SGC-7901细胞株NS基因表达的影响及凋亡诱导作用,探讨姜黄素抗肿瘤机制。方法:不同浓度姜黄素(0,10,20,40μmol·L^(-1))和不同时间(12,24,48 h)点处理细胞,利用CCK-8法检测细胞增殖抑制率,RT-PCR法检测姜黄... 目的:研究姜黄素对胃癌SGC-7901细胞株NS基因表达的影响及凋亡诱导作用,探讨姜黄素抗肿瘤机制。方法:不同浓度姜黄素(0,10,20,40μmol·L^(-1))和不同时间(12,24,48 h)点处理细胞,利用CCK-8法检测细胞增殖抑制率,RT-PCR法检测姜黄素作用前后NS基因表达量的变化,TUNEL试剂盒法、流式细胞仪法检测细胞凋亡情况。结果:20μmol·L^(-1)以上浓度的姜黄素对体外培养的胃癌SGC-7901细胞株生长具有抑制作用并呈量效和时效关系;与对照组相比,姜黄素处理组NS基因表达量明显下降,细胞凋亡明显增加(凋亡指数>26.61%,P<0.05)。结论:姜黄素使胃癌SGC-7901细胞增殖减慢,凋亡增加,NS基因表达下降,可能是姜黄素抗肿瘤机制之一。 展开更多
关键词 nucleostemin 姜黄素 胃癌 细胞凋亡
下载PDF
沉默核干因子基因表达对HL-60白血病细胞凋亡的影响 被引量:9
9
作者 岳保红 蔚利纳 王园园 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2009年第2期319-323,共5页
本研究探讨靶向沉默白血病细胞的核干因子(nucleostemin,NS)基因对HL-60白血病细胞凋亡的影响。用T7启动子介导体外合成两条短发夹状干扰RNA(NS-shRNA),以其中沉默NS基因作用强的一条NS-shRNA转染HL-60细胞,同时以与NS基因序列无关小干... 本研究探讨靶向沉默白血病细胞的核干因子(nucleostemin,NS)基因对HL-60白血病细胞凋亡的影响。用T7启动子介导体外合成两条短发夹状干扰RNA(NS-shRNA),以其中沉默NS基因作用强的一条NS-shRNA转染HL-60细胞,同时以与NS基因序列无关小干扰RNA转染HL-60细胞作对照,应用RT-PCR检测被转染的HL-60细胞NS-mRNA抑制效果,倒置显微镜下观察活体细胞形态变化,Wright-Giemsa染色观察细胞胞体和细胞核形态学变化,以流式细胞仪(FCM)和TdT介导的dUTP缺口末端标记技术(TUNEL)测定凋亡细胞数并计算凋亡阳性率。结果表明:HL-60细胞被NS-shRNA转染48小时后NS-mRNA阻断率达到74.94%,凋亡率分别为(25.32±3.06)%和(27.3±3.21)%,对照组仅(3.12±0.38)%和(3.30±1.52)%,转染组与对照组比较差异显著(p<0.01)。Wright-Giemsa染色显示细胞发生核碎裂并出现"凋亡小体"。结论:靶向沉默NS基因表达可诱发和促进HL-60白血病细胞发生凋亡,为NS基因作为恶性肿瘤治疗的候选靶基因奠定了理论基础。 展开更多
关键词 核干因子 细胞凋亡 短发夹状干扰RNA 白血病 HL-60细胞
下载PDF
RNA干扰抑制膀胱肿瘤细胞BIU-87核干细胞因子基因表达对其增殖的影响 被引量:7
10
作者 张志宏 刘思金 +8 位作者 吴长利 劳为德 王广有 李胜芝 张月 马志方 赵振理 刘秉乾 马小兵 《中华泌尿外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第S1期22-25,共4页
目的探讨体外培养膀胱肿瘤细胞BIU-87核干细胞因子(NS)表达在肿瘤发生和肿瘤细胞自身维护中的作用,以及RNAi技术应用于肿瘤治疗的可行性。方法通过RT-PCR和North-ernblot方法检测体外培养的BIU-87细胞中NS的表达情况。采用分子克隆手段... 目的探讨体外培养膀胱肿瘤细胞BIU-87核干细胞因子(NS)表达在肿瘤发生和肿瘤细胞自身维护中的作用,以及RNAi技术应用于肿瘤治疗的可行性。方法通过RT-PCR和North-ernblot方法检测体外培养的BIU-87细胞中NS的表达情况。采用分子克隆手段构建NS基因特异性siRNA表达载体,细胞转染获得稳定整合有pcDNA4/C-NS-Silencer载体和pcDNA4/C载体的细胞克隆,Northernblot方法检测阳性克隆NS基因表达丰度的变化,并观察其体外增殖能力的变化。结果RT-PCR和Northern印迹杂交结果均显示所检测的BIU-87细胞有较高水平的NS表达,NS在正常人膀胱组织中无表达。Northernblot检测证明获得稳定整合有pcDNA4/C-NS-Silencer载体的细胞克隆NS的表达丰度明显下调,且其体外增殖速率明显降低(P<0.05)。结论NS表达在BIU-87细胞体外增殖过程中发挥重要作用,通过RNAi技术实现NS基因沉默可能是一种较有前景的肿瘤治疗方法。 展开更多
关键词 核干细胞因子 增殖 RNA干扰 BIU-87细胞
原文传递
Nucleostemin基因特异性RNA干扰对胃癌细胞增殖和凋亡的影响 被引量:6
11
作者 郑学芝 胡静 +3 位作者 孙卫 刘桂莲 刘晓霓 蔡子微 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期203-205,224,共4页
目的探讨应用RNA干扰技术抑制nucleostemin(NS)基因表达对胃癌SGC-7901细胞株增殖和凋亡的影响。方法阳离子脂质体法将构建好的NS-siRNA表达载体转染胃癌SGC-7901细胞株,采用MTT法测试各组细胞增殖抑制率;RT-PCR法检测各组细胞NS基因表... 目的探讨应用RNA干扰技术抑制nucleostemin(NS)基因表达对胃癌SGC-7901细胞株增殖和凋亡的影响。方法阳离子脂质体法将构建好的NS-siRNA表达载体转染胃癌SGC-7901细胞株,采用MTT法测试各组细胞增殖抑制率;RT-PCR法检测各组细胞NS基因表达情况,流式细胞术检测细胞周期,Annexin-V-FITC/PI法检测细胞凋亡率。结果与对照组相比,S组细胞的增殖减慢,24、48、72 h细胞增殖抑制率分别为53.21%、71.54%、87.47%;NS基因表达量下降,G0/G1期细胞百分率显著升高(58.34%),S期细胞减少(20.68%),细胞凋亡率增加(26.85%)。结论RNA干扰技术可抑制胃癌SGC-7901细胞株NS基因的表达,使细胞增殖减慢,细胞周期阻滞在G0/G1期,凋亡率增加。 展开更多
关键词 RNA干扰 nucleostemin 胃癌 细胞增殖 凋亡
下载PDF
胃癌组织和SGC-7901细胞中nucleostemin基因表达的实验研究 被引量:6
12
作者 郑学芝 张承玉 +2 位作者 孙卫 徐秋玲 蔡子微 《中国全科医学》 CAS CSCD 2008年第16期1461-1463,共3页
目的检测nucleostemin(NS)基因在胃癌组织和胃癌SGC-7901细胞中的表达情况。方法21例胃癌手术标本,提取胃癌组织和胃癌SGC-7901细胞株总RNA,用半定量RT-PCR方法检测胃癌组织和SGC-7901中NS基因的表达情况。用脂质体法将PCDNA4/C-NS-sile... 目的检测nucleostemin(NS)基因在胃癌组织和胃癌SGC-7901细胞中的表达情况。方法21例胃癌手术标本,提取胃癌组织和胃癌SGC-7901细胞株总RNA,用半定量RT-PCR方法检测胃癌组织和SGC-7901中NS基因的表达情况。用脂质体法将PCDNA4/C-NS-silencer质粒及空载体PCDNA4/C-vector质粒分别转染SGC-7901细胞,分别命名为silencer组和vector组,未转染的SGC-7901细胞记为normal组,RT-PCR方法检测NS基因表达量。用MTT法检测3组细胞的生长增殖情况。结果胃癌组织和SGC-7901细胞中皆有NS基因表达。定性分析显示,与vector组和normal组比较,silencer组细胞趋于分化,NS基因表达量下降。细胞培养24 h、48 h、72 h后,si-lencer组和vector组细胞增殖抑制率间差别均有统计学意义(P<0.01)。结论胃癌组织和SGC-7901细胞中有NS基因表达;NS基因特异性RNA干扰使NS基因表达量下降,抑制SGC-7901细胞株体外增殖。 展开更多
关键词 nucleostemin 胃癌 RNA干扰 细胞增殖
下载PDF
核干细胞因子特异性短发夹状RNA对HL-60细胞分化抗原和生物学性质的影响 被引量:7
13
作者 岳保红 朱晓燕 +6 位作者 张功员 孙玲 赵小强 王清霞 刘帅 张秋堂 张钦宪 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第11期1191-1194,共4页
目的研究核干细胞因子(nuc leostem in,NS)特异性短发夹状RNA(shRNA)阻断NS基因表达对HL-60白血病细胞分化抗原及生物学性质的影响,探讨NS的生物学功能和与急性白血病的关系以及用于基因治疗的可能性。方法特异性转染试剂和合成的NS短... 目的研究核干细胞因子(nuc leostem in,NS)特异性短发夹状RNA(shRNA)阻断NS基因表达对HL-60白血病细胞分化抗原及生物学性质的影响,探讨NS的生物学功能和与急性白血病的关系以及用于基因治疗的可能性。方法特异性转染试剂和合成的NS短发夹状RNA(NS-shRNA)体外直接转染HL-60细胞,采用RT-PCR判断基因阻断效果,MTT法测定转染后细胞增殖能力,流式细胞仪(FCM)测定细胞分化抗原,形态学观察细胞形状和生长状态,血细胞分析仪测定细胞大小、粒度。结果合成的2条NS-shRNA均能明显阻断NS基因表达,抑制率分别为37.82%和71.88%;NS-shRNA能显著抑制HL-60细胞的增殖并存在时间和浓度依赖性,以48 h和10 nmol/L浓度最佳。转染后:分化抗原CD11b、CD33、CD14、CD64、HLA-DR增高,CD38降低,显示有向粒系继续成熟和向单核系重新分化趋势;细胞聚团性减弱,碎片增多,一部分细胞形态变成梭形和长尾形,染色后细胞核紧密,凹陷,髓过氧化物酶(MPO)和α-醋酸萘酚酯酶(α-NAE)活性增强;大小和粒度分析小体积细胞和核碎裂细胞增多。结论NS-shRNA通过阻断NS基因表达,对HL-60细胞有抑制增殖和促分化作用,改变了细胞的生物学性质,使细胞恶性程度有所减弱,并有可能诱发凋亡,在白血病的基因中具有潜在的临床价值。 展开更多
关键词 核干细胞因子 短发夹状RNA 分化抗原 生物学性质 增殖 分化 HL-60细胞
下载PDF
核干因子在前列腺癌中的表达及其临床意义 被引量:8
14
作者 刘冉录 徐勇 +5 位作者 张志宏 王萌 孙建涛 齐士勇 张玥 李胜芝 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 2008年第5期418-422,共5页
目的:探讨核干因子(NS)基因在前列腺癌组织中的表达及其临床意义。方法:利用RT-PCR及免疫组化方法对前列腺癌、良性前列腺增生(BPH)及高级别前列腺上皮内瘤(HGPIN)组织中NS基因的表达进行检测,并探讨NS蛋白表达水平与前列腺癌患者临床... 目的:探讨核干因子(NS)基因在前列腺癌组织中的表达及其临床意义。方法:利用RT-PCR及免疫组化方法对前列腺癌、良性前列腺增生(BPH)及高级别前列腺上皮内瘤(HGPIN)组织中NS基因的表达进行检测,并探讨NS蛋白表达水平与前列腺癌患者临床指标的关系。结果:前列腺癌中NSmRNA表达水平显著高于BPH中的表达水平,NS蛋白在前列腺癌中的强阳性、阳性及弱阳性表达率分别为48.8%、36.6%及12.2%,在BPH中分别为4.0%、32.0%及56.0%,在HGPIN中分别为5.0%、25.0%及60.0%,在前列腺癌中的表达水平显著高于BPH及HGPIN中的水平,具有统计学意义(P<0.05)。NS基因表达水平与前列腺癌的分化程度呈负相关,细胞分化程度越差,NS基因表达水平越高。结论:前列腺癌中高表达NS基因,NS基因在前列腺癌的不良分化和恶性增殖中可能起着重要作用。 展开更多
关键词 核干因子 前列腺癌 细胞分化 增殖
下载PDF
核干细胞因子基因siRNA表达载体的构建及鉴定 被引量:6
15
作者 张功员 赵国强 +1 位作者 尹磊 张钦宪 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期392-395,398,共5页
目的构建针对核干细胞因子(NS)基因的小干扰RNA(siRNA)真核表达载体。方法根据GenBank提供的NS基因AY825265mRNA序列及siRNA设计原则设计siRNA,筛选得到126-144nt,199-217nt和487-505nt3个19bp片段为靶序列;合成带有BamHI、XhoI酶切位... 目的构建针对核干细胞因子(NS)基因的小干扰RNA(siRNA)真核表达载体。方法根据GenBank提供的NS基因AY825265mRNA序列及siRNA设计原则设计siRNA,筛选得到126-144nt,199-217nt和487-505nt3个19bp片段为靶序列;合成带有BamHI、XhoI酶切位点的发夹结构寡核苷酸序列,经过退火,将此序列克隆至载体pRNAT-U6.1中构建重组表达载体;转化DH5α,提取质粒,应用PCR技术和测序方法鉴定重组克隆。转染入食管癌EC9706细胞,检测NS基因沉默情况。结果PCR筛选得到3个目的片段的阳性重组克隆,测序证实重组表达载体中插入序列与设计一致。RT-PCR和Westernblot检测显示构建的siRNA表达载体可显著降低EC9706细胞中NSmRNA和蛋白水平的表达。结论成功构建出一组针对NS基因的siRNA表达载体,为下一步NS基因的RNA干扰研究鉴定了基础。 展开更多
关键词 核干细胞因子 RNA干扰 基因克隆 EC9706
下载PDF
Nucleostemin在大鼠骨髓基质干细胞向成骨细胞诱导分化中的研究 被引量:4
16
作者 裴方 王建超 +3 位作者 江红辉 王小丽 刘俊 刘胜洪 《医学分子生物学杂志》 CAS CSCD 2010年第1期45-49,共5页
目的探讨Nucleostemin(NS)在大鼠骨髓基质干细胞向成骨细胞诱导分化中的机制及作用。方法取4~6周龄雄性SD大鼠两侧股骨、胫骨骨髓基质细胞,原代及传代培养。取第3代骨髓间充质干细胞分别用普通和矿化培养基培养,通过相差倒置显微... 目的探讨Nucleostemin(NS)在大鼠骨髓基质干细胞向成骨细胞诱导分化中的机制及作用。方法取4~6周龄雄性SD大鼠两侧股骨、胫骨骨髓基质细胞,原代及传代培养。取第3代骨髓间充质干细胞分别用普通和矿化培养基培养,通过相差倒置显微镜观察细胞生长、MTT法检测细胞增殖、碱性磷酸酶和茜素红钙染色了解成骨活性。免疫组化SABC法及免疫荧光法检测NS在细胞中的表达情况,比较NS分别在普通培养基和成骨细胞诱导培养基作用下的表达情况。结果大鼠骨髓间充质干细胞在矿化培养基诱导下其NS的表达较普通培养基培养下的表达明显减弱,且呈时间依赖性衰减。成骨细胞的NS表达则为阴性。在矿化液作用下,骨髓间充质干细胞可诱导为成骨细胞。MTT显示矿化液培养细胞生长潜伏期长,对数生长期较对照组延长。结论NS作为核干细胞因子,在干细胞中和某些肿瘤细胞中表达丰富。细胞分化后,其表达明显减少。因此,NS很可能作为大鼠基质干细胞是否具有潜在分化能力的标志性因子。 展开更多
关键词 骨髓基质干细胞 成骨细胞 诱导分化 nucleostemin
原文传递
核干细胞因子基因沉默对HL-60细胞分化特征的影响 被引量:5
17
作者 岳保红 朱晓燕 +5 位作者 王清霞 刘帅 张功员 张秋堂 张慧 张钦宪 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2007年第4期657-659,共3页
目的:探讨核干细胞因子(NS)特异性短发夹RNA(shRNA)沉默NS基因对白血病细胞HL-60分化的影响。方法:用体外合成的NS-shRNA转染HL-60细胞,Western blot检测转染细胞NS蛋白,Wright-Giemsa染色观察细胞形态学改变,流式细胞仪(FCM)测定细胞... 目的:探讨核干细胞因子(NS)特异性短发夹RNA(shRNA)沉默NS基因对白血病细胞HL-60分化的影响。方法:用体外合成的NS-shRNA转染HL-60细胞,Western blot检测转染细胞NS蛋白,Wright-Giemsa染色观察细胞形态学改变,流式细胞仪(FCM)测定细胞表面分化抗原变化,细胞髓过氧化物酶(MPO)和过碘酸-雪夫反应(PAS)测定细胞化学特征的变化。以转染无关shRNA序列的细胞作阴性对照,以未转染细胞作空白对照。结果:NS-shRNA转染的HL-60细胞NS蛋白较对照组降低;转染细胞细胞核和细胞质都出现了成熟和分化特征,分化抗原CD11b、CD33、CD14、CD64、HLA-DR增高,CD38降低,显示有向粒系继续成熟和向单核系重新分化的趋势;转染细胞内MPO活性增强,PAS反应增强。结论:阻断NS基因表达能促使HL-60细胞重分化。 展开更多
关键词 核干细胞因子 短发夹RNA 细胞分化 HL-60细胞
下载PDF
In vitro Study of Nucleostemin Gene as a Potential Therapeutic Target for Human Lung Carcinoma 被引量:4
18
作者 GAO Hong Xia GAO Xiu Feng +3 位作者 WANG Guo Qing WANG En Shu HUANG Wei HUANG Ping 《Biomedical and Environmental Sciences》 SCIE CAS CSCD 2012年第1期91-97,共7页
Objective Nucleostemin (NS) is a GTP-conjugated protein located in the nucleoli of stem cells and some cancer cells, and maintains cell self-renewal. We aimed to evaluate NS as a potential target for lung carcinoma ... Objective Nucleostemin (NS) is a GTP-conjugated protein located in the nucleoli of stem cells and some cancer cells, and maintains cell self-renewal. We aimed to evaluate NS as a potential target for lung carcinoma gene therapy by investigating NS gene expression and its effect on A549 cell proliferation. Methods NS mRNA and protein expression in A549, HepG2, SMMC-7721, HeLa, and U251 cells was analyzed by RT-PCR and western blotting following transfection of NS siRNAs and negative control siRNA (NC). The effect on cell proliferation was also analyzed by MTF assays. Results NS mRNA and protein were both expressed in A549 cells and four other tumor cell lines; the relative expression levels were similar in all five cell lines. The three pairs of NS siRNA, either transfected alone or cotransfected into A549 cells, could effectively inhibit the expression of NS mRNA and protein. Moreover, the interference ratio showed an obvious concentration-dependent relationship. NS siRNA treatment resulted in significant inhibition of A549 cell proliferation by 35.7%. Conclusion NS gene was not only highly expressed but also played an important role in A549 cell proliferation. Thus, targeting of NS may be a promising novel strategy for the treatment of lung carcinoma. 展开更多
关键词 nucleostemin RNA interference A549 cells Tumor gene therapy
下载PDF
nucleostemin基因在肾癌中的表达及其意义 被引量:4
19
作者 张昊 徐卫丽 +3 位作者 武玉东 张林超 牛俊豪 范锐 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期631-633,共3页
目的观察nucleostemin基因在肾癌组织和正常肾组织中的表达,探讨其在肾癌发生中的意义。方法收集肾癌组织标本62例,透明细胞型50例,颗粒细胞型12例。同时取10例癌旁非癌肾组织和10例非瘤正常肾组织作对照组。应用逆转录一聚合酶链反... 目的观察nucleostemin基因在肾癌组织和正常肾组织中的表达,探讨其在肾癌发生中的意义。方法收集肾癌组织标本62例,透明细胞型50例,颗粒细胞型12例。同时取10例癌旁非癌肾组织和10例非瘤正常肾组织作对照组。应用逆转录一聚合酶链反应(RT.PCR)方法,以GAPDH为内参照,检测上述组织nucleostemin基因mRNA的表达,统计学分析实验结果。结果‘肾癌组织中,nucleostemin基因47例显示阳性表达,阳性率为75.81%。正常肾组织未见有nucleostemin基因阳性表达。nucleostemin基因在肾癌组织中的阳性表达显著高于正常肾组织(P〈0.01)。nucleostemin基因在透明细胞癌中阳性表达率为74.00%;颗粒细胞癌阳性表达率为83.33%,两者比较差异无统计学意义(P〉0.05)。结论nucleostemin基因在肾癌组织中呈高表达,而在正常肾组织中无表达;nucleostemin基因的表达可能与病理类型无关。提示nucleostemin基因的表达与肾癌的发生密切相关。 展开更多
关键词 肾癌 基因表达 nucleostemin
原文传递
NS和PUMA蛋白在人脑胶质瘤中的表达及其临床意义 被引量:6
20
作者 程森 寿记新 +2 位作者 付旭东 马建 周少龙 《中华神经医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期1256-1259,共4页
目的探讨核干因子(NS)和p53上调凋亡因子(PUMA)蛋白在人脑胶质瘤中的表达及其临床意义。方法收集郑州大学第五附属医院神经外科自2011年1月至2013年2月手术切除并经病理证实的脑胶质瘤标本62例,其中WHO分级Ⅰ级8例、Ⅱ级21例,Ⅲ... 目的探讨核干因子(NS)和p53上调凋亡因子(PUMA)蛋白在人脑胶质瘤中的表达及其临床意义。方法收集郑州大学第五附属医院神经外科自2011年1月至2013年2月手术切除并经病理证实的脑胶质瘤标本62例,其中WHO分级Ⅰ级8例、Ⅱ级21例,Ⅲ级19例,Ⅳ级14例。另取同期10例因颅脑损伤行内减压术获取的的正常脑组织作为对照组,免疫组化染色检测标本中NS和PUMA蛋白的表达。结果胶质瘤组织NS蛋白的表达明显高于对照组,胶质瘤组织PUMA蛋白的表达明显低于对照组,差异均有统计学意义(P〈0.05);与Ⅰ+Ⅱ级胶质瘤比较,Ⅲ+Ⅳ级胶质瘤组织NS蛋白的表达较高(0.224±0.015vs0.302±0.024),PUMA蛋白的表达较低(0.182±0.020vs0.167±0.0181,差异有统计学意义(P〈0.05)。结论NS和PUMA蛋白与胶质瘤的恶性程度密切相关。二者在胶质瘤的发生和发展过程中起重要的作用。 展开更多
关键词 核干因子 p53上调凋亡因子 神经胶质瘤 免疫组化
原文传递
上一页 1 2 6 下一页 到第
使用帮助 返回顶部