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题名不同的核酸提取方法在布鲁氏菌检测中的应用评价
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作者
常秀琴
郝梦
徐珂
海晓梅
白小成
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机构
宁夏回族自治区第四人民医院检验科
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出处
《宁夏医学杂志》
CAS
2024年第7期614-617,共4页
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基金
宁夏回族自治区重点研发项目(2022BEG03161)。
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文摘
目的比较不同核酸提取方法对布鲁氏菌检出率的影响,为布鲁氏菌核酸快速提取检测提供技术参考。方法分别使用磁珠法、直接裂解法和高温裂解法对感染布鲁氏菌患者的20例全血样本、10例关节腔及浆膜腔积液样本进行核酸提取,然后进行实时荧光RT-PCR检测,采用SPSS 22.0对结果进行统计分析,评价该核酸快速提取试剂的DNA提取效率。结果磁珠法阳性检出率为100%,Ct值中位数为29.17(21.19~31.33),批内变异系数(CV)最高为1.33%。直接裂解法阳性检出率为63.33%,Ct值中位数为33.29(28.69~34.54),批内CV最高为1.28%。高温裂解法阳性检出率为100%,Ct值中位数为30.26(26.63~33.85),批内CV最高为1.21%。高温裂解法和磁珠法检出率比较差异无统计学意义(P>0.05),直接裂解法检出率显著低于磁珠法和高温裂解法(P<0.05)。结论核酸快速提取试剂在高温裂解条件下可保证核酸提取效率和重复性稳定,具有操作简单、检测时间短、降低实验室生物安全风险等优势,可以应用于布鲁氏菌的核酸检测。
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关键词
布鲁氏菌
核酸快速提取
磁珠法
实时荧光RT-PCR
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Keywords
Brucella
nucleic acid rapid extraction
Magnetic bead method
Real-time fluorescent RT-PCR
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分类号
R372
[医药卫生—病原生物学]
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