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核因子E2相关因子2调控机体抗氧化途径特性及其与畜禽的健康和肉品质的关系 被引量:13
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作者 林谦 邱磊 +3 位作者 云龙 曹蓉 贺喜 侯德兴 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期1421-1429,共9页
核因子E2相关因子2(Nrf2)是一种调控氧化应激基本表达的关键转录因子,以Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白-1(Keap1)在氧化环境下的构象改变或者其本身直接被磷酸化而激活并进入细胞核与抗氧化反应元件(ARE)结合,启动ARE下游的一系列抗氧化基... 核因子E2相关因子2(Nrf2)是一种调控氧化应激基本表达的关键转录因子,以Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白-1(Keap1)在氧化环境下的构象改变或者其本身直接被磷酸化而激活并进入细胞核与抗氧化反应元件(ARE)结合,启动ARE下游的一系列抗氧化基因的转录、表达以抵抗机体内外界的有害刺激。本文主要总结了Nrf2信号途径的特点及其在动物机体抗氧化过程中的重要作用,并结合它在畜禽抗应激、肉品质、新型饲料添加剂和保健品等开发方面的应用,阐述了其在维持畜禽健康和肉品质中的重要作用。 展开更多
关键词 nrf2 抗氧化反应元件 肉品质 抗氧化
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慈姑多糖调节Nrf2/HO-1改善多种重金属所致肝损伤的体内外实验研究 被引量:6
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作者 刘红双 李亚兰 +6 位作者 孔靖玮 周漫钰 董瑞娟 葛东宇 刘佳静 彭桂英 廖艳 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第7期1913-1920,共8页
从体内外2个方面探究慈姑多糖是否通过激活核转录因子E2相关因子2(nuclear factor erythroid-2-related factor 2,Nrf2)/血红素加氧酶1(heme oxygenase-1,HO-1)信号通路对多种重金属联合诱导的肝损伤发挥保护作用。首先基于北京市售大米... 从体内外2个方面探究慈姑多糖是否通过激活核转录因子E2相关因子2(nuclear factor erythroid-2-related factor 2,Nrf2)/血红素加氧酶1(heme oxygenase-1,HO-1)信号通路对多种重金属联合诱导的肝损伤发挥保护作用。首先基于北京市售大米6种重金属膳食摄入比例,构建多种重金属混合染毒液所致小鼠及HepG2细胞肝损伤体内外模型。40只雄性昆明小鼠分为5组:对照组、模型组、谷胱甘肽阳性对照组以及慈姑多糖(Sagittaria sagittifolia polysaccharides)低、高剂量组,每组8只。灌胃干预30 d后,HE染色观察小鼠肝脏损伤情况;体外实验应用MTT法检测不同质量浓度慈姑多糖(0.25、0.5、1、2 mg·mL^(-1))在不同时间点下,对HepG2细胞存活率的影响;利用微板法检测48 h细胞培养液中谷丙转氨酶(alaninetransaminase, ALT)、谷草转氨酶(aspartate aminotransferase, AST)的含量;流式细胞术检测细胞中活性氧(reactive oxygen species, ROS)含量变化;RT-PCR法检测细胞中Nrf2、HO-1 mRNA表达;Western blot法检测细胞中Nrf2、HO-1蛋白表达情况。HE染色结果显示,与模型组比较,慈姑多糖给药组肝脏中炎细胞浸润显著减轻,脂肪浸润情况明显改善,其中高剂量组损伤改善更为明显。在体外MTT实验中,与模型组相比,4个浓度慈姑多糖给药组其细胞存活率增加、ALT和AST含量下降、ROS含量减少,差异具有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,慈姑多糖组Nrf2、HO-1 mRNA及蛋白表达下调,差异具有统计学意义(P<0.05)。慈姑多糖能显著改善多种重金属所致小鼠肝组织炎症浸润,并纠正肝脏脂肪变性情况,可能与调节Nrf2/HO-1信号通路、降低ROS缓解氧化损伤有关。 展开更多
关键词 慈姑多糖 多种重金属损伤 预防作用 HEPG2 nrf2 HO-1
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气-液界面染毒系统中不同暴露流量对汽油发动机尾气致肺细胞氧化应激相关蛋白表达的影响
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作者 李国梁 鱼涛 +4 位作者 张雪艳 裴梦娟 晋瑜 李斌 宾萍 《环境卫生学杂志》 2024年第5期367-377,共11页
目的采用气-液界面(air-liquid interface,ALI)培养和暴露系统,探索二轮摩托车来源的汽油发动机尾气(gasoline engine exhaust,GEE)对人肺细胞氧化应激相关蛋白表达的影响。方法实验分为空白对照组、洁净空气组、GEE组。除了空白对照组... 目的采用气-液界面(air-liquid interface,ALI)培养和暴露系统,探索二轮摩托车来源的汽油发动机尾气(gasoline engine exhaust,GEE)对人肺细胞氧化应激相关蛋白表达的影响。方法实验分为空白对照组、洁净空气组、GEE组。除了空白对照组,其余各组采用气-液界面体外染毒技术,分别在暴露流量为10、15和25 mL/min,37℃水浴条件下,对生长在气-液界面插件多孔膜上的人支气管上皮细胞BEAS-2B和人肺癌A549细胞持续暴露60 min。利用Cell Counting Kit-8(CCK-8)法评价细胞相对存活率。采用2′,7′-二氯荧光黄双乙酸盐(2′,7′-dichloro-dihydro-fluoresceindiacetate,DCFH-DA)探针检测细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平。Annexin V-FITC细胞凋亡检测试剂盒检测GEE对BEAS-2B和A549细胞凋亡及坏死率的影响。蛋白质免疫印迹法检测全细胞裂解物中核因子红细胞2相关因子2(nuclear factor erythroid-2-related factor 2,Nrf2)和血红素氧合酶1(heme oxygenase-1,HO-1)蛋白表达水平。结果在10、15和25 mL/min三种暴露流量下,随着暴露流量增大,GEE暴露组的2种细胞相对存活率逐渐降低、胞内ROS生成量和细胞凋亡率逐渐升高,且与洁净空气组相比,存在统计学上的显著性差异(P<0.05)。BEAS-2B和A549细胞相对存活率、胞内活性氧水平、早期凋亡率、晚期凋亡及坏死率和总凋亡率在GEE暴露和暴露流量上存在主效应,且GEE暴露与暴露流量存在交互效应(P<0.01)。在GEE暴露组,BEAS-2B细胞Nrf2和HO-1蛋白表达下降,A549细胞Nrf2和HO-1蛋白表达水平升高。BEAS-2B细胞Nrf2蛋白表达仅在暴露流量主效应上差异有统计学意义(P<0.01)。BEAS-2B细胞HO-1蛋白表达仅在GEE主效应上差异有统计学意义(P<0.01)。A549细胞Nrf2蛋白表达在GEE主效应、暴露流量主效应和交互效应上差异均有统计学意义(P<0.05)。A549细胞HO-1蛋白表达则在GEE主效应、暴露流量主效应和交互效应上差异均无统 展开更多
关键词 汽油发动机尾气 气-液界面 肺细胞毒性 核因子红细胞2相关因子2(nrf2) 血红素氧合酶1(HO-1)
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SFN激活Nrf2提高小鼠低氧环境下运动耐力和红白肌乳酸代谢 被引量:4
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作者 王林佳 王瑞琪 +1 位作者 李祥宁 张缨 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第12期1473-1480,共8页
运动耐力与骨骼肌中乳酸的产生和消除密切相关。有文献表明,核因子E2相关因子2(nuclear factor erythroid-2-related factor 2,Nrf2)在运动引起的骨骼肌抗氧化、线粒体的生物合成和能量代谢中起着重要作用。然而,目前尚不明确Nrf2激活... 运动耐力与骨骼肌中乳酸的产生和消除密切相关。有文献表明,核因子E2相关因子2(nuclear factor erythroid-2-related factor 2,Nrf2)在运动引起的骨骼肌抗氧化、线粒体的生物合成和能量代谢中起着重要作用。然而,目前尚不明确Nrf2激活对低氧环境下的乳酸代谢和运动耐力的影响。本研究通过预先给与小鼠补充Nrf2激活剂萝卜硫素(sulforaphane,SFN),而后给小鼠在低氧环境下(11.2%O2)进行一次性递增负荷至力竭的运动,观察小鼠在低氧环境下的运动耐力和红白肌乳酸代谢的变化。结果表明,在低氧下一次性力竭运动显著增加小鼠血乳酸水平(P<0.05)。但补充SFN组小鼠运动后血乳酸水平仅是未补充组的76%(P<0.05),并且补充SFN小鼠在低氧下进行力竭运动的跑动距离从577.0±52.9m增加到636.3±101.4m(P<0.05),力竭运动时间也提高了1.1倍(P<0.05)。采用免疫印迹法测定骨骼肌中蛋白质的相对表达。结果显示,在红肌中,SFN-Control/SFN-Exercise组与相应PBS-Control/PBS-exercise组相比,Nrf2和磷酸化-Nrf2(p-Nrf2)蛋白质表达水平均显著增加(P<0.05)。在白肌中,补充SFN诱导小鼠骨骼肌中的p-Nrf2表达在安静和运动后分别增加38%和52%(P<0.05)。另外,补充SFN与补充PBS相比,促进了小鼠在安静及一次性力竭运动后红肌中MCT1的表达(P<0.05)以及降低了SFN-Exercise组MCT4蛋白表达水平(P<0.05)。同时,与补充PBS相比,补充SFN小鼠红肌中乳酸脱氢酶B(LDH-B)蛋白表达增加了62%(P<0.05);小鼠白肌中,在安静及一次性力竭运动后,分别增加了1.35及1.31倍(P<0.05)。以上研究结果表明,补充SFN激活Nrf2可提高小鼠骨骼肌乳酸转运及代谢能力,这可能是在该低氧环境下的运动耐力增加的原因之一。该研究将对运动员、登山者和高原工作者等在高原运动、高原习服中SFN补充的应用,提供一定的理论参考依据。 展开更多
关键词 萝卜硫素 核因子E2相关因子2 氧化应激 乳酸 运动耐力
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核因子E2相关因子2过表达对间充质干细胞抗缺氧和抗凋亡能力的影响 被引量:2
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作者 刘荣强 袁泽南 +2 位作者 吴小材 刘炜 汪国营 《器官移植》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期110-115,共6页
目的研究核因子E2相关因子2(Nrf2)对间充质干细胞(MSCs)的抗缺氧及抗凋亡能力的影响。方法将过表达Nrf2的重组质粒及辅助质粒转染人胚肾细胞(293FT),获得过表达Nrf2的高滴度慢病毒。MSCs分别转染过表达Nrf2慢病毒以及空载体慢病毒,构建... 目的研究核因子E2相关因子2(Nrf2)对间充质干细胞(MSCs)的抗缺氧及抗凋亡能力的影响。方法将过表达Nrf2的重组质粒及辅助质粒转染人胚肾细胞(293FT),获得过表达Nrf2的高滴度慢病毒。MSCs分别转染过表达Nrf2慢病毒以及空载体慢病毒,构建稳定过表达Nrf2的Nrf2-MSCs(Nrf2过表达组)以及绿色荧光蛋白(GFP)-MSCs(对照组)。采用荧光显微镜观察两组细胞的绿色荧光表达情况。采用蛋白免疫印迹(Western Blot)法检测两组细胞中Nrf2蛋白的表达水平。采用光学显微镜观察两组细胞的抗缺氧能力,采用流式细胞术检测两组细胞的抗凋亡能力。结果成功构建了稳定过表达Nrf2的Nrf2-MSCs,Western Blot法检测结果显示Nrf2过表达组细胞的Nrf2蛋白表达水平明显高于对照组(P<0.01)。缺氧处理15 h后,Nrf2过表达组的细胞活力明显高于对照组。流式细胞术检测表明Nrf2过表达组细胞的凋亡率为(30.9±1.4)%,明显低于对照组细胞的(61.3±1.3)%(P<0.05)。结论稳定过表达Nrf2的Nrf2-MSCs在低氧环境中具有一定的抗缺氧、抗凋亡能力。 展开更多
关键词 核因子E2相关因子2(nrf2) 间充质干细胞(MSCs) 慢病毒载体 转染 质粒 凋亡 缺氧 流式细胞术 人胚肾细胞 缺血-再灌注损伤(IRI)
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莱菔硫烷通过激活Nrf2/HO-1通路减缓斑马鱼放射性脑损伤 被引量:2
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作者 赵志红 廖桂祥 +3 位作者 杨红丽 龚龙 陈善义 李先明 《海南医学》 CAS 2020年第7期817-820,共4页
目的应用成年斑马鱼放射脑损伤模型研究莱菔硫烷对放射性脑损伤的保护作用。方法成年斑马鱼90条按随机数表法分为正常组、照射组、照射+莱菔硫烷组(SFN组),每组30条,放射后48 h检测各组斑马鱼氧化应激相关因子活性氧簇(ROS)、丙二醛(MDA... 目的应用成年斑马鱼放射脑损伤模型研究莱菔硫烷对放射性脑损伤的保护作用。方法成年斑马鱼90条按随机数表法分为正常组、照射组、照射+莱菔硫烷组(SFN组),每组30条,放射后48 h检测各组斑马鱼氧化应激相关因子活性氧簇(ROS)、丙二醛(MDA)和超氧歧化酶(SOD)活力的变化。利用聚合酶链反应和免疫蛋白印迹的方法检测斑马鱼脑组织中核因子E2相关因子2 (Nrf2)和血红素加氧合酶1 (HO-1)的基因和蛋白表达情况。结果与照射组相比,SFN组减少了ROS [相对倍数改变:(1.56±0.17) vs (2.13±0.24)]和MDA [相对倍数改变:(1.77±0.13) vs (3.28±0.25)]的产生,差异均有统计学意义(P<0.05);与照射组相比,SFN组提高了SOD [相对倍数改变:(1.83±0.22) vs (0.65±0.14)]的水平,差异有统计学意义(P<0.05);SFN组提高了Nrf2的核内蛋白水平[相对倍数改变:(2.07±0.38) vs (1.2±0.34)],提高了HO-1基因[相对倍数改变:(2.41±0.25) vs (1.19±0.14)]和蛋白表达水平[相对倍数改变:(2.36±0.43) vs (1.40±0.18)],差异均有统计学意义(P<0.05)。结论在斑马鱼放射性脑损伤模型中,SFN通过激活Nrf2/HO-1通路起到减缓放射性脑损伤的作用。 展开更多
关键词 斑马鱼 放射性脑损伤 莱菔硫烷 氧化应激 核因子E2相关因子2 血红素加氧合酶1
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罗耳阿太菌多糖经Nrf2通路预防小鼠肝脏铅损伤机制
7
作者 赵盼 李鸿梅 +1 位作者 王志超 闵伟红 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2022年第20期395-402,共8页
目的:本研究旨在探究罗耳阿太菌多糖(Athelia rolfsii polysaccharides,AEPS)保护铅暴露小鼠肝脏的作用机制。方法:小鼠随机分为正常组(NC)、模型组(MC)、阳性对照组(PC)、AEPS低剂量组(LD)、AEPS中剂量组(MD)、AEPS高剂量组(HD)、全反... 目的:本研究旨在探究罗耳阿太菌多糖(Athelia rolfsii polysaccharides,AEPS)保护铅暴露小鼠肝脏的作用机制。方法:小鼠随机分为正常组(NC)、模型组(MC)、阳性对照组(PC)、AEPS低剂量组(LD)、AEPS中剂量组(MD)、AEPS高剂量组(HD)、全反式维甲酸(all-trans-retinoic acid,ATRA)单独组(ATRA+NC)、ATRA干预组(ATRA+MC)和ATRA+AEPS高剂量组(ATRA+HD)。测定铅暴露小鼠肝脏的铅含量、抗氧化指标、功能指标,苏木伊红染色评估小鼠肝脏病理切片。测定小鼠肝脏谷胱甘肽巯基转移酶(glutathione-s-transferase,GST)活性和谷胱甘肽(glutathione,GSH)水平,肝脏组织中细胞凋亡相关蛋白、多药耐药相关蛋白2(multidrug resistance-associated protein 2,MRP2)及肝细胞核中核因子E2相关因子2(nuclear factor erythroid-2-related factor 2,Nrf2)蛋白水平。结果:AEPS低、中、高剂量组均显著提高铅暴露小鼠肝细胞MRP2运输铅离子的能力(P<0.05),并呈剂量依赖性地减少小鼠肝脏铅积累(P<0.05)。AEPS显著抑制铅暴露小鼠肝细胞凋亡(P<0.05),呈剂量依赖性地增强小鼠肝脏抗氧化能力(P<0.05),恢复肝功能(P<0.05),并减轻肝脏病理损伤。AEPS还促进了Nrf2向肝细胞核转移(P<0.05)。而ATRA干预可降低AEPS对铅暴露小鼠肝脏的保护作用。结论:AEPS依赖于Nrf2信号通路可减少肝脏铅积累,保护肝脏铅损伤。 展开更多
关键词 罗耳阿太菌多糖(AEPS) 核因子E2相关因子2(nrf2) 保护机制 铅暴露 肝脏损伤
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寡聚原花色素通过激活Nrf2拮抗慢性阻塞性肺疾病大鼠的氧化应激 被引量:1
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作者 褚婉婷 张淑香 褚星霞 《广州中医药大学学报》 CAS 2021年第2期373-378,共6页
【目的】观察寡聚原花色素(OPC)对慢性阻塞性肺疾病(COPD)模型大鼠氧化应激的调节作用。【方法】将30只Wistar大鼠随机分为5组,即正常组,模型组,OPC低、高剂量组,地塞米松(DXM)组,每组6只。除正常组,其他组别大鼠采用注入脂多糖(LPS)联... 【目的】观察寡聚原花色素(OPC)对慢性阻塞性肺疾病(COPD)模型大鼠氧化应激的调节作用。【方法】将30只Wistar大鼠随机分为5组,即正常组,模型组,OPC低、高剂量组,地塞米松(DXM)组,每组6只。除正常组,其他组别大鼠采用注入脂多糖(LPS)联合暴露于香烟烟雾法建立COPD模型。成功造模后,OPC低、高剂量组与DXM组分别给予对应药物灌胃治疗,正常组和模型组给予相同体积的生理盐水灌胃。给药结束后,测量大鼠的肺功能,检测肺组织匀浆液中脂质过氧化物标记物丙二醛(MDA)和谷胱甘肽(GSH)水平,观察肺组织病理变化并测定平均线性截距(MLI)、平均肺泡数(MAN),采用免疫组织化学法检测肺组织8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)表达水平,蛋白免疫印迹(Western Blot)法检测肺组织醌氧化还原酶(NQO1)、血红素氧合酶1(HO1)和核因子E2相关因子2(Nrf2)的表达水平。【结果】与正常组比较,模型组大鼠肺功能指标第0.3秒用力呼气容积/用力肺活量(FEV0.3/FVC)、最大呼气中段流量(MMF)、呼气峰值流量(PEF)速率和动态肺顺应性(Cydn)降低,肺组织出现明显病理损害,MLI增加,MAN降低,肺组织8-OHdG平均光密度升高,肺组织匀浆MDA水平明显升高、GSH水平明显降低,肺组织Nrf2、HO1和NQO1的表达水平显著降低(P <0.05或P <0.01);与模型组比较,OPC高剂量组可明显改善上述指标(P <0.05或P <0.01或P <0.001)。【结论】OPC治疗COPD可能通过激活Nrf2缓解氧化应激反应,从而减轻COPD大鼠的肺气肿症状。 展开更多
关键词 寡聚原花色素 慢性阻塞性肺疾病 核因子E2相关因子2(nrf2) 氧化应激 大鼠
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核转录因子Nrf2在帕金森病中的作用
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作者 张美金 王莎莎 +2 位作者 张钊 陈乃宏 胡金凤 《神经药理学报》 2016年第1期35-40,共6页
核因子E2相关因子2(nuclear factor erythroid-2-related factor 2,Nrf2)是细胞调节抗氧化应激反应的重要转录因子,其与抗氧化反应元件(anti-oxidative response element,ARE)结合,形成的Keap1-Nrf2-ARE信号通路是机体抵抗内、外氧化应... 核因子E2相关因子2(nuclear factor erythroid-2-related factor 2,Nrf2)是细胞调节抗氧化应激反应的重要转录因子,其与抗氧化反应元件(anti-oxidative response element,ARE)结合,形成的Keap1-Nrf2-ARE信号通路是机体抵抗内、外氧化应激的关键保护性通路。现有研究显示Keap1-Nrf2-ARE信号通路对帕金森病患者具有重要的神经保护作用。该文对近年来Nrf2在治疗帕金森病方面的作用及其机制,以及以Nrf2为药物治疗靶点治疗帕金森病的最新研究成果进行总结。 展开更多
关键词 核因子E2相关因子2 帕金森病 氧化应激
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基于Nrf2/ARE信号通路探讨少腹逐瘀汤对寒凝血瘀证大鼠血管内皮损伤的保护作用及机制 被引量:8
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作者 李凤金 牛雯颖 +2 位作者 刘欣欣 肖洪彬 王伟明 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期31-37,共7页
目的:通过制备寒凝血瘀证大鼠模型,观察少腹逐瘀汤对寒凝血瘀证大鼠胸主动脉血管组织核转录因子E2相关因子2(Nrf2)/抗氧化反应元件(ARE)信号通路的影响,探讨少腹逐瘀汤对血管内皮损伤的保护作用及机制。方法:将50只SPF级大鼠随机分为少... 目的:通过制备寒凝血瘀证大鼠模型,观察少腹逐瘀汤对寒凝血瘀证大鼠胸主动脉血管组织核转录因子E2相关因子2(Nrf2)/抗氧化反应元件(ARE)信号通路的影响,探讨少腹逐瘀汤对血管内皮损伤的保护作用及机制。方法:将50只SPF级大鼠随机分为少腹逐瘀汤高、中、低剂量组(4.8,2.4,1.2 g·kg^(-1)),模型组和空白组,每组10只。采用冰水浴联合皮下注射盐酸肾上腺素的方法建立寒凝血瘀证大鼠模型。造模的同时开始灌胃给药,连续给药28 d后,采用全自动血液流变仪检测血液流变学指标;酶联免疫吸附测定(ELISA)检测血清中一氧化氮(NO),内皮素-1(ET-1),超氧化物歧化酶(SOD),谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px),细胞间黏附分子-1(ICAM-1),血管细胞黏附分子-1(VCAM-1),血管性血友病因子(vWF)水平;苏木素-伊红(HE)染色观察胸主动脉血管损伤情况;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测胸主动脉血管组织Nrf2,血红素加氧酶-1(HO-1)蛋白表达;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测胸主动脉血管组织Nrf2,HO-1 mRNA的表达。结果:与空白组比较,模型组大鼠全血黏度及血浆黏度均明显升高(P<0.05,P<0.01),vWF,ICAM-1,VCAM-1含量显著升高(P<0.01),NO,SOD,GSH-Px含量显著降低(P<0.01),ET-1的含量显著升高(P<0.01),胸主动脉血管组织Nrf2,HO-1 mRNA表达显著升高(P<0.01),细胞核内的Nrf2蛋白表达明显升高(P<0.05),细胞浆中Nrf2的蛋白表达水平明显降低(P<0.05),HO-1的蛋白表达水平显著升高(P<0.01)。与模型组比较,少腹逐瘀汤高、中剂量组全血黏度(高、中切),血浆黏度均明显降低(P<0.05);vWF,ICAM-1,VCAM-1,ET-1含量明显降低(P<0.05,P<0.01);NO,SOD,GSH-Px含量明显升高(P<0.05,P<0.01);胸主动脉血管内皮细胞增生、肿胀、脱落,内弹力膜断裂、平滑肌排列紊乱等病理变化有所改善;Nrf2,HO-1蛋白及mRNA表达水平显著升高(P<0.01)。结论:少腹逐瘀汤对寒凝血瘀证大鼠胸主动脉血� 展开更多
关键词 少腹逐瘀汤 内皮细胞损伤 核转录因子E2相关因子2(nrf2)/抗氧化反应元件(ARE) 寒凝血瘀证
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三焦祛湿方对C-BSA诱导膜性肾病小鼠肾脏保护作用及其对Nrf2/HO-1信号通路的影响 被引量:7
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作者 赵亚云 方敬 +2 位作者 陈静洁 刘海平 陈志强 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第18期58-65,共8页
目的:探索三焦祛湿方对阳离子化牛血清白蛋白(C-BSA)诱导膜性肾病(MN)小鼠肾脏保护作用及其对核因子E2相关因子2(Nrf2)/血红素氧合酶-1(HO-1)信号通路影响。方法:雌性BALB/c小鼠60只,随机分为正常组10只,模型组50只。模型组小鼠尾静脉注... 目的:探索三焦祛湿方对阳离子化牛血清白蛋白(C-BSA)诱导膜性肾病(MN)小鼠肾脏保护作用及其对核因子E2相关因子2(Nrf2)/血红素氧合酶-1(HO-1)信号通路影响。方法:雌性BALB/c小鼠60只,随机分为正常组10只,模型组50只。模型组小鼠尾静脉注射C-BSA(6.5 mg·kg^(-1)),造模成功小鼠按体质量随机分为模型组、三焦祛湿方低剂量(3.71 g·kg^(-1))组,三焦祛湿方高剂量(7.42 g·kg^(-1))组及盐酸贝那普利(1.3 mg·kg^(-1))组,分别给予各组相应剂量的药物灌胃,1次/d,连续4周。分别于造模前、造模后及治疗后检测24 h尿蛋白定量。给药后,腹主动脉取血检测血尿素氮(BUN),血清肌酐(SCr),甘油三酯(TG),总胆固醇(TC),总蛋白(TP),白蛋白(Alb)水平,肾组织行苏木素-伊红(HE),马松(Masson),过碘酸-六胺银(PASM)染色,光镜下观察小鼠肾组织病理形态变化,免疫荧光检测肾组织免疫球蛋白G(IgG)沉积情况,采用免疫荧光法检测肾组织中活性氧(ROS)表达情况。蛋白免疫印迹法(Western blot)观察肾组织Nrf2蛋白在细胞质和细胞核的表达情况,以及其下游因子血红素氧合酶-1(HO-1),醌还原型辅酶Ⅰ(NADH)脱氢酶1(NQO1)蛋白表达水平。结果:模型组小鼠24 h尿蛋白水平显著升高(P<0.01),血清TG,TC水平显著升高(P<0.01),TP,Alb水平显著降低(P<0.01);光镜下观察肾脏病理改变,可见肾小球体积增大,基底膜增厚,嗜复红蛋白沉积,"钉突"形成;荧光显微镜下可见IgG沿毛细血管襻弥漫性沉积;肾组织ROS表达水平显著升高(P<0.01);肾组织细胞核内Nrf2蛋白表达显著升高(P<0.01),细胞质Nrf2蛋白表达显著降低(P<0.01),HO-1和NQO1蛋白表达显著升高(P<0.01);给药后,各治疗组小鼠24 h尿蛋白水平显著降低(P<0.01),血清TG,TC水平显著降低(P<0.01),TP,Alb水平明显升高(P<0.05,P<0.01);各治疗组肾组织病理损害明显改善;肾组织ROS表达水平显著降低(P<0.01);肾组织细胞核内Nrf2蛋白表达显著降低( 展开更多
关键词 膜性肾病 核因子E2相关因子2(nrf2)/血红素氧合酶-1(HO-1)信号通路 三焦祛湿方
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基于Nrf2-GPX4铁死亡轴探讨黄连-红曲对小鼠非酒精性脂肪肝的影响
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作者 杨炀 张小波 +3 位作者 张永 卢富明 罗雅琪 吴晓仪 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第20期30-36,共7页
目的:观察黄连-红曲对非酒精性脂肪肝小鼠的影响,并探讨其可能的作用机制。方法:60只SPF级C75BL/6J雄性小鼠随机分为空白组、模型组、黄连-红曲低、中、高剂量组(0.75、1.5、3 g·kg^(-1))、二甲双胍组(0.075 g·kg^(-1)),每组1... 目的:观察黄连-红曲对非酒精性脂肪肝小鼠的影响,并探讨其可能的作用机制。方法:60只SPF级C75BL/6J雄性小鼠随机分为空白组、模型组、黄连-红曲低、中、高剂量组(0.75、1.5、3 g·kg^(-1))、二甲双胍组(0.075 g·kg^(-1)),每组10只。利用高脂饲料喂养24周构建非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)小鼠模型,黄连-红曲低、中、高剂量组给与相应剂量黄连-红曲灌胃,空白组和模型组给与等量生理盐水,连续处理4周。采用全自动生化仪检测血清血脂指标总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、游离脂肪酸(FFA)和肝功能指标肝功丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天门冬氨酸氨基转移酶(AST)水平,采用苏木素-伊红(HE)和油红O染色检测肝脏脂质沉积情况,普鲁士蓝染色检测肝脏亚铁离子水平;采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测肝脏核因子E_(2)相关因子2(Nrf2)-谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)轴关键蛋白的表达。结果:高脂饲养24周后,与空白组比较,模型组小鼠体质量显著增加,肝重和肝指数显著升高,血脂显著升高(P<0.01),肝脏脂质大量沉积,表现出显著的脂肪样变。与模型组比较,黄连-红曲干预后,小鼠体质量显著减轻(P<0.01),肝重和肝指数显著降低(P<0.01),血脂水平明显下降(P<0.05,P<0.01),肝功能显著降低(P<0.01),肝脏脂质沉积减轻,其中黄连-红曲低剂量组效果较好。Western blot结果显示,与空白组比较,模型组小鼠肝脏Nrf2、血红素氧合酶(HO-1)、Kelch样ECH相关蛋白(Keap1)和GPX4蛋白表达明显下降(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,给与黄连-红曲后,各组小鼠肝脏Nrf2、HO-1、Keap1和GPX4蛋白表达升高(P<0.05,P<0.01)。结论:黄连-红曲可减轻小鼠脂肪肝,改善肝功和减轻肝脏脂质沉积,其机制可能与调控Nrf2-GPX4铁死亡轴有关。 展开更多
关键词 黄连-红曲 脂肪肝 小鼠 铁死亡 核因子E_(2)相关因子2(nrf2)-谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)轴
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金蓉颗粒通过雌二醇/活性氧簇/核转录因子E2相关因子2通路抑制乳腺癌进程的机制研究
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作者 李东梅 陈青青 +4 位作者 陈丹丹 韦任雄 周若鹏 林毅 陈前军 《广州中医药大学学报》 CAS 2023年第2期428-437,共10页
【目的】观察金蓉颗粒(原名消癖颗粒,由淫羊藿、肉苁蓉、郁金等组成)对MMTV-PyMT小鼠乳腺癌发生与转移的影响及对雌二醇(E2)/活性氧簇(ROS)/转录因子E2相关因子2(Nrf2)信号通路的调控作用。【方法】选取MMTV-PyMT自发乳腺癌转基因小鼠模... 【目的】观察金蓉颗粒(原名消癖颗粒,由淫羊藿、肉苁蓉、郁金等组成)对MMTV-PyMT小鼠乳腺癌发生与转移的影响及对雌二醇(E2)/活性氧簇(ROS)/转录因子E2相关因子2(Nrf2)信号通路的调控作用。【方法】选取MMTV-PyMT自发乳腺癌转基因小鼠模型,分为模型组(生理盐水灌胃)、金蓉颗粒组(0.5 mg/kg金蓉颗粒混悬液灌胃),共给药12周。给药结束后,观察2组小鼠原发肿瘤大小及肺转移情况,检测血清中E2、8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、总抗氧化能力(T-AOC)、ROS的水平,苏木素-伊红(HE)染色法观察乳腺肿瘤组织病理学改变,免疫组织化学法检测乳腺肿瘤组织中层黏连蛋白(Laminin)、Nrf2、血红素加氧酶1(HO-1)、NAD(P)H:醌氧化还原酶1(NQO1)蛋白表达水平,聚合酶链反应(PCR)法检测乳腺肿瘤组织中Nrf2、HO-1、NQO1 mRNA表达水平。【结果】与模型组比较,金蓉颗粒组小鼠乳腺肿瘤生长及肺转移被明显抑制,血清E2、ROS和8-OHdG水平明显降低,SOD、CAT、GSH-PX、T-AOC水平明显升高(均P<0.05),乳腺肿瘤组织中Laminin表达水平显著降低,Nrf2及下游NQO1、HO-1的蛋白和mRNA表达水平升高(均P<0.05)。【结论】金蓉颗粒可抑制小鼠乳腺癌生长及肺转移,其机制可能与激活E2/ROS/Nrf2通路有关。 展开更多
关键词 金蓉颗粒 乳腺癌 雌二醇(E2)/活性氧簇(ROS)/核转录因子E2相关因子2(nrf2)通路 氧化损伤 MMTV-PyMT小鼠
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益母草碱激活p62/Nrf2/HO-1信号通路抑制肾小管上皮细胞铁死亡的作用机制 被引量:13
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作者 吴爱君 陈乃清 +7 位作者 黄丽华 程冉 王晓婉 黎创 毛炜 黄清明 徐鹏 田瑞敏 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第8期2176-2183,共8页
为探讨益母草碱(leonurine,Leo)对erastin诱导的人肾小管上皮细胞(HK-2细胞)铁死亡的保护作用及其潜在机制,在体外构建erastin诱导的HK-2细胞铁死亡模型,检测Leo对铁死亡细胞活力、细胞状态、铁死亡相关指标及相关信号通路蛋白的影响。... 为探讨益母草碱(leonurine,Leo)对erastin诱导的人肾小管上皮细胞(HK-2细胞)铁死亡的保护作用及其潜在机制,在体外构建erastin诱导的HK-2细胞铁死亡模型,检测Leo对铁死亡细胞活力、细胞状态、铁死亡相关指标及相关信号通路蛋白的影响。首先,体外培养HK-2细胞,CCK-8法检测10、20、40、60、80、100μmol·L^(-1)的Leo对正常HK-2细胞活性的影响,以此确定Leo的安全给药剂量范围;用铁死亡经典诱导剂erastin诱导铁死亡细胞模型并筛选出合适的造模浓度;CCK-8法检测Leo(20、40、80μmol·L^(-1))及阳性药铁死亡抑制剂ferrostatin-1(Fer-1,1、2μmol·L^(-1))对铁死亡模型细胞活性的影响,同时在相差显微镜下观察细胞形态学的变化。其次,通过Western blot法检测核转录因子E2相关因子2(nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2)的入核激活情况,并筛选后续机制研究的最佳浓度;进一步用透射电镜观察铁死亡发生的特征性显微形态学改变,应用流式细胞术检测活性氧(reactive oxygen species,ROS)变化,使用还原型谷胱甘肽(glutathione,GSH)测定试剂盒检测GSH含量。最后,采用Western blot法定量检测各组谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)、通路蛋白p62及Nrf2下游蛋白血红素加氧酶1(heme oxygenase 1,HO-1)的表达,探讨Leo对HK-2铁死亡调控作用的具体机制。结果显示,Leo在浓度为10~100μmol·L^(-1)时对正常HK-2细胞活性无影响,表明该浓度范围的药物对细胞无明显毒副作用;HK-2细胞活性随着铁死亡诱导剂erastin浓度的增高而降低,5μmol·L^(-1) erastin能够显著诱导HK-2细胞发生铁死亡;与模型组相比,20、40、80μmol·L^(-1)的Leo呈剂量依赖性提高HK-2细胞活性,并且能有效改善细胞形态;80μmol·L^(-1) Leo能显著上调HK-2细胞核中Nrf2的表达。进一步研究表明,Leo可以显著改善erastin造成的铁死亡特征性显微结构损伤,抑制细胞内ROS的释放,升高GSH含� 展开更多
关键词 益母草碱 肾小管上皮细胞 铁死亡 P62 核转录因子E2相关因子2(nrf2) 血红素加氧酶1(HO-1)
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基于Nrf2/ARE信号通路探讨清热化瘀方对大鼠脑缺血再灌注损伤氧化应激反应的影响 被引量:16
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作者 胡跃强 秦红玲 +3 位作者 唐农 李媛媛 王启芝 廖泰荣 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第14期128-133,共6页
目的:从核转录因子E2相关因子2/抗氧化反应元件(Nrf2/ARE)信号通路探讨清热化瘀方对脑缺血再灌注损伤大鼠氧化应激的影响及可能的作用机制。方法:采用Longa线栓法制备局灶性脑缺血再灌注大鼠(MCAO)模型,将160只SD大鼠随机分为4组... 目的:从核转录因子E2相关因子2/抗氧化反应元件(Nrf2/ARE)信号通路探讨清热化瘀方对脑缺血再灌注损伤大鼠氧化应激的影响及可能的作用机制。方法:采用Longa线栓法制备局灶性脑缺血再灌注大鼠(MCAO)模型,将160只SD大鼠随机分为4组,分别为假手术组(SO),模型组(MCAO),清开灵组(QKL),清热化瘀方组(QRHY)。每组大鼠40只,根据取材时间点12 h,1 d,2 d,3 d可以分为每组分为4个亚组,每个亚组10只大鼠。分别采用氯化三苯基四氮唑(TTC)染色法测量脑梗死体积,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)和免疫组化检测Nrf2/ARE信号通路蛋白Nrf2和血红素加氧酶1(HO-1)mRNA及其蛋白表达变化。结果:与SO组比较,大鼠脑缺血再灌注后1 d,MCAO组梗死体积显著升高(P〈0.01),QKL组较MCAO组梗死体积明显减小(P〈0.05);QRHY组脑梗死体积较QKL组进一步缩小(P〈0.05);MCAO组Nrf2和HO-1 mRNA及其蛋白表达均于缺血再灌注后12 h开始明显上升,24 h达高峰(P〈0.05,P〈0.01),随再灌注时间延长其表达逐渐下降,但仍保持较高表达水平(P〈0.05);QKL组较MCAO组Nrf2和HO-1 mRNA及其蛋白表达明显升高(P〈0.05),QRHY组较QKL组进一步升高Nrf2和HO-1 mRNA及其蛋白表达(P〈0.05,P〈0.01)。结论:清热化瘀方治疗脑缺血再灌注损伤可能通过激活Nrf2/ARE信号通路而降低细胞氧化损伤的程度,从而达到保护神经元的作用。 展开更多
关键词 清热化瘀方 脑缺血再灌注损伤 核转录因子E2相关因子2/抗氧化反应元件
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基于Nrf2信号通路探究参苓白术散调节铁死亡对酒精性肝损伤大鼠的影响 被引量:8
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作者 周相宇 周素芳 +3 位作者 李玉茹 蔡世揿 廖佳佳 叶佐玉 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期104-113,共10页
目的:观察参苓白术散通过调节核因子E2相关因子2(Nrf2)信号通路的干预调节铁死亡对酒精性肝损伤大鼠的影响。方法:将40只SD大鼠随机分为模型组、多烯磷脂酰胆碱组、参苓白术散高、中、低剂量组,每组8只,另取8只SD大鼠作为正常组。模型... 目的:观察参苓白术散通过调节核因子E2相关因子2(Nrf2)信号通路的干预调节铁死亡对酒精性肝损伤大鼠的影响。方法:将40只SD大鼠随机分为模型组、多烯磷脂酰胆碱组、参苓白术散高、中、低剂量组,每组8只,另取8只SD大鼠作为正常组。模型组、多烯磷脂酰胆碱组、参苓白术散高、中、低剂量组予以10 mL·kg^(-1)灌胃造模,正常组予以等体积蒸馏水灌胃;每日灌酒4 h后,予以多烯磷脂酰胆碱组143.64 mg·kg^(-1)药物灌胃、参苓白术散高、中、低剂量组分别予以15、7.5、3.75 mg·kg^(-1)的药物,正常组与模型组予以等体积蒸馏水灌胃,灌胃连续6周。全自动生化仪检测丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、谷氨酰转肽酶(GGT)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)水平,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)水平,生化检测法检测脂多糖(LPS)、丙二醇(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)、铁离子(Fe^(+))水平,苏木素-伊红(HE)和油红O染色观察肝脏病理变化,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测Nrf2、血红素加氧酶-1(HO-1)、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、铁蛋白重链1(FTH1)、核转录因子-κB(NF-κB) mRNA表达,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测Nrf2、HO-1、GPX4、FTH1、p65、磷酸化(p)-p65蛋白表达。结果:与正常组比较,模型组肝功能(ALT、AST、GGT)、血脂(TC、TG)水平明显升高(P<0.05),肝脏出现明显脂肪变性,有大量脂肪沉积,氧化应激水平及炎症因子明显升高(P<0.05),Fe^(+)水平明显增高(P<0.05),Nrf2、HO-1、GPX4、FTH1蛋白表达明显下调(P<0.05),p65、p-p65蛋白表达明显上调(P<0.05),Nrf2、HO-1、GPX4、FTH1 mRNA表达明显下调(P<0.05),NF-κB mRNA表达明显上调(P<0.05);与模型组比较,参苓白术散高、中剂量组肝功能(ALT、AST、GGT)、血脂(TC、TG)水平明显下调(P<0.05),肝脏脂肪变性明显改 展开更多
关键词 参苓白术散 酒精性肝损伤 核因子E2相关因子2(nrf2) 氧化应激 铁死亡
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褪黑素通过Nrf2/HO-1信号通路减轻大鼠脑缺血再灌注损伤 被引量:12
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作者 巩敏杰 安佳琪 +4 位作者 吴锋 唐永兰 祁艺 袁惠婕 罗国刚 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期857-863,876,共8页
目的研究褪黑素对脑缺血再灌注后Nrf2/HO-1信号通路的调控作用。方法SPF级雄性SD大鼠99只随机分为假手术组、脑缺血再灌注组、褪黑素处理组,对脑缺血再灌注组和褪黑素处理组采用线栓法制作脑缺血再灌注模型,缺血90min后拔出线栓进行再灌... 目的研究褪黑素对脑缺血再灌注后Nrf2/HO-1信号通路的调控作用。方法SPF级雄性SD大鼠99只随机分为假手术组、脑缺血再灌注组、褪黑素处理组,对脑缺血再灌注组和褪黑素处理组采用线栓法制作脑缺血再灌注模型,缺血90min后拔出线栓进行再灌注,褪黑素处理组在再灌注即刻和12h后按5mg/kg体质量腹腔注射褪黑素,脑缺血再灌注组腹腔注射3.43mol/L无水乙醇生理盐水溶液;改良GarciaJH评分评估3组动物神经缺损的严重程度,Nissle染色观察24h后梗死面积,HE染色观察3组大鼠脑组织梗死灶神经元的改变,免疫组化观察3组大鼠组间HO-1、GFAP和NF200的表达情况,Western blot检测3组大鼠组间Nrf2和HO-1的表达。结果褪黑素处理能提高脑缺血再灌注后1、3、7d神经功能评分(P<0.05);褪黑素处理后可以增加脑缺血急性期Nrf2和HO-1的表达(P<0.05);褪黑素处理能减少GFAP的表达(P<0.05),增加NF200的表达。结论褪黑素对脑缺血再灌注损伤有保护作用,其机制可能为褪黑素激活了Nrf2/HO-1信号途径,促进抗氧化蛋白HO-1的表达;同时,褪黑素可能抑制神经胶质细胞生成胶质瘢痕,有利于神经轴突再生。 展开更多
关键词 褪黑素 脑缺血再灌注 核因子E2相关因子2 血红素加氧酶1
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姜黄素对大鼠非酒精性脂肪性肝炎的作用及其机制初探 被引量:12
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作者 李兵兵 王龙 +1 位作者 陈维雄 朱金水 《肝脏》 2013年第1期18-22,共5页
目的探讨姜黄素对高脂饮食诱导的大鼠非酒精性脂肪性肝炎(NASH)的防治作用及其机制。方法 SD大鼠36只随机分为正常组、模型组和治疗组(每组12只)。正常组全程饲以普通饲料,另两组均给予高脂饮食。6周末,每组各处死2只大鼠。验证非酒精... 目的探讨姜黄素对高脂饮食诱导的大鼠非酒精性脂肪性肝炎(NASH)的防治作用及其机制。方法 SD大鼠36只随机分为正常组、模型组和治疗组(每组12只)。正常组全程饲以普通饲料,另两组均给予高脂饮食。6周末,每组各处死2只大鼠。验证非酒精性单纯性脂肪肝(NAFL)造模成功后,给予治疗组50mg·kg-1·d-1姜黄素灌胃,正常组、模型组给予相应体积的0.5%羧甲基纤维素钠(CMC)灌胃。6周治疗结束后,留取血样和肝组织,计算肝指数,进行血脂、肝功能和病理组织学检查;检测肝脏组织丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)含量及超氧化物歧化酶(SOD)的活性;Western印迹检测肝脏转录因子NF-E2相关因子2(Nrf2)的水平。结果模型组大鼠肝组织出现NASH的病理特征。治疗组大鼠与模型组相比,血清三酰甘油、TC、ALT、AST及肝组织MDA水平均明显降低(0.36±0.17)mmol/L比(0.67±0.14)mmol/L,(1.01±0.06)mmol/L比(1.40±0.20)mmol/L,(43.67±3.22)U/L比(83.00±4.36)U/L,(82.50±7.42)U/L比(122.33±3.51)U/L,(0.54±0.95)nmol/mgprot比(1.57±0.03)nmol/mgprot;均P<0.01。肝组织脂肪变、炎症程度明显改善,GSH含量和SOD的活性升高(1.64±0.17)mg/gprot比(1.17±0.17)mg/gprot,(420.12±42.03)U/mgprot比(335.53±25.81)U/mgprot;均P<0.05。且该组肝组织内Nrf2蛋白表达较正常组、模型组显著升高(均P<0.01)。结论姜黄素可通过降脂、减弱氧应激,延缓大鼠从NAFL向NASH的进展,该作用可能与其诱导Nrf2在肝脏中的表达相关。 展开更多
关键词 姜黄素 非酒精性脂肪性肝炎 大鼠 转录因子NF-E2相关因子2
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基于Nrf2/HO-1通路抑制铁死亡探究甘草含药血清对LPS诱导的Caco2细胞炎症的影响 被引量:5
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作者 孔金融 施高翔 +5 位作者 侯静 冯烨 项庆镇 王运来 宣自华 许钒 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第16期144-153,共10页
目的:探讨甘草含药血清激活核因子E2相关因子2(Nrf2)/血红素加氧酶-1(HO-1)通路抑制铁死亡对脂多糖(LPS)诱导的人结肠上皮腺癌细胞(Caco2)炎症的影响。方法:将Caco2细胞分为正常组、模型组(LPS,200μg·L^(-1))、甘草含药血清低、... 目的:探讨甘草含药血清激活核因子E2相关因子2(Nrf2)/血红素加氧酶-1(HO-1)通路抑制铁死亡对脂多糖(LPS)诱导的人结肠上皮腺癌细胞(Caco2)炎症的影响。方法:将Caco2细胞分为正常组、模型组(LPS,200μg·L^(-1))、甘草含药血清低、中、高浓度组(5%、10%、20%)、铁死亡抑制剂组(3-氨基-4-环己基氨基苯甲酸乙酯,Fer-1,10μmol·L^(-1))。正常组细胞正常培养,其他组建立炎症模型,甘草含药血清低、中、高浓度组分别加入5%、10%、20%含药血清处理24 h,铁死亡抑制剂组给予Fer-1处理24 h。透射电镜观察各组线粒体形态;流式细胞术检测细胞内Fe^(2+)水平;微板法检测超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-6、IL-10、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测Nrf2、HO-1、铁蛋白重链1(FTH1)、谷胱甘肽过氧化物酶4(GSH-Px4)蛋白的表达水平。运用小干扰核糖核酸(siRNA)的方式来观察Nrf2在铁死亡调控中的作用。将干扰后细胞分为空载体组(NC)、Si-Nrf2组、含药血清(20%)+Si-Nrf2组、含药血清(20%)+NC组。微板法检测MDA、SOD、GSH-Px水平;Western blot检测Nrf2、HO-1、FTH1、GSH-Px4蛋白表达水平。结果:与正常组比较,模型组线粒体固缩,线粒体膜增厚,线粒体形态变小;模型组Fe2+含量显著增加(P<0.01);SOD活性显著降低(P<0.01),GSH-Px表达显著下降(P<0.01),MDA含量显著增高(P<0.01);Nrf2、HO-1表达降低(P<0.05),FTH1表达显著性下降(P<0.01),GSH-Px4表达显著降低(P<0.01)。甘草含药血清处理组,中、高浓度组Fe2+含量显著降低(P<0.01),SOD活性和GSH-Px活性显著升高(P<0.01),MDA水平显著降低(P<0.01);高浓度组Nrf2表达明显升高(P<0.05),中浓度组HO-1与GSH-Px4蛋白的表达有所增高(P<0.05),低、中、高浓度组FTH1水平皆显著增加(P<0.01)。机制研究发现,与NC组比较, 展开更多
关键词 甘草 溃疡性结肠炎 核因子E2相关因子2(nrf2) 血红素加氧酶-1(HO-1) 铁死亡
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甲基汞对原代大鼠星形胶质细胞的毒性作用 被引量:9
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作者 陈茹 蔡激扬 《中国康复理论与实践》 CSCD 2008年第5期437-439,共3页
目的初步研究甲基汞对原代SD大鼠星形胶质细胞产生毒性的机制。方法用甲基汞作用于原代SD大鼠星形胶质细胞,用高效液相色谱检测细胞氧化还原水平,用Western-blot检测核因子E2相关因子2(Nrf2)蛋白表达水平。结果随着甲基汞浓度的增加,星... 目的初步研究甲基汞对原代SD大鼠星形胶质细胞产生毒性的机制。方法用甲基汞作用于原代SD大鼠星形胶质细胞,用高效液相色谱检测细胞氧化还原水平,用Western-blot检测核因子E2相关因子2(Nrf2)蛋白表达水平。结果随着甲基汞浓度的增加,星形胶质细胞的还原水平明显下降。在甲基汞浓度较小时,随着甲基汞浓度的增加,星形胶质细胞Nrf2表达水平呈增长趋势;在甲基汞浓度较大时,随着甲基汞浓度的增加,星形胶质细胞Nrf2表达水平呈减少趋势。结论甲基汞对原代SD大鼠星形胶质细胞的毒性作用可能通过改变还原型谷胱甘肽(GSH)和Nrf2的功能而实现。 展开更多
关键词 甲基汞 星形胶质细胞 毒性作用 核因子E2相关因子2(nrf2)
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