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混合砷暴露对Nrf2抑制细胞Keap1和N6AMT1表达的影响
1
作者 涂开荣 赵雨欣 +3 位作者 蒙好孝 马瑶 白雪 吴军 《中华疾病控制杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第11期1177-1180,共4页
目的探究混合砷染毒对核转录因子红细胞系-2p45(NF-E2)因子-2(nuclear erythroid 2-related factor,Nrf2)抑制的人永生化角质形成细胞(human immortalized keratinocytes,Ha Ca T细胞) Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1(Kelch-like ECH-assoc... 目的探究混合砷染毒对核转录因子红细胞系-2p45(NF-E2)因子-2(nuclear erythroid 2-related factor,Nrf2)抑制的人永生化角质形成细胞(human immortalized keratinocytes,Ha Ca T细胞) Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1(Kelch-like ECH-associated protein,Keap1)和N-6-腺嘌呤DNA甲基转移酶(N-6-adenine DNA methyltransferase,N6AMT1)表达的影响。方法细胞培养72 h,分为4组:空白对照组、Keap1抑制对照组、Nrf2抑制对照组和三个Nrf2抑制混合染砷组,混合砷染毒浓度分别为2. 1μmol/L、4. 2μmol/L、21. 0μmol/L;采用实时荧光定量PCR和蛋白质分子印记(western blot)方法测定各组细胞N6AMT1、Keap1的mRNA和蛋白水平。结果与Nrf2抑制对照组比较Keap1和N6AMT1 mRNA表达不全相等(均有P <0. 05)。与Nrf2抑制对照组比较,低、中、高剂量Keap1蛋白表达促进(均有P <0. 05),N6AMT1蛋白表达呈低剂量促进(t=-3. 18,P=0. 034),中、高剂量抑制(均有P <0. 05)。结论 Nrf2抑制状况下,N6AMT1基因可能与Keap1-Nrf2通路调控有关。低剂量砷暴露时,Keap1激活可促进N6AMT1基因表达,促进砷代谢;高剂量砷暴露N6AMT1蛋白表达下调,抑制砷代谢。Keap1-Nrf2通路可能参与N6AMT1表达调控,而影响砷毒性作用。 展开更多
关键词 砷 nrf2抑制 HaCaT细胞 N6AMT1基因 Keap1基因
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砷对Nrf2抑制HaCaT细胞凋亡及抗氧化水平的影响
2
作者 魏朝 毛宏凯 +3 位作者 王纤云 阿迪拉·阿布迪日木 祖丽姑努尔·巴克 吴军 《医学动物防制》 2019年第9期822-825,共4页
目的以Nrf2基因抑制的人永生化皮肤角质细胞(HaCaT)作为模型细胞,通过染砷模型细胞,观察抗氧化水平及细胞凋亡等的变化。探讨对氧化应激的影响,为探究砷致皮肤角化紊乱机制提供基础。方法以人正常HaCaT细胞为实验空白对照组。无机砷混... 目的以Nrf2基因抑制的人永生化皮肤角质细胞(HaCaT)作为模型细胞,通过染砷模型细胞,观察抗氧化水平及细胞凋亡等的变化。探讨对氧化应激的影响,为探究砷致皮肤角化紊乱机制提供基础。方法以人正常HaCaT细胞为实验空白对照组。无机砷混合物暴露于砷污染组,高、中、低砷浓度为LC50浓度的1/10、1/50、1/100,即为21. 0μmol/L、4. 2μmol/L、2. 1μmol/L。每组细胞培养8、24、48和72 h。酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组HO-1、GSH和COX-2蛋白水平。结果与阴性对照组相比,高、中、低剂量组在8 h和24 h时早期凋亡率增加,差异有统计学意义(F=298. 696,P <0. 01),在低、中、高剂量组中HO-1蛋白水平在8 h和24 h时上调(F=279. 229,P <0. 01;F=530. 741,P <0. 01),48 h和72 h HO-1蛋白含量均下调(F=329. 470,P <0. 01;F=814. 141,P <0. 01),各组8 h、72 h GSH蛋白浓度先上调后下调(F=100 064. 804,P <0. 001,F=158 817. 814,P <0. 05),各组24 h、48 h GSH蛋白浓度上调(F=77 549. 323,P <0. 05),除8 h外,其余时间点各组COX-2蛋白浓度均下调(F=147. 203,P <0. 001;F=3 054. 025,P <0. 001;F=126 920. 724,P <0. 001)。结论砷暴露通过增加ROS生成,调控Nrf2通路,下调COX-2和HO-1蛋白,上调GSH蛋白,诱导皮肤角质形成细胞凋亡及皮肤角化紊乱。 展开更多
关键词 HACAT细胞 nrf2基因抑制 细胞凋亡 抗氧化水平
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