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基于Notch1信号通路观察电针对脑缺血再灌注损伤大鼠缺血周边皮质与SVZ区神经干细胞增殖的影响 被引量:28
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作者 陶静 柳维林 +7 位作者 黄佳 薛偕华 杨珊莉 郑薏 林云娇 叶晓倩 林梅琴 陈立典 《康复学报》 2015年第3期23-34,共12页
目的:探讨电针曲池、足三里穴对脑缺血再灌注损伤大鼠缺血周边区皮质、室管膜下区(SVZ)内源性神经干细胞增殖的影响及可能机制。方法:采用改良Zea Longa线栓法制备大鼠脑缺血再灌注损伤模型。电针患肢曲池、足三里穴,治疗3 d和7 d后,观... 目的:探讨电针曲池、足三里穴对脑缺血再灌注损伤大鼠缺血周边区皮质、室管膜下区(SVZ)内源性神经干细胞增殖的影响及可能机制。方法:采用改良Zea Longa线栓法制备大鼠脑缺血再灌注损伤模型。电针患肢曲池、足三里穴,治疗3 d和7 d后,观察大鼠神经功能缺损和脑梗死体积情况,以及动物整体行为学的变化;采用免疫组化和免疫荧光法观察Nestin、Vimentin阳性细胞分布及与Brdu共标情况;采用Western Blotting法检测Notch1信号转导通路相关蛋白的表达水平。结果:(1)电针曲池、足三里穴后,脑缺血再灌注损伤大鼠的神经缺损评分降低,脑梗死体积减小(P<0.05);(2)Catwalk步态分析显示,电针治疗3 d和7 d后大鼠通过Catwalk通道的平均速度增加,而持续时间减少(P<0.05);(3)模型组大鼠脑缺血再灌注损伤8d,缺血周围区皮质以及缺血侧SVZ区Ki-67、Nestin和Vimentin阳性细胞数量较缺血再灌注损伤4 d时增加(P<0.05或P<0.01)。电针治疗3 d和7 d均促进神经干细胞增殖(P<0.05);(4)电针治疗7 d后缺血周围区皮质以及缺血侧SVZ区JAG1、NICD、Hes1、Hes5的表达量较模型组明显增加(P<0.05或P<0.01),而电针+GSI组大鼠脑缺血周围区皮质以及缺血侧SVZ区NICD、Hes1、Hes5蛋白的表达量显著降低(P<0.05),但JAG1的表达无统计学意义(P>0.05)。(5)电针+GSI组Nestin阳性细胞、Brdu与Nestin共定位细胞在缺血周围区皮质、缺血侧SVZ区均明显增加(P<0.01或P<0.05)。结论:电针曲池、足三里穴能够减少脑梗死体积,改善动物整体行为学,发挥积极的神经保护作用。其作用机制可能为活化Notch1信号转导通路,释放NICD调控Hes1、Hes5的表达,促进缺血周围区皮质以及缺血侧SVZ区内源性神经干细胞的增殖。 展开更多
关键词 电针 脑缺血再灌注损伤 神经干细胞 缺血周围区 SVZ区 notch1信号通路
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槲皮素通过靶向GAS5/Notch1信号通路促进乳腺癌细胞凋亡的研究 被引量:19
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作者 蒋多晨 金乐 +3 位作者 陈洪晓 张蕾 陈昭琳 居靖 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期637-644,共8页
目的探讨槲皮素对乳腺癌细胞促凋亡作用的可能机制。方法用槲皮素处理乳腺癌MCF-7细胞后,采用MTT法检测细胞活力;平板克隆实验检测细胞增殖克隆能力;Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡;同时,分别采用槲皮素(40、80、160μmol·L^... 目的探讨槲皮素对乳腺癌细胞促凋亡作用的可能机制。方法用槲皮素处理乳腺癌MCF-7细胞后,采用MTT法检测细胞活力;平板克隆实验检测细胞增殖克隆能力;Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡;同时,分别采用槲皮素(40、80、160μmol·L^(-1))、GAS5小干扰RNA(siGAS5)、槲皮素(80μmol·L^(-1))协同siGAS5处理细胞后,qRT-PCR法和Western blot法检测GAS5、Notch1、Jagged1、Hes1、Bcl-2、Bax、Caspase-3的表达。结果槲皮素(40、80、160μmol·L^(-1))处理MCF-7细胞后,发现40μmol·L^(-1)槲皮素可明显抑制增殖,而80、160μmol·L^(-1)槲皮素不仅明显抑制增殖且诱导凋亡;槲皮素(40、80、160μmol·L^(-1))可上调GAS5、Bax和Caspase-3的表达,下调Notch1、Jagged1、Hes1和Bcl-2的表达;细胞转染siGAS5后,与sncRNA组相比,GAS5、Bax和Caspase-3表达下调,Notch1、Jagged1、Hes1和Bcl-2表达上调;当siGAS5与槲皮素(80μmol·L^(-1))共处理细胞后,与sncRNA加槲皮素对照组相比,GAS5、Bax和Caspase-3表达下调,Notch1、Jagged1、Hes1和Bcl-2上调。结论槲皮素通过靶向GAS5/Notch1信号通路促进乳腺癌细胞凋亡。 展开更多
关键词 槲皮素 乳腺癌 长链非编码RNA GAS5 notch1信号通路 细胞凋亡 靶向
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Notch-1信号通路与甲状腺乳头状癌的关系 被引量:16
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作者 杨晶金 姚军 +5 位作者 沈峰清 陈佳玉 杨林军 张强 金晓燕 梁勇 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期120-126,共7页
研究Notch-1信号通路中Notch-1、NICD、Hes1、c-Myc与人甲状腺乳头状癌的关系,探讨Notch-1信号通路在甲状腺乳头状癌中的分子机制。对照人甲状腺乳头状癌及正常甲状腺组织标本各35例,采用Real Time PCR检测Notch-1、Hes1、c-Myc的mRNA... 研究Notch-1信号通路中Notch-1、NICD、Hes1、c-Myc与人甲状腺乳头状癌的关系,探讨Notch-1信号通路在甲状腺乳头状癌中的分子机制。对照人甲状腺乳头状癌及正常甲状腺组织标本各35例,采用Real Time PCR检测Notch-1、Hes1、c-Myc的mRNA表达情况,采用免疫组织化学、Western blot方法检测组织标本中Notch-1、NICD、Hes1、c-Myc蛋白的表达情况。Notch-1、Hes1在甲状腺乳头状癌中的mRNA表达水平明显降低,c-Myc mRNA的表达在甲状腺乳头状癌中升高,Notch-1、NICD、Hes1蛋白在人甲状腺乳头状癌中的表达低于正常甲状腺组织(P<0.05),c-Myc蛋白在甲状腺乳头状癌中的表达高于正常甲状腺组织(P<0.05)。甲状腺乳头状癌组织标本中,Notch-1信号通路中Notch-1、NICD、Hes1在基因转录和蛋白质表达水平上均明显下调,而c-Myc的基因转录和蛋白质表达水平均升高,提示Notch-1信号通路在甲状腺乳头状癌的发生发展中起抑癌作用,c-Myc基因表达升高与Notch-1信号通路可能无关。 展开更多
关键词 甲状腺乳头状癌 notch-1信号通路 notch-1 NICD HES1 C-MYC
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姜黄素对肝癌细胞凋亡及TNF-ɑ、IL-1β、IL-6炎性因子影响的机制研究 被引量:15
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作者 周宁 戴旖旎 +7 位作者 白旭光 王瑜 贺勇毅 田蓉 王锻 黄晶晶 张雪竹 范萍 《癌症进展》 2017年第11期1282-1285,共4页
目的探讨姜黄素对肝癌细胞凋亡及肿瘤坏死因子α(TNF-ɑ)、白介素1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)炎性因子的影响及机制。方法采用5、10、20、40、80、160μmol/L的姜黄素处理人肝癌Hep G2细胞24、48 h后,CCK8实验检测细胞的增殖情况,计算I... 目的探讨姜黄素对肝癌细胞凋亡及肿瘤坏死因子α(TNF-ɑ)、白介素1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)炎性因子的影响及机制。方法采用5、10、20、40、80、160μmol/L的姜黄素处理人肝癌Hep G2细胞24、48 h后,CCK8实验检测细胞的增殖情况,计算IC50值;50μmol/L的姜黄素处理Hep G2细胞48 h后,流式细胞仪检测细胞凋亡情况;Western blot检测TNF-ɑ、IL-1β、IL-6、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Cleaved Caspase-3)、Notch1、Hes1蛋白表达情况。结果细胞抑制率随着姜黄素作用时间及浓度的增加显著升高。根据IC50值选择50μmol/L的姜黄素作为研究对象;以50μmol/L的姜黄素处理肝癌细胞的凋亡率及Cleaved Caspase-3蛋白表达明显高于对照组,TNF-ɑ、IL-1β、IL-6、Notch1、Hes1蛋白表达均明显低于对照组(P﹤0.01)。结论姜黄素可呈时间及剂量依赖式抑制人肝癌Hep G2细胞增殖,可诱导细胞的凋亡,可通过降低TNF-ɑ、IL-1β、IL-6的表达达到抗炎作用,其机制与抑制Notch1信号通路有关。 展开更多
关键词 姜黄素 肝癌 凋亡 炎性因子 notch1信号通路
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补中益气汤对AIT小鼠Th17/Treg免疫失衡及Notch1信号通路的影响 被引量:7
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作者 赵卓 宋囡 +8 位作者 刘子玉 李品 罗玥 张鹏坤 王智民 尹远平 高天舒 金哲 杨潇 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期19-27,共9页
目的:探讨补中益气汤对自身免疫性甲状腺炎(AIT)小鼠辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)免疫失衡及果蝇双翅边缘缺刻同源基因1(Notch1)信号通路的影响。方法:将60只8周龄NOD.H-2^(h4)小鼠,随机分为正常组、模型组、西药组(硒酵母片,... 目的:探讨补中益气汤对自身免疫性甲状腺炎(AIT)小鼠辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)免疫失衡及果蝇双翅边缘缺刻同源基因1(Notch1)信号通路的影响。方法:将60只8周龄NOD.H-2^(h4)小鼠,随机分为正常组、模型组、西药组(硒酵母片,32.5 mg·kg^(-1))、补中益气汤低、中、高剂量组(4.78、9.56、19 g·kg^(-1)),每组10只。正常组饲以蒸馏水,其余各组饲以含0.05%碘化钠水8周,自发形成AIT动物模型后,依据分组灌胃给药8周麻醉处死小鼠。酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清抗甲状腺球蛋白抗体(TGAb)、促甲状腺激素(TSH)、游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)、游离甲状腺激素(FT4)含量;苏木素-伊红(HE)染色法观察甲状腺组织改变;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)分别检测甲状腺组织维甲酸相关孤核受体γt(RORγt)、白细胞介素(IL)-17、叉头样转录因子3(FoxP3)、IL-10、Notch1、发状分裂相关增强子1(Hes1)mRNA及蛋白表达水平。结果:与正常组比较,模型组小鼠甲状腺结构破坏严重,淋巴细胞明显浸润,血清TGAb、FT3及FT4含量显著升高,TSH含量显著降低(P<0.01),RORγt、IL-17、Notch1、Hes1 mRNA及蛋白表达水平明显升高,FoxP3、IL-10 mRNA及蛋白表达水平显著降低(P<0.01);与模型组比较,各给药组小鼠甲状腺结构破坏及淋巴细胞浸润程度有所改善,血清TGAb、FT3及FT4含量显著降低,TSH含量升高,RORγt、IL-17、Notch1、Hes1 mRNA及蛋白表达水平均有不同程度降低,FoxP3、IL-10 mRNA及蛋白表达水平均有不同程度升高(P<0.05,P<0.01),以补中益气汤中剂量组干预效果最为显著。结论:补中益气汤可缓解AIT小鼠甲状腺结构损伤,其机制可能与改善Th17/Treg免疫细胞异常分化,抑制Notch1信号通路激活有关。 展开更多
关键词 补中益气汤 自身免疫性甲状腺炎 辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg) 果蝇双翅边缘缺刻同源基因1(notch1)信号通路 炎症
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姜黄素通过抑制Notch1信号通路增强多发性骨髓瘤对硼替佐米的化疗敏感性 被引量:11
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作者 葛雪苹 洪亚婷 +1 位作者 李亚丽 李炳宗 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期464-471,共8页
目的:探讨姜黄素对耐硼替佐米的骨髓瘤细胞的作用以及对Notch1信号通路表达的影响,进一步探索其潜在的作用机制。方法:分别将姜黄素、硼替佐米及姜黄素+硼替佐米作用于骨髓瘤细胞系RPMI8266、U266、耐5 nmol/L硼替佐米的RPMI 8266(RPMI8... 目的:探讨姜黄素对耐硼替佐米的骨髓瘤细胞的作用以及对Notch1信号通路表达的影响,进一步探索其潜在的作用机制。方法:分别将姜黄素、硼替佐米及姜黄素+硼替佐米作用于骨髓瘤细胞系RPMI8266、U266、耐5 nmol/L硼替佐米的RPMI 8266(RPMI8226-V5R)、耐5 nmol硼替佐米的U266(U266-V5R)及骨髓瘤CD138+浆细胞,应用MTT法检测细胞增殖活性,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot检测凋亡相关蛋白的表达;利用notch1抑制剂DAPT及RNA干扰技术抑制细胞内notch1表达,重复上述实验。结果:与单药组相比,联合作用组可进一步抑制细胞增殖,增加细胞凋亡,增强对Notch1信号通路的抑制作用(P<0.05);而抑制Notch1可以减少细胞的增殖,并增加凋亡相关蛋白Cleaved caspase-3的表达水平。结论:姜黄素能够增强骨髓瘤细胞对硼替佐米的敏感性,此作用可能与Notch1受抑制有关。 展开更多
关键词 多发性骨髓瘤 姜黄素 notch1信号通路 硼替佐米
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Notch1信号通路调控乳腺癌肿瘤细胞放疗敏感性的机制研究 被引量:10
7
作者 林争 王绎 明华 《肿瘤学杂志》 CAS 2018年第7期687-691,共5页
[目的]探讨抑制Notch1信号通路对乳腺癌肿瘤细胞放疗敏感性的影响及机制。[方法]Western blot检测人乳腺癌MCF-7细胞中加入5、10、20μmol/L的Notch1信号通路抑制剂γ分泌酶抑制剂(γ-secretase inhibitor,GSI)后Notch1、Hes1蛋白表达... [目的]探讨抑制Notch1信号通路对乳腺癌肿瘤细胞放疗敏感性的影响及机制。[方法]Western blot检测人乳腺癌MCF-7细胞中加入5、10、20μmol/L的Notch1信号通路抑制剂γ分泌酶抑制剂(γ-secretase inhibitor,GSI)后Notch1、Hes1蛋白表达;克隆形成实验检测细胞经GSI和照射处理后增殖情况;后续实验分为对照组、GSI组和GSI+8Gy组,48h后CCK8实验检测细胞增殖;流式细胞仪检测细胞凋亡;Western blot检测Ki67、Cleaved caspase3蛋白表达。[结果]随着GSI的浓度增高,Notch1和Hes1蛋白表达随之降低(P〈0.05),且呈剂量依赖性关系。GSI与照射同时处理细胞较单纯用照射有较高的增敏比。GSI组和GSI+8Gy组细胞吸光值均显著性低于对照组(P〈0.05),而GSI+8Gy组吸光值显著性低于GSI组(P〈0.05),除对照组,GSI组和GSI+8Gy组随着处理时间的延长均明显降低(P〈0.05),呈时间依赖性关系。GSI组和GSI+8Gy组细胞凋亡率均显著性高于对照组,GSI+8Gy组细胞凋亡率显著性高于GSI组(P〈0.01)。GSI组和GSI+8Gy组Ki67蛋白表达显著性低于对照组(P〈0.05),Cleaved caspase3蛋白表达显著性高于对照组(P〈0.05),GSI+8Gy组Ki67蛋白表达显著性低于GSI组,Cleaved caspase3蛋白表达显著性高于GSI组(P〈0.05)。[结论 ]抑制Notch1信号通路可增强乳腺癌的放疗敏感性。 展开更多
关键词 乳腺癌 notch1信号通路 放疗敏感性
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RNAi结肠癌HOXB7基因表达对癌细胞增殖及凋亡的机制研究 被引量:9
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作者 朱克祥 袁得峰 +2 位作者 张正聪 吕鹏飞 白小平 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期371-375,共5页
目的:探讨抑制HOXB7基因表达对结肠癌细胞增殖凋亡的影响。方法:通过LipofectamineTM2000脂质体介导法将合成的阴性对照siRNA(阴性对照组)及HOXB7-siRNA(HOXB7转染组)转染人结肠癌SW480细胞,未经特殊处理的细胞为空白组。收集转染48 h... 目的:探讨抑制HOXB7基因表达对结肠癌细胞增殖凋亡的影响。方法:通过LipofectamineTM2000脂质体介导法将合成的阴性对照siRNA(阴性对照组)及HOXB7-siRNA(HOXB7转染组)转染人结肠癌SW480细胞,未经特殊处理的细胞为空白组。收集转染48 h的细胞,RT-PCR及Western blot分别检测细胞中HOXB7的mRNA及蛋白表达;分别于转染后的24、48、72、96 h,CCK8法检测细胞增殖;流式细胞仪检测转染后48 h细胞的凋亡情况;Western blot检测凋亡相关蛋白B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)及Notch1信号通路Notch1、Hes1的蛋白表达。结果:HOXB7转染组HOXB7的mRNA及蛋白表达均显著低于空白组(P<0.05);转染24 h后三组细胞的OD值间差异无统计学意义(P>0.05),48、72、96 h后,与空白组比较,HOXB7转染组OD值均显著降低(P<0.05);与空白组比较,HOXB7转染组细胞凋亡率显著升高,Bcl-2、Notch1、Hes1蛋白显著下调表达,Bax蛋白显著上调表达(P<0.05)。结论:RNAi结肠癌HOXB7基因表达可通过抑制Notch1信号通路降低癌细胞的增殖,并诱导细胞凋亡。 展开更多
关键词 RNAI 结肠癌 HOXB7基因 notch1信号通路
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运动可能通过下调肾脏Notch-1信号改善Ⅱ型糖尿病大鼠肾功能 被引量:9
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作者 朱洪竹 肖国强 朱梅菊 《天津体育学院学报》 CAS CSSCI 北大核心 2014年第1期1-5,共5页
目的:观察有氧游泳运动对Ⅱ型糖尿病大鼠肾脏损伤的改善效果,并探讨其可能的机制。方法:45只4周龄健康雄性SD大鼠,随机抽取10只为正常对照组,基础饲料喂养;其余35只经高糖高脂喂养5周后,配合腹腔注射STZ(35 mg/kg.bw)诱导建立Ⅱ型糖尿... 目的:观察有氧游泳运动对Ⅱ型糖尿病大鼠肾脏损伤的改善效果,并探讨其可能的机制。方法:45只4周龄健康雄性SD大鼠,随机抽取10只为正常对照组,基础饲料喂养;其余35只经高糖高脂喂养5周后,配合腹腔注射STZ(35 mg/kg.bw)诱导建立Ⅱ型糖尿病大鼠模型;7周后,将成模大鼠随机分为糖尿病安静组和糖尿病运动组,每组14只。3组大鼠均采用基础饲料喂养;糖尿病运动组大鼠进行8周有氧游泳运动;正常对照组、糖尿病安静组2组大鼠均自由活动,不施加任何干预。结果:(1)8周有氧游泳运动后,糖尿病运动组肾脏在电镜下的形态表现为肾小球三层结构较清晰,基底膜增厚不明显,足突融合减少,溶酶体增多现象等均有一定程度减少,较糖尿病安静组有明显改善;(2)糖尿病运动组血糖浓度和24 h UA排泄量较糖尿病安静组显著降低(分别为P<0.05或P<0.01);(3)糖尿病运动组肾皮质Jagged-1、Val1744NICD和Hes-1蛋白的表达较糖尿病安静组均显著降低(P<0.05或P<0.01)。结论:运动可提高Ⅱ型糖尿病大鼠肾功能,改善大鼠肾脏损伤,可能与其下调Ⅱ型糖尿病状态下激活的Notch-1信号通路有关。 展开更多
关键词 Ⅱ型糖尿病 有氧运动 肾脏损伤 notch-1信号通路 动物实验
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RNA干扰Rac1基因表达抑制胃癌细胞增殖及促进凋亡的机制研究 被引量:7
10
作者 张瑞瑞 周武碧 +1 位作者 潘振国 刘海燕 《临床和实验医学杂志》 2017年第13期1279-1282,共4页
目的 RNA干扰抑制Rac1基因的表达对胃癌细胞增殖和凋亡的影响及机制。方法 Western blot检测胃癌组织及相应的癌旁组织中Rac1基因的蛋白表达;将NC-siRNA、Rac1-siRNA转染至人胃癌SGC-7901细胞,不经任何处理的细胞作为空白对照组,48 h后,... 目的 RNA干扰抑制Rac1基因的表达对胃癌细胞增殖和凋亡的影响及机制。方法 Western blot检测胃癌组织及相应的癌旁组织中Rac1基因的蛋白表达;将NC-siRNA、Rac1-siRNA转染至人胃癌SGC-7901细胞,不经任何处理的细胞作为空白对照组,48 h后,Western blot检测各组细胞中Rac1的蛋白表达;CCK8实验检测细胞增殖;流式细胞仪检测细胞凋亡;Western blot检测ki67、PCNA、Cleaved caspase3、Notch1、Hes1蛋白表达。结果 Rac1在胃癌组织中的蛋白表达显著高于癌旁组织(P<0.01);RNA干扰SGC-7901细胞中Rac1基因后能显著降低Rac1的蛋白表达;与对照组及NC-siRNA组比较,Rac1-siRNA组细胞存活率及ki67、PCNA、Notch1、Hes1蛋白表达显著降低,细胞凋亡率及Cleaved caspase3蛋白表达显著升高(P<0.01)。结论 Rac1基因在胃癌组织中高表达,RNA干扰抑制Rac1基因表达后能显著降低细胞的增殖及诱导细胞凋亡,其机制与抑制Notch1信号通路有关。 展开更多
关键词 胃癌 RNA干扰 Rac1基因 增殖 凋亡 notch1信号通路
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血府逐瘀胶囊对动脉粥样硬化小鼠巨噬细胞极化的影响 被引量:3
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作者 刘梦华 程序 +2 位作者 赵梦竹 魏琼 张冬梅 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第12期54-61,共8页
目的:以果蝇双翅边缘缺刻同源基因1(Notch1)/锯齿典型Notch配体1(Jagged1)/Hes家族BHLH转录因子1(Hes1)信号通路为切入点,探讨血府逐瘀胶囊调控巨噬细胞极化抗动脉粥样硬化的作用机制。方法:载脂蛋白E敲除(ApoE-/-)小鼠高脂饮食4周制备... 目的:以果蝇双翅边缘缺刻同源基因1(Notch1)/锯齿典型Notch配体1(Jagged1)/Hes家族BHLH转录因子1(Hes1)信号通路为切入点,探讨血府逐瘀胶囊调控巨噬细胞极化抗动脉粥样硬化的作用机制。方法:载脂蛋白E敲除(ApoE-/-)小鼠高脂饮食4周制备动脉粥样硬化小鼠模型,随机分为模型组、血府逐瘀胶囊组、阿托伐他汀组,以C57BL/6小鼠常规饲养作为正常组。血府逐瘀胶囊组给予血府逐瘀胶囊(0.728 g·kg^(-1)·d^(-1))灌胃,阿托伐他汀组给予阿托伐他汀片(6.07 mg·kg^(-1)·d^(-1))灌胃,正常组、模型组给予等体积去离子水灌胃,连续干预12周。采用苏木素-伊红(HE)染色观察主动脉斑块形态,油红O染色观察主动脉斑块面积及脂质沉积情况,免疫组化法检测主动脉组织CD86、CD206阳性表达,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测小鼠血清肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β、转化生长因子(TGF)-β1、IL-10表达,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测主动脉组织诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、精氨酸酶-1(Arg^(-1))、Notch1、Jagged1、Hes1mRNA相对表达,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测主动脉组织iNOS、Arg^(-1)、Notch1、Jagged1、Hes1蛋白相对表达。结果:与正常组比较,模型组有明显的主动脉斑块和脂质沉积,促炎因子TNF-α、IL-1β表达显著升高(P<0.01),抗炎因子TGF-β1表达有下降趋势,但差异无统计学意义;巨噬细胞标志物CD86、CD206出现阳性表达;iNOS mRNA及蛋白表达显著升高(P<0.01),Arg^(-1)蛋白表达显著下降(P<0.01);相关通路分子Jagged1 mRNA及Notch1、Jagged1、Hes1蛋白表达明显升高(P<0.05,P<0.01)。与模型组比较,血府逐瘀胶囊组斑块面积与脂质沉积有下降趋势,TNF-α、IL-1β表达有下降趋势;TGF-β1表达明显升高(P<0.05),巨噬细胞标志物CD86表达下降,CD206表达显著升高(P<0.01);iNOS mRNA及蛋白表达显著下降(P<0.01)Arg^(-1)mRNA及蛋白表达明显升高(P<0.05 展开更多
关键词 血府逐瘀胶囊 动脉粥样硬化 巨噬细胞极化 果蝇双翅边缘缺刻同源基因1(notch1)信号通路 炎症
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TNF-α抑制剂通过激活Notch1信号通路治疗创伤后心肌再灌注损伤的实验研究 被引量:7
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作者 王卫芳 柳潇 +1 位作者 计晓玲 杨波 《中国循证心血管医学杂志》 2016年第12期1504-1507,共4页
目的探讨肿瘤坏死因子-α(TNF-α)抑制剂(依那西普)通过跨膜蛋白受体Notch1信号通路对小鼠创伤性心肌损伤的保护作用。方法选取c57系清洁级雄性小鼠36只(10-12周龄),采用随机数字表法分为假手术组(腹腔注射5 ml/kg生理盐水)、... 目的探讨肿瘤坏死因子-α(TNF-α)抑制剂(依那西普)通过跨膜蛋白受体Notch1信号通路对小鼠创伤性心肌损伤的保护作用。方法选取c57系清洁级雄性小鼠36只(10-12周龄),采用随机数字表法分为假手术组(腹腔注射5 ml/kg生理盐水)、对照组(腹腔注射5 ml/kg生理盐水)、依那西普组(建立创伤后心肌缺血再灌注损伤模型,依那西普8 mg/kg)各12只,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测各组小鼠再灌注30 min后的血浆TNF-α、3 h后的血清心肌肌钙蛋白I(cTnI)浓度,测定各组再灌注24 h后的左室射血分数(LVEF)、采用TUNEL染色法检测各组心肌细胞凋亡率、采用TTC双染色检测各组心肌梗死面积比值,采用免疫印迹法(Western-blot)检测再灌注6 h后心肌跨膜蛋白受体Notch1胞内活性片段(Notch1-ICD)、细胞凋亡相关蛋白3(caspase-3)的表达。结果对照组、依那西普组大鼠的血浆TNF-α、血清cTnI水平、心肌Notch1-ICD、caspase-3蛋白表达水平、心肌细胞凋亡率、心肌梗死面积比值均显著高于假手术组(P〈0.05);依那西普组血浆TNF-α、血清cTnI水平、心肌caspase-3蛋白表达水平、心肌细胞凋亡率、心肌梗死面积比值显著低于对照组(P〈0.05),Notch1-ICD蛋白表达水平、LVEF值显著的高于对照组(P〈0.05)。结论 TNF-α抑制剂对创伤后心肌缺血再灌注损伤心肌具有保护作用,其作用机制与激活Notch1信号通路以调节caspase-3蛋白表达水平有关。 展开更多
关键词 肿瘤坏死因子-α抑制剂 跨膜蛋白受体notch1信号通路 创伤 再灌注
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丙泊酚对结直肠癌细胞生物学行为的影响 被引量:7
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作者 余海燕 刘德生 王云 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期245-250,共6页
目的:研究丙泊酚对结直肠癌细胞活力、侵袭和凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法:10、25、50和100μmol/L的丙泊酚处理Lo Vo细胞72 h,或以100μmol/L的丙泊酚处理细胞12、24、48和72 h,CCK-8实验检测细胞活力;Transwell小室检测经100μm... 目的:研究丙泊酚对结直肠癌细胞活力、侵袭和凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法:10、25、50和100μmol/L的丙泊酚处理Lo Vo细胞72 h,或以100μmol/L的丙泊酚处理细胞12、24、48和72 h,CCK-8实验检测细胞活力;Transwell小室检测经100μmol/L丙泊酚处理72 h的细胞的侵袭能力;流式细胞术检测细胞周期及细胞凋亡率;Western blot检测基质金属蛋白酶2(MMP-2)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、活化的胱天蛋白酶3(cleaved caspase-3)、Notch1和发状分裂相关增强子1(Hes1)的蛋白表达。结果:丙泊酚可抑制结直肠癌细胞活力;丙泊酚组细胞侵袭能力、S期细胞及MMP-2、MMP-9、Notch1和Hes1蛋白表达均显著低于对照组,而细胞凋亡率、G0/G1期细胞及cleaved caspase-3的蛋白水平均显著高于对照组(P<0.01)。结论:丙泊酚可抑制结直肠癌Lo Vo细胞生长及侵袭能力,阻滞细胞周期,并诱导细胞凋亡,其机制与下调Notch1信号通路有关。 展开更多
关键词 丙泊酚 结直肠癌 细胞活力 肿瘤侵袭 细胞凋亡 notch1信号通路
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姜黄素通过抑制Notch1信号通路逆转人食管癌Eca-109/VCR细胞对长春新碱的耐药性 被引量:7
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作者 牛树荣 孙剑经 +4 位作者 任海玉 刘华 罗强 张晓丽 张林西 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期526-534,共9页
目的:研究姜黄素(curcumin,Cur)对人食管癌Eca-109/长春新碱(vincristine,VCR)细胞耐药性的逆转作用,并探讨其可能的作用机制。方法:MTT法检测不同浓度的Cur对Eca-109/VCR细胞增殖的影响,以及Cur浓度为25μmol/L时对Eca-109/VCR细胞耐... 目的:研究姜黄素(curcumin,Cur)对人食管癌Eca-109/长春新碱(vincristine,VCR)细胞耐药性的逆转作用,并探讨其可能的作用机制。方法:MTT法检测不同浓度的Cur对Eca-109/VCR细胞增殖的影响,以及Cur浓度为25μmol/L时对Eca-109/VCR细胞耐药性的逆转作用。将Cur(25μmol/L)、VCR(2μg/mL)单独及联合作用于Eca-109/VCR细胞24 h后,分别采用FCM法和Hoechst 33258荧光染色法检测对细胞凋亡的影响;实时荧光定量PCR法检测Eca-109/VCR细胞中Notch1、Jagged1和发状分裂相关增强子1(hairy and enhancer of split 1,Hes1)mRNA的表达水平;蛋白质印迹法检测Eca-109/VCR细胞中Notch1、Jagged1、Hes1及P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)的表达水平。结果:25μmol/L的Cur作用于Eca-109/VCR细胞24 h后,细胞的增殖抑制率为(8.82±0.80)%;Cur(25μmol/L)与不同浓度VCR联合作用后,VCR对Eca-109/VCR细胞的半数抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC_(50))由(7.70±0.63)μg/mL下降为(2.55±0.12)μg/mL,耐药逆转倍数为3.02倍。Cur(25μmol/L)单药、VCR(2μg/mL)单药以及Cur(25μmol/L)联合VCR(2μg/mL)作用于Eca-109/VCR细胞24 h后,FCM法和Hoechst 33258荧光染色检测结果均显示,Cur联合VCR组细胞的凋亡率均明显高于Cur单药组和VCR单药组(P值均<0.05);Cur联合VCR组细胞中Notch1、Jagged1和Hes1 mRNA的表达水平较Cur单药组和VCR单药组明显下调(P值均<0.01);Notch1、Jagged1、Hes1及P-gp蛋白的表达水平亦均明显下调(P值均<0.05)。结论:Cur能明显逆转人食管癌VCR耐药细胞株Eca-109/VCR对VCR的耐药性,其机制可能是通过抑制Notch1信号通路和降低P-gp的表达及功能而实现的。 展开更多
关键词 食管肿瘤 姜黄素 长春新碱 P-糖蛋白 notch1信号通路
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Notch1调控在糖尿病周围神经病变中的意义 被引量:7
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作者 宋宜忻 李懂 +3 位作者 陈奇 邵青 梁秋华 孙琳 《中国临床实用医学》 2020年第5期54-60,共7页
目的探讨Notch1调控在糖尿病周围神经病变(DPN)中的意义。方法选取济南朋悦生物有限公司提供的24只6周龄雄性SD大鼠,无特定病原体级,体质量200~220 g,采用随机数表法将大鼠随机分为正常组、DPN组、DPN+信号通路阻断剂γ-分泌酶抑制剂(3... 目的探讨Notch1调控在糖尿病周围神经病变(DPN)中的意义。方法选取济南朋悦生物有限公司提供的24只6周龄雄性SD大鼠,无特定病原体级,体质量200~220 g,采用随机数表法将大鼠随机分为正常组、DPN组、DPN+信号通路阻断剂γ-分泌酶抑制剂(3,5-二氟苯乙酰基)-L-丙氨酰基-L-2-苯基甘氨酸叔丁(DAPT)组,每组8只。分别观察比较造模后1、4、8周三组大鼠的一般情况、血糖、体质量、坐骨神经传导速度、足底热痛阈值情况的变化及各组SD大鼠的坐骨神经甲苯胺蓝染色。采用免疫荧光检测DAPT对大鼠坐骨神经Notch1、人第10号染色体缺失的磷酸酶(PTEN)/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)表达的影响。结果造模后8周DPN组和DPN+DAPT组大鼠血糖[(22.16±4.77)mmol/L、(17.16±4.43)mmol/L]显著高于正常组大鼠[(6.28±0.51)mmol/L],且DPN+DAPT组血糖水平显著低于同期的DPN组;造模后4、8周,DPN组、DPN+DAPT组大鼠的体质量[(250.00±7.48)g、(250.38±11.02)g,(274.75±9.15)g、(311.50±7.89)g]均显著低于正常组[(363.00±8.98)g、(408.75±16.14)g],且DPN+DAPT组大鼠的体质量高于DPN组;造模后4、8周,DPN组、DPN+DAPT组大鼠坐骨神经传导速度[(25.50±2.56)m/s、(28.13±1.96)m/s,(24.75±1.91)m/s、(32.25±2.44)m/s]显著低于正常组[(38.00±3.70)m/s、(41.25±2.71)m/s],且DPN+DAPT组大鼠坐骨神经传导速度高于DPN组;造模后4、8周,DPN组、DPN+DAPT组大鼠足底热痛阈值[(26.63±3.54)s、(22.50±2.56)s,(28.50±5.10)s、(21.00±3.02)s]显著高于正常组[(12.88±1.13)s、(13.50±2.01)s],且DPN+DAPT组大鼠足底热痛阈值低于DPN组,差异均有统计学意义(P<0.05)。造模后8周DPN组病变髓鞘的比例高于正常组,DPN+DAPT组病变髓鞘的比例低于DPN组;DPN组的Notch1、mTOR、Akt绿色免疫荧光强度强于正常组,DPN+DAPT组的绿色免疫荧光强度弱于DPN组;DPN组的PTEN绿色免疫荧光强度弱于正常组,DPN+DAPT组的绿色免疫荧光强度强于DPN 展开更多
关键词 notch1信号通路 人第10号染色体缺失的磷酸酶 蛋白激酶B 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白 糖尿病周围神经病变
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二陈汤加味通过Jagged1/Notch1/Hes1信号通路对慢性阻塞性肺疾病的抗炎机制 被引量:6
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作者 尚立芝 季书 +6 位作者 李耀洋 胡文豪 谢文英 陈壮 刘高阳 尚皓梵 王红伟 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第9期109-118,共10页
目的:观测二陈汤加味对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠肺组织中Jagged1/Notch1/Hes1信号通路中关键分子表达的影响,探讨二陈汤加味通过Jagged1/Notch1/Hes1信号通路对COPD抗炎的作用及分子机制。方法:将60只SD大鼠随机分为6组,分别为正常... 目的:观测二陈汤加味对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠肺组织中Jagged1/Notch1/Hes1信号通路中关键分子表达的影响,探讨二陈汤加味通过Jagged1/Notch1/Hes1信号通路对COPD抗炎的作用及分子机制。方法:将60只SD大鼠随机分为6组,分别为正常组、模型组、二陈汤加味低、中、高剂量(5、10、20·kg^(-1))和γ-分泌酶抑制剂(DAPT)组,每组10只。以烟熏联合气管滴注脂多糖(LPS)的方法制备COPD大鼠模型。二陈汤加味各干预组灌胃(ig)给药;DAPT组ig DAPT(0.02 g·kg^(-1));正常组及模型组ig等体积生理盐水。采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)测定各组血清中Notch1、可溶性细胞间黏附分子-1(sICAM-1)、白细胞活化黏附分子(ALCAM)和可溶性血管黏附分子-1(sVCAM-1)的含量;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测肺组织中Jagged1、Notch1和Hes1 mRNA表达,免疫组织化学(IHC)法检测大鼠肺组织中Jagged1、Notch1、Notch1胞内段(NICD1)和Hes1蛋白表达。结果:与正常组比较,模型组血清中Notch1、sICAM-1、ALCAM和sVCAM含量均显著升高(P<0.01);肺组织Jagged1、Notch1和Hes1 mRNA表达显著增加(P<0.01);Jagged1、Notch1、NICD1和Hes1蛋白的表达显著增强(P<0.01)。与模型组比较,二陈汤加味中、高剂量和DAPT组血清中Notch1、sICAM-1、ALCAM和sVCAM含量均明显减少(P<0.05,P<0.01);Jagged1、Notch1和Hes1 mRNA表达明显下调(P<0.05,P<0.01);Jagged1、Notch1、NICD1和Hes1蛋白表达均明显减弱(P<0.05,P<0.01)。结论:二陈汤加味能有效减弱COPD肺部炎症反应。其机制可能是通过下调Jagged1、Notch1、Hes1 mRNA表达,抑制Notch1、s ICAM-1、ALCAM和sVCAM释放,对抗炎症对COPD肺组织的损伤有关。 展开更多
关键词 慢性阻塞性肺疾病 二陈汤 notch1信号通路 黏附分子
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异甘草素对SHG44人脑胶质瘤干细胞增殖和分化的影响 被引量:6
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作者 荔志云 孙红军 +5 位作者 周杰 林瑜亮 党莹 孙建军 李长栋 黄燕萍 《国际神经病学神经外科学杂志》 北大核心 2017年第3期241-246,共6页
目的探讨不同浓度异甘草素对SHG44人脑胶质瘤干细胞增殖和分化的影响及机制。方法实验分为二甲基亚砜(dimethyl sulfoxide,DMSO)对照组,异甘草素(10~160μmol/L)诱导组,氮-[氮-(3,5-二氟苯乙酰)-L-丙氨酰]-S-苯基甘氨酸丁酯(N-[N-(3,5-d... 目的探讨不同浓度异甘草素对SHG44人脑胶质瘤干细胞增殖和分化的影响及机制。方法实验分为二甲基亚砜(dimethyl sulfoxide,DMSO)对照组,异甘草素(10~160μmol/L)诱导组,氮-[氮-(3,5-二氟苯乙酰)-L-丙氨酰]-S-苯基甘氨酸丁酯(N-[N-(3,5-difluorophenacetyl)-1-alanyl]-S-ph,DAPT)(2.0μmol/L)阻断剂组,异甘草素+阻断剂组(10~160μmol/L+2.0μmol/L DAPT),采用CCK-8法、免疫荧光染色、Western blot及Real-time PCR分别检测细胞抑制率、相关分化蛋白及Notch1通路相关基因表达情况。结果异甘草素在12~48 h,随着浓度增加,细胞抑制率减弱(P<0.05),且分化细胞越多,干细胞减少;72 h后随着浓度增加,细胞抑制率增强(P<0.05),分化细胞及干细胞同时减少;隔日加药至第7 d时,经统计分析胶质瘤干细胞球数目减少、直径减小(与对照组比),且P<0.05。异甘草素作用72 h后:与对照组比较,随着异甘草素浓度的增加Nestin蛋白表达量逐渐下调(P<0.05);与对照组比较,10、40、160μmol/L组GFAP蛋白表达水平均上调(P<0.05),且40μmol/L组GFAP蛋白表达量较其他浓度组均较高,(P<0.05);与对照组比较,10、40、160μmol/L组β-TubulinⅢ蛋白表达水平均上调(P<0.05),且10μmol/L组β-TubulinⅢ蛋白表达量较其他浓度组均较高(P<0.05)。Notch1通路阻断剂作用后,与对照组比较,各异甘草素组和阻断剂组Notch1、RBP-JK及Hes1基因表达均显著下调(P<0.05);与异甘草素组比较,Notch1、RBP-JK及Hes1基因表达在异甘草素加DAPT组及阻断剂组显著下调(P<0.05);与阻断剂组比较,Notch1、RBP-JK及Hes1基因表达在异甘草素加DAPT组显著下调(P<0.05)。结论异甘草素能诱导SHG44人脑胶质瘤干细胞向星形胶质细胞和神经元细胞分化,且能抑制其增殖,可能与下调Notch1信号通路中的Notch1、RBP-JK及Hes1有关。 展开更多
关键词 异甘草素 SHG44胶质瘤干细胞 notch1信号通路 分化作用 抑制作用
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原苏木素A通过调控Notch1信号通路增加前列腺癌细胞的放疗敏感性 被引量:6
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作者 林棋 刘世雄 +1 位作者 李欣 张鑫圣 《中国药师》 CAS 2020年第5期834-838,949,共6页
目的:研究原苏木素A(PrA)对前列腺癌PC-3细胞放疗敏感性及的Notch1信号通路影响。方法:体外培养人前列腺癌PC-3细胞,分别用不同浓度PrA(100,200,400,800,1600μmol·L-1)处理对数生长期PC-3细胞,分别设为PrA-1组、PrA-2组、PrA-4组... 目的:研究原苏木素A(PrA)对前列腺癌PC-3细胞放疗敏感性及的Notch1信号通路影响。方法:体外培养人前列腺癌PC-3细胞,分别用不同浓度PrA(100,200,400,800,1600μmol·L-1)处理对数生长期PC-3细胞,分别设为PrA-1组、PrA-2组、PrA-4组、PrA-8组、PrA-16组,另设无处理PC-3细胞为正常对照(NC)组,只进行放射处理的PC-3细胞为放射处理(RT)组。采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测各组前列腺癌PC-3细胞增殖情况;采用平板克隆试验法检测前列腺癌PC-3细胞增殖能力;采用流式细胞仪和AnnexinV-FITC/PI法体外检测前列腺癌PC-3细胞凋亡率;Western Blot检测前列腺癌PC-3细胞中凋亡相关半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(cleaved-caspase3)、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达水平及Notch1信号通路相关蛋白Jagged1、Notch1、Hes-1蛋白表达。结果:与NC组比较,RT组、PrA-1、PrA-2、PrA-4、PrA-8组前列腺癌PC-3细胞增值抑制率呈时间依赖性依次增加(P<0.05),PrA-8组48 h时,前列腺癌PC-3细胞抑制率为51.03%,与半数抑制浓度(IC50)接近,因此将800μmol·L-1作为PrA最佳浓度,48 h作为最佳作用时间用于下游实验。与NC组比较,RT组、PrA-4、PrA-8组列腺癌PC-3细胞平板克隆形成率、Bcl-2蛋白水平依次降低(P<0.05),细胞凋亡率、Bax、cleaved-caspase3、Jagged1、Notch1、Hes-1蛋白水平依次升高(P<0.05)。PrA-8和PrA-16组前列腺癌PC-3细胞增值抑制率、克隆形成率、凋亡率、Bcl-2、Bax、cleaved-caspase3、Jagged1、Notch1、Hes-1蛋白表达水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:原苏木素A可通过上调Bax、cleaved-caspase3,下调Bcl-2蛋白,激活Notch1信号通路增加前列腺癌PC-3细胞的放疗敏感性。 展开更多
关键词 原苏木素A notch1信号通路 前列腺癌 PC-3细胞 放疗敏感性
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冬凌草甲素介导Notch信号通路对IgA肾病大鼠肾组织损伤及炎症因子、氧化应激的影响 被引量:6
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作者 徐斐翀 宋雨亭 +3 位作者 米伟 伍佳 冯曌娉 于海燕 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期44-50,共7页
目的观察冬凌草甲素对IgA肾病(IgAN)大鼠肾组织损伤及炎症因子、氧化应激的影响。方法将60只SD大鼠随机分为对照组、模型组(IgAN)、低、中、高剂量冬凌草甲素组(5、10、20 mg/kg)及阳性对照组(10 mg/kg贝那普利),采用BCA法检测24 h尿蛋... 目的观察冬凌草甲素对IgA肾病(IgAN)大鼠肾组织损伤及炎症因子、氧化应激的影响。方法将60只SD大鼠随机分为对照组、模型组(IgAN)、低、中、高剂量冬凌草甲素组(5、10、20 mg/kg)及阳性对照组(10 mg/kg贝那普利),采用BCA法检测24 h尿蛋白含量,肌酐酶法检测血清肌酐(Scr)含量,脲酶连续监测法检测尿素氮(BUN)含量,HE染色观察肾组织病理损伤,生化试剂盒检测肾组织炎症因子IL-1β、IL-6及TNF-α及氧化应激指标[超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)],蛋白印迹检测Notch1信号通路蛋白表达。另取40只大鼠随机分为假手术组、IgAN组、Notch1激活剂Jagged1组及Jagged1+冬凌草甲素组(20 mg/kg),观察各组大鼠上述指标的变化。结果与IgAN组比较,中、高剂量冬凌草甲素组和贝那普利组24 h尿蛋白、血清Scr、BUN、TNF-α、IL-6、IL-1β、MDA、Notch1及Hes1表达降低,SOD、GSH-Px水平升高(P<0.05),且高剂量冬凌草甲素组与贝那普利组上述指标比较,差异无统计学意义(P>0.05)。添加20 mg/kg冬凌草甲素后,可逆转激活剂Jagged1对IgAN大鼠生理指标的恶化(P<0.05)。结论冬凌草甲素可保护IgA肾病肾组织损伤,减轻大鼠炎症反应和氧化应激水平,可能与阻滞Notch1信号通路有关。 展开更多
关键词 冬凌草甲素 IGA肾病 炎症反应 氧化应激 notch1信号通路
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丹参酮ⅡA 配伍DAPT对TGF-β_(1)诱导的HK-2细胞Notch1/Jagged1信号通路的影响 被引量:6
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作者 李均 陈莎莎 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第9期1087-1092,共6页
目的观察丹参酮ⅡA配伍γ-分泌酶抑制剂3,5-二氟苯乙酰-L-丙氨酰-S-苯基甘氨酸-t-丁酯(DAPT)对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的人源性肾小管上皮细胞HK-2细胞中纤维化标志物fibronectin(FN)、N-cadherin及Notch1/Jagged1信号通路分子No... 目的观察丹参酮ⅡA配伍γ-分泌酶抑制剂3,5-二氟苯乙酰-L-丙氨酰-S-苯基甘氨酸-t-丁酯(DAPT)对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的人源性肾小管上皮细胞HK-2细胞中纤维化标志物fibronectin(FN)、N-cadherin及Notch1/Jagged1信号通路分子Notch1、Jagged1表达的影响,探讨其防治肾纤维化的机制。方法?HK-2细胞分为5组:正常组(无特殊处理)、模型组(TGF-β110 ng/mL)、丹参酮ⅡA组(TGF-β110 ng/mL+丹参酮ⅡA 5μmol/L)、DAPT组(TGF-β110 ng/mL+DAPT 10μmol/L)、丹参酮ⅡA+DAPT组(TGF-β110 ng/mL+丹参酮ⅡA 5μmol/L+DAPT 10μmol/L)。采用RT-qPCR、Western Bolt及免疫荧光技术检测各组细胞间质纤维化指标FN、N-cadherin及Notch1、Jagged1mRNA及蛋白的表达。结果?正常组HK-2细胞FN、N-cadherin、Notch1、Jagged1 mRNA及蛋白呈低表达,模型组HK-2细胞FN、N-cadherin、Notch1、Jagged1 mRNA及蛋白表达较正常组升高(P<0.05),各干预组HK-2细胞FN、N-cadherin、Notch1、Jagged1 mRNA及蛋白表达较模型组降低(P<0.05)。丹参酮ⅡA+DAPT组HK-2细胞FN、N-cadherin、Jagged1 mRNA及蛋白表达低于丹参酮ⅡA组及DAPT组(P<0.05);丹参酮ⅡA+DAPT组HK-2细胞Notch1 mRNA及蛋白表达低于丹参酮ⅡA组(P<0.05)。结论?丹参酮ⅡA配伍DAPT用药可抑制TGF-β1诱导的HK-2细胞FN、N-cadherin的表达缓解肾间质纤维化,其机制可能与其协同干预Notch1/Jagged1信号通路传导有关。 展开更多
关键词 丹参酮ⅡA 3 5-二氟苯乙酰-L-丙氨酰-S-苯基甘氨酸-t-丁酯 肾间质纤维化 notch1信号通路
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