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薰衣草非特异性脂质转移蛋白基因nsLTP2-1和nsLTP2-2的克隆与功能分析
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作者 张夏夏 陈凌娜 +2 位作者 杨扬 赵旌汝 陈永坤 《植物遗传资源学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期834-843,共10页
非特异性脂质转移蛋白(nsLTP,non-specific lipid transfer proteins)在植物脂质转运和分泌中发挥重要作用。本研究从薰衣草(Lavandula angustifolia)中克隆到2个II型nsLTP基因,命名为nsLTP2-1和nsLTP2-2,并对其进行功能分析。生信分析... 非特异性脂质转移蛋白(nsLTP,non-specific lipid transfer proteins)在植物脂质转运和分泌中发挥重要作用。本研究从薰衣草(Lavandula angustifolia)中克隆到2个II型nsLTP基因,命名为nsLTP2-1和nsLTP2-2,并对其进行功能分析。生信分析表明,nsLTP2-1和ns LTP2-2分别编码119个和117个氨基酸,具有脂转移蛋白(LTP,lipid transfer proteins)保守结构域和8个高度保守的半胱氨酸残基;系统进化分析显示它们处于两个分支,与同科的紫苏(Perilla frutescens)相似性最高。基因表达分析显示2个基因均在花蕾中高表达,在叶片、茎和花瓣中几乎不表达,在花萼中的表达存在差异,nsLTP2-1和nsLTP2-2分别在成熟花萼和幼嫩花萼中表达量更高;2个基因在花蕾和叶片中的表达均受到强光诱导,且在花蕾中的表达均受脱落酸诱导,而叶片中nsLTP2-1和nsLTP2-2的表达分别受茉莉酸甲酯和乙烯诱导。亚细胞定位显示2个nsLTPs均定位在细胞膜和细胞壁上,可能与次生代谢物的转运有关。过表达nsLTP2-1和nsLTP2-2烟草叶片经尼罗红染色后,经485~543 nm激发光激发,叶片腺毛头部的荧光显示多于野生型,说明本研究中的nsLTPs可能在脂类的合成和转运中起重要作用。这些结果为明确薰衣草脂转移蛋白在脂类及萜类转运中的功能研究提供了参考。 展开更多
关键词 薰衣草 非特异性脂质转移蛋白 激素处理 非生物胁迫 基因表达 亚细胞定位 尼罗红染色
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产油微生物的筛选及其产油率测定 被引量:3
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作者 廖春丽 高阿龙 +3 位作者 郑瑞 薛丛丛 黄飞 单林娜 《贵州农业科学》 CAS 2016年第6期83-85,89,共4页
为寻求可再生、环境友好且经济可行的化石能源替代燃料,采用苏丹黑B和尼罗红染色法及甲醇-氯仿提取法对平顶山各地不同生境富含油脂土壤中的高产油脂微生物进行分离筛选。结果表明:试验分离到2株产油菌株PDS1和PDS2。其中,产油细菌PDS1... 为寻求可再生、环境友好且经济可行的化石能源替代燃料,采用苏丹黑B和尼罗红染色法及甲醇-氯仿提取法对平顶山各地不同生境富含油脂土壤中的高产油脂微生物进行分离筛选。结果表明:试验分离到2株产油菌株PDS1和PDS2。其中,产油细菌PDS1为革兰氏阴性菌,产油率为29.47%;产油细菌PDS2为革兰氏阳性菌,产油率为23.57%。 展开更多
关键词 苏丹黑B染色法 尼罗红染色法 甲醇-氯仿提取法 产油细菌PDS1 产油细菌PDS2
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重金属暴露可以改变秀丽线虫的脂肪积累(英文) 被引量:2
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作者 武秋立 杜敏 王大勇 《东南大学学报(医学版)》 CAS 2010年第1期17-23,共7页
目的:研究重金属暴露对秀丽线虫脂肪积累的急性中毒效应,鉴定重金属暴露秀丽线虫中发生表达模式改变的与脂肪酸代谢相关的基因。方法:银、镉、铬、铜、汞、锰和锌作为测试重金属,Nile Red荧光探针染色分析重金属暴露线虫肠道的脂肪酸含... 目的:研究重金属暴露对秀丽线虫脂肪积累的急性中毒效应,鉴定重金属暴露秀丽线虫中发生表达模式改变的与脂肪酸代谢相关的基因。方法:银、镉、铬、铜、汞、锰和锌作为测试重金属,Nile Red荧光探针染色分析重金属暴露线虫肠道的脂肪酸含量变化,并测定重金属暴露线虫中脂肪酸代谢相关基因的转录水平变化。结果:在所分析重金属中,高浓度银、铬和铜暴露可以显著诱导线虫肠道脂肪积累的增加,而高浓度镉暴露可以显著降低线虫肠道脂肪的积累。而且,与对照组相比,高浓度的银和铬暴露不明显影响基因pod-2、gei-7、lbp-8、gpd-3、W05G11.6、C03H5.4和C07E3.9的表达水平,而在暴露的线虫动物中,基因fat-5、fat-6和fat-7的表达水平显著升高,lbp-1、acs-2和ech-1的表达水平显著降低。结论:高浓度银、铬、铜和镉暴露可以导致异常的秀丽线虫肠道的脂肪积累变化,其中高浓度银和铬暴露导致线虫脂肪积累增加的主要原因可能归因于暴露动物体内脂肪酸去饱和与线粒体β-氧化代谢途径以及脂肪酸结合能力的异常。 展开更多
关键词 脂肪积累 金属暴露 代谢途径 nile red染色 秀丽线虫
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裂殖壶菌高产油突变体的高通量筛选 被引量:2
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作者 段光前 李硕硕 +1 位作者 李鑫 黄开耀 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期1335-1347,共13页
二十二碳六烯酸(DHA)具有促进婴幼儿大脑和视网膜发育等多种生理功能,被广泛应用于食品、医药和养殖等行业。为了获得适合于工业化生产的高产油、高产DHA的裂殖壶菌工程株,文中建立了一套操作简单、快速准确的基于尼罗红染色的高通量筛... 二十二碳六烯酸(DHA)具有促进婴幼儿大脑和视网膜发育等多种生理功能,被广泛应用于食品、医药和养殖等行业。为了获得适合于工业化生产的高产油、高产DHA的裂殖壶菌工程株,文中建立了一套操作简单、快速准确的基于尼罗红染色的高通量筛选方案。首先利用紫外线(UVC)诱变的方式快速构建裂殖壶菌的随机突变体库。然后采用优化后的筛选条件如裂殖壶菌的最佳尼罗红染色条件(二甲基亚砜浓度为20%,尼罗红终浓度为2.0μg/mL,孵育时间为10min,孵育温度为40℃)和更合理的筛选依据(多功能酶标仪实现高通量测量的单位细胞密度油脂量)等,对3648株突变体进行筛选,得到了3株高产油突变体(D03432、D05106和D01521)。摇瓶发酵实验表明,这3株突变体在生物量、油脂含量和DHA产量上均高于野生型菌株,其中突变体D03432和D05106的油脂量分别达到了干重的64.74%和63.13%,远高于野生型菌株的43.19%。而且这两株突变体的DHA产量分别是野生型菌株的2.26倍和2.37倍。最后,对突变体D03432和D05106进行了5L发酵罐发酵培养,相较于野生型菌株,这两株突变体不仅生物量和油脂含量有所增加,而且DHA产量更是分别增加了45.51%和66.46%,展现出较好的工业应用潜力。此外,本筛选方案对其他产油微生物高产油突变体的高通量筛选具有借鉴作用。 展开更多
关键词 油滴 高通量选育 二十二碳六烯酸(DHA) 尼罗红染色
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徐闻珊瑚礁自然保护区可培养富脂海洋微藻的生物多样性 被引量:4
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作者 杨晓红 黄永梅 +3 位作者 兰柳波 詹静婷 江黎明 罗辉 《生态科学》 CSCD 2016年第4期52-61,共10页
从徐闻珊瑚礁自然保护区(20°10′–20°27′N,109°50′–109°24′E)潮间带采集海水和泥沙样品,用f/2-medium培养液富集培养其中的海洋微藻,采用基于96孔板的"稀释分配"结合"微吸管剔除"的方法分离培养海洋微藻... 从徐闻珊瑚礁自然保护区(20°10′–20°27′N,109°50′–109°24′E)潮间带采集海水和泥沙样品,用f/2-medium培养液富集培养其中的海洋微藻,采用基于96孔板的"稀释分配"结合"微吸管剔除"的方法分离培养海洋微藻,采用微藻形态学观察、18S rDNA序列分析及其系统进化树构建的方法分析鉴定分离培养的藻株,采用尼罗红染色法检测和分析海洋微藻细胞中的脂质。目的就是要分析研究徐闻珊瑚礁自然保护区潮间带可培养富脂海洋微藻的生物多样性,为富脂海洋微藻的研究开发奠定基础。结果分离、培养、鉴定并储藏了118株海洋微藻(Genbank登录号为KU561102-KU561219),含48个种,分布于硅藻门(Bacillariophyta)、绿藻门(Chlorophyta)和定鞭金藻门(Haptophyta)3个门的6纲、22目、24个科、28个属。其中,有37株为富脂微藻,含22个种,分布于硅藻门和绿藻门2个门的4纲、11目、12个科、16个属;优势属为双眉藻属(Amphora),含22株,占分离培养藻株的18.6%;含脂量最高的种群为辐节藻属(Stauroneis),含Stauroneis anceps,Stauroneis gracilior,和2株Stauroneis kriegeri,共4株海洋微藻。这表明徐闻珊瑚礁自然保护区潮间带可培养的富脂海洋微藻的物种丰富多样,可能是发掘多不饱和脂肪酸和生物柴油的理想资源。 展开更多
关键词 徐闻珊瑚礁自然保护区 海洋微藻 稀释分离技术 生物多样性 富脂 尼罗红染色法
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