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基于转录组测序花烟草响应盐胁迫活性氧清除相关基因的挖掘 被引量:8
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作者 鲁琳 杨尚谕 +1 位作者 刘维东 鲁黎明 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第12期42-53,共12页
为了鉴定参与花烟草盐胁迫响应的活性氧清除相关基因,用200 mmol/L NaCl处理花烟草幼苗,并在处理后12 h采集其幼苗样本,提取总RNA,采用高通量测序技术,进行转录组测序。基于差异表达基因GO及KEGG分析的基础上,对参与其中的活性氧清除基... 为了鉴定参与花烟草盐胁迫响应的活性氧清除相关基因,用200 mmol/L NaCl处理花烟草幼苗,并在处理后12 h采集其幼苗样本,提取总RNA,采用高通量测序技术,进行转录组测序。基于差异表达基因GO及KEGG分析的基础上,对参与其中的活性氧清除基因进行挖掘,利用qRT-PCR的方法验证转录组测序结果。结果表明,盐处理后,花烟草基因表达量变化在2倍以上的基因有7239个(P<0.01),其中,上调表达基因4037个,下调表达基因3162个,将其功能归类于生物过程、细胞组分及分子功能三大类159个GO条目,并显著富集在12条KEGG代谢通路中。同时,在盐胁迫下,花烟草有45个活性氧清除相关基因的表达发生了显著改变,其中,上调表达基因28个,下调表达基因17个。此结果说明,活性氧的清除是花烟草抵御盐胁迫的重要机制之一。 展开更多
关键词 花烟草 转录组 盐胁迫 活性氧
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Product Variability of the ‘Cineole Cassette' Monoterpene Synthases of Related Nicotiana Species 被引量:4
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作者 Anke Fahnrich Katrin Krause Birgit Piechulla 《Molecular Plant》 SCIE CAS CSCD 2011年第6期965-984,共20页
Nicotiana species of the section Alatae characteristically emit the floral scent compounds of the 'cineole cassette' comprising 1,8-cineole, limonene, myrcene, α-pinene, β-pinene, sabinene, and α-terpineol. We su... Nicotiana species of the section Alatae characteristically emit the floral scent compounds of the 'cineole cassette' comprising 1,8-cineole, limonene, myrcene, α-pinene, β-pinene, sabinene, and α-terpineol. We successfully isolated genes of Nicotiana alata and Nicotiana langsdorfii that encoded enzymes, which produced the characteristic monoter- penes of this 'cineole cassette' with α-terpineol being most abundant in the volatile spectra. The amino acid sequences of both terpineol synthases were 99% identical. The enzymes cluster in a monophyletic branch together with the closely related cineole synthase of Nicotiana suaveolens and monoterpene synthase 1 of Solanum lycopersicum. The cyclization reactions (α-terpineol to 1,8-cineole) of the terpineol synthases of N. alata and N. langsdorfii were less efficient compared to the 'cineole cassette' monoterpene synthases of Arabidopsis thaliana, N. suaveolens, Salvia fruticosa, Salvia officinalis, and Citrus unshiu. The terpineol synthases of IV. alata and N. langsdorfii were localized in pistils and in the adaxial and abaxial epidermis of the petals. The enzyme activities reached their maxima at the second day after anthesis when flowers were fully opened and the enzyme activity in N. alata was highest at the transition from day to night (diurnal rhythm). 展开更多
关键词 nicotiana alata nicotiana langsdorfii cineole cassette terpineol synthase multiproduct enzyme monoterpene synthase 1 8-cineole α-terpineol.
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花烟草NaERF1基因的克隆及在非生物胁迫下的表达模式分析 被引量:6
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作者 鲁琳 赵希胜 +5 位作者 刘桂雲 刘维东 王艳婷 吴玲莉 任学良 鲁黎明 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期1-8,共8页
AP2/ERF类转录因子,是植物所特有的最大的一类转录因子家族,在植物的生长发育过程中,扮演着重要的角色。探究花烟草ERF转录因子的生理功能,为花烟草抵御逆境的分子机制研究提供借鉴。采用同源克隆的方法进行基因克隆。通过对花烟草进行... AP2/ERF类转录因子,是植物所特有的最大的一类转录因子家族,在植物的生长发育过程中,扮演着重要的角色。探究花烟草ERF转录因子的生理功能,为花烟草抵御逆境的分子机制研究提供借鉴。采用同源克隆的方法进行基因克隆。通过对花烟草进行非生物胁迫,运用qPCR的方法进行基因表达模式分析。从花烟草(Nicotiana alata)中克隆了一个属于ERF家族的基因NaERF1。该基因的开放阅读框全长为819 bp,编码了272个氨基酸。生物信息学分析结果表明,该基因编码的蛋白分子量为30.7 kD,等电点为6.07;具有AP2/ERF类转录因子家族典型的保守结构域;该基因主要定位于细胞质内,并含有多个磷酸化位点。同源性分析的结果显示,NaERF1基因与茄科植物的ERF同源性较高,并且与普通烟草的ERF亲缘关系最近。NaERF1基因的表达具有组织表达特异性,花中表达量最高,茎中次之,根和叶中表达量较低。同时,在高盐、干旱、低温、ABA、低钾及H2O2等非生物胁迫下,NaERF1的表达呈现5种模式。其中,对低钾及ABA胁迫的响应强烈。NaERF1基因属于AP2/ERF类转录因子,可能广泛参与了花烟草包括非生物胁迫响应在内的众多生理过程。 展开更多
关键词 花烟草 转录因子 ERF 生物信息学 基因克隆 非生物胁迫
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盐胁迫下SA在大花烟草中以剂量依赖方式调节种子萌发和生长
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作者 张忍 明鉴霖 +1 位作者 刘朋承 明凤 《上海师范大学学报(自然科学版中英文)》 2024年第4期522-532,共11页
以改造的大花烟草(Nicotiana alata)即早花烟草为试材,研究在1500 mmol·L^(-1)氯化钠(NaCl)胁迫下,不同浓度梯度外源水杨酸(SA)处理下早花烟草种子的萌发情况和植株的生长状况,分析其过氧化物酶(POD)酶活性、超氧化物歧化酶(SOD)... 以改造的大花烟草(Nicotiana alata)即早花烟草为试材,研究在1500 mmol·L^(-1)氯化钠(NaCl)胁迫下,不同浓度梯度外源水杨酸(SA)处理下早花烟草种子的萌发情况和植株的生长状况,分析其过氧化物酶(POD)酶活性、超氧化物歧化酶(SOD)酶活性和活性氧(ROS)含量,及其作用机制.研究结果表明,适量外源SA可以缓解盐胁迫对早花烟草萌发的毒害.经0.05~1.00 mmol·L^(-1) SA处理,盐胁迫下早花烟草种子的发芽势、发芽率、发芽指数及活力指数上升,但随着SA浓度继续升高,其缓解效应随之降低.盐胁迫下的早花烟草生长已经受到严重抑制.喷施0.5~1.5 mmol·L^(-1) SA后,叶片大小和鲜重、根系的大小和鲜重都明显升高;且喷施0.5~2.0 mmol·L^(-1) SA叶片中SOD和POD活性均呈现先降低后上升的趋势;ROS含量呈现先降低后上升的趋势;叶绿素含量呈现出先上升后降低的趋势.这些结果表明:SA调节耐盐性可能以剂量依赖的方式发生,在外源施加适量浓度的SA提高抗氧化酶活性,能有效地消除过量的ROS,避免ROS积累,降低叶片中叶绿素含量及对光系统和光合碳同化过程中多种酶的伤害,维持较高的光合速率. 展开更多
关键词 幼苗生长 生理响应 盐胁迫 种子萌发 水杨酸(SA) 早花烟草 活性氧(ROS)
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基于转录组测序的花烟草低温胁迫响应转录因子挖掘 被引量:5
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作者 鲁琳 杨尚谕 +1 位作者 刘维东 鲁黎明 《植物研究》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期119-129,共11页
为了鉴定参与花烟草低温胁迫的转录因子,对花烟草幼苗进行了4℃低温处理,并在处理后12 h采集其幼苗样本,提取总RNA后,采用高通量测序技术,进行了转录组测序。在对差异表达基因进行GO及KEGG分析的基础上,对参与其中的转录因子进行了挖掘... 为了鉴定参与花烟草低温胁迫的转录因子,对花烟草幼苗进行了4℃低温处理,并在处理后12 h采集其幼苗样本,提取总RNA后,采用高通量测序技术,进行了转录组测序。在对差异表达基因进行GO及KEGG分析的基础上,对参与其中的转录因子进行了挖掘,并采用qRT-PCR的方法,对转录组测序的结果进行了验证。结果表明,低温处理后,花烟草基因表达量变化在2倍以上的基因有8388个(P<0.01),其中,上调表达4229个,下调表达4159个。这些差异表达基因的功能归类于生物过程、细胞组分及分子功能3大类69个GO条目,并显著富集在40条KEGG代谢通路中。同时,在低温胁迫下,花烟草有118个转录因子的表达发生了显著改变,其中,上调表达82个,下调表达36个。这些转录因子属于28个家族,其中,数量最多的为NAC家族19个,其次为ERF家族16个、MYB家族15个、WRKY家族15个。本研究的结果为花烟草低温响应分子机制的研究提供了借鉴。 展开更多
关键词 花烟草 转录组 低温胁迫 转录因子
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花烟草自交不亲和及其机理 被引量:3
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作者 李凤霞 杨爱国 +3 位作者 王卫锋 龚达平 刘贯山 孙玉合 《生命的化学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期76-79,共4页
花烟草是研究基于S-核酸酶自交不亲和系统的一种重要材料。目前,已经从花烟草中克隆了多个基于S-核酸酶自交不亲和性的基因,如花柱特异性识别关键因子S-核酸酶、调节因子HT-B、120K等,并对其功能进行了深入分析。本文对花烟草中参与自... 花烟草是研究基于S-核酸酶自交不亲和系统的一种重要材料。目前,已经从花烟草中克隆了多个基于S-核酸酶自交不亲和性的基因,如花柱特异性识别关键因子S-核酸酶、调节因子HT-B、120K等,并对其功能进行了深入分析。本文对花烟草中参与自交不亲和过程的基因以及基于S-核酸酶自交不亲和的作用机理研究进行综述,并就未来花烟草自交不亲和性研究的焦点问题进一步分析探讨。 展开更多
关键词 花烟草 自交不亲和 S-位点基因 F-BOX蛋白
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花烟草中黄酮类化合物种类及含量的分析 被引量:2
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作者 崔亚静 张延龙 +4 位作者 牛立新 刘亚婷 汪晓谦 王润丰 孙安妮 《西北林学院学报》 CSCD 北大核心 2012年第1期150-154,共5页
将加拿大引进的花烟草按花色分为九个大类,用潘通色卡进行花色标定,并采用分光光度计、光谱扫描和高效液相色谱仪对黄酮(醇)类物质的组成及含量进行分析以此推测花色素成分。结果表明,各色花烟草中均不含有类胡萝卜素、C3-OH氢游离的黄... 将加拿大引进的花烟草按花色分为九个大类,用潘通色卡进行花色标定,并采用分光光度计、光谱扫描和高效液相色谱仪对黄酮(醇)类物质的组成及含量进行分析以此推测花色素成分。结果表明,各色花烟草中均不含有类胡萝卜素、C3-OH氢游离的黄酮醇、查儿酮,都含有橙酮,且除白色花外,均含有花青苷,紫色系的花青苷含量最高,可知花青苷是影响花色的主要因素。 展开更多
关键词 花烟草 花色素 黄酮类物质 高效液相色谱 光谱扫描
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花烟草NaNHX1基因的克隆及其在非生物胁迫下的表达模式 被引量:2
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作者 鲁琳 赵希胜 +3 位作者 刘维东 王艳婷 吴玲莉 鲁黎明 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期70-77,共8页
植物NHX家族基因,在植物的生长发育以及生物与非生物胁迫的应答反应中发挥着十分重要的作用。为了探究花烟草Na+/H+逆向转运蛋白的生理功能,为花烟草耐盐分子机制的研究提供参考。采用同源克隆的方法进行基因克隆,对花烟草进行非生物胁... 植物NHX家族基因,在植物的生长发育以及生物与非生物胁迫的应答反应中发挥着十分重要的作用。为了探究花烟草Na+/H+逆向转运蛋白的生理功能,为花烟草耐盐分子机制的研究提供参考。采用同源克隆的方法进行基因克隆,对花烟草进行非生物胁迫,并运用qPCR的方法进行基因表达模式分析。结果表明,从花烟草(Nicotiana alata)中克隆了一个属于Na+/H+逆向转运蛋白家族的基因NaNHX1。该基因的开放阅读框全长为1 599 bp,编码了532个氨基酸残基。生物信息学分析结果表明,该基因编码的蛋白分子量为58.4 kD,等电点为5.66;具有Na+/H+逆向转运蛋白家族典型的保守结构域NhaP2;该蛋白属于疏水性蛋白,包含10个跨膜区。NaNHX1基因主要定位于细胞质膜,并含有多个磷酸化位点。同源性分析的结果显示,NaNHX1基因与美花烟草(Nicotiana sylvestris)、茸毛烟草(Nicotiana tomentosiformis)以及番茄(Solanum lycoperisicum)NHX基因的亲缘关系最近,而与拟南芥的NHX基因同源性最低。NaNHX1基因的表达具有组织表达特异性,花中表达量最高,茎中次之,根和叶中表达量较低。在高盐、干旱、低温、ABA、低钾及H2O2等非生物胁迫下,NaNHX1的表达呈现3种不同的表达模式。其中,对高盐及低钾胁迫的响应强烈。本研究的结果表明,NaNHX1基因属于Na+/H+逆向转运蛋白家族,可能参与了花烟草高盐和低钾胁迫,以及其它非生物胁迫响应在内的众多生理过程。 展开更多
关键词 花烟草 NA^+/H^+逆向转运蛋白 生物信息学 基因克隆 耐盐性
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海藻糖酶基因RNA干扰载体对花烟草的转化 被引量:2
9
作者 王彬 周靖 +3 位作者 赵文博 余佳 陈茁 郭蓓 《中国农学通报》 CSCD 2014年第15期282-285,共4页
为了能够使花烟草更好地应用于园林美化,需要进一步提高其抵抗非生物胁迫的能力。海藻糖在植物抗逆性方面具有重要作用。利用RNA干扰技术抑制植物海藻糖酶基因的表达,可以阻断海藻糖降解过程,从而使植物体内海藻糖含量增加,有望以此提... 为了能够使花烟草更好地应用于园林美化,需要进一步提高其抵抗非生物胁迫的能力。海藻糖在植物抗逆性方面具有重要作用。利用RNA干扰技术抑制植物海藻糖酶基因的表达,可以阻断海藻糖降解过程,从而使植物体内海藻糖含量增加,有望以此提高植物抵抗非生物胁迫的能力。本实验利用叶盘侵染法将带有拟南芥海藻糖酶基因干扰载体(iTre-1285)的农杆菌导入花烟草中,经过抗生素筛选初步获得阳性植株后,对阳性植株提取DNA,完成了目的基因的PCR鉴定,初步证明目的基因已转入花烟草植株中。通过本试验,在建立起花烟草基因转化方法的同时,成功地将海藻糖酶干扰基因转入花烟草中。转基因花烟草植株的获得为后期能够进一步筛选出具有抵抗非生物胁迫的转基因植株奠定了基础。 展开更多
关键词 花烟草 海藻糖酶 RNA干扰 基因转化
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中国水仙凝集素基因在大花烟草中的定量表达及抗蚜性分析 被引量:2
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作者 杨会苗 陈段芬 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2017年第4期78-84,共7页
为了确定中国水仙凝集素基因NTL1的抗蚜功能及培育具有抗蚜功能的大花烟草,利用qPCR方法,研究了中国水仙凝集素基因(NTL1)在转基因大花烟草4个株系中的相对表达情况;利用自然感蚜、活体接种和离体接种方法研究了不同转基因株系的抗蚜能... 为了确定中国水仙凝集素基因NTL1的抗蚜功能及培育具有抗蚜功能的大花烟草,利用qPCR方法,研究了中国水仙凝集素基因(NTL1)在转基因大花烟草4个株系中的相对表达情况;利用自然感蚜、活体接种和离体接种方法研究了不同转基因株系的抗蚜能力。结果表明,NTL1在不同株系中的相对表达量差异显著,从高到低依次为3,4,1,2;抗蚜虫试验结果显示:转基因烟草具有一定抗蚜性,但不同烟草株系的抗蚜能力有所不同;活体转基因烟草单株与离体烟草叶片的平均蚜虫密度抑制率分别为8.22%~76.61%,4.62%~65.65%;转基因大花烟草可加速蚜虫的死亡。对比NTL1在不同转基因大花烟草株系中的相对表达量及抗蚜效果,发现NTL1在不同株系中的相对表达量与植株抗蚜性具有高度一致性。 展开更多
关键词 中国水仙 凝集素基因 qPCR 大花烟草 抗蚜性
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高表达花烟草防御素1基因K326烟草叶片总蛋白的提取及其生物活性分析
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作者 龚伟伟 黄小贞 赵懿琛 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期800-804,共5页
目的 提取高表达花烟草防御素1(Nicotiana alata defensin 1,NaD1)基因的K326烟草叶片总蛋白,并分析其生物活性。方法 从花烟草花、野生型(WT)和高表达NaD1基因(转基因)K326烟草叶片中提取总蛋白,Bardford法测定蛋白浓度。滤纸片法检测... 目的 提取高表达花烟草防御素1(Nicotiana alata defensin 1,NaD1)基因的K326烟草叶片总蛋白,并分析其生物活性。方法 从花烟草花、野生型(WT)和高表达NaD1基因(转基因)K326烟草叶片中提取总蛋白,Bardford法测定蛋白浓度。滤纸片法检测总蛋白对真菌的抑菌活性,CCK-8法检测对癌细胞(HeLa细胞)的抑制活性。结果 花烟草花、WT及转基因K326烟草叶片总蛋白浓度分别为11.25、10.33和10.14 mg/mL。转基因K326烟草叶片总蛋白对白色念珠菌的抑菌活性为(85.68±3.08)%,分别为WT K326烟草叶片和花烟草花总蛋白的1.33和1.14倍(F=15 339,P <0.05);对尖孢镰刀菌的抑菌活性为(148.48±2.47)%,分别为WT K326烟草叶片和花烟草花总蛋白的1.09和1.08倍(F=4 927,P <0.05)。转基因K326烟草叶片总蛋白对HeLa细胞的IC_(50)最小(6.11 mg/mL),抑制活性分别为WT K326烟草叶片和花烟草花总蛋白的1.56和1.21倍(F=89 748,P <0.05)。结论 高表达NaD1基因的K326烟草总蛋白具有良好的抑菌和抗癌生物活性,本研究为以烟草作为生物反应器生产抑菌和抗癌生物制剂提供了实验依据。 展开更多
关键词 K326烟草 花烟草防御素1 转基因 生物活性
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