源于体外培养胰岛中表达Ngn3的细胞是胰腺内分泌前体细胞的新证据 被引量：9

1

作者 宋陆军 秦新裕 +8 位作者 牛伟新 沈坤堂 刘凤林 K.A.Andreoni D.A.Gerber J.H.Fair L.Rice A.Pleasant J.Wang 《中华外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期42-45,共4页

目的　评估表达Ngn3的细胞对成体胰岛维护和更新的作用及其意义。方法　用 6～ 8周龄的C5 7BL/ 6小鼠分离胰岛。胆总管内插管成功后 ,切除胰腺组织并用浓度为 2 5mg/ml胶原蛋白酶V灌注消化。手工拣取胰岛后 ,置于 6 0mm培养皿内 ,每个... 目的　评估表达Ngn3的细胞对成体胰岛维护和更新的作用及其意义。方法　用 6～ 8周龄的C5 7BL/ 6小鼠分离胰岛。胆总管内插管成功后 ,切除胰腺组织并用浓度为 2 5mg/ml胶原蛋白酶V灌注消化。手工拣取胰岛后 ,置于 6 0mm培养皿内 ,每个培养皿内含 10～ 12个胰岛 ,用RPMI 16 4 0 (12 5mmol/LHEPES ,5 2mmol/L葡萄糖和 2 %胎牛血清 )培养液培养。用A6抗体 ,胰岛素抗体 ,胰高血糖素抗体 ,Nestin抗体 ,Ngn3抗体和 5′ 溴 2 脱氧尿嘧啶 (5 bromo 2′ deoxy uridine,BrdU)抗体进行胰岛细胞免疫荧光染色。结果　在增殖的胰岛细胞中 ,只有不到 15 %的细胞表达Ngn3,其中约有 30 %以上的细胞同时表达A6。在培养的胰岛细胞中存在表达Ngn3的细胞 ,这一结果与其他在胚胎发育和成体胰岛中的研究结果一致。本研究发现培养的胰岛细胞中存在同时表达A6和Ngn3的细胞。A6被认为是可分化为胆管上皮细胞的肝脏前体细胞的标记物。胰岛内表达A6的细胞可能来源于成体胰管 ,并迁移至胰岛内。细胞表达A6的同时表达Ngn3,表明这些细胞在胰岛内可分化为内分泌细胞。结论　培养的胰岛细胞中发现共同表达Ngn3和A6的细胞 ,表明胰岛内的 4种内分泌细胞可能来源于成体胰岛中的同一内分泌细胞系。 展开更多

关键词 胰岛细胞 细胞表达 抗体 前体细胞 胰腺 标记物 治疗 成体干细胞 培养皿 内分泌细胞

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Ngn3基因及其转录调控网络在胰腺内分泌发育与功能调控中的作用 被引量：6

2

作者 高勇 喻萍 +1 位作者 蔡涛 陈翔 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第7期1035-1043,共9页

Ngn3(neurogenin 3)基因及其直接靶基因NeuroD1(neurogenic differentiation 1)和Islet-1(insulin gene enhancer binding protein-1)是一类胰岛转录因子(islet transcription factors,ITFs)调控基因。Ngn3基因及其转录调控网络在小鼠... Ngn3(neurogenin 3)基因及其直接靶基因NeuroD1(neurogenic differentiation 1)和Islet-1(insulin gene enhancer binding protein-1)是一类胰岛转录因子(islet transcription factors,ITFs)调控基因。Ngn3基因及其转录调控网络在小鼠和人胚胎胰腺内分泌细胞发育、胰岛素的产生和分泌及重编程干细胞或非β细胞生成胰岛素分泌β细胞中起着重要的调控作用。新近的研究发现,INSM1(insulinoma associated 1)和INSM2(insulinoma associated 2)基因家族成员也是Ngn3基因的直接靶基因,初步证明了INSM1/INSM2基因对胰腺内分泌发育可能起重要的调控作用,进一步补充和完善了Ngn3转录调控网络。因此,深入理解Ngn3基因及其转录调控网络,尤其是INSM1/INSM2基因对胰岛发育和成熟胰岛细胞命运的分子调控机制,将有助于研究胰腺内分泌疾病和内分泌发育疾病,特别是糖尿病的病因、治疗和预防。为此,就近年来Ngn3基因及其转录调控网络的研究进展作一综述。 展开更多

关键词 ngn3 INSM1 INSM2 转录调控网络 胰腺内分泌 胰岛细胞 胰岛素

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宫内发育迟缓对大鼠胰腺中Ngn3表达及内分泌细胞发育的影响 被引量：3

3

作者 徐春卓 辛颖 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第10期891-894,899,共5页

目的探讨宫内发育迟缓(IUGR)对大鼠胰腺中Ngn3表达及内分泌细胞发育的影响。方法给予孕鼠孕期全程低蛋白饲料或正常饲料任意摄取喂养,将其子鼠分为IUGR组和对照组(CON组)。选取胚胎第15.5天(E15.5)、第18.5天(E18.5),新生第1天(P1)在解... 目的探讨宫内发育迟缓(IUGR)对大鼠胰腺中Ngn3表达及内分泌细胞发育的影响。方法给予孕鼠孕期全程低蛋白饲料或正常饲料任意摄取喂养,将其子鼠分为IUGR组和对照组(CON组)。选取胚胎第15.5天(E15.5)、第18.5天(E18.5),新生第1天(P1)在解剖显微镜下分离胰腺组织;采用HE染色观察胰腺形态变化,用免疫组织化学染色及图像分析技术检测Ngn3蛋白表达。结果随着胚胎发育,光镜下胰腺腺泡、导管结构逐渐聚集成β细胞并形成内外分泌部的典型结构;组织化学染色发现在胚胎期Ngn3蛋白主要表达在胰腺的导管,新生期主要表达在胰岛中。随胎龄的增长Ngn3蛋白表达量减少,与E15.5、E18.5比较,P1时Ngn3蛋白表达量下降(均P <0.01)。IUGR组子鼠体质量明显低于CON组(P <0.05);光镜下观察IUGR组腺泡导管、胰岛数量及面积较CON组减少;与CON组比较,IUGR组Ngn3蛋白表达减少,E15.5、E18.5时2组差异有统计学意义(P <0.05)。结论 IUGR可使胰腺中内分泌祖细胞减少,导致内分泌细胞发育异常。 展开更多

关键词 ngn3 宫内发育迟缓 内分泌发育 大鼠

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基于Ngn3和Caspase-3探讨姜黄素对宫内发育迟缓仔鼠胰腺发育及糖脂代谢的影响

4

作者 刘晓玲 雷小平 张莲玉 《广州中医药大学学报》 CAS 2022年第10期2361-2367,共7页

【目的】观察宫内发育迟缓(IUGR)仔鼠的胰腺发育及糖脂代谢情况及姜黄素的干预机制。【方法】采用日粮限饲的方法构建IUGR新生大鼠模型。将20只健康仔鼠分为健康组(健康仔鼠+基础饲料)、健康+姜黄素组(健康仔鼠+姜黄素+基础饲料),20只I... 【目的】观察宫内发育迟缓(IUGR)仔鼠的胰腺发育及糖脂代谢情况及姜黄素的干预机制。【方法】采用日粮限饲的方法构建IUGR新生大鼠模型。将20只健康仔鼠分为健康组(健康仔鼠+基础饲料)、健康+姜黄素组(健康仔鼠+姜黄素+基础饲料),20只IUGR仔鼠分为IUGR组(IUGR仔鼠+基础饲料)和IUGR+姜黄素组(IUGR仔鼠+姜黄素+基础饲料)。给药结束后,检查仔鼠血糖、血脂水平,采用苏木素-伊红(HE)染色法观察胰腺发育情况,末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)法测定胰岛β细胞凋亡率,免疫组织化学法、蛋白免疫印迹(Western Blot)法分别检测胰腺组织中Ngn3、Caspase-3阳性细胞数、蛋白表达水平。【结果】(1)与健康组比较,IUGR组仔鼠空腹血糖、总胆固醇(TC)及低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平均升高,高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平降低(均P<0.05);与IUGR组比较,IUGR+姜黄素组仔鼠空腹血糖、TC及LDL-C水平降低,HDL-C水平升高(均P<0.05)。(2)与健康组比较,IUGR组仔鼠胰腺发育不完善;与IUGR组比较,IUGR+姜黄素组仔鼠胰腺发育较完善。(3)与健康组比较,IUGR组胰岛β细胞凋亡率升高(P<0.05);与IUGR组比较,IUGR+姜黄素组胰岛β细胞凋亡率降低(P<0.05)。(4)与健康组比较,IUGR组胰腺组织Ngn3阳性细胞数及蛋白表达水平降低,Caspase-3阳性细胞数及蛋白表达水平升高(均P<0.05);与IUGR组比较,IUGR+姜黄素组胰腺组织Ngn3阳性细胞数及蛋白表达水平升高,Caspase-3阳性细胞数及蛋白表达水平降低(均P<0.05)。此外,健康+姜黄素组上述各指标水平与健康组比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。【结论】IUGR仔鼠存在糖脂代谢紊乱、胰腺结构发育不完善及胰岛β细胞凋亡加剧,姜黄素能够调节糖脂代谢,改善胰腺发育,这可能与其上调Ngn3活性和抑制Caspase-3表达相关。 展开更多

关键词 姜黄素 宫内发育迟缓 胰腺发育 糖脂代谢 ngn3 CASPASE-3 大鼠

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Ngn3生物学特性及其转录因子信号在胰岛细胞分化中的作用 被引量：1

5

作者 洪洋 杨开明 《齐齐哈尔医学院学报》 2020年第14期1797-1799,共3页

胰腺干细胞分化为胰岛细胞的生物学调控机制,是解决如何促进胰腺干细胞分化、增殖治疗糖尿病的关键。Neurogenin3(Ngn3)作为胰腺干细胞向胰岛细胞分化调控中的一个重要的转录因子,目前研究较多。为了阐述其及其信号在胰岛细胞分化发育... 胰腺干细胞分化为胰岛细胞的生物学调控机制,是解决如何促进胰腺干细胞分化、增殖治疗糖尿病的关键。Neurogenin3(Ngn3)作为胰腺干细胞向胰岛细胞分化调控中的一个重要的转录因子,目前研究较多。为了阐述其及其信号在胰岛细胞分化发育和胰岛再生中的作用机制,本文对Ngn3的生物学特性以及其转录因子信号在促进胰岛细胞分化中的作用机制进行综述。 展开更多

关键词 ngn3 转录因子 胰岛分化 糖尿病

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PDX1、MafA、Ngn3及其联合作用的研究进展 被引量：2

6

作者 杜少斐 袁慧娟 《中国实用医刊》 2014年第11期87-88,共2页

胰腺十二指肠同源盒（PDX1）、肌腱膜纤维肉瘤癌基因同系物A（MafA）、神经元素3（Ngn3）是三个对胰岛发育有重要影响的转录因子。PDX1促进胚胎期胰芽形成，MafA促进β细胞最终成熟，Ngn3始动内分泌祖细胞分化为内分泌细胞。PDX1、MafA... 胰腺十二指肠同源盒（PDX1）、肌腱膜纤维肉瘤癌基因同系物A（MafA）、神经元素3（Ngn3）是三个对胰岛发育有重要影响的转录因子。PDX1促进胚胎期胰芽形成，MafA促进β细胞最终成熟，Ngn3始动内分泌祖细胞分化为内分泌细胞。PDX1、MafA、Ngn3是诱导分化的特定组合，其转分化效果优于任何单基因或双基因组合。携带有PDX-1、MafA、Ngn3的腺病毒诱导分化非β细胞，获得的胰岛样细胞与！源β细胞大小、形态相似，表达β细胞功能基因。 展开更多

关键词 PDX1 MAFA ngn3 胰岛细胞 胰岛素 糖尿病

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hUMSCs向胰岛前体细胞诱导分化过程中Notch1和神经元素3的表达

7

作者 韩晶 洪艳 +1 位作者 王琪 檀梦天 《贵州医科大学学报》 CAS 2020年第7期773-780,共8页

目的:探讨人间充质干细胞(hUMSCs)向胰岛前体细胞诱导分化过程中Notch信号通路受体Notch1与神经元素3(Ngn3)变化。方法:分离培养并鉴定hUMSCs,采用分阶段联合诱导法(前10 d用含EGF低糖培养基诱导,后11 d用含激活素A和尼克酰胺高糖培养... 目的:探讨人间充质干细胞(hUMSCs)向胰岛前体细胞诱导分化过程中Notch信号通路受体Notch1与神经元素3(Ngn3)变化。方法:分离培养并鉴定hUMSCs,采用分阶段联合诱导法(前10 d用含EGF低糖培养基诱导,后11 d用含激活素A和尼克酰胺高糖培养基诱导)诱导hUMSCs向胰岛前体细胞分化,设单独培养的hUMSCs作为对照;观察诱导分化前后细胞的形态变化,免疫细胞化学法检测诱导后细胞Ngn3、胰高血糖素(Glucagon)表达鉴定胰岛前体细胞,电镜下观察诱导后胰岛前体细胞改变;采用免疫细胞化学法、real-time PCR法及Western blot法检测诱导第7天、第14天及第21天时细胞中Notch1及Ngn3的表达;Western blot法检测诱导并加入γ分泌酶抑制剂(DAPT)后第21天时细胞中Notch1及Ngn3的表达水平。结果:诱导后Glucagon免疫组化染色呈阳性,出现胰岛前体细胞集落,电镜下可见胞体内有分泌颗粒;real-time PCR和Western blot结果显示,Notch1水平在诱导后第7天时最高,Ngn3水平至第14天时达到峰值;添加Notch信号通路抑制剂后Ngn3表达水平升高。结论:Notch信号通路可能通过激活Notch1受体与下游基因Ngn3共同调控体外诱导hUMSCs向胰岛前体细胞分化过程。 展开更多

关键词 间质干细胞 胰岛前体细胞 NOTCH1 ngn3 人脐带间充质干细胞 γ分泌酶抑制剂 诱导

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神经元素3在不同纯度供体胰岛细胞中的表达

8

作者 薛栋 杜成友 +1 位作者 杨闯 尹昌生 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2007年第1期12-14,21,共4页

目的:研究神经元素3(Ngn3)在不同纯度胰岛细胞中的表达情况,探讨不同纯度胰岛细胞中所携带的干细胞。方法:30只成年雄性SD大鼠随机分为3组,采用胰管内注入胶原酶消化法分离成年大鼠胰腺,Ⅰ组(n=10):采用2次消化、不纯化的方法获得胰岛;... 目的:研究神经元素3(Ngn3)在不同纯度胰岛细胞中的表达情况,探讨不同纯度胰岛细胞中所携带的干细胞。方法:30只成年雄性SD大鼠随机分为3组,采用胰管内注入胶原酶消化法分离成年大鼠胰腺,Ⅰ组(n=10):采用2次消化、不纯化的方法获得胰岛;Ⅱ组(n=10):胰岛沉淀物加入25%Ficoll-400纯化,Ⅲ组(n=10):胰岛沉淀物依次加入25%、11%的Ficoll-400纯化。应用免疫组化、逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)方法进行定位、半定量分析,检测Ngn3在不同纯度胰岛细胞中的表达。结果:Ⅰ组获得胰岛纯度约为43.6%±6.29%,Ⅱ组获得胰岛纯度约为65.3%±4.40%,Ⅲ组获得胰岛纯度约为77.6%±6.36%,各组比较均具有显著性差异(P<0.05)。Ngn3在不同纯度胰岛细胞中均有表达,Ⅰ组中Ngn3的蛋白和和核酸水平表达明显高于Ⅱ组、Ⅲ组,Ⅲ组中表达最弱,各组比较均具有显著性差异(P<0.05)。结论:Ngn3在不同纯度胰岛细胞中均有表达,在低纯度胰岛细胞中表达最明显,提示低纯度胰岛细胞中可能携带较多的干细胞。 展开更多

关键词 神经元素3 供体胰岛 逆转录-多聚酶链反应 免疫组化

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Analysis of CK-19,PDX-1,Nestin,Ngn3 in different donor islet purity in rats

9

作者 DU Chengyou XUE Dong YANG Chuang LI Dewei 《内分泌外科杂志》 2007年第1期17-21,共5页

关键词 CK-19 PDX-1 NESTIN ngn3 供体 纯度 免疫组织化学 干细胞 RT-PCR

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番石榴叶总黄酮促进糖尿病模型小鼠胰岛再生机制 被引量：9

10

作者 李杰 李东华 +5 位作者 涂正伟 傅予 刘洪斌 张一 宗春辉 于强 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第10期116-121,共6页

目的:观察番石榴叶总黄酮对链脲佐菌素(streptozocin,STZ)糖尿病模型小鼠胰腺组织中胰腺十二指肠同源盒因子-1(pancreas-duodenumhomeobox-1,PDX-1),神经元素3(neurogenin 3,Ngn3),NK6转录因子相关基因座1(NK6 transcription factor rel... 目的:观察番石榴叶总黄酮对链脲佐菌素(streptozocin,STZ)糖尿病模型小鼠胰腺组织中胰腺十二指肠同源盒因子-1(pancreas-duodenumhomeobox-1,PDX-1),神经元素3(neurogenin 3,Ngn3),NK6转录因子相关基因座1(NK6 transcription factor related locus 1,Nkx6.1)表达的影响,探讨其促进胰岛β细胞再生的机制。方法:将STZ糖尿病模型小鼠随机分为模型组和治疗组,治疗组包括番石榴叶总黄酮低、高剂量组及二甲双胍组,另设10只正常小鼠为正常组。番石榴叶总黄酮低、高剂量组按小鼠体重分别以番石榴叶总黄酮0.198,0.396 g·kg^(-1)·d^(-1)灌胃,二甲双胍组以二甲双胍0.087 5 g·kg^(-1)·d^(-1)灌胃,正常组和模型组以等体积蒸馏水灌胃,2周后检测其空腹血糖、体重,苏木素-伊红(HE)染色观察胰岛病理形态学改变,实时荧光定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测胰腺组织内胚胎期胰岛β细胞发育相关转录因子PDX-1,Ngn3,Nkx6.1 mRNA相对表达量。结果:与正常组比较,STZ糖尿病模型小鼠胰腺组织中PDX-1,Ngn3,Nkx6.1表达量明显下降(P<0.01);与模型组比较,番石榴叶总黄酮治疗组PDX-1,Ngn3,Nkx6.1 mRNA表达升高(P<0.05)。结论:番石榴叶总黄酮能上调糖尿病小鼠胰腺组织中PDX-1,Ngn3,Nkx6.1的表达;胰岛β细胞再生机制可能与PDX-1,Ngn3,Nkx6.1 mRNA表达的上调有关。 展开更多

关键词 番石榴叶总黄酮 糖尿病 胰岛再生 胰腺十二指肠同源盒因子-1 神经元素3 NK6转录因子相关基因座1

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中国IPTV的发展策略 被引量：5

11

作者 陈如明 《邮电设计技术》 2006年第5期1-7,共7页

从IPTV的定义、内涵及其与NGN的关系出发,论述IPTV的战略价值及其市场前景与发展策略。

关键词 GⅡ 下一代网络 3G/3G演进 下一代 宽带无线 IP电视 目标网络 阶段性

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神经元素3蛋白(Ngn3)诱导大鼠骨髓间充质干细胞向胰岛素表达细胞分化的初步研究 被引量：3

12

作者 毋慧玲 李戈 +3 位作者 陈静 范薇薇 沈坤堂 卢大儒 《复旦学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期585-592,F0003,共9页

胰腺发育相关基因神经元素3(neurogenin3,Ngn3),属于碱性螺旋-环-螺旋(basic helix-loop-helix,bHLH)家族的转录因子,对胰腺内分泌细胞的发育及分化至关重要,且被认为是胰腺祖细胞的标志蛋白质.之前的研究发现,全长Ngn3蛋白具有蛋白质... 胰腺发育相关基因神经元素3(neurogenin3,Ngn3),属于碱性螺旋-环-螺旋(basic helix-loop-helix,bHLH)家族的转录因子,对胰腺内分泌细胞的发育及分化至关重要,且被认为是胰腺祖细胞的标志蛋白质.之前的研究发现,全长Ngn3蛋白具有蛋白质转导功能,可以高效进入多种真核细胞系.近年来多项研究显示,骨髓间充质干细胞是一种具有多向分化潜能的多能干细胞.利用蛋白质转导技术,将体外表达纯化的胰腺发育重要因子Ngn3蛋白导入体外分离培养的大鼠骨髓间充质干细胞中,诱导其向胰岛素表达细胞分化.结果显示,经Ngn3蛋白诱导的大鼠骨髓间充质干细胞出现细胞聚集生长现象,并有形状类似胰岛的细胞团出现.RT-PCR结果显示经Ngn3蛋白诱导的大鼠骨髓间充质干细胞可以有效表达胰岛素,并且一些β细胞相关基因如胰十二指肠同源盒基因-1(pancreatic-duodenal homeobox 1,Pdx-1),神经分化因子(neurogenic differentiation,NeuroD),同源结构域基因4(paired box gene 4,Pax4),葡萄糖转运体-2(glucose transporter 2,Glut-2)都有表达.细胞免疫荧光也可检测到胰岛素的表达.通过Ngn3蛋白质诱导分化大鼠骨髓间充质干细胞的初步研究,探索了应用骨髓间充质干细胞体外诱导分化获得胰岛素表达细胞的可行性,为糖尿病治疗提供一定的实验依据. 展开更多

关键词 蛋白质转导 碱性螺旋-环-螺旋家族 神经元素3 大鼠骨髓间充质干细胞 胰岛素表达细胞

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H.264/AVC技术进展及其务实发展策略思考 被引量：1

13

作者 陈如明 《邮电设计技术》 2006年第1期1-8,共8页

结合NGN及3G演进的固定、移动视频业务实际需求状况,论述H.264/AVC的重要技术进展及其务实发展策略。

关键词 下一代网络 3G/3G演进 标准 简单语 音增强语音

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3G及TD-SCDMA务实发展策略 被引量：1

14

作者 陈如明 《中国无线电》 2006年第2期2-6,共5页

在概述3G及TD-SCDMA进展基础上,重点论述了TD-SCDMA系统的优势与面临的挑战,独立组网与混合组网的利弊及务实发展策略。

关键词 TD-SCDMA系统 务实 3G 混合组网 独立组网

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人神经元素3基因重组逆转录病毒表达载体的构建及其包装细胞株的建立 被引量：2

15

作者 楚元奎 吕长荣 +2 位作者 陈冬梅 曹晖 窦忠英 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期448-453,共6页

为构建表达人神经元素3基因(neurogenin 3,ngn3)的重组逆转录病毒载体,建立稳定表达ngn3的包装细胞株,本研究以流产人胎儿胰腺组织为材料,通过RT-PCR方法克隆出人ngn3基因,将其连接到pMD18-T载体上并测序,结果表明,测序得到的基因序列... 为构建表达人神经元素3基因(neurogenin 3,ngn3)的重组逆转录病毒载体,建立稳定表达ngn3的包装细胞株,本研究以流产人胎儿胰腺组织为材料,通过RT-PCR方法克隆出人ngn3基因,将其连接到pMD18-T载体上并测序,结果表明,测序得到的基因序列与发表的人ngn3基因序列(GenBank Accession No.BC126468)完全一致。将EcoRI和HpaI双酶切后的基因片段构建到pMSCV-neo逆转录病毒载体中,酶切鉴定结果表明,pMSCV-ngn3重组逆转录病毒载体构建成功。脂质体法将pMSCV-ngn3重组载体导入PT67包装细胞,G418筛选后,对得到的细胞株进行RT-PCR和免疫组化检测,结果显示,该细胞株在mRNA水平和蛋白水平均稳定表达Ngn3;收集该细胞株的培养上清液,进行RT-PCR检测及电镜观察,结果表明,该细胞株将导入的重组逆转录病毒载体pMSCV-ngn3包装成了具有感染性的病毒颗粒,并将其释放到了培养上清液中。以上结果表明PT67-ngn3包装细胞株建立成功。该细胞株的成功建立,为下一步将ngn3基因应用于提高人胎儿胰腺祖细胞诱导分化效率方面的研究奠定了基础。 展开更多

关键词 人 神经元素3基因 逆转录病毒载体 包装细胞株

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NGN3与PAX4双基因表达腺病毒载体的构建与表达 被引量：2

16

作者 唐小龙 江振友 +2 位作者 庞雪云 蓝锴 欧财文 《暨南大学学报（自然科学与医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期346-351,共6页

目的:运用pADxsi系统构建带人NGN3与PAX4双基因表达腺病毒载体。方法:采用基因克隆技术,将目的基因NGN3从pEGFP-N1-NGN3质粒上切下连到pShuttle-GFP-CMV上,替换GFP,得到pShuttle-CMV-NGN3;再将PAX4从pEGFP-N1-PAX4质粒上切下连到系统pSh... 目的:运用pADxsi系统构建带人NGN3与PAX4双基因表达腺病毒载体。方法:采用基因克隆技术,将目的基因NGN3从pEGFP-N1-NGN3质粒上切下连到pShuttle-GFP-CMV上,替换GFP,得到pShuttle-CMV-NGN3;再将PAX4从pEGFP-N1-PAX4质粒上切下连到系统pShuttle-CMV-NGN3上,得到pShuttle-CMV-NGN3/CMV-PAX4穿梭质粒;最后将CMV-NGN3/CMV-PAX4从pShuttle-CMV-NGN3/CMV-PAX4转移到ADxsi骨架载体上,得到pADxsi-CMV-NGN3/CMV-PAX4病毒质粒,然后在293细胞中进行包装与扩增活性病毒,并进行病毒滴度测定。体外感染人脐带间充质干细胞。逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)与免疫印迹(Western blotting)检测目的基因在细胞内的表达情况,免疫细胞化学与间接荧光法检测目的分子在细胞内的定位。结果:酶切鉴定和PCR证明重组人NGN3与PAX4双基因表达腺病毒载体构建正确;RT-PCR与Western blotting结果显示目的基因在细胞持续稳定表达;间接荧光与免疫化学表明重组腺病毒可高效感染人脐带间充质干细胞,且目的基因特异性地定位于细胞核内。结论:应用重组技术成功构建人NGN3与PAX4双基因表达腺病毒载体,且在间充质干细胞内持续而稳定表达。 展开更多

关键词 腺病毒 神经元素3(ngn3) 成对盒基因4(PAX4) 间充质干细胞(MCS)

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胰岛类器官基础应用的研究现状与展望

17

作者 吴玲玲 蒋鹏 +3 位作者 武桢 李万里 杨玉伟 高宏君 《器官移植》 CAS CSCD 北大核心 2021年第4期397-402,共6页

类器官指利用干细胞的全能性,将其在体外进行培养,使其不断进行自我更新和自我组织,形成结构和功能与原始器官相似的组织。类器官具有与原始组织保持相似外观和功能的特点,已广泛应用于基础研究及临床研究。目前已经成功培养出肝、肾、... 类器官指利用干细胞的全能性,将其在体外进行培养,使其不断进行自我更新和自我组织,形成结构和功能与原始器官相似的组织。类器官具有与原始组织保持相似外观和功能的特点,已广泛应用于基础研究及临床研究。目前已经成功培养出肝、肾、胰、脑、肠等类器官,其中使用胰岛类器官是类器官领域研究的热点,但由于还未完全解决移植术后排斥反应等问题,目前胰岛类器官仅用于基础研究。本文对胰岛类器官的起源与发展、胰岛类器官的基础应用进行综述,旨在为胰岛类器官实现基础应用向临床应用转化及糖尿病的治疗提供参考。 展开更多

关键词 胰岛类器官 糖尿病 人类多能干细胞(hPSC) 胚胎干细胞(ESC) 诱导多能干细胞(iPSC) 器官移植 胰十二指肠同源盒1(Pdx1) 神经源素3(ngn3)

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自主创新导向下的TD-SCDMA与NGBWM务实发展战略思考

18

作者 陈如明 《邮电设计技术》 2007年第3期1-4,共4页

以TD-SCDMA既有进展及面临的挑战与NGBWM的发展走向为基础,重点论述自主创新导向下的TD-SCDMA与NGBWM务实发展战略思考。

关键词 ngn 3G/3G演进 TD-SCDMA NGBWM 自主创新 战略思考

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IP协议的作用、问题与发展战略思考(下)

19

作者 陈如明 《邮电设计技术》 2005年第8期1-7,共7页

从IP协议的内涵、作用与外延的一系列问题讨论出发,进一步论述发展IP及NGN的理性战略思维。

关键词 ngn 3G演进目标网络软交换 IPV6 IP协议 问题讨论

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IP协议的作用、问题与发展战略思考(上)

20

作者 陈如明 《邮电设计技术》 2005年第7期1-6,共6页

从IP协议的内涵、作用与外延的一系列问题讨论出发,进一步论述发展IP及NGN的理性战略思维。

关键词 IP协议 战略思考 问题讨论 战略思维 ngn

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