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胎儿胰腺组织中巢蛋白阳性细胞的分离和体外增殖以及诱导分化
被引量:
8
1
作者
张玲
洪天配
+2 位作者
胡江
吴永华
李凌松
《中国糖尿病杂志》
CAS
CSCD
2003年第6期416-420,共5页
目的 研究从胎儿胰腺组织中分离巢蛋白 (Nestin)阳性细胞以及该细胞的体外扩增与向胰岛内分泌细胞分化的能力。 方法 采用胶原酶消化法 ,从胎儿胰腺组织中分离获得胰岛样细胞簇 (islet likecellclusters ,ICCs) ,ICCs经手工挑拣后接...
目的 研究从胎儿胰腺组织中分离巢蛋白 (Nestin)阳性细胞以及该细胞的体外扩增与向胰岛内分泌细胞分化的能力。 方法 采用胶原酶消化法 ,从胎儿胰腺组织中分离获得胰岛样细胞簇 (islet likecellclusters ,ICCs) ,ICCs经手工挑拣后接种 ,待形成单层上皮样细胞后 ,进行传代培养和诱导分化。利用逆转录 -聚合酶链反应 (RT PCR)、免疫荧光染色及放射免疫分析 (RIA)等方法 ,检测该细胞中分子标志物的表达 ,并对其向胰岛内分泌细胞分化的能力进行鉴定。 结果 (1)上述单层上皮样细胞具有很强的增殖能力 ,可至少连续传 16代 ;(2 )RT PCR、免疫荧光染色分析显示 ,该细胞可表达干细胞的标志分子巢蛋白和ABCG2 ;(3 )RT PCR分析显示 ,在多种细胞因子和无血清的条件下 ,巢蛋白阳性细胞经诱导后可出现胰岛素、胰升糖素和胰十二指肠同源盒基因 1(PDX 1)mR NA的表达 ,而巢蛋白和Neurogenin3 (Ngn3 )mRNA表达消失。RIA分析也可检测到诱导后的细胞内有胰岛素产生。 结论 从胎儿胰腺中分离得到的巢蛋白阳性细胞具有胰腺前体细胞的特性 ,在体外具有很强的增殖能力 ,并可诱导分化为胰岛内分泌细胞。该细胞有望为胰岛移植提供一种新的细胞来源。
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关键词
胎儿
胰腺组织
巢蛋白阳性细胞
分离
体外增殖
诱导分化
胰岛移植
糖尿病
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职称材料
题名
胎儿胰腺组织中巢蛋白阳性细胞的分离和体外增殖以及诱导分化
被引量:
8
1
作者
张玲
洪天配
胡江
吴永华
李凌松
机构
北京大学第三医院内分泌科
北京大学干细胞研究中心
出处
《中国糖尿病杂志》
CAS
CSCD
2003年第6期416-420,共5页
基金
国家自然科学基金资助项目 ( 30 1 70 4 43)
"2 1 1工程"建设项目人体干细胞工程学学科群资助项目
国家 973重点基础研究发展规划基金资助项目
文摘
目的 研究从胎儿胰腺组织中分离巢蛋白 (Nestin)阳性细胞以及该细胞的体外扩增与向胰岛内分泌细胞分化的能力。 方法 采用胶原酶消化法 ,从胎儿胰腺组织中分离获得胰岛样细胞簇 (islet likecellclusters ,ICCs) ,ICCs经手工挑拣后接种 ,待形成单层上皮样细胞后 ,进行传代培养和诱导分化。利用逆转录 -聚合酶链反应 (RT PCR)、免疫荧光染色及放射免疫分析 (RIA)等方法 ,检测该细胞中分子标志物的表达 ,并对其向胰岛内分泌细胞分化的能力进行鉴定。 结果 (1)上述单层上皮样细胞具有很强的增殖能力 ,可至少连续传 16代 ;(2 )RT PCR、免疫荧光染色分析显示 ,该细胞可表达干细胞的标志分子巢蛋白和ABCG2 ;(3 )RT PCR分析显示 ,在多种细胞因子和无血清的条件下 ,巢蛋白阳性细胞经诱导后可出现胰岛素、胰升糖素和胰十二指肠同源盒基因 1(PDX 1)mR NA的表达 ,而巢蛋白和Neurogenin3 (Ngn3 )mRNA表达消失。RIA分析也可检测到诱导后的细胞内有胰岛素产生。 结论 从胎儿胰腺中分离得到的巢蛋白阳性细胞具有胰腺前体细胞的特性 ,在体外具有很强的增殖能力 ,并可诱导分化为胰岛内分泌细胞。该细胞有望为胰岛移植提供一种新的细胞来源。
关键词
胎儿
胰腺组织
巢蛋白阳性细胞
分离
体外增殖
诱导分化
胰岛移植
糖尿病
Keywords
Fetus
Pancreas
Pancreatic
stem
cell
nes
tin
分类号
R657.5 [医药卫生—外科学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
胎儿胰腺组织中巢蛋白阳性细胞的分离和体外增殖以及诱导分化
张玲
洪天配
胡江
吴永华
李凌松
《中国糖尿病杂志》
CAS
CSCD
2003
8
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