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TPT1基因转染对肝癌细胞系SMMC-7721生物学行为的影响 被引量：3
1
作者 高天慧 段芳龄 +4 位作者 周云 尚佳 孙嫣 孙艳 王晓 《中国误诊学杂志》 CAS 2005年第16期3004-3007,共4页
目的:观察TPT 1转染对肝癌细胞系生物学行为的影响。方法:用Q IAGEN超纯质粒抽提试剂盒抽提TPT 1的真核表达质粒pEGFP-N 3TPT 1和pEGFP-N 3,通过lipofectAM INE,在24 h内连续3次转染肝癌细胞系SMM C-7721,通过荧光显微镜、RT-PCR观察转... 目的:观察TPT 1转染对肝癌细胞系生物学行为的影响。方法:用Q IAGEN超纯质粒抽提试剂盒抽提TPT 1的真核表达质粒pEGFP-N 3TPT 1和pEGFP-N 3,通过lipofectAM INE,在24 h内连续3次转染肝癌细胞系SMM C-7721,通过荧光显微镜、RT-PCR观察转染、表达效率,通过M TT实验、软琼脂克隆形成实验、细胞周期分析,研究TPT 1转染对肝癌细胞系SMM C-7721生物学行为的影响。结果:用此重构体转染后,在荧光显微镜下,可见细胞发出明亮的绿色荧光,转染效率约在30%左右。RT-PCR分析显示,pEGFP-N 3 TPT 1转染的细胞,TPT 1 mRNA水平升高0.78倍(P<0.05)。与对照组相比,pEGFP-N 3TPT 1转染可明显增强肝癌细胞系的增殖能力和软琼脂克隆形成能力(P值均<0.05),使G 2+S/M期细胞数增多。结论:pEGFP-N 3 TPT 1可在肝系细胞内高效表达,TPT 1可增强肝癌细胞系SMM C-7721的恶性表型。 展开更多
关键词 肝肿瘤/病理学 转染 细胞系 肿瘤 肿瘤蛋白质类/遗传学
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Survivin基因沉默对胰腺癌细胞Patu8988增殖及其对吉西他滨敏感性的影响
2
作者 岑伟立 刘凤华 《中国医师杂志》 CAS 2012年第8期1055-1059,共5页
目的研究Survivin基因沉默对人胰腺癌Patu8988细胞增殖和对化疗药物吉西他滨敏感性的影响。方法设计合成Survivin的siRNA序列，Lipofectamine^TM 2000转染入Patu8988细胞。采用RT．PCR和Western blot检测Survivin在干扰后mRNA和蛋白的... 目的研究Survivin基因沉默对人胰腺癌Patu8988细胞增殖和对化疗药物吉西他滨敏感性的影响。方法设计合成Survivin的siRNA序列，Lipofectamine^TM 2000转染入Patu8988细胞。采用RT．PCR和Western blot检测Survivin在干扰后mRNA和蛋白的表达情况，利用流式细胞仪检测细胞周期。通过MTY法和细胞克隆形成试验法观察Survivin基因沉默后Patu8988细胞对吉西他滨的敏感性。结果Survivin基因沉默48h后，Patu8988细胞的Survivin基因和蛋白表达明显降低，基因表达分别为：对照组：0．78±0．03，空白组：0．82±0．06，实验组：0．52±0．05；蛋白表达分别为：对照组：0．77±0．21，空白组：0．77±0．26，实验组：0．57±0．03，差异有统计学意义（P〈0．05）。细胞周期被阻滞在G0／G1期，S期细胞数减少，其差异有统计学意义（P〈0．05）。Survivin基因沉默组细胞对吉西他滨的敏感性显著性增强。结论Survivin特异性siRNA能显著沉默Patu8988细胞Survivin基因，抑制细胞增殖，并增强Patu8988细胞对吉西他滨的敏感性。 展开更多
关键词 胰腺肿瘤 肿瘤蛋白质类/遗传学 基因沉默 细胞增殖 脱氧胞苷/类似物和
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