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纳豆激酶液态发酵工艺的优化 被引量：6
1
作者 任武贤 王星星 戴东升 《大豆科学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期128-130,共3页
对由纳豆芽孢杆菌(Bacillus natto)液体摇瓶发酵生产纳豆激酶的发酵条件进行优化,并对5L发酵罐放大工艺进行研究。结果表明:以4%(w/v)的可溶性淀粉作为碳源,种龄10 h,接种量3%(v/v),通气量0.5 vvm,发酵罐转速由220 r·min-1提升至70... 对由纳豆芽孢杆菌(Bacillus natto)液体摇瓶发酵生产纳豆激酶的发酵条件进行优化,并对5L发酵罐放大工艺进行研究。结果表明:以4%(w/v)的可溶性淀粉作为碳源,种龄10 h,接种量3%(v/v),通气量0.5 vvm,发酵罐转速由220 r·min-1提升至700 r·min-1,使发酵罐中溶解氧保持在20%以上,以上条件更有利于纳豆激酶的表达。条件优化后,摇瓶中纳豆激酶的表达量由低于1 000 IU·m L-1,提高到2 051.3 IU·m L-1(以尿激酶活为标准)。 展开更多
关键词 纳豆激酶 液态发酵工艺 碳源 溶解氧
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豆豉纤溶酶的纯化及其性质研究 被引量：76
2
作者 阎家麒 童岩 臧莹安 《药物生物技术》 CAS CSCD 2000年第3期149-152,共4页
由发酵大豆 (豆豉 )分离纯化一种活性强的纤溶酶 ,采用硫酸铵盐析 ,SephadexG 10 0和SephacrylS 2 0 0色谱纯化的纤溶酶 ,在SDS PAGE上呈一条蛋白带 ,Mr310 0 0 ,等电点 8 6± 0 2。纯化倍数 44倍 ,纯酶比活 310 2 0UK/mg ,活性回... 由发酵大豆 (豆豉 )分离纯化一种活性强的纤溶酶 ,采用硫酸铵盐析 ,SephadexG 10 0和SephacrylS 2 0 0色谱纯化的纤溶酶 ,在SDS PAGE上呈一条蛋白带 ,Mr310 0 0 ,等电点 8 6± 0 2。纯化倍数 44倍 ,纯酶比活 310 2 0UK/mg ,活性回收率 6 8%。由于该酶具有较强的催化纤维蛋白原溶解的作用 。 展开更多
关键词 豆鼓纤溶酶 纯化 分离 抗血栓药 纳豆激酶
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纳豆激酶液体发酵条件的优化 被引量：61
3
作者 谢秋玲 郭勇 《华南理工大学学报（自然科学版）》 EI CAS CSCD 北大核心 1999年第5期127-131,共5页
纳豆激酶是从日本传统食品纳豆中提取出来的一种具有溶血栓功能的酶．笔者从市售纳豆中分离出一株能产纳豆激酶的菌株，并对之进行液体培养，发现在ｐＨ７．０，接种量为２％，种龄２４ｈ，装液量１０ｍＬ／１００ｍＬ，碳源为木糖，浓... 纳豆激酶是从日本传统食品纳豆中提取出来的一种具有溶血栓功能的酶．笔者从市售纳豆中分离出一株能产纳豆激酶的菌株，并对之进行液体培养，发现在ｐＨ７．０，接种量为２％，种龄２４ｈ，装液量１０ｍＬ／１００ｍＬ，碳源为木糖，浓度为２％，氮源为大豆蛋白胨，浓度为３％的条件下，接种后第四天为产酶高峰期，最高产酶量可达到７８７．１尿激酶单位／ｍＬ发酵液． 展开更多
关键词 纳豆激酶 液体发酵 药理 激酶
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响应面法优化纳豆激酶液体发酵 被引量：58
4
作者 胡升 梅乐和 姚善泾 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期13-17,共5页
用响应面法对Bacillussubtilis液体发酵生产纳豆激酶的培养条件进行了优化。首先用Plackett Burman方法对相关影响因素的效应进行评价并筛选出了有显著正效应的胰蛋白胨和有显著负效应的种龄、发酵温度和Na2 HPO4浓度等 4个因素 ,其他... 用响应面法对Bacillussubtilis液体发酵生产纳豆激酶的培养条件进行了优化。首先用Plackett Burman方法对相关影响因素的效应进行评价并筛选出了有显著正效应的胰蛋白胨和有显著负效应的种龄、发酵温度和Na2 HPO4浓度等 4个因素 ,其他因素对纳豆激酶产量无显著影响。第 2步用最陡爬坡路径逼近最大产酶区域。最后由中心组合实验及响应面分析确定了主要影响因素的最佳条件。在优化培养条件下 ,液体发酵液中纳豆激酶浓度从10 0 5 73IU/mL提高到 13 14 48IU/mL。 展开更多
关键词 响应面法 优化 纳豆激酶 液体发酵 培养条件 P1ackett-Burman方法
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纳豆激酶的发酵工艺研究 被引量：31
5
作者 王正刚 丁贵平 蔡正森 《氨基酸和生物资源》 CAS 2001年第2期17-21,共5页
以实验室选育的纳豆菌— 6号 (Bacillusnatto 6)为出发菌株 ,研究其固液两种发酵条件对纳豆激酶溶栓活力的影响。研究表明 ,纳豆菌适于固体发酵 ,37℃下 2 4h ,其活力可达 1 60 0IU/g以上。
关键词 纳豆激酶 纳豆菌 发酵工艺 溶栓药物
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豆豉中纳豆杆菌的筛选和纳豆激酶的初步分离 被引量：34
6
作者 杨艳燕 李顺意 +2 位作者 高尚 闫达中 陈勇 《沈阳药科大学学报》 CAS CSCD 2001年第6期436-438,442,共4页
利用改良的培养基 纤维蛋白平板法 ,从我国传统食品豆豉中筛选出具有高纤溶活性的纳豆杆菌菌株 ;菌株液体发酵法制得粗酶液 ,采用沉淀法及柱层析等方法从发酵液中初步分离纳豆激酶 ;并应用体外溶栓实验考察分析了纳豆激酶的纤溶活性 。
关键词 纳豆杆菌 纳豆激酶 纤溶活性 豆鼓 纤维蛋白平板法
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纳豆、纳豆激酶与人体保健 被引量：39
7
作者 江晓 董明盛 《中国酿造》 CAS 北大核心 2001年第4期1-3,共3页
论述了纳豆与人体保健关系 ,特别是其中的功能因子—纳豆激酶特点及溶栓功能 ,指出利用微生物生产溶栓酶将是未来发展方向。
关键词 纳豆 纳豆激酶 溶栓功能 保健功能 保健食品
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日本纳豆与中国豆豉营养功能成分的研究进展 被引量：38
8
作者 宋永生 张炳文 《中国调味品》 CAS 北大核心 2004年第12期6-9,26,共5页
许多研究表明,日本纳豆含有独特的纳豆激酶,具有溶血栓、降血压、防治糖尿病等功能;中国豆豉的加工处理可以使游离氨基酸、维生素B1、维生素B2、可溶性糖的含量增加,可以使糖苷型大豆异黄酮转化为活性更高的游离型大豆异黄酮等,进一步... 许多研究表明,日本纳豆含有独特的纳豆激酶,具有溶血栓、降血压、防治糖尿病等功能;中国豆豉的加工处理可以使游离氨基酸、维生素B1、维生素B2、可溶性糖的含量增加,可以使糖苷型大豆异黄酮转化为活性更高的游离型大豆异黄酮等,进一步提高了豆豉的营养与保健功能。 展开更多
关键词 豆鼓 纳豆 营养成分 功能成分
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一种食源性纤溶酶(纳豆激酶)酶学性质的研究 被引量：27
9
作者 江晓 董明盛 江汉湖 《中国酿造》 CAS 北大核心 2002年第1期23-25,共3页
纳豆激酶是一种新型食源性纤溶酶 ,具有易于提取 ,无任何毒副作用 ,溶栓效果好 ,体内作用时间长等特点。实验以新鲜制备纳豆为原料 ,经生理盐水浸提 ,硫酸铵分级盐析 ,SephadexG -10 0层析获得纯纳豆激酶活性蛋白。实验表明 ,该酶分子量... 纳豆激酶是一种新型食源性纤溶酶 ,具有易于提取 ,无任何毒副作用 ,溶栓效果好 ,体内作用时间长等特点。实验以新鲜制备纳豆为原料 ,经生理盐水浸提 ,硫酸铵分级盐析 ,SephadexG -10 0层析获得纯纳豆激酶活性蛋白。实验表明 ,该酶分子量为2 80 0 0Da ,等电点为 9,在 6 0℃以下 ,pH 5～ 12均较稳定 ,其最适反应pH为 8,最适反应温度为 45℃ ,Mg2 + 和Co2 + 离子对酶活有激活作用 ,而Cu2 + 、Zn2 +和Al3 + 等离子对该酶有明显的抑制作用。 展开更多
关键词 纳豆激酶 纤溶活性 酶学性质 食品
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纳豆激酶的研究进展 被引量：31
10
作者 陈志文 徐尔尼 肖美燕 《食品科技》 CAS 北大核心 2002年第2期66-68,共3页
纳豆激酶有很强的溶血栓能力,跟传统的一些溶栓剂相比,具有安全性好、成本低、口服有效等优点,极有可能开发为新一代的溶栓剂。介绍了纳豆激酶的分离纯化技术、生化特性,并对纳豆激酶的活性测定方法、影响纳豆激酶稳定性的因素及提高纳... 纳豆激酶有很强的溶血栓能力,跟传统的一些溶栓剂相比,具有安全性好、成本低、口服有效等优点,极有可能开发为新一代的溶栓剂。介绍了纳豆激酶的分离纯化技术、生化特性,并对纳豆激酶的活性测定方法、影响纳豆激酶稳定性的因素及提高纳豆激酶酶产量的几种途径等最新研究成果进行了综述。 展开更多
关键词 纳豆激酶 活性测定 稳定性因素 高产量
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枯草杆菌DC-2纳豆激酶基因的克隆及其融合蛋白在E.coli中的表达 被引量：21
11
作者 彭勇 黄庆 张义正 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期559-563,共5页
纳豆激酶是一种纤维蛋白溶解酶 ,有望开发成为新型的溶栓药物 .从中国豆豉中分离的具有较强纤溶活性的枯草杆菌DC 2中提取总DNA ,根据纳豆激酶 (NK)基因序列设计引物 ,用PCR法扩增NK基因 .序列分析表明 ,NK基因成熟肽编码区含有 82 5bp ... 纳豆激酶是一种纤维蛋白溶解酶 ,有望开发成为新型的溶栓药物 .从中国豆豉中分离的具有较强纤溶活性的枯草杆菌DC 2中提取总DNA ,根据纳豆激酶 (NK)基因序列设计引物 ,用PCR法扩增NK基因 .序列分析表明 ,NK基因成熟肽编码区含有 82 5bp ,编码 2 75个氨基酸残基 ,与文献报道的序列分别有 93 4 %和 94 5 %同源性 .将NK基因插入载体pGEX 4T1构建表达质粒pGEX NK ,转化大肠杆菌JM10 9后 ,经 1mmol LIPTG诱导 4h ,发现大量NK融合蛋白表达 ,并形成包涵体 .SDS PAGE分析表明 ,NK融合蛋白作为包涵体的分子量为 5 3kD .凝胶自动扫描结果显示 ,NK融合蛋白约占菌体可溶性蛋白的 2 6 % . 展开更多
关键词 枯草杆菌DC-2 纳豆激酶基因 融合蛋白 基因克隆 基因表达 大肠杆菌
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纳豆激酶稳定性的研究 被引量：30
12
作者 董明盛 江晓 +1 位作者 刘诚 江汉湖 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期13-15,共3页
纳豆激酶是一种新型溶栓酶 ,具有溶栓效率高、药效时间长以及无毒副作用等优点。实验研究了pH、温度、金属离子以及某些有机物质对该酶稳定性的影响。实验表明 ,该酶在 4 5℃以下和 pH 7～ 9范围内酶活相对稳定 ;Mg2 +和Co2 +离子对酶... 纳豆激酶是一种新型溶栓酶 ,具有溶栓效率高、药效时间长以及无毒副作用等优点。实验研究了pH、温度、金属离子以及某些有机物质对该酶稳定性的影响。实验表明 ,该酶在 4 5℃以下和 pH 7～ 9范围内酶活相对稳定 ;Mg2 +和Co2 +离子对酶活有激活作用 ,而Cu2 +、Zn2 +和Al3+等离子对该酶有明显的抑制作用 ;牛血清蛋白、蛋白胨、明胶、甘油、丙二醇和海藻酸钠等能显著提高酶的耐热性 ,其中以明胶的作用最为明显。 展开更多
关键词 纳豆激酶 纤溶活性 稳定性 纳豆枯草杆菌 大豆发酵食品
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纳豆激酶粗制液对家兔溶血栓作用及其机制研究 被引量：30
13
作者 段智变 江汉湖 +3 位作者 张书霞 江晓 董名盛 赵晓燕 《营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期46-51,共6页
目的 :　观察纳豆激酶粗酶液体外、体内溶解血栓的作用。方法 :　 2 0 % Fe Cl3制造兔颈动脉血栓模型 ;1 8只日本大耳兔 ,随机分为 3组 ,即十二指肠肠腔注射纳豆激酶 (Nattokinase,NK)高、低剂量实验组 (分别 45 0 0 U/ kg、2 5 0 0 U/ ... 目的 :　观察纳豆激酶粗酶液体外、体内溶解血栓的作用。方法 :　 2 0 % Fe Cl3制造兔颈动脉血栓模型 ;1 8只日本大耳兔 ,随机分为 3组 ,即十二指肠肠腔注射纳豆激酶 (Nattokinase,NK)高、低剂量实验组 (分别 45 0 0 U/ kg、2 5 0 0 U/ kg)、生理盐水模型对照组。结果 :　体外试验表明 ,纳豆菌株 B.N.1 2液体发酵粗酶液作用血凝块 1 0 h、2 2 h后 ,溶解率分别为 78.2 3 %、98.1 6% ,对照组分别为 2 1 .43 %、2 3 .91 % (P<0 .0 5 ,P<0 .0 1 ) ;动物试验表明 ,与对照组相比 ,NK高剂量组注射 1 .0 h、1 .5 h后 ,凝血时间 (coagulation time,CT) (P<0 .0 5 )、凝血酶原时间 (prothrombintime,PT) (P<0 .0 5 )、凝血酶时间 (thrombin time,TT) (P<0 .0 1 )和活化的部分凝血活酶时间(activiated partial thrombopastin time,APTT) (P<0 .0 5 )均显著延长 ,注射 2 h后优球蛋白溶解时间 (euglobulinlysis time,ELT)和纤维蛋白原 (fibrinogen,FIG)含量显著降低 (P<0 .0 1、P<0 .0 5 ) ,纤维蛋白降解产物 (fibrinogen degradation products,FDP)含量明显增高 (P<0 .0 5 ) ,血浆D-二聚体 (D-dimer)呈阳性 ,病理组织切片表明肺静脉、肾小球毛细血管中无明显血栓 ,只有少量红细胞聚积 ;低剂量组 CT、PT和 展开更多
关键词 纳豆激酶 溶栓 纤溶 抗凝
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纳豆菌液体发酵生产纳豆激酶的研究 被引量：28
14
作者 鲍时翔 田艳 +2 位作者 黄惠琴 凌华 吕家森 《药物生物技术》 CAS CSCD 2002年第6期322-325,共4页
以纳豆菌BacillusnattostrainB -2 0 2 3为出发菌株 ,对其液体发酵生产纳豆激酶进行了研究。实验考察了氮源、碳源、离子组成、表面活性剂、发酵温度和初始pH值对纳豆菌产酶的影响。在优化发酵条件基础上 ,发酵 72h后通过纤维平板测活 ... 以纳豆菌BacillusnattostrainB -2 0 2 3为出发菌株 ,对其液体发酵生产纳豆激酶进行了研究。实验考察了氮源、碳源、离子组成、表面活性剂、发酵温度和初始pH值对纳豆菌产酶的影响。在优化发酵条件基础上 ,发酵 72h后通过纤维平板测活 ,其产酶量相当于 786尿激酶IU/ml。 展开更多
关键词 纳豆菌 液体发酵 生产 纳豆激酶
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纳豆激酶液体发酵条件的优化 被引量：32
15
作者 熊晓辉 梁剑光 熊强 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期62-66,共5页
以纳豆枯草芽孢杆菌 (Bacillussubtillisnatto ,BSN)为实验菌株 ,对其液体发酵生产进行了研究。实验考察了发酵条件 (温度、接种量、起始pH、装液量 )和培养基成分 (碳源、氮源、金属离子等 )对纳豆激酶产量的影响 ;在优化发酵条件和培... 以纳豆枯草芽孢杆菌 (Bacillussubtillisnatto ,BSN)为实验菌株 ,对其液体发酵生产进行了研究。实验考察了发酵条件 (温度、接种量、起始pH、装液量 )和培养基成分 (碳源、氮源、金属离子等 )对纳豆激酶产量的影响 ;在优化发酵条件和培养基的基础上 ,进行了 5L发酵罐放大实验 ,产酶量为 2 2 5 0IU/mL。 展开更多
关键词 纳豆枯草芽孢杆菌 液体发酵 纳豆激酶 工艺优化 产量 培养基 溶血栓药
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纳豆激酶的制备及其降血脂功效研究 被引量：35
16
作者 谢嵩 于宗琴 刘秀菊 《中国生化药物杂志》 CAS 2015年第1期17-20,共4页
目的利用纳豆芽孢杆菌制备纳豆激酶,并评价纳豆激酶的降血脂功效。方法采用酪蛋白平板初筛-摇瓶发酵复筛的方法从市售纳豆中筛选获得高产纳豆激酶的纳豆枯草芽孢杆菌菌株,采用纤维蛋白平板法测定纳豆激酶酶活,以大豆为原料,利用该菌株... 目的利用纳豆芽孢杆菌制备纳豆激酶,并评价纳豆激酶的降血脂功效。方法采用酪蛋白平板初筛-摇瓶发酵复筛的方法从市售纳豆中筛选获得高产纳豆激酶的纳豆枯草芽孢杆菌菌株,采用纤维蛋白平板法测定纳豆激酶酶活,以大豆为原料,利用该菌株制备纳豆激酶冻干粉。选取72只Wistar高脂模型大鼠进行降血脂功效研究,将其随机分为6组,分别为空白对照组、模型组、阳性对照组(普伐他汀钠片200 mg/kg)、纳豆激酶冻干粉高剂量组(360 mg/kg)、中剂量组(180 mg/kg)和低剂量组(90 mg/kg)。给药前后分别用自动生化分析仪测定总胆固醇(total cholesterol,TC)、甘油三酯(total triglyceride,TG)。结果成功发酵制得纳豆激酶冻干粉,大鼠喂养高脂饲料2周后其TC、TG水平较空白组显著升高(P<0.05),纳豆激酶冻干粉高、中、低剂量组及阳性对照组在给药6周后均能显著降低TC,TG水平(P<0.05)。结论本研究制备的纳豆激酶降血脂功效良好,为其作为降血脂药物和保健品奠定了基础。 展开更多
关键词 纳豆激酶 制备方法 降血脂
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一种潜在的溶血栓药物——纳豆激酶 被引量：28
17
作者 谢秋玲 郭勇 林剑 《药物生物技术》 CAS CSCD 2001年第1期51-53,共3页
纳豆中提取出纳豆激酶 (Nattokinase ,简称NK)具有溶栓作用还兼具促进体内组织纤溶酶型激活剂 (tPA)合成的功效。NK是一个分子量小的单链肽 ,可利用枯草杆菌进行液体发酵生产 ,因此有望成为新一代的口服溶血栓药物。
关键词 纳豆激酶 溶血栓药物 纤溶酶型激活剂 枯草杆菌 单链肽
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纳豆激酶的分离纯化及生化研究 被引量：23
18
作者 丁贵平 蔡正森 王正刚 《氨基酸和生物资源》 CAS 2001年第3期13-16,共4页
用固体发酵工艺制得的纳豆中含有大量溶栓活性成分———纳豆激酶。经过生理盐水浸提 ,(NH4 ) 2 SO4 分级沉淀 ,Sephadex柱层析等步骤 ,可以得一层析纯的纳豆激酶。
关键词 纳豆激酶 纳豆 分离纯化 生化性能 发酵工艺
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纳豆激酶的纯化及活力测定 被引量：19
19
作者 徐仲 赵晓东 +1 位作者 郑稚莺 宋玉庆 《生物技术》 CAS CSCD 1997年第4期16-18,共3页
利用SephadexG—100s柱凝胶层析法从纳豆菌（BacillusNatto）提取液中分离纯化出具有体外活性的纳豆激酶，并通过纤维蛋白平板法测定其纤溶活力，发现其具有较强的促进纤维凝块溶解的作用。
关键词 纳豆激酶 药物 纯化 活力测定
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纳豆激酶活性测定方法的研究 被引量：25
20
作者 熊迎新 尹宗宁 +1 位作者 杨超 孟延发 《药物生物技术》 CAS CSCD 2006年第2期140-143,共4页
从专属性、灵敏度及实际操作的可行性等几个方面,对TAME法和纤维蛋白平板法进行了比较研究。结果:TAME法灵敏度高,操作简便,适合作为常规的分析检测手段,而平板法虽专属性高,却操作繁琐,适宜于定性分析。结论:利用TAME法与平板法各自的... 从专属性、灵敏度及实际操作的可行性等几个方面,对TAME法和纤维蛋白平板法进行了比较研究。结果:TAME法灵敏度高,操作简便,适合作为常规的分析检测手段,而平板法虽专属性高,却操作繁琐,适宜于定性分析。结论:利用TAME法与平板法各自的优点,将两者结合起来作为纳豆激酶的活性检测方法,可达到高效灵敏、专属性强的目的。 展开更多
关键词 纳豆激酶 溶栓酶 活性测定方法
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