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维甲酸诱导后CK13基因在鼻咽癌中的表达研究
被引量:
4
1
作者
邱元正
肖健云
+3 位作者
田勇泉
赵素萍
曹利
李桂源
《中国耳鼻咽喉颅底外科杂志》
CAS
2003年第5期290-292,共3页
目的探讨维甲酸(retinoic acids,RA)对鼻咽癌细胞株HNE1生长及表型的作用,同时观察维甲酸诱导鼻咽癌细胞株HNE1后细胞角蛋白基因13(cytokeratin 13,CK13)表达情况。方法应用细胞培养的方法观察维甲酸诱导鼻咽癌细胞株HNE1细胞的生长状况...
目的探讨维甲酸(retinoic acids,RA)对鼻咽癌细胞株HNE1生长及表型的作用,同时观察维甲酸诱导鼻咽癌细胞株HNE1后细胞角蛋白基因13(cytokeratin 13,CK13)表达情况。方法应用细胞培养的方法观察维甲酸诱导鼻咽癌细胞株HNE1细胞的生长状况,利用Northern杂交技术分析维甲酸诱导鼻咽癌细胞株HNE1后CK13基因的表达。结果维甲酸能显著抑制鼻咽癌细胞的生长,抑制的强度取决于维甲酸的浓度和诱导持续时间,当维甲酸的浓度为1×10-4 M/L时,前4天下降约50%,第5天开始细胞停止增殖,细胞数逐渐减少,细胞逐渐老化死亡。维甲酸处理后的鼻咽癌细胞从典型的多边形变成扁平、细长,类似纤维细胞的形态。维甲酸诱导后的鼻咽癌细胞中CK13基因的表达明显上调,且与维甲酸的浓度有关。结论维甲酸能促进鼻咽癌细胞的分化,可能是通过上调CK13基因的表达而实现的。
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关键词
鼻咽癌
hne
l细胞
维甲酸
RA
细胞角蛋白基因
1
3
CKl3基因
基因表达
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职称材料
鼻咽癌上皮细胞株HNE1差异表达基因的分离与鉴定
被引量:
2
2
作者
张必成
周洁
+7 位作者
朱诗国
龚佳蕾
聂新民
吕红斌
何显锋
李小玲
胡赓熙
李桂源
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2003年第6期743-750,共8页
为了分离鼻咽癌差异表达基因 ,应用抑制性扣除杂交技术 ,在正向抑制性扣除杂交中 ,以鼻咽癌上皮细胞株HNE1cDNA作为检测子 ,以人胚鼻咽上皮细胞cDNA作为驱赶子 ;在反向抑制性扣除杂交中 ,以人胚鼻咽上皮细胞cDNA作为检测子 ,以鼻咽癌上...
为了分离鼻咽癌差异表达基因 ,应用抑制性扣除杂交技术 ,在正向抑制性扣除杂交中 ,以鼻咽癌上皮细胞株HNE1cDNA作为检测子 ,以人胚鼻咽上皮细胞cDNA作为驱赶子 ;在反向抑制性扣除杂交中 ,以人胚鼻咽上皮细胞cDNA作为检测子 ,以鼻咽癌上皮细胞株HNE1cDNA作为驱赶子 ,分别通过抑制性扣除杂交 ,构建了鼻咽癌上皮细胞株HNE1表达下调和表达上调的两个扣除cDNA文库 .从鼻咽癌相关的扣除cDNA文库中随机挑取 1 2 0 0个克隆 ,采用菌落PCR扩增其插入cDNA片段 ,自动点膜制备成cDNA微阵列膜 ,分别用鼻咽癌上皮细胞株HNE1、人胚鼻咽上皮mRNA经逆转录标记cDNA探针 ,分别与cDNA微阵列膜杂交 ,通过杂交信号的自动扫描分析 ,对杂交信号存在 5倍差异的克隆进行测序 ,获得了 1 0个鼻咽癌差异表达基因的cDNA片段 ,其中 3个为新基因序列 ,其GenBank登录号为 :AF5 1 0 1 88、AF5 1 0 1 89和AF5 1 0 1 90 ,7个代表已知基因序列 .采用RT PCR证实S1 0 0A8,CK1 9和RBP1基因在人胚鼻咽上皮中高表达而在鼻咽癌细胞株HNE1中低表达 .
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关键词
鼻咽癌细胞株
hne
l
抑制性扣除杂交
CDNA微阵列
差异表达基因
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职称材料
唑来膦酸影响人鼻咽癌HNE-1细胞增殖和凋亡的体外实验
被引量:
1
3
作者
王鸿彪
林文照
+3 位作者
林穗玲
李绪渊
林英城
林雯
《肿瘤防治研究》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第6期527-530,共4页
目的 观察唑来膦酸对鼻咽癌细胞系HNE-1的增殖抑制及凋亡诱导作用并探索其相关机制。方法MTT法检测体外细胞增殖能力;流式细胞仪分析细胞凋亡和细胞周期变化;原位末端标记法(TUNEL)检测DNA片段化以标记凋亡细胞;Real-time PCR和Western ...
目的 观察唑来膦酸对鼻咽癌细胞系HNE-1的增殖抑制及凋亡诱导作用并探索其相关机制。方法MTT法检测体外细胞增殖能力;流式细胞仪分析细胞凋亡和细胞周期变化;原位末端标记法(TUNEL)检测DNA片段化以标记凋亡细胞;Real-time PCR和Western blot检测凋亡相关基因Bcl-2、Bad、Bax及Caspase-9 mRNA和蛋白表达。结果 MTT显示不同浓度唑来膦酸处理组(2.5、5、10、20、40μmol/L)作用24 h,对HNE-1细胞增殖无抑制作用(P】0.05);作用48和72 h均能明显抑制HNE-1细胞增殖(P【0.05);但抑制增殖能力与药物浓度和作用时间未呈时效和量效关系(P】0.05)。10~40μmol/L唑来膦酸处理后,48和72 h的早期凋亡率明显高于对照组;S期细胞比例较对照组升高(P【0.01);TUNEL法染色显示,作用72 h后凋亡细胞明显增多(P【0.05);Real-time PCR和Western blot显示,唑来膦酸下调Bcl-2 mRNA和蛋白的表达,同时上调Bad、Bax及Caspase-9 mRNA和蛋白表达。结论 唑来膦酸可以抑制HNE-1细胞增殖,诱导HNE-1细胞凋亡,可能与促进Bad、Bax及Caspase-9的表达并降低Bcl-2的表达有关。
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关键词
唑来膦酸
hne
-
1
细胞
凋亡
增殖
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职称材料
题名
维甲酸诱导后CK13基因在鼻咽癌中的表达研究
被引量:
4
1
作者
邱元正
肖健云
田勇泉
赵素萍
曹利
李桂源
机构
中南大学湘雅医院耳鼻咽喉科
中南大学湘雅医学院肿瘤研究所
出处
《中国耳鼻咽喉颅底外科杂志》
CAS
2003年第5期290-292,共3页
基金
国家863项自(102-10-05)
973国家重点项目资助
湖南省自然科学基金资助(99JJY20034)
文摘
目的探讨维甲酸(retinoic acids,RA)对鼻咽癌细胞株HNE1生长及表型的作用,同时观察维甲酸诱导鼻咽癌细胞株HNE1后细胞角蛋白基因13(cytokeratin 13,CK13)表达情况。方法应用细胞培养的方法观察维甲酸诱导鼻咽癌细胞株HNE1细胞的生长状况,利用Northern杂交技术分析维甲酸诱导鼻咽癌细胞株HNE1后CK13基因的表达。结果维甲酸能显著抑制鼻咽癌细胞的生长,抑制的强度取决于维甲酸的浓度和诱导持续时间,当维甲酸的浓度为1×10-4 M/L时,前4天下降约50%,第5天开始细胞停止增殖,细胞数逐渐减少,细胞逐渐老化死亡。维甲酸处理后的鼻咽癌细胞从典型的多边形变成扁平、细长,类似纤维细胞的形态。维甲酸诱导后的鼻咽癌细胞中CK13基因的表达明显上调,且与维甲酸的浓度有关。结论维甲酸能促进鼻咽癌细胞的分化,可能是通过上调CK13基因的表达而实现的。
关键词
鼻咽癌
hne
l细胞
维甲酸
RA
细胞角蛋白基因
1
3
CKl3基因
基因表达
Keywords
nasopharyngeal
carcinoma
cell
line
hne
1
Retinoic
acid
Cytokerotin
1
3
gene
expression
分类号
R739.63 [医药卫生—肿瘤]
R730.2 [医药卫生—临床医学]
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职称材料
题名
鼻咽癌上皮细胞株HNE1差异表达基因的分离与鉴定
被引量:
2
2
作者
张必成
周洁
朱诗国
龚佳蕾
聂新民
吕红斌
何显锋
李小玲
胡赓熙
李桂源
机构
中南大学湘雅医学院肿瘤研究所
中国科学院上海生物化学和细胞生物学研究所
出处
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2003年第6期743-750,共8页
基金
国家 8 63项目 (No .2 0 0 1AA2 2 10 3 1)
973重点项目 (No .G19980 5 10 0 8)资助~~
文摘
为了分离鼻咽癌差异表达基因 ,应用抑制性扣除杂交技术 ,在正向抑制性扣除杂交中 ,以鼻咽癌上皮细胞株HNE1cDNA作为检测子 ,以人胚鼻咽上皮细胞cDNA作为驱赶子 ;在反向抑制性扣除杂交中 ,以人胚鼻咽上皮细胞cDNA作为检测子 ,以鼻咽癌上皮细胞株HNE1cDNA作为驱赶子 ,分别通过抑制性扣除杂交 ,构建了鼻咽癌上皮细胞株HNE1表达下调和表达上调的两个扣除cDNA文库 .从鼻咽癌相关的扣除cDNA文库中随机挑取 1 2 0 0个克隆 ,采用菌落PCR扩增其插入cDNA片段 ,自动点膜制备成cDNA微阵列膜 ,分别用鼻咽癌上皮细胞株HNE1、人胚鼻咽上皮mRNA经逆转录标记cDNA探针 ,分别与cDNA微阵列膜杂交 ,通过杂交信号的自动扫描分析 ,对杂交信号存在 5倍差异的克隆进行测序 ,获得了 1 0个鼻咽癌差异表达基因的cDNA片段 ,其中 3个为新基因序列 ,其GenBank登录号为 :AF5 1 0 1 88、AF5 1 0 1 89和AF5 1 0 1 90 ,7个代表已知基因序列 .采用RT PCR证实S1 0 0A8,CK1 9和RBP1基因在人胚鼻咽上皮中高表达而在鼻咽癌细胞株HNE1中低表达 .
关键词
鼻咽癌细胞株
hne
l
抑制性扣除杂交
CDNA微阵列
差异表达基因
Keywords
nasopharyngeal
carcinoma
cell
line
hne
1,
suppression
subtractive
hybridization,
cDNA
microarray,
differentially
expressed
genes
分类号
R739.63 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
唑来膦酸影响人鼻咽癌HNE-1细胞增殖和凋亡的体外实验
被引量:
1
3
作者
王鸿彪
林文照
林穗玲
李绪渊
林英城
林雯
机构
汕头大学医学院附属肿瘤医院内科
出处
《肿瘤防治研究》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第6期527-530,共4页
基金
广东省科技计划资助项目(2011B031800190)
文摘
目的 观察唑来膦酸对鼻咽癌细胞系HNE-1的增殖抑制及凋亡诱导作用并探索其相关机制。方法MTT法检测体外细胞增殖能力;流式细胞仪分析细胞凋亡和细胞周期变化;原位末端标记法(TUNEL)检测DNA片段化以标记凋亡细胞;Real-time PCR和Western blot检测凋亡相关基因Bcl-2、Bad、Bax及Caspase-9 mRNA和蛋白表达。结果 MTT显示不同浓度唑来膦酸处理组(2.5、5、10、20、40μmol/L)作用24 h,对HNE-1细胞增殖无抑制作用(P】0.05);作用48和72 h均能明显抑制HNE-1细胞增殖(P【0.05);但抑制增殖能力与药物浓度和作用时间未呈时效和量效关系(P】0.05)。10~40μmol/L唑来膦酸处理后,48和72 h的早期凋亡率明显高于对照组;S期细胞比例较对照组升高(P【0.01);TUNEL法染色显示,作用72 h后凋亡细胞明显增多(P【0.05);Real-time PCR和Western blot显示,唑来膦酸下调Bcl-2 mRNA和蛋白的表达,同时上调Bad、Bax及Caspase-9 mRNA和蛋白表达。结论 唑来膦酸可以抑制HNE-1细胞增殖,诱导HNE-1细胞凋亡,可能与促进Bad、Bax及Caspase-9的表达并降低Bcl-2的表达有关。
关键词
唑来膦酸
hne
-
1
细胞
凋亡
增殖
Keywords
Zoledronic
acid
Human
nasopharyngeal
carcinoma
cell
line
(
hne
-1)
Apoptosis
Proliferation
分类号
R73 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
维甲酸诱导后CK13基因在鼻咽癌中的表达研究
邱元正
肖健云
田勇泉
赵素萍
曹利
李桂源
《中国耳鼻咽喉颅底外科杂志》
CAS
2003
4
下载PDF
职称材料
2
鼻咽癌上皮细胞株HNE1差异表达基因的分离与鉴定
张必成
周洁
朱诗国
龚佳蕾
聂新民
吕红斌
何显锋
李小玲
胡赓熙
李桂源
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2003
2
下载PDF
职称材料
3
唑来膦酸影响人鼻咽癌HNE-1细胞增殖和凋亡的体外实验
王鸿彪
林文照
林穗玲
李绪渊
林英城
林雯
《肿瘤防治研究》
CAS
CSCD
北大核心
2014
1
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职称材料
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