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盐胁迫下宁夏枸杞Na^+吸收及Na^+/H^+转运蛋白与H^+-ATPase基因表达的研究 被引量：7
1
作者 梁敏 许兴 +4 位作者 丁向真 李志英 郑蕊 杨淑娟 毛桂莲 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期745-751,共7页
为从分子水平揭示宁夏枸杞钠的吸收积累机理,本试验采用原子吸收分光光度法和实时荧光定量PCR(RT-qPCR)方法,对盐胁迫下宁夏枸杞根中Na^+、K^+含量以及质膜和液泡膜Na^+/H^+转运蛋白与H^+-ATPase基因表达水平进行测定分析。结果表明,相... 为从分子水平揭示宁夏枸杞钠的吸收积累机理,本试验采用原子吸收分光光度法和实时荧光定量PCR(RT-qPCR)方法,对盐胁迫下宁夏枸杞根中Na^+、K^+含量以及质膜和液泡膜Na^+/H^+转运蛋白与H^+-ATPase基因表达水平进行测定分析。结果表明,相同胁迫时间下,随着NaCl处理浓度的增加,枸杞根系中Na^+浓度总体呈缓慢增加趋势,K^+含量呈先增加后减少趋势,Na^+/K^+比值呈先减少后增加趋势;编码质膜和液泡膜的Na^+/H^+转运蛋白基因LbSOS1、LbNHX1以及液泡膜H^+-ATPase基因LbVHA-C1表达量均呈升高趋势,质膜H^+-ATPase基因LbHA1表达量呈先升高后降低趋势。相同NaCl处理浓度下,随着胁迫时间的延长,Na^+含量总体呈增加趋势,K^+含量呈先增加后减少趋势,Na^+/K^+比值呈增加趋势。LbSOS1、LbNHX1表达量总体呈先升高后降低趋势,LbVHA-C1、LbHA1表达量总体呈降低的趋势。相关性分析显示,不同胁迫时间下,枸杞根中LbSOS1、LbNHX1、LbVHA-C1和LbHA1表达量与Na^+含量存在一定的正相关或负相关。上述结果表明,在低浓度NaCl胁迫时,维持枸杞体内较高的K^+/Na^+比值是宁夏枸杞耐盐的主要方式之一,同时也说明在胁迫初期,质膜和液泡膜的Na^+/H^+转运蛋白与H^+-ATPase参与了枸杞细胞中Na^+及时排出胞外和区隔于液泡,从而保持了根细胞内Na^+的稳定性。此外,随着胁迫时间的延长和NaCl处理浓度的增加,LbSOS1、LbNHX1、LbVHA-C1和LbHA1的表达水平均降低,而Na^+积累量大幅增加,致使枸杞抗盐性降低。本研究揭示了宁夏枸杞的耐盐机理,为利用宁夏枸杞改良宁夏大面积盐碱地提供了理论依据。 展开更多
关键词 盐胁迫 实时荧光定量PCR ^^na^+含量 ^^na^+/h^+转运蛋白 ^^h^+-ATPASE
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番茄LeNHX3基因的生物信息学分析 被引量：6
2
作者 范晶 胥成浩 +2 位作者 张西玉 刘超 黄明远 《湖北农业科学》 北大核心 2009年第12期2917-2921,共5页
应用生物信息学的方法和工具对番茄LeNHX3蛋白质的理化性质、跨膜区域、疏水性/亲水性、二级结构、结构功能域、功能分类和同源性进行了分析,结果表明,番茄LeNHX3蛋白为疏水性稳定蛋白,包含一个高度保守的具有氨氯吡嗪咪结合位点的LFFIY... 应用生物信息学的方法和工具对番茄LeNHX3蛋白质的理化性质、跨膜区域、疏水性/亲水性、二级结构、结构功能域、功能分类和同源性进行了分析,结果表明,番茄LeNHX3蛋白为疏水性稳定蛋白,包含一个高度保守的具有氨氯吡嗪咪结合位点的LFFIYLLPPI结构功能域,相对分子量为59.4kD,等电点为8.54,可能存在10个跨膜区域,蛋白质二级结构中的主要构成元件是α-螺旋和不规则卷曲;蛋白质同源性分析后,发现番茄LeNHX3蛋白和紫高杯花、矮牵牛花2种植物的Na+/H+反转运蛋白高度同源,序列相似性为90%。 展开更多
关键词 番茄 LeNhX3基因 na+/h+反转运蛋白 生物信息学
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联合抑制人肺腺癌细胞的MCT1基因及NHE1基因表达对其增殖生长的影响
3
作者 张桂芝 黄桂君 +2 位作者 厉为良 吴国明 钱桂生 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2002年第7期719-723,共5页
背景与目的:以往的研究中我们发现,用反义基因分别抑制肿瘤细胞膜上的单羧酸转运蛋白第1亚型(monocarboxylatetransporter-1,MCT1)基因和Na+/H+交换蛋白第1亚型(Na+/H+exchanger-1,NHE1)基因的表达,可使肿瘤细胞内pH(intracellularpH,p... 背景与目的:以往的研究中我们发现,用反义基因分别抑制肿瘤细胞膜上的单羧酸转运蛋白第1亚型(monocarboxylatetransporter-1,MCT1)基因和Na+/H+交换蛋白第1亚型(Na+/H+exchanger-1,NHE1)基因的表达,可使肿瘤细胞内pH(intracellularpH,pHi)降低,细胞酸化死亡。而同时抑制这两种基因的表达,对肿瘤细胞pHi及其增殖生长的影响尚不清楚。方法:用电穿孔法将MCT1基因及NHE1基因相应的反义基因表达载体pLXSN-MCT1和pLXSN-NHE1同时转染于人肺腺癌细胞系A549中,经G418筛选阳性克隆,用PCR及RT-PCR方法鉴定MCT1和NHE1的反义基因与A549基因组的整合。pHi及乳酸含量用分光光度法测定;细胞生长周期用流式细胞仪测定;并将联合转染反义基因的细胞、转染MCT1反义基因的细胞、A549细胞分别接种于裸鼠皮下,观察移植瘤的生长。结果:与A549细胞比较,联合转染反义基因的细胞pHi降低、乳酸显著升高(P<0.001),细胞周期阻滞在G0-G1期。接种联合转染反义基因细胞和转染MCT1反义基因细胞的裸鼠移植瘤明显比接种A549细胞的轻且小(P<0.001)。结论:MCT1基因和NHE1基因可能通过影响pHi对肿瘤细胞的增殖生长起重要的调节作用。 展开更多
关键词 MCT1基因 NhE1基因 单羧酸转运蛋白基因 ^^na^+/h^+交换蛋白基因 肺肿瘤 基因表达 肿瘤细胞增殖
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