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北美海蓬子Na^+/H^+逆向运输蛋白基因的克隆及拟南芥转化分析 被引量：9
1
作者 肖前谷 叶妙水 +2 位作者 钟克亚 胡新文 郭建春 《分子植物育种》 CAS CSCD 2007年第5期619-624,共6页
Na+/H+逆向运输蛋白在植物耐盐性方面起着极为重要的作用。根据在不同植物中功能相同的同源基因保守序列设计引物,通过RT-PCR方法从真盐生植物北美海蓬子(Salicornia Bigelovii Torr.)中克隆出包括有1683bp的完整编码区在内的2591bp(Gen... Na+/H+逆向运输蛋白在植物耐盐性方面起着极为重要的作用。根据在不同植物中功能相同的同源基因保守序列设计引物,通过RT-PCR方法从真盐生植物北美海蓬子(Salicornia Bigelovii Torr.)中克隆出包括有1683bp的完整编码区在内的2591bp(GenBank登陆号为DQ157454)的Na+/H+逆向运输蛋白基因(SbNHX1)cDNA序列。将该基因编码区序列构建到植物表达载体pVKH-35S-pA上,并通过农杆菌介导转化到模式植物拟南芥(Arabidopsis thaliana)中,得到T3代转入单基因种子。200mmol/L的NaCl胁迫培养结果显示,转基因拟南芥在200mmol/L的NaCl胁迫条件下生长状况好于野生型植株,植物表现有一定的耐盐性。 展开更多
关键词 北美海蓬子 ^^na^+/h^+逆向运输蛋白 转基因拟南芥 耐盐性
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北美海蓬子SbNHX1基因耐盐性及功能结构域分析 被引量：3
2
作者 刘钢 肖前谷 +1 位作者 段瑞军 郭建春 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期874-881,共8页
对从北美海蓬子中分离的Na+/H+逆向转运蛋白基因SbNHX1进行了耐盐性及功能结构域分析.利用套叠PCR技术去除SbNHX1基因C末端162个核苷酸,得到SbNHX1-C基因,然后将SbNHX1、SbNHX1-C和拟南芥Na+/H+逆向转运蛋白基因AtNHX1分别插入pET22b(+... 对从北美海蓬子中分离的Na+/H+逆向转运蛋白基因SbNHX1进行了耐盐性及功能结构域分析.利用套叠PCR技术去除SbNHX1基因C末端162个核苷酸,得到SbNHX1-C基因,然后将SbNHX1、SbNHX1-C和拟南芥Na+/H+逆向转运蛋白基因AtNHX1分别插入pET22b(+)表达载体,转化大肠杆菌B菌株,进行各种金属盐离子胁迫分析.结果表明,北美海蓬子Na+/H+逆向转运蛋白基因SbNHX1只对Na+、K+离子有抗性,且耐盐性强于拟南芥Na+/H+逆向转运蛋白基因AtNHX1.缺失C末端的SbNHX1-C基因对Na+、K+离子胁迫无抗性,说明北美海蓬子Na+/H+逆向转运蛋白基因SbNHX1的耐盐作用与该基因C末端1353bp至1514bp的序列密切相关. 展开更多
关键词 北美海蓬子 na+/h+逆向运输蛋白 盐胁迫 大肠杆菌
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苦豆子液泡膜Na^＋／H^＋逆向运输蛋白基因SaNHX1的克隆与生物信息学分析 被引量：3
3
作者 柏丹阳 王彦芹 李志军 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期727-733,共7页
苦豆子(Sophora alopecuroides L.)因其具有很强的耐盐、耐旱、耐高温等功能广泛分布于干旱荒漠区。研究报道植物液泡膜Na^+/H^+逆向运输蛋白对植株耐盐性及耐旱性等具有重要作用。本研究首先对苦豆子种子进行萌发处理,采用改良的异硫... 苦豆子(Sophora alopecuroides L.)因其具有很强的耐盐、耐旱、耐高温等功能广泛分布于干旱荒漠区。研究报道植物液泡膜Na^+/H^+逆向运输蛋白对植株耐盐性及耐旱性等具有重要作用。本研究首先对苦豆子种子进行萌发处理,采用改良的异硫氰酸胍法提取苦豆子的总RNA,利用逆转录试剂盒获得苦豆子的cDNA,通过同源克隆法获得了苦豆子液泡膜Na^+/H^+逆向运输蛋白基因的cDNA全长,并对其氨基酸序列及可能的功能进行了生物信息学分析。结果显示,所获得的基因编码548个氨基酸,与豆科植物大豆GlNHX1的一致性最高为86%;二级结构预测显示其具有10个跨膜结构,不含信号肽;对其3D结构预测显示该蛋白是一个富含α螺旋的桶装蛋白质。这些预测结果表明本研究所克隆的基因为苦豆子液泡膜逆向运输蛋白Na^+/H^+基因,这将为荒漠植物苦豆子抗逆基因资源的发掘利用奠定基础。 展开更多
关键词 苦豆子 ^^na^+/h^+逆向运输蛋白 生物信息学分析
原文传递
木榄细胞膜Na^+/H^+逆向运输蛋白BgSOS1功能的初步验证 被引量：2
4
作者 荆海瑜 周扬 +3 位作者 郭晓颖 从心黎 黄绵佳 江行玉 《海南大学学报（自然科学版）》 CAS 2014年第3期252-259,269,共9页
根据木榄BgSOS1的序列信息从木榄中克隆到了全长的BgSOS1基因,该片段包含1个3 462 bp的开放阅读框,可编码1 153个氨基酸的多肽.生物信息学的分析结果表明:该氨基酸序列所编码的蛋白与拟南芥、番茄、水稻、小麦、盐芥和杨树的SOS1蛋白高... 根据木榄BgSOS1的序列信息从木榄中克隆到了全长的BgSOS1基因,该片段包含1个3 462 bp的开放阅读框,可编码1 153个氨基酸的多肽.生物信息学的分析结果表明:该氨基酸序列所编码的蛋白与拟南芥、番茄、水稻、小麦、盐芥和杨树的SOS1蛋白高度同源,同源性分别为63.86%,66.61%,62.18%,60.19%,63.97%和75.97%;BgSOS1蛋白的N端含有12个跨膜的结构域,C端为1个较长的胞内结构域.尽管单个BgSOS1的表达并不能提高转基因酵母的抗盐性,但SOS1,SOS2和SOS3共表达的酵母,其抗盐性明显提高,这表明SOS2/SOS3蛋白激酶复合体可能通过调控BgSOS1的Na+/H+交换功能来提高木榄的抗盐机理. 展开更多
关键词 ^^na^+/h^+逆向运输蛋白 细胞膜 木榄 抗盐机理
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