Na+/H+逆向转运蛋白调节细胞内的离子内平衡,在植物耐盐性起重要的作用.本研究克隆一个大豆Na+/H+逆向转运蛋白的同源基因GmNHX2,编码一条长534氨基酸的多肽并预测有10个可能的跨膜结构域.GmNHX2在大豆的根、茎和叶中表达,但在根中的丰...Na+/H+逆向转运蛋白调节细胞内的离子内平衡,在植物耐盐性起重要的作用.本研究克隆一个大豆Na+/H+逆向转运蛋白的同源基因GmNHX2,编码一条长534氨基酸的多肽并预测有10个可能的跨膜结构域.GmNHX2在大豆的根、茎和叶中表达,但在根中的丰度最高,受NaCl和PEG(polyethylene glycol)处理的诱导表达.GmNHX2与LeNHX2和AtNHX2的序列相似性高于AtNHX1和AtSOS1.尽管系统发育分析将GmNHX2与细胞器(液泡和囊泡)逆向转运蛋白聚成一类,但亚细胞定位的结果表明GmNHX2-EGFP(enhanced green flurescent protein)融合蛋白可能位于植物细胞的质膜或细胞器膜上.与野生型植株相比,异源表达GmNHX2的拟南芥植株在萌发和幼苗期都更加耐高浓度的NaCl.这些结果暗示,GmNHX2是一个Na+/H+逆向转运蛋白同源物,可能在盐胁迫下执行调节离子内平衡的功能.展开更多
利用RACE(rapid-amplification of cDNA end)方法,以大豆叶片提取总的RNA为模板克隆了大豆Na+/H+逆向转运蛋白(Glycine max Na+/H+antiporter,GmNHX)基因,并将其连接到表达载体PBI121中,构建重组表达载体PBI121-NHX3.分析结果表明:该基...利用RACE(rapid-amplification of cDNA end)方法,以大豆叶片提取总的RNA为模板克隆了大豆Na+/H+逆向转运蛋白(Glycine max Na+/H+antiporter,GmNHX)基因,并将其连接到表达载体PBI121中,构建重组表达载体PBI121-NHX3.分析结果表明:该基因的ORF为1 503 bp,推测编码501个氨基酸.与所选取的10种植物同类蛋白氨基酸序列进行对比,一致性为72%～94%,并具有真核生物单价阳离子(氢离子)反向转运蛋白典型的结构域,将该基因命名为GmNHX3,GenBank接收号为JN872904.通过PCR和酶切鉴定,PBI121-NHX3构建成功.展开更多
文摘Na+/H+逆向转运蛋白调节细胞内的离子内平衡,在植物耐盐性起重要的作用.本研究克隆一个大豆Na+/H+逆向转运蛋白的同源基因GmNHX2,编码一条长534氨基酸的多肽并预测有10个可能的跨膜结构域.GmNHX2在大豆的根、茎和叶中表达,但在根中的丰度最高,受NaCl和PEG(polyethylene glycol)处理的诱导表达.GmNHX2与LeNHX2和AtNHX2的序列相似性高于AtNHX1和AtSOS1.尽管系统发育分析将GmNHX2与细胞器(液泡和囊泡)逆向转运蛋白聚成一类,但亚细胞定位的结果表明GmNHX2-EGFP(enhanced green flurescent protein)融合蛋白可能位于植物细胞的质膜或细胞器膜上.与野生型植株相比,异源表达GmNHX2的拟南芥植株在萌发和幼苗期都更加耐高浓度的NaCl.这些结果暗示,GmNHX2是一个Na+/H+逆向转运蛋白同源物,可能在盐胁迫下执行调节离子内平衡的功能.
文摘利用RACE(rapid-amplification of cDNA end)方法,以大豆叶片提取总的RNA为模板克隆了大豆Na+/H+逆向转运蛋白(Glycine max Na+/H+antiporter,GmNHX)基因,并将其连接到表达载体PBI121中,构建重组表达载体PBI121-NHX3.分析结果表明:该基因的ORF为1 503 bp,推测编码501个氨基酸.与所选取的10种植物同类蛋白氨基酸序列进行对比,一致性为72%～94%,并具有真核生物单价阳离子(氢离子)反向转运蛋白典型的结构域,将该基因命名为GmNHX3,GenBank接收号为JN872904.通过PCR和酶切鉴定,PBI121-NHX3构建成功.
