应用自然组织谐波和彩色多普勒血流显像技术评价集束电极射频治疗肝癌的早期效果 被引量：29

1

作者 赵柏山 罗淑荣 +1 位作者 段云友 袁丽君 《中国医学影像技术》 CSCD 北大核心 2000年第2期135-137,共3页

目的　NTHI及CDFI评价肝癌射频治疗术早期效果。方法　应用NTHI和CDFI对行集束电极射频治疗肝癌的 3 5例患者 4 7个肿块治疗前后 1周瘤体的形态学及血供进行了观察。结果　射频术后 1周 ,3 5例患者 4 7个肿块中 3 1个体积缩小 ,9个肿块... 目的　NTHI及CDFI评价肝癌射频治疗术早期效果。方法　应用NTHI和CDFI对行集束电极射频治疗肝癌的 3 5例患者 4 7个肿块治疗前后 1周瘤体的形态学及血供进行了观察。结果　射频术后 1周 ,3 5例患者 4 7个肿块中 3 1个体积缩小 ,9个肿块大小变化不明显 ,7个肿块较术前增大。低回声肿块变成等回声或强回声肿块 ,强回声肿块无变化或变化不均质强回声。术前 4 2个肿块可测及血流信号 ,术后 19个血流减少 ,14个完全消失。结论　NTHI和CDFI对观察射频疗效有重要的意义。 展开更多

关键词 肝癌 射频治疗术 nthi CDFI 治疗

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小柴胡汤对NTHi诱导的肺部炎症的影响 被引量：17

2

作者 陈平安 黄家望 +4 位作者 廖灿 袁娉 谢希 陈俊炜 程莉娟 《中医药学报》 CAS 2019年第4期28-32,共5页

目的:探讨小柴胡汤干预不可分型嗜血流感杆菌(NTHi)诱导肺部炎症的药效机制。方法:①建立NTHi感染小鼠模型,实验同步设生理盐水(NS)组、NTHi组、氨苄西林(Amp)组和小柴胡汤(XCH)组,灌胃给予药物7天后,处理动物,进行指标检测;②检测小鼠... 目的:探讨小柴胡汤干预不可分型嗜血流感杆菌(NTHi)诱导肺部炎症的药效机制。方法:①建立NTHi感染小鼠模型,实验同步设生理盐水(NS)组、NTHi组、氨苄西林(Amp)组和小柴胡汤(XCH)组,灌胃给予药物7天后,处理动物,进行指标检测;②检测小鼠体重、肺指数及免疫器官指数;③HE染色观察小鼠肺组织病理变化;④ELISA法检测小鼠血清中IL-1β、IL-6、GCSF、TNF-α含量水平。结果:①与NC组比较,NTHi组小鼠精神萎靡,不好动,毛发竖起,皮肤松弛,经常蜷缩在一起,饮食量少;与NTHi组比较,经小柴胡汤或氨苄西林药物干预后,小鼠状态得到不同程度地缓解;②HE染色观察表明:小柴胡汤和氨苄西林均能不同程度改善由NTHi干预引起的肺部间质增生现象及炎症渗出;③ELISA结果表明:小柴胡汤和氨苄西林药物均能减少NTHi诱导所致血清中炎性细胞因子的生成。结论:小柴胡汤可通过抑制炎性细胞因子IL-1β、IL-6、TNF-α和G-CSF的分泌,改善小鼠肺组织损伤和炎症程度,最终对NTHi诱导肺部炎症能产生有效的治疗作用。 展开更多

关键词 不可分型嗜血流血杆菌 肺部炎症 小柴胡汤 炎性细胞因子

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自然组织谐波成像在肝癌诊断中的初步应用 被引量：8

3

作者 罗淑荣 段云友 赵柏山 《中国医学影像技术》 CSCD 北大核心 2000年第4期297-298,共2页

目的　评价自然组织谐波成像在肝癌诊断中的价值。方法　我们应用自然组织谐波成像和传统的基波成像对 5 3例经病理证实的肝癌患者的声像图进行对比分析。结果　自然组织谐波成像能明显清晰地显示肿瘤的轮廓 ,提高对细小病变的分辨率 ,... 目的　评价自然组织谐波成像在肝癌诊断中的价值。方法　我们应用自然组织谐波成像和传统的基波成像对 5 3例经病理证实的肝癌患者的声像图进行对比分析。结果　自然组织谐波成像能明显清晰地显示肿瘤的轮廓 ,提高对细小病变的分辨率 ,有助于对弥漫性肝癌 ,不典型肝癌的显示。结论　同常规基波超声技术相比 ,自然组织谐波成像能提高肝癌诊断的准确性。 展开更多

关键词 肝癌 超声显像 nthi 诊断

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不可分型流感嗜血杆菌致病机制及耐药 被引量：7

4

作者 马玉帅 陈蕊 +1 位作者 赵颖 张玉妥 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2020年第2期379-384,共6页

作为全球两大高发疾病—儿童中耳炎和成人慢性阻塞性肺疾病的急性加重的主要病原菌,不可分型流感嗜血杆菌(NTHi)日益受到国内外学者的关注,然而目前,NTHi感染致病的相关机制及耐药并未得到全面地阐释,在一定程度上影响了临床对NTHi感染... 作为全球两大高发疾病—儿童中耳炎和成人慢性阻塞性肺疾病的急性加重的主要病原菌,不可分型流感嗜血杆菌(NTHi)日益受到国内外学者的关注,然而目前,NTHi感染致病的相关机制及耐药并未得到全面地阐释,在一定程度上影响了临床对NTHi感染的有效控制。该文综合分析NTHi引起的主要感染,从以黏附作用为基础的定植策略、生物膜的形成、免疫逃逸和细菌耐药4个方面对NTHi感染致病的相关机制及耐药作一综述,以期为研究NTHi疫苗和特异抗感染药物提供理论依据。 展开更多

关键词 不可分型流感嗜血杆菌 黏附作用 生物膜 免疫逃逸 细菌耐药

原文传递

364例不定型流感嗜血杆菌呼吸道感染分析 被引量：3

5

作者 刘东华 胡艳华 王少敏 《安徽医学》 2014年第9期1264-1266,共3页

目的了解本地区呼吸道不定型流感嗜血杆菌(NTHi)感染现状及耐药性。方法对本地区2009年1月至2011年12月门诊及住院患者的呼吸道标本进行细菌培养、菌种鉴定及药敏试验,并对结果进行统计、分析。结果 4 862例儿童患者分离出NTHi 208株,... 目的了解本地区呼吸道不定型流感嗜血杆菌(NTHi)感染现状及耐药性。方法对本地区2009年1月至2011年12月门诊及住院患者的呼吸道标本进行细菌培养、菌种鉴定及药敏试验,并对结果进行统计、分析。结果 4 862例儿童患者分离出NTHi 208株,分离率为4.28%;6 920例成年患者分离出NTHi 156株,分离率为2.25%。β-内酰胺酶平均产酶率为34.89%,成年组对氯霉素、复方磺胺甲噁唑、氟喹诺酮类的耐药率显著高于儿童组,儿童组对氨苄西林的耐药率显著高于成年组,对其他药物耐药率均很低。结论 NTHi在呼吸道感染占非常重要的地位,治疗上应根据药敏结果结合患者实际情况,合理选用抗菌药物,以期达到良好的疗效。 展开更多

关键词 呼吸道感染 不定型流感嗜血杆菌 耐药性

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流感嗜血杆菌外膜蛋白P6分子生物学及免疫学研究进展 被引量：2

6

作者 何多姣 李双霞 +1 位作者 贾天军 张玉妥 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2011年第14期2680-2681,共2页

流感嗜血杆菌（Haemophilus influenzae，Hi）根据有无荚膜分为荚膜型和无荚膜型（nontypeable Haemophilus influenzae，NTHi）两类，荚膜型又可分为a～f六个血清型。以往认为只有荚膜型菌株可以致病，以b型（Hib）侵袭力最强，但近来... 流感嗜血杆菌（Haemophilus influenzae，Hi）根据有无荚膜分为荚膜型和无荚膜型（nontypeable Haemophilus influenzae，NTHi）两类，荚膜型又可分为a～f六个血清型。以往认为只有荚膜型菌株可以致病，以b型（Hib）侵袭力最强，但近来研究显示，随着Hib荚膜多糖疫苗的应用．目前在Hi引起的感染中最多见的是NTHi．占70％以上，尤其是在呼吸道的感染中NTHi已成为主要致病菌，由其引起的呼吸道继发感染加重了感染症状， 展开更多

关键词 流感嗜血杆菌 分子生物学 外膜蛋白 免疫学 荚膜多糖疫苗 nthi 感染症状 继发感染

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脂寡糖为基础的不可分型Hib结合苗Ⅰ期临床研究

7

作者 雍元 杜琳 《生物制品快讯》 2004年第3期22-23,共2页

关键词 脂寡糖 Hib结合苗 流感嗜血杆菌 nthi 抗体 疫苗

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自然组织谐频成像在腹部应用的临床研究

8

作者 施倩 陆菲菲 徐翠芳 《上海医学影像》 2000年第4期201-202,共2页

目的 研究自然组织谐频成像(NTHI)技术在腹部应用的临床价值。方法 用NTHI技术对200例不同患者腹部脏器的二维图像与常规基频成像(FI)进行对比分析。NTHI成像探头发射频率为2.5MHz,接收频率为5.0MHz,FI成像探头频率为3.5MHz。结果 NTHI... 目的 研究自然组织谐频成像(NTHI)技术在腹部应用的临床价值。方法 用NTHI技术对200例不同患者腹部脏器的二维图像与常规基频成像(FI)进行对比分析。NTHI成像探头发射频率为2.5MHz,接收频率为5.0MHz,FI成像探头频率为3.5MHz。结果 NTHI技术的二维图像其回声更加细腻,病灶及管道等的边界回声更加清晰,液体内的细小点状回声更易显示,NTHI对深部结构的显示受到一定条件的限制。结论 NTHI可提高二维图像的质量,提高信噪比,尤其可提高各种病灶界面及病灶本身的回声强度,提高判断液体是否粘稠的敏感性,对诊断及鉴别诊断均有一定帮助,但深部结构的图像质量并非均能得到改善。 展开更多

关键词 自然组织谐频成像 基频成像 腹部脏器 nthi

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自然组织谐波显像的临床应用价值

9

作者 李春梅 邓燕 +1 位作者 程力剑 尹立雪 《临床超声医学杂志》 2001年第5期267-269,共3页

目的　研究超声心动图检查中自然组织谐波显像 (NTHI)改善图像质量是否有程度的差异。方法　经胸用基波显像 (FI)及NTHI对比分析成像条件不同的 80例二维超声心动图的胸骨旁左室长轴切面 (LAX)、心尖两腔切面(AP2 )和心尖四腔切面 (AP4)... 目的　研究超声心动图检查中自然组织谐波显像 (NTHI)改善图像质量是否有程度的差异。方法　经胸用基波显像 (FI)及NTHI对比分析成像条件不同的 80例二维超声心动图的胸骨旁左室长轴切面 (LAX)、心尖两腔切面(AP2 )和心尖四腔切面 (AP4)及 2 2个不同节段的内膜可视度 (EV)及心内结构清晰度。内膜EV根据内膜不可见、可见、清晰分为 1、2、3分。结果　NTHI能明显提高总的及不同切面的EV ,所有 2 2个节段EV也明显改善 ,但改善程度以AP2、AP4及其基底段、中段最佳 ;图像质量差的比图像质量好的心内结构改善更明显。但NTHI示心内结构稍显增厚 ,彩色血流显像不丰富。结论　支持NTHI能显著改善超声心动图二维图像 ,但不同节段、不同切面及成像条件不同的患者改善程度不同 ,因使心内结构稍显增厚 。 展开更多

关键词 自然组织谐波显像 二维超声心动图 nthi 图像质量

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Treg细胞抑制慢性中耳炎模型小鼠中耳炎症的进展

10

作者 王丹 杨启梅 +1 位作者 刘晓娜 陈菁华 《山西医科大学学报》 CAS 2024年第2期205-213,共9页

目的探究慢性中耳炎(chronic otitis media,COM)小鼠中Treg细胞与炎症发展之间的关系。方法采用不可分型流感嗜血杆菌(NTHi)腹腔注射和中耳咽鼓管(ET)阻断的方式诱导构建慢性中耳炎小鼠模型(模型组),选择健康BALB/c小鼠作为对照组。分... 目的探究慢性中耳炎(chronic otitis media,COM)小鼠中Treg细胞与炎症发展之间的关系。方法采用不可分型流感嗜血杆菌(NTHi)腹腔注射和中耳咽鼓管(ET)阻断的方式诱导构建慢性中耳炎小鼠模型(模型组),选择健康BALB/c小鼠作为对照组。分别在建模后第3,14,28,56天分离收集小鼠中耳积液和中耳黏膜组织,通过苏木精-伊红(HE)染色检测MEM病理变化,采用免疫组织化学染色评估CD4^(+)和Foxp3^(+)T细胞水平,ELISA和Western blot分别检测小鼠中耳积液和中耳黏膜组织中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β、IL-10和转化生长因子(TGF-β)水平,流式细胞术分析CD4^(+)CD25^(+)Foxp3^(+)细胞比例。另取COM模型小鼠分为PBS组和抗-CD25组。抗-CD25组小鼠腹腔注射抗CD25 mAb模拟体内Treg耗竭,PBS组小鼠腹腔注射等量PBS溶液,第56天收集小鼠中耳积液、中耳黏膜组织、脾脏和颈部淋巴结组织,检测分析脾脏、颈部淋巴结和中耳黏膜组织中CD4^(+)CD25^(+)Foxp3^(+)细胞比例,中耳黏膜组织中炎性因子水平,以及中耳积液中细菌水平。结果HE结果显示,对照组小鼠中耳黏膜组织正常,模型组小鼠中耳黏膜组织出现炎性细胞浸润,细菌数量、炎性细胞数量和黏膜厚度均增加(P<0.05)。与对照组比较,模型组小鼠中耳黏膜组织中CD4^(+)CD25^(+)Foxp3^(+)细胞比例升高(P<0.05),中耳积液和中耳黏膜组织中炎性因子IL-1β、TNF-α、IL-10和TGF-β的水平均升高(P<0.01)。与PBS组比较,抗-CD25组小鼠中耳黏膜组织、脾脏和颈部淋巴结组织中CD4^(+)CD25^(+)Foxp3^(+)细胞比例均降低(P<0.05),中耳积液中细菌数和中耳黏膜组织中炎性因子IL-1β、TNF-α、IL-10和TGF-β的水平均降低(P<0.01)。结论Treg细胞在慢性中耳炎的炎症平衡维持中具有重要作用,抑制炎症的进展,但过度的Treg细胞抑制了宿主对细菌的清除作用。 展开更多

关键词 慢性中耳炎 不可分型流感嗜血杆菌(nthi) Treg细胞 中耳积液 中耳黏膜组织

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不可分型流感嗜血杆菌外膜蛋白P6的纯化及其免疫原性 被引量：4

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作者 陈敬 王建华 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2010年第5期496-499,共4页

目的纯化不可分型流感嗜血杆菌(NTHi)外膜蛋白P6,并检测其免疫原性。方法常规培养NTHi,根据外膜蛋白P6的特性纯化P6蛋白。Lowry法测定纯化P6蛋白的含量;SDS-PAGE检测纯化P6蛋白的相对分子质量及纯度;IEF-PAGE分析纯化P6蛋白的等电点;琼... 目的纯化不可分型流感嗜血杆菌(NTHi)外膜蛋白P6,并检测其免疫原性。方法常规培养NTHi,根据外膜蛋白P6的特性纯化P6蛋白。Lowry法测定纯化P6蛋白的含量;SDS-PAGE检测纯化P6蛋白的相对分子质量及纯度;IEF-PAGE分析纯化P6蛋白的等电点;琼脂糖双向免疫扩散试验鉴定纯化P6蛋白;以纯化的P6蛋白免疫NIH小鼠,ELISA法检测小鼠血清中IgG抗体水平,并进行小鼠保护性试验。结果纯化的P6蛋白含量为208μg/ml;相对分子质量为16600,纯度为100%;等电点为5.49;琼脂糖双向免疫扩散试验证实所提取的蛋白为P6蛋白;ELISA检测显示,P6蛋白具有良好的免疫原性,免疫小鼠后能够诱导产生针对P6蛋白的抗体,其抗体水平呈剂量依赖关系,最佳免疫剂量为10μg/只,最佳免疫针次为3针;对20LD50NTHiSSIp/1225株攻击的小鼠保护率为80%。结论已纯化了不可分型流感嗜血杆菌外膜蛋白P6,其具有良好的免疫原性和保护效果。 展开更多

关键词 嗜血杆菌 流感 细菌外膜蛋白质类 免疫

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免疫途径和佐剂对NTHiP6蛋白疫苗免疫效果的影响 被引量：3

12

作者 韩小艳 张彦霞 +1 位作者 张存辉 张玉妥 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2014年第8期691-693,698,共4页

目的观察不同免疫途径和佐剂对NTHiP6蛋白疫苗免疫效果的影响。方法将原核表达质粒PGEX-6P2/P6转入E.coli XL1-Blue,IPTG诱导P6蛋白的表达并进行纯化。以不同免疫途径(皮下,腹腔,滴鼻)用P6蛋白免疫小鼠,每组12只。然后另取小鼠分为PBS... 目的观察不同免疫途径和佐剂对NTHiP6蛋白疫苗免疫效果的影响。方法将原核表达质粒PGEX-6P2/P6转入E.coli XL1-Blue,IPTG诱导P6蛋白的表达并进行纯化。以不同免疫途径(皮下,腹腔,滴鼻)用P6蛋白免疫小鼠,每组12只。然后另取小鼠分为PBS组和不同佐剂组(MDC、IL-2、弗氏佐剂),每组15只,采用皮下注射途径免疫。共免疫3次,间隔2周,用ELISA检测小鼠血清特异性IgG抗体,用CCK-8法检测脾淋巴细胞增殖活性,用ELISA检测IL-4和IFN-γ水平。结果在大肠埃希菌中成功表达P6蛋白。3种免疫途径相比,皮下途径免疫诱导的IgG抗体滴度为1 279.97±3.87,腹腔免疫组为427.16±3.08,滴鼻免疫组为253.98±3.30,差异有统计学意义(F=5.43,P<0.05)。采用皮下免疫途径时,MDC组诱导的IgG抗体滴度、IL-4水平分别为7 421.02±3.30和79.64±2.75,与其他组比较差异有统计学意义(P<0.05)。IFN-γ水平和脾淋巴细胞增殖指数与IL-2组相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论使用MDC佐剂并采用皮下途径注射可使NTHiP6蛋白疫苗获得较好的免疫效果。 展开更多

关键词 不可分型流感嗜血杆菌 P6蛋白 佐剂 免疫途径

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小鼠巨噬细胞源性趋化因子作为佐剂增强不可分型流感嗜血杆菌P6蛋白疫苗的免疫保护作用 被引量：2

13

作者 韩小艳 王晨红 +3 位作者 乔海霞 张彦霞 常月立 张玉妥 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期913-916,共4页

目的用原核细胞表达不可分型流感嗜血杆菌(NTHi)P6蛋白并观察巨噬细胞源性趋化因子(MDC)对NTHi-P6蛋白疫苗免疫效果的影响。方法构建原核表达质粒PGEX-6P2/P6,转化E.coli XL1-Blue,诱导P6蛋白的表达。将BALB/c小鼠随机分为P6蛋白联合Fre... 目的用原核细胞表达不可分型流感嗜血杆菌(NTHi)P6蛋白并观察巨噬细胞源性趋化因子(MDC)对NTHi-P6蛋白疫苗免疫效果的影响。方法构建原核表达质粒PGEX-6P2/P6,转化E.coli XL1-Blue,诱导P6蛋白的表达。将BALB/c小鼠随机分为P6蛋白联合Freund佐剂与MDC组、P6蛋白联合Freund佐剂组、PBS对照组。分别于0、14、28 d经腹腔免疫,末次免疫后14 d,每组取12只小鼠取血,ELISA检测血清中IgG抗体水平。每组取3只小鼠,制备脾淋巴细胞,ELISA检测IL-4和IFN-γ水平。用10×LD50NTHi攻击每组剩余15只小鼠,观察免疫保护作用。结果 P6蛋白联合Freund佐剂与MDC组、P6蛋白联合Freund佐剂组均能诱导小鼠产生IgG抗体,其滴度分别为1∶1 140.25、1∶3 044.38,P6蛋白联合Freund佐剂与MDC组小鼠抗体滴度和IFN-γ水平明显高于P6蛋白联合Freund佐剂组(P<0.05),但IL-4水平2组间差异无统计学意义(P>0.05)。经NTHi攻击后,P6蛋白联合Freund佐剂与MDC组小鼠的生存率达80%,与PBS组相比差异有统计学意义(P<0.05),但与P6蛋白联合Freund佐剂组相比无显著性差异。结论 MDC作为蛋白佐剂,在一定程度上增强了NTHi-P6蛋白疫苗的免疫保护作用。 展开更多

关键词 不可分型流感嗜血杆菌 P6蛋白 巨噬细胞源性趋化因子 小鼠

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不可分型流感嗜血杆菌P6重组蛋白的原核表达及其黏膜免疫效应 被引量：2

14

作者 乔海霞 张彦霞 +4 位作者 戴明艳 张存辉 常月立 贾晓辉 张玉妥 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期216-221,共6页

目的:研究不可分型流感嗜血杆菌重组P6蛋白的免疫原性,以确定重组P6蛋白在不可分型流感嗜血杆菌疫苗研制中的应用价值。方法:扩增P6目的基因,构建重组质粒PGEX-6P2/P6,鉴定后将其转化入E.coli XL1-Blue,IPTG诱导、纯化后经SDS-PAGE、Wes... 目的:研究不可分型流感嗜血杆菌重组P6蛋白的免疫原性,以确定重组P6蛋白在不可分型流感嗜血杆菌疫苗研制中的应用价值。方法:扩增P6目的基因,构建重组质粒PGEX-6P2/P6,鉴定后将其转化入E.coli XL1-Blue,IPTG诱导、纯化后经SDS-PAGE、Western blot分析;纯化的重组蛋白经滴鼻方式免疫BALB/c小鼠,ELISA法检测血清IgG,肺灌洗液IgA的水平及脾细胞中IL-4、IL-10、IL-17和IFN-γ的产生水平。CCK-8法检测脾淋巴细胞增殖情况。结果:成功构建了重组表达载体PGEX-6P2/P6,并表达GST-P6融合蛋白。Western blot证明GST-P6蛋白能与菌源P6蛋白免疫小鼠后的抗血清发生特异性反应。动物实验表明重组P6蛋白通过滴鼻途径既能刺激小鼠产生血清IgG,又能诱导肺黏膜产生较高的特异性IgA抗体。重组蛋白+IL-2组小鼠脾淋巴细胞所产生的IL-17和IFN-γ的含量高于对照组(P<0.05)。结论:P6蛋白的原核表达载体PGEX-6P2/P6在大肠杆菌XL1-Blue中大量表达,重组P6蛋白经黏膜免疫可以同时诱导产生体液免疫和细胞免疫。此实验为P6蛋白疫苗的研发提供了理论基础。 展开更多

关键词 不可分型流感嗜血杆菌 外膜蛋白P6 原核表达 黏膜免疫效应

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不可分型流感嗜血杆菌外膜蛋白P6基因真核质粒的保护性研究 被引量：2

15

作者 何多姣 张彦霞 +3 位作者 刘雪晴 李双霞 贾天军 张玉妥 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2011年第12期2118-2121,共4页

目的:探讨不可分型流感嗜血杆菌(nontypeable Haemophilus influenzae,NTHi)外膜蛋白P6(outer membrane proteinP6,P6)真核质粒的免疫保护性及其可能的保护机制。方法:构建pcDNA3.1/HisA-P6核酸疫苗,转染HeLa细胞;将P6质粒免疫BALB/c小... 目的:探讨不可分型流感嗜血杆菌(nontypeable Haemophilus influenzae,NTHi)外膜蛋白P6(outer membrane proteinP6,P6)真核质粒的免疫保护性及其可能的保护机制。方法:构建pcDNA3.1/HisA-P6核酸疫苗,转染HeLa细胞;将P6质粒免疫BALB/c小鼠后,ELISA法检测小鼠脾淋巴细胞IFN-γ和IL-4产生水平;CCK-8法分析脾淋巴细胞增殖情况,并建立小鼠NTHi感染模型,检测小鼠鼻咽部灌洗液NTHi数目变化;HE染色法分析鼻黏膜病理变化。结果:pcDNA3.1/HisA-P6在HeLa细胞中有目的蛋白的表达,免疫后pcDNA3.1/HisA-P6组小鼠脾淋巴细胞产生的IFN-γ及刺激指数均高于pcDNA3.1/HisA、PBS对照组(P<0.05),而IL-4的表达无差异;P6组鼻咽部NTHi清除率也显著高于对照组(P<0.01);病理显示P6组小鼠鼻黏膜组织结构基本正常,而对照组鼻黏膜紊乱、脱落。讨论:P6核酸疫苗可诱导小鼠产生明显的抗NTHi保护效应,其可能的保护机制包括细胞免疫、体液免疫及黏膜免疫。 展开更多

关键词 不可分型流感嗜血杆菌 外膜蛋白P6 核酸疫苗 保护性免疫

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不可分型流感嗜血杆菌重组Hap蛋白免疫抗小鼠急性感染的实验研究 被引量：1

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作者 李婉宜 王保宁 +5 位作者 左凤琼 曾蔚 丰锋 邝玉 蒋中华 李明远 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期635-637,641,共4页

目的：观察重组Hap蛋白免疫抗不可分型流感嗜血杆菌（NHTi）感染的免疫保护效果，初步探讨其保护机制。方法：用纯化的Hap重组蛋白与黏膜免疫佐剂霍乱肠毒素B亚单位（CT-B）联合鼻腔免疫C57BL／6小鼠。NHTi琼脂珠悬液对免疫小鼠进行气... 目的：观察重组Hap蛋白免疫抗不可分型流感嗜血杆菌（NHTi）感染的免疫保护效果，初步探讨其保护机制。方法：用纯化的Hap重组蛋白与黏膜免疫佐剂霍乱肠毒素B亚单位（CT-B）联合鼻腔免疫C57BL／6小鼠。NHTi琼脂珠悬液对免疫小鼠进行气管内注射，建立小鼠NHTi急性肺部感染模型。NHTi攻击5d后，收集实验小鼠的支气管肺泡灌洗液（BALF）进行白细胞计数，并取其肺组织进行肺部荷菌数检测及肺组织的病理检测。结果：Hap重组蛋白与CT—B的联合免疫能显著降低小鼠BALF中的白细胞总数、中性粒细胞渗出（P〈0．05）及感染小鼠肺组织内NTHi的荷菌数，并减轻感染小鼠支气管、细支气管周围及肺泡内的炎性浸润程度，明显改善其肺组织的病变。结论：鼻腔免疫的Hap重组蛋白在动物体内能发挥良好抗NTHi感染的免疫保护作用，为NTHi新型疫苗的研发提供了理论基础和实验依据。 展开更多

关键词 重组Hap蛋白 CT—B nthi急性肺部感染模型 黏膜免疫

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不可分型流感嗜血杆菌Hap基因的克隆及原核表达 被引量：1

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作者 李婉宜 邝玉 +4 位作者 姚锋 杨远 陈长春 蒋忠华 李明远 《生物医学工程学杂志》 EI CAS CSCD 北大核心 2009年第5期1072-1076,共5页

构建不可分型流感嗜血杆菌(Non-typeable Haemophilus influenzae,NTHi)Hap基因的原核表达载体,并诱导其表达Hap融合蛋白。以NTHi标准株ATCC49247基因组DNA为模板扩增出Hap目的基因片段,双酶切后连接于原核表达载体pET-32a(+),构建Hap... 构建不可分型流感嗜血杆菌(Non-typeable Haemophilus influenzae,NTHi)Hap基因的原核表达载体,并诱导其表达Hap融合蛋白。以NTHi标准株ATCC49247基因组DNA为模板扩增出Hap目的基因片段,双酶切后连接于原核表达载体pET-32a(+),构建Hap重组原核表达质粒pET-32a(+)-Hap,将经PCR、酶切及DNA测序鉴定正确者转化E.coliBL21(DE3),诱导表达带有His标签的Hap融合蛋白。SDS-PAGE电泳分析重组蛋白的相对分子量大小及表达形式,Western blot进一步鉴定表达产物的特异性。通过PCR成功扩增出NTHi Hap基因,构建了具有正确基因序列的Hap原核表达质粒pET-32a(+)-Hap,SDS-PAGE电泳分析成功表达出相对分子量(Mr)为176000的重组融合蛋白,该蛋白主要以包涵体的形式存在;Western blot结果表明该重组融合蛋白可与抗His-tag单克隆抗体发生特异性结合。NTHi Hap蛋白在原核表达系统中的成功表达,将为Hap蛋白免疫活性的深入研究及NTHi新型保护性疫苗的开发奠定实验基础。 展开更多

关键词 不可分型流感嗜血杆菌 Hap蛋白 原核表达

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MIP-1α基因佐剂对NTHi P6 DNA疫苗免疫效果的影响

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作者 韩小艳 王晨红 张玉妥 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2015年第6期512-515,共4页

目的观察小鼠巨噬细胞炎性蛋白1α(macrophage inflammatory protein-1α,MIP-1α)基因佐剂对不可分型流感嗜血杆菌(nontypeable Haemophilus influenzae,NTHi)外膜蛋白P6(outer membrane protein P6,P6)DNA疫苗免疫效果的影响。方法将9... 目的观察小鼠巨噬细胞炎性蛋白1α(macrophage inflammatory protein-1α,MIP-1α)基因佐剂对不可分型流感嗜血杆菌(nontypeable Haemophilus influenzae,NTHi)外膜蛋白P6(outer membrane protein P6,P6)DNA疫苗免疫效果的影响。方法将92只BALB/c小鼠随机分为4组,分别用pcDNA3.1、pcDNA3.1/MIP-1α、pcDNA3.1/P6和pcDNA3.1/MIP-1α+pcDNA3.1/P6,肌肉注射免疫,每2周免疫1次,共3次,质粒每次每只接种100μg。末次免疫后14d,每组取10只小鼠,采血,分离血清,采用ELISA法检测特异性IgG抗体;每组取3只小鼠,制备脾淋巴细胞,采用CCK-8法检测脾淋巴细胞增殖活性,采用ELISA法检测小鼠脾淋巴细胞分泌IL-4和IFN-γ水平。用8LD50NTHi攻击每组剩余10只小鼠,观察免疫保护作用。结果末次免疫后,pcDNA3.1/MIP-1α+pcDNA3.1/P6组小鼠脾淋巴细胞分泌IFN-γ水平为(1726.45±184.48)ng/L,增殖指数2.06±0.04,与pcDNA3.1/P6组(1443.09±187.70)ng/L和1.90±0.04比较差异均有统计学意义(P<0.05);抗体滴度和IL-4水平两组间差异无统计学意义(P>0.05)。经NTHi攻击后,pcDNA3.1/MIP-1α+pcDNA3.1/P6免疫组小鼠14d生存率达70%,与pcDNA3.1组0%和pcDNA3.1/MIP-1α组0%相比与差异有统计学意义(P<0.05),与pcDNA3.1/P6组60%相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论MIP-1α基因佐剂在一定程度上能增强NTHi P6基因疫苗的免疫保护作用。 展开更多

关键词 不可分型流感嗜血杆菌 核酸疫苗 巨噬细胞炎性蛋白1Α 小鼠

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不可分型流感嗜血杆菌P6 DNA疫苗与蛋白疫苗序贯免疫效应研究

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作者 韩小艳 王晨红 +1 位作者 张玉妥 乔海霞 《现代免疫学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期276-279,共4页

观察不可分型流感嗜血杆菌P6DNA疫苗初免蛋白疫苗加强免疫方式的免疫效果。大量扩增pcDNA3-P6。将65只BALB/c小鼠随机分PBS对照组、pcDNA3.1对照组、pcDNA3.1-P6组、P6蛋白组、pcDNA3.1-P6/P6蛋白组,分别于0、14、28d免疫。质粒每次每... 观察不可分型流感嗜血杆菌P6DNA疫苗初免蛋白疫苗加强免疫方式的免疫效果。大量扩增pcDNA3-P6。将65只BALB/c小鼠随机分PBS对照组、pcDNA3.1对照组、pcDNA3.1-P6组、P6蛋白组、pcDNA3.1-P6/P6蛋白组,分别于0、14、28d免疫。质粒每次每只接种100μg,蛋白每次每只接种10μg。末次免疫后14d,每组取10只小鼠取血,ELISA检测血清中特异性IgG抗体滴度。每组取3只小鼠处死,制备脾淋巴细胞,ELISA检测IL-4和IFN-γ水平,CCK-8法检测脾淋巴细胞增殖指数。用15LD50NTHi攻击每组剩余10只小鼠,观察免疫保护作用。结果:pcDNA3.1-P6/P6蛋白组小鼠的脾淋巴增殖指数和IFN-γ水平明显高于质粒组和蛋白组(P<0.05)。pcDNA3.1-P6/P6蛋白组小鼠IgG抗体滴度、IL-4水平和动物生存率明显高于质粒组(P<0.05)但和蛋白组相比无明显差异(P>0.05)。因此pcDNA3.1-P6初免P6蛋白加强免疫的方式可以提高疫苗的免疫效果。 展开更多

关键词 不可分型流感嗜血杆菌 P6蛋白 质粒

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MDC对不可分型流感嗜血杆菌P6重组蛋白免疫原性的影响

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作者 乔海霞 张彦霞 +4 位作者 张存辉 戴明艳 常月立 韩小艳 张玉妥 《现代免疫学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期368-372,共5页

观察巨噬细胞源趋化因子(macrophage-derived chemokine,MDC)联合不可分型流感嗜血杆菌重组P6蛋白免疫小鼠的免疫效果,探讨MDC的佐剂效应。将50只BALB/c小鼠随机分为5组:P6重组蛋白+MDC,P6重组蛋白,MDC组,P6重组蛋白+IL-2组及PBS对照组... 观察巨噬细胞源趋化因子(macrophage-derived chemokine,MDC)联合不可分型流感嗜血杆菌重组P6蛋白免疫小鼠的免疫效果,探讨MDC的佐剂效应。将50只BALB/c小鼠随机分为5组:P6重组蛋白+MDC,P6重组蛋白,MDC组,P6重组蛋白+IL-2组及PBS对照组,分别于第0 d、14 d、28 d经腹腔免疫3次,末次免疫后14 d,取小鼠血、脾标本,ELISA法检测血清中抗体IgG水平,并分析其脾淋巴细胞IL-10和IFN-γ的产生水平。CCK-8法检测各组脾淋巴细胞增殖活性。结果是小鼠血清IgG水平,P6重组蛋白联合MDC组高于PBS对照组、MDC组、P6重组蛋白+IL-2组及P6重组蛋白组(P<0.05)。P6重组蛋白联合MDC组小鼠特异性脾淋巴细胞刺激指数及其所产生的IL-10、IFN-γ水平均高于PBS对照组、MDC组及P6重组蛋白组(P<0.05)。因此MDC联合P6重组蛋白诱导小鼠的免疫应答优于P6重组蛋白单独免疫,MDC可以作为不可分型流感嗜血杆菌P6重组蛋白的佐剂。 展开更多

关键词 不可分型流感嗜血杆菌 外膜蛋白P6 巨噬细胞源趋化因子(MDC) 佐剂

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