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NS2A序列对日本脑炎病毒NS1基因在原核系统中的体外表达的影响
被引量：
1
1
作者
仇华吉
金吉东
+3 位作者
田志军
周艳君
王云峰
童光志
《中国农业科学》
CAS
CSCD
北大核心
2004年第4期614-618,共5页
用RT-PCR扩增并克隆了日本脑炎病毒弱毒株SA14-14-2的NS1、NS1'、NS1-2A的 cDNA片段,分别将其亚克隆到原核表达载体pET-30b(+),构建了重组原核表达质粒pET30b-NS1、pET30b-NS1'、pET30b-NS1-2A,转化大肠杆菌BL-21(DE3),用IPTG...
用RT-PCR扩增并克隆了日本脑炎病毒弱毒株SA14-14-2的NS1、NS1'、NS1-2A的 cDNA片段,分别将其亚克隆到原核表达载体pET-30b(+),构建了重组原核表达质粒pET30b-NS1、pET30b-NS1'、pET30b-NS1-2A,转化大肠杆菌BL-21(DE3),用IPTG诱导培养。结果表明,仅有pET30b-NS1质粒转化的菌株获得表达,而另外2种重组质粒转化的菌株均无表达。表达的融合蛋白分子量约为46kD,约占菌体总蛋白的30.8%,Western blotting分析表明表达产物具有抗原活性。动物试验证实,重组NS1免疫小鼠蛋白可以抵抗强毒的攻击。笔者研究证实NS2A或部分NS2A的存在对于NS1的表达具有不利影响。
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关键词
日本脑炎病毒
ns
1基因
原核系统
体外表达
ns
2
A
序列
RT-PCR
下载PDF
职称材料
题名
NS2A序列对日本脑炎病毒NS1基因在原核系统中的体外表达的影响
被引量：
1
1
作者
仇华吉
金吉东
田志军
周艳君
王云峰
童光志
机构
中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室
延边大学农学院动物医学系
出处
《中国农业科学》
CAS
CSCD
北大核心
2004年第4期614-618,共5页
文摘
用RT-PCR扩增并克隆了日本脑炎病毒弱毒株SA14-14-2的NS1、NS1'、NS1-2A的 cDNA片段,分别将其亚克隆到原核表达载体pET-30b(+),构建了重组原核表达质粒pET30b-NS1、pET30b-NS1'、pET30b-NS1-2A,转化大肠杆菌BL-21(DE3),用IPTG诱导培养。结果表明,仅有pET30b-NS1质粒转化的菌株获得表达,而另外2种重组质粒转化的菌株均无表达。表达的融合蛋白分子量约为46kD,约占菌体总蛋白的30.8%,Western blotting分析表明表达产物具有抗原活性。动物试验证实,重组NS1免疫小鼠蛋白可以抵抗强毒的攻击。笔者研究证实NS2A或部分NS2A的存在对于NS1的表达具有不利影响。
关键词
日本脑炎病毒
ns
1基因
原核系统
体外表达
ns
2
A
序列
RT-PCR
Keywords
Japanese encephalitis virus
ns
1
ns
1'
RT-PCR
Gene expression
分类号
S852.64 [农业科学—基础兽医学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
NS2A序列对日本脑炎病毒NS1基因在原核系统中的体外表达的影响
仇华吉
金吉东
田志军
周艳君
王云峰
童光志
《中国农业科学》
CAS
CSCD
北大核心
2004
1
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