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唾液腺腺泡细胞癌中NR4A3基因重排及NOR-1蛋白表达分析
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作者 王敏 钱佳骏 +4 位作者 薛俊青 顾挺 胡宇华 陈颖 夏荣辉 《中国口腔颌面外科杂志》 CAS 2024年第3期249-254,共6页
目的:探讨NR4A3基因重排和NOR-1蛋白表达在唾液腺腺泡细胞癌中的表达及在鉴别诊断中的价值。方法:收集2020年5月—2024年1月于上海交通大学医学院附属第九人民医院口腔病理科诊断的唾液腺癌119例,包括腺泡细胞癌(acinic cell carcinoma,... 目的:探讨NR4A3基因重排和NOR-1蛋白表达在唾液腺腺泡细胞癌中的表达及在鉴别诊断中的价值。方法:收集2020年5月—2024年1月于上海交通大学医学院附属第九人民医院口腔病理科诊断的唾液腺癌119例,包括腺泡细胞癌(acinic cell carcinoma,AciCC)63例,黏液表皮样癌(mucoepidermoid carcinoma,MEC)31例,分泌性癌(secretory carcinoma,SC)25例。分别使用荧光原位杂交和免疫组织化学染色检测NR4A3基因重排和NOR-1蛋白表达情况,采用SPSS 18.0软件包对数据进行统计学分析。结果:AciCC主要发生于大唾液腺。与MEC和SC相比,AciCC好发于女性(P=0.006)。NR4A3基因重排在AciCC、MEC和SC中的阳性率分别为76.2%(48/63)、0%(0/10)和0%(0/7),NOR-1蛋白表达在AciCC、MEC和SC中的阳性率分别为92.1%(58/63)、9.7%(3/31)和0%(0/25),差异具有统计学意义(P<0.001)。单独使用NR4A3基因重排诊断AciCC时,灵敏度和特异度分别为76.2%和100%。单独使用NOR-1蛋白表达诊断AciCC时,灵敏度和特异度分别为92.1%和94.6%。联合使用NR4A3基因重排和NOR-1蛋白表达诊断AciCC时,灵敏度和特异度分别为96.8%和94.6%,曲线下面积为0.896,诊断价值最优。结论:AciCC好发于女性,主要发病部位为大唾液腺。NR4A3基因重排仅见于AciCC中,在诊断工作中具有100%的特异性,但敏感性较低。NOR-1蛋白表达检测具有很好的灵敏度和特异度,可作为鉴别AciCC、MEC和SC的初筛和替代方法。联合使用NR4A3基因重排和NOR-1蛋白表达检测具有最优的诊断价值。 展开更多
关键词 腺泡细胞癌 唾液腺 NR4A3 基因重排 nor-1 蛋白表达
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A Novel Non Radioactive PCR-DNA Probe for the Detection of Aflatoxin Producing <i>Aspergillus</i>Species from Major Food Crops Grown in India
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作者 S. R. Priyanka M. Venkata Ramana +2 位作者 K. Balakrishna H. S. Murali H. V. Batra 《Advances in Microbiology》 2012年第4期577-586,共10页
In the present study, a novel non radioactive digoxigenen labelled PCR-DNA probe was developed targeting nor-1 gene to assess the contamination of aflatoxigenic Aspergillus species in food grain samples from Southern ... In the present study, a novel non radioactive digoxigenen labelled PCR-DNA probe was developed targeting nor-1 gene to assess the contamination of aflatoxigenic Aspergillus species in food grain samples from Southern parts of India. The sensitivity of developed PCR-DNA probe was determined to be 10 pg of genomic DNA and 1 pg of purified PCR product. The specificity of the DNA probe was validated by testing against an array of Aspergillus, Fusarium and Penicillium spp. A total of 89 Aspergillus isolates were recovered from 152 grain samples of maize, paddy, and groundnut. Among them, maize had the highest (90%) incidence of toxigenic Aspergillus species. When developed PCR-DNA probe was evaluated onto pure cultures of toxigenic and nontoxigenic Aspergillus species, 60 samples were positive for the nor-1 gene probe. DNA probe results unequivocally matched with the HPLC analysis. In conclusion, the novel PCR-DNA probe developed in this study may find its application in rapid detection of aflatoxin-producing Aspergillus isolates from contaminated cereal grains. 展开更多
关键词 AFB1-Aflatoxin B1 HPLC-High Performance Liquid Chromatography nor-1 norsolorinic Acid SYNTHASE PCR-Polymerase Chain Reaction
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肝X受体对获得性免疫反应及NOR-1的调节作用
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作者 戴卓娅 龚建平 《医学分子生物学杂志》 CAS CSCD 2009年第5期455-458,共4页
肝X受体(liver X receptor,LXRs)是核受体超家族成员,能被氧化的胆固醇衍生物结合并激活,在胆固醇逆向转运中起着非常重要的作用。LXRs在人体的代谢和炎症中都有重要作用。现从获得性免疫反应中LXRs通过调控胞膜的重要组成物质-胆... 肝X受体(liver X receptor,LXRs)是核受体超家族成员,能被氧化的胆固醇衍生物结合并激活,在胆固醇逆向转运中起着非常重要的作用。LXRs在人体的代谢和炎症中都有重要作用。现从获得性免疫反应中LXRs通过调控胞膜的重要组成物质-胆固醇胞内水平,从而抑制T细胞增殖的方向,在硫转移酶2B-肝X受体-膜转运体G1(SULT281-LXR—ABCG1)轴线上探讨LXRs对获得性免疫的调节作用,以及LXRs对神经元衍生孤核受体(NOR-1)的调控作用,以进一步认识LXRs的调控功能。 展开更多
关键词 肝X受体 获得性免疫 胆固醇 SULT281-LXR—ABCG1 nor-1
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荧光定量PCR检测发酵豆酱中黄曲霉毒素相关基因nor-1 被引量:3
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作者 晏丽 孙秀兰 +2 位作者 张银志 赵建新 王淼 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2011年第11期177-182,共6页
建立了TaqMan荧光定量PCR快速检测产黄曲霉毒素曲霉菌的方法,并将其应用于发酵豆酱中。以黄曲霉毒素合成相关结构基因nor-1基因作为靶标基因,设计特异性引物及TaqMan探针,以含nor-1基因的质粒为模板建立标准曲线,将其应用于豆酱发酵过程... 建立了TaqMan荧光定量PCR快速检测产黄曲霉毒素曲霉菌的方法,并将其应用于发酵豆酱中。以黄曲霉毒素合成相关结构基因nor-1基因作为靶标基因,设计特异性引物及TaqMan探针,以含nor-1基因的质粒为模板建立标准曲线,将其应用于豆酱发酵过程中nor-1基因的动态监测,并与传统平板培养法测定产毒曲霉菌结果相比较。结果显示,两检测方法呈较好的相关性,Pearson等级相关系数为0.808,P=0.098。灵敏度及特异性检测结果显示,该方法灵敏度达10CFU/mL,特异性针对含nor-1基因的曲霉菌。所建立的方法检测时间短,仅6h即能完成整个过程,相比传统平板培养法,具有优势。该研究在国内首次建立了快速、灵敏、准确的荧光定量检测方法检测豆酱中黄曲霉毒素相关基因nor-1,能够在黄曲霉毒素产生前期,对产毒曲霉菌污染状况进行监测以更好控制食品中黄曲霉毒素,提高食品安全性。 展开更多
关键词 nor-1基因 荧光定量PCR 产毒曲霉菌 快速 安全性
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19-失碳-1α,25-二羟基维生素D_3A环合成子的合成 被引量:3
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作者 吴勇 《有机化学》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1999年第4期374-378,共5页
报道以价廉、易得的D-(-)-奎尼酸为手性源,经9步反应,有效地合成光学活性的19-失碳-1α,25-二羟基维生素D_3A环合成子4的合成方法。
关键词 维生素D3 奎尼酸 失碳 二羟基维生素D3 合成子
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The Synthesis of 19-Nor-1a , 25-dihydroxy-22-oxo-vitamin D_(3)
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作者 Yong WU Mei GUAN +2 位作者 Pei Jie LI Cheng XU Xiao Chun WU 《Chinese Chemical Letters》 SCIE CAS CSCD 2001年第1期19-20,共2页
Nor-1α, 25-dihydroxy-22-oxo-vitamin D3 4 was synthesized by the coupling of known compound 5 and the A-ring phosphine oxide 6 followed by deprotection of the hydroxy functions.
关键词 nor-1α 25-dihydroxy-22-oxo-vitamin D3 DEVICE synthesT
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Synthesis of an optically active intermediate for A-ring of 19-nor-1α,25-dihydroxyvitamin D3
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作者 Shan Qian Li Hai Lei Tang Jin Cheng Yang Yong Wu 《Chinese Chemical Letters》 SCIE CAS CSCD 2007年第3期261-262,共2页
An optically active intermediate 5 for A-ring of 19-nor-1α,25-dihydroxyvitamin D3 2 has been synthesized in five steps, starting from readily available, inexpensive v(+)-xylose 6 with good yield.
关键词 A-ring of 19-nor-1α 25-dihydroxyvitamin D3 INTERMEDIATE SYNTHESIS
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鼻咽癌下调新基因 NOR1相互作用蛋白的筛选和鉴定 被引量:6
8
作者 向波 王理 +5 位作者 易梅 欧阳珏 李夏雨 张祖萍 李小玲 李桂源 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2009年第6期709-714,共6页
NOR1基因是新的鼻咽癌相关基因,该基因在鼻咽癌细胞系HNE1和鼻咽癌组织中表达下调.在鼻咽癌细胞HNE1中恢复NOR1基因表达抑制了鼻咽癌细胞的生长和增殖能力.为了探讨NOR1基因的生物学功能,以NOR1基因为诱饵运用酵母双杂交技术在人胎脑文... NOR1基因是新的鼻咽癌相关基因,该基因在鼻咽癌细胞系HNE1和鼻咽癌组织中表达下调.在鼻咽癌细胞HNE1中恢复NOR1基因表达抑制了鼻咽癌细胞的生长和增殖能力.为了探讨NOR1基因的生物学功能,以NOR1基因为诱饵运用酵母双杂交技术在人胎脑文库中筛选其交互作用蛋白,挑选阳性克隆,进行DNA序列分析和同源检索,阳性克隆编码7个不同的蛋白质,其中一个阳性克隆编码线粒体ATP合成酶亚基OSCP蛋白.瞬时转染pCMV-myc-NOR1质粒进入鼻咽癌5-8F细胞,通过密度梯度离心法分离线粒体蛋白,Western blot检测表明myc-NOR1蛋白分布于线粒体与胞浆.免疫荧光检测表明在鼻咽正常上皮细胞NP69中内源性NOR1蛋白与线粒体存在明显共定位.随后采用特异性酵母双杂交、免疫荧光共定位、免疫共沉淀技术证实了NOR1与OSCP在线粒体内存在交互作用.提示,NOR1是一个新的线粒体蛋白,可能通过结合OSCP蛋白调控细胞能量代谢,为深入探讨其功能提供了重要线索. 展开更多
关键词 nor1 酵母双杂交 OSCP 蛋白质相互作用
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稳定干扰NOR1基因对HeLa细胞的影响 被引量:3
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作者 谭怡忻 李文娟 +5 位作者 易梅 王卫 郑盼 张海静 向波 李桂源 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2014年第8期757-763,共7页
目的:研究稳定干扰NOR1基因对宫颈癌HeLa细胞系的影响。方法:采用pSUPER.neo+GFP载体构建靶向NOR1基因的shRNA干扰载体pSUPER-shNOR1-1,pSUPER-shNOR1-2以及无关序列对照载体pSUPER-scramble,通过脂质体转染HeLa细胞,经G418筛选获得稳... 目的:研究稳定干扰NOR1基因对宫颈癌HeLa细胞系的影响。方法:采用pSUPER.neo+GFP载体构建靶向NOR1基因的shRNA干扰载体pSUPER-shNOR1-1,pSUPER-shNOR1-2以及无关序列对照载体pSUPER-scramble,通过脂质体转染HeLa细胞,经G418筛选获得稳定干扰细胞系。采用RT-PCR和Western印迹检测NOR1 mRNA和蛋白表达水平。采用MTT法测定细胞生长曲线。采用H2O2处理HeLa细胞,采用Hoechst 33258染色和TUNEL法测定细胞凋亡。Western印迹检测干扰NOR1对HeLa细胞凋亡相关分子Bcl-2,caspase和聚ADP核糖聚合酶(poly ADP-ribose polymerase,PARP)表达的影响。结果:稳定感染的shRNA干扰载体pSUPER-shNOR1-1和pSUPER-shNOR1-2抑制了HeLa细胞内源性NOR1的基因表达,成功构建了稳定干扰NOR1基因的HeLa细胞系。MTT生长曲线测定表明:与pSUPER-scramble质粒转染细胞相比,稳定转染pSUPER-shNOR1-1和pSUPER-shNOR1-2质粒促进了HeLa细胞的活力和增殖,并抑制了H2O2诱导的HeLa细胞凋亡。Western印迹检测发现稳定干扰NOR1抑制了H2O2诱导的HeLa细胞caspase 9和PARP的活化,上调了Bcl-2蛋白的表达。结论:稳定干扰NOR1基因促进了HeLa细胞的活力与生长,并抑制了H2O2诱导的细胞凋亡,其机制与干扰NOR1表达引起抗凋亡分子Bcl-2表达增加和抑制caspase 9活化有关。 展开更多
关键词 nor1 宫颈癌 RNAI 凋亡
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T_4 DNA连接酶介导的5’RACE法克隆大鼠Nor 1全长cDNA 被引量:2
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作者 银巍 黄奕俊 +3 位作者 苏兴文 赵灵芝 邱鹏新 颜光美 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期317-321,共5页
目的:克隆75AEST全长cDNA序列。方法:抽提在25mmol/L KCl条件下培养7d的大鼠小脑颗粒神经元的总RNA后,用DNA连接酶介导的5’RACE法克隆75A表达序列标签(EST)cDNA5’端未知序列,其产物亚克隆到pGEM-Teasy后进行序列测定以及同源性分性。... 目的:克隆75AEST全长cDNA序列。方法:抽提在25mmol/L KCl条件下培养7d的大鼠小脑颗粒神经元的总RNA后,用DNA连接酶介导的5’RACE法克隆75A表达序列标签(EST)cDNA5’端未知序列,其产物亚克隆到pGEM-Teasy后进行序列测定以及同源性分性。结果:首轮5’RACE扩增出2.5kb序列后,75A EST鉴定为神经来源孤儿受体1(Nor1)基因的部分序列;再经过二次轮5’RACE,我们首次克隆Nor-1的全长cDNA序列。结论:T_4DNA连接酶介导的5’RACE是一种效率较高的克隆mRNA5’端未知序列的好方法,为进一步研究Nor1在小脑颗粒神经元存活或分化过程中的作用奠定基础。 展开更多
关键词 T4DNA连接酶 5’cDNA末端快速扩增法 nor1 小脑 神经元
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DNA甲基化对NOR1基因启动子活性和基因表达的影响 被引量:2
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作者 向波 李文娟 +3 位作者 易梅 王卫 李小玲 李桂源 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第8期765-770,共6页
目的:研究DNA甲基化对NOR1基因启动子活性和表达的影响。方法:采用SssI甲基转移酶处理NOR1基因启动子报告载体,经重亚硫酸钠修饰后测序检测报告载体甲基化水平。未经SssI处理和经SssI处理的NOR1基因启动子报告载体分别转染细胞,检测荧... 目的:研究DNA甲基化对NOR1基因启动子活性和表达的影响。方法:采用SssI甲基转移酶处理NOR1基因启动子报告载体,经重亚硫酸钠修饰后测序检测报告载体甲基化水平。未经SssI处理和经SssI处理的NOR1基因启动子报告载体分别转染细胞,检测荧光素酶活性或GFP表达。采用去甲基化药物5-氮杂-2'-脱氧胞苷处理白血病细胞系HL60细胞,抽提RNA,Real-time RT-PCR检测NOR1 mRNA表达水平。结果:重亚硫酸钠测序表明SssI甲基转移酶体外处理导致NOR1启动子CpG岛CG位点完全甲基化。体外甲基化的NOR1启动子活性完全丧失。去甲基化药物5-氮杂-2'-脱氧胞苷连续处理3 d后,白血病细胞系HL60细胞中内源性NOR1 mRNA表达水平显著增加。结论:SssI甲基转移酶可用于体外甲基化修饰NOR1基因启动子报告载体。甲基化修饰导致NOR1启动子活性丧失。去甲基化药物5-氮杂-2'-脱氧胞苷处理恢复NOR1 mRNA表达。 展开更多
关键词 表观遗传学 甲基化 5-氮杂-2’-脱氧胞苷 nor1 启动子 表达
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抗癌蛋白NOR1基因工程重组蛋白表达条件的优化和纯化 被引量:2
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作者 向波 王理 +5 位作者 王卫 李文娟 易梅 李小玲 曾朝阳 李桂源 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期610-615,共6页
目的:构建NOR1基因原核表达载体,并在大肠杆菌中原核表达NOR1重组蛋白,对其诱导条件进行优化,并纯化NOR1蛋白。方法:PCR扩增人NOR1基因全长开放阅读框,克隆入原核表达载体pET28b。重组质粒转化大肠杆菌,采用不同温度、不同抗生素浓度、... 目的:构建NOR1基因原核表达载体,并在大肠杆菌中原核表达NOR1重组蛋白,对其诱导条件进行优化,并纯化NOR1蛋白。方法:PCR扩增人NOR1基因全长开放阅读框,克隆入原核表达载体pET28b。重组质粒转化大肠杆菌,采用不同温度、不同抗生素浓度、不同IPTG浓度诱导NOR1蛋白表达。选择最佳条件大量诱导NOR1蛋白表达,采用Ni-IDE树脂纯化NOR1重组蛋白,并通过SDS-PAGE凝胶电泳检测重组蛋白的纯度。结果:成功构建了pET28b-NOR1基因原核表达载体,并转化E.coli Rosettablue(DE3)。利用IPTG诱导His-NOR1蛋白表达,结果发现IPTG浓度、温度、抗生素浓度均可影响NOR1重组蛋白的表达效率。0.25mmol/L IPTG即可诱导NOR1融合蛋白的表达,分子质量为43 kD;随着IPTG浓度提高,重组蛋白表达量增加。温度对NOR1蛋白原核表达有重要影响,低温条件(30℃)无法诱导NOR1蛋白表达。提高卡那霉素筛选浓度可以提高NOR1蛋白表达量。原核表达的NOR1重组蛋白绝大部分形成包涵体,采用6 mol/L盐酸胍溶解包涵体,通过Ni-IDE树脂纯化得到高纯度的His-NOR1重组蛋白。结论:构建了pET28b-NOR1原核表达载体。研究发现在37℃条件下,采用1 mmol/L IPTG,200μg/mL卡那霉素可以高效诱导NOR1蛋白表达。纯化得到高纯度的NOR1重组蛋白。 展开更多
关键词 鼻咽癌 nor1 原核表达 重组蛋白 纯化
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稳定转染NOR1抑制5-8F细胞片状伪足形成和Wnt信号通路 被引量:2
13
作者 向波 王卫 +4 位作者 李文娟 唐珂 曾朝阳 李小玲 李桂源 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2012年第9期887-892,共6页
细胞骨架是真核细胞中的蛋白纤维网络结构,不仅与保持细胞形态结构有关,而且影响细胞黏附和细胞运动.NOR1是从鼻咽癌中克隆得到的新基因,在鼻咽癌组织和细胞系中表达下调.本研究建立了NOR1稳定表达的鼻咽癌5-8F细胞系.过表达NOR1引起高... 细胞骨架是真核细胞中的蛋白纤维网络结构,不仅与保持细胞形态结构有关,而且影响细胞黏附和细胞运动.NOR1是从鼻咽癌中克隆得到的新基因,在鼻咽癌组织和细胞系中表达下调.本研究建立了NOR1稳定表达的鼻咽癌5-8F细胞系.过表达NOR1引起高转移性鼻咽癌5-8F细胞形态改变,抑制片状伪足形成、细胞表面积缩小、细胞聚集性增强.扫描电镜检测发现,NOR1抑制了5-8F细胞膜微绒毛的数量,引起细胞膜表面改变.细胞骨架染色发现,NOR1过表达导致5-8F细胞actin骨架连续性破坏,应力纤维增加.Realtime RT-PCR检测发现,NOR1引起5-8F细胞Wnt/β-catenin信号通路分子Wnt5A受体FZD5、FZD7表达下调,抑制了β-catenin蛋白入核.提示NOR1抑制Wnt/β-catenin信号通路激活,破坏细胞骨架连续性,抑制细胞膜微绒毛与伪足形成. 展开更多
关键词 nor1 鼻咽癌 片状伪足 WNT信号通路
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NOR1基因对HepG2细胞E-选择素的影响 被引量:1
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作者 李登清 李跃进 聂新民 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期402-404,共3页
目的:探讨NOR1基因对HepG2细胞E-选择素的影响。方法:将NOR1基因通过脂质体转染HepG2细胞后,抽提细胞总RNA,采用RT-PCR法检测HepG2细胞中NOR1基因和E-选择素mRNA的表达水平;ELISA法检测细胞培养上清液中E-选择素的蛋白表达水平。结果:RT... 目的:探讨NOR1基因对HepG2细胞E-选择素的影响。方法:将NOR1基因通过脂质体转染HepG2细胞后,抽提细胞总RNA,采用RT-PCR法检测HepG2细胞中NOR1基因和E-选择素mRNA的表达水平;ELISA法检测细胞培养上清液中E-选择素的蛋白表达水平。结果:RT-PCR结果显示,转染NOR1基因组E-选择素mRNA的表达水平明显高于空白组和对照组的E-选择素mRNA的表达水平(P<0.01)。ELISA结果显示,转染NOR1基因组E-选择素蛋白水平明显高于空白组和对照组(P<0.01)。结论:NOR1基因可诱导HepG2细胞中E-选择素表达水平的增高。 展开更多
关键词 肝肿瘤 实验性 E选择素 基因 nor1 酶联免疫吸附测定
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鼻咽癌抑瘤基因NOR1第2外显子选择性剪切异构体在组织和细胞中的分布规律(英文) 被引量:1
15
作者 向波 王卫 +4 位作者 易梅 李文娟 周鸣 李小玲 李桂源 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期597-603,共7页
目的:研究NOR1基因全长及第2外显子选择性剪切异构体在人细胞系和组织中的分布规律以及NOR1蛋白全长及剪切异构体的亚细胞定位模式。方法:以人胎脑cDNA文库质粒为模板,PCR扩增NOR1基因开放阅读框(open reading frame,ORF),酶切后连接pCM... 目的:研究NOR1基因全长及第2外显子选择性剪切异构体在人细胞系和组织中的分布规律以及NOR1蛋白全长及剪切异构体的亚细胞定位模式。方法:以人胎脑cDNA文库质粒为模板,PCR扩增NOR1基因开放阅读框(open reading frame,ORF),酶切后连接pCMV/myc载体。以pCMV/myc-NOR1(isoform 1)质粒为标准品,采用Real-time RT-PCR方法检测NOR1 mRNA在人胚胎组织和成人睾丸组织中的表达。用RT-PCR方法扩增NOR1基因第2外显子两侧序列片段,测序分析NOR1 isoform 1和isoform 2 mRNA在细胞和组织中的分布;PCR方法扩增细胞系NOR1第2外显子基因组序列,测序检测第2外显子gDNA序列。将pCMV/myc-NOR1(isoform 1)和pCMV/myc-NOR1(isoform 2)质粒转染细胞,采用免疫荧光方法观察两种异构体在细胞内定位模式。结果:从人胎脑cDNA文库克隆得到NOR1基因全长ORF(isoform 1)和遗漏第2外显子的剪切异构体(isoform 2)。Real-time RT-PCR检测发现成人睾丸组织NOR1 mRNA表达水平最高,胚胎鼻咽、气管、脑、肾组织有中等水平表达,其他组织表达较低。RT-PCR结合测序检测发现表明睾丸、鼻咽、气管、肾等16种组织仅表达isoform 2;而脑组织同时检测到NOR1 isoform 1和isoform 2 mRNA,以isoform 2为主。NP69,HNE1等细胞系仅表达遗漏第2外显子的isoform 2,所有检测的细胞系基因组DNA无第2外显子缺失。免疫荧光检测发现NOR1 isoform 1和isoform 2编码蛋白在细胞内定位模式相似。结论:克隆得到NOR1基因全长和遗漏第2外显子的剪切本。Isoform 2是NOR1基因在组织和细胞系中的主要表达形式,NOR1 iso-form 1仅表达于脑组织。第2外显子对NOR1蛋白的细胞内定位模式没有影响。 展开更多
关键词 鼻咽癌 nor1 选择性剪切 亚细胞定位
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NOR1基因在前列腺癌细胞和组织中的表达
16
作者 陈云峰 张宇 +1 位作者 刘鹏华 陈乐仲 《贵州医科大学学报》 CAS 2018年第5期546-550,共5页
目的:探究NOR1基因在前列腺癌细胞和组织中的表达及意义。方法:89例前列腺癌患者手术切除的配对癌组织、癌旁组织及正常组织标本,Real-time PCR检测NOR1 mRNA表达,记录患者的Gleason分值、肿瘤分期、淋巴结转移、远处转移及术前血清前... 目的:探究NOR1基因在前列腺癌细胞和组织中的表达及意义。方法:89例前列腺癌患者手术切除的配对癌组织、癌旁组织及正常组织标本,Real-time PCR检测NOR1 mRNA表达,记录患者的Gleason分值、肿瘤分期、淋巴结转移、远处转移及术前血清前列腺癌特异性标志物PSA资料;构建过表达NOR1质粒转染的前列腺癌细胞DU-145,CCK-8实验检测细胞的增殖能力,Transwell实验检测细胞的侵袭能力,Western blot试验检测细胞中Bcl2、Bax及cleaved-caspase-3蛋白表达。结果:NOR1 mRNA表达水平比较,前列腺癌组织<癌旁组织<正常组织(P<0.05);NOR1表达与前列腺癌病理分期及淋巴结转移明显有关(P<0.05);过表达NOR1的前列腺癌细胞增殖侵袭能力减弱(P<0.05),Bax和cleaved-caspase-3水平上调、Bcl2水平下调。结论:NOR1在前列腺癌组织中表达下调,恢复其表达可抑制前列腺癌细胞增殖侵袭能力,其机制可能与Bax和cleaved-caspase-3水平上调和Bcl-2水平下调、前列腺癌病理分级及淋巴结转移有关。 展开更多
关键词 前列腺癌 抑癌基因 nor1 细胞增殖 细胞凋亡 临床分期
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氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)对人脐静脉内皮细胞(H-UVEC)孤儿核受体NOR1表达的影响
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作者 张东献 陶俊良 +1 位作者 张伟 满永宏 《吉林医学》 CAS 2017年第7期1243-1245,共3页
目的:探讨氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)孤儿核受体NOR1表达的影响。方法:采用ox-LDL建立人脐静脉内皮细胞损伤模型,将细胞分为空白组、ox-LDL高、中、低剂量组(25μg/ml、50μml、100μg/ml、200μg/ml),采用CCK... 目的:探讨氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)孤儿核受体NOR1表达的影响。方法:采用ox-LDL建立人脐静脉内皮细胞损伤模型,将细胞分为空白组、ox-LDL高、中、低剂量组(25μg/ml、50μml、100μg/ml、200μg/ml),采用CCK8法检测HUVEC活性,采用实时荧光定量PCR分析NOR1转录水平变化,采用Western-Blot分析NOR1蛋白表达的变化。结果:在HUVEC中加入不同浓度ox-LDL共同培养12h后,CCK8值与ox-LDL呈现明显的剂量反应关系,与空白对照组相比具有显著性差异(P<0.01)。Ox-LDL能够诱导NOR1 mRNA转录和蛋白表达,NOR1 mRNA峰值出现在ox-LDL共同培养后的3h,NOR1蛋白质最大值出现在ox-LDL共同培养后的6 h。结论:ox-LDL能够损伤HUVEC,并能诱导NOR1的表达上调,其在内皮细胞损伤和动脉粥样硬化炎性反应中的作用有待进一步研究。 展开更多
关键词 氧化低密度脂蛋白(ox-LDL) 人脐静脉内皮细胞(HUVEC) nor1
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一个新硝基还原酶基因NOR1编码区单核苷酸多态及与鼻咽癌的关联分析 被引量:17
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作者 熊炜 曾朝阳 +9 位作者 肖炳燚 熊芳 聂新民 范松青 彭聪 李伟芳 王蓉 沈守荣 李小玲 李桂源 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2003年第3期401-405,共5页
NOR1基因是中南大学湘雅医学院肿瘤研究所克隆的一个鼻咽癌表达下调新基因 ,生物信息学预测NOR1基因含有硝基还原酶结构域 ,该基因可能参与亚硝胺类化学致癌物在体内的代谢过程 ,从而与鼻咽癌的发生密切相关 .通过采用病例 对照的研究方... NOR1基因是中南大学湘雅医学院肿瘤研究所克隆的一个鼻咽癌表达下调新基因 ,生物信息学预测NOR1基因含有硝基还原酶结构域 ,该基因可能参与亚硝胺类化学致癌物在体内的代谢过程 ,从而与鼻咽癌的发生密切相关 .通过采用病例 对照的研究方法 ,利用测序技术对 144名鼻咽癌患者和匹配的 144名正常人NOR1基因编码区单核苷酸多态 (codingregionsinglenucleotidepolymorphisms ,cSNPs)进行基因分型 ,关联分析结果显示所检测到的两个cSNPs之间存在连锁不平衡 ,且均与鼻咽癌发病相关 ,两个cSNPs及它们所组成的单倍型相对危险度分别为 1 3 6、 1 64和 1 3 7.两个cSNPs的多态性改变均使NOR1基因编码蛋白一级结构发生了变化 ,这种改变可能影响NOR1基因编码蛋白的结构和功能 . 展开更多
关键词 硝基还原酶基因 norl编码区 单核苷酸多态 鼻咽癌 关联分析
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NOR_1基因对HepG2细胞白介素-8水平的影响 被引量:12
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作者 傅锦芳 李登清 +2 位作者 聂新民 黄民主 桂嵘 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期282-284,共3页
目的探讨NOR1基因对HepG2细胞IL-8水平的影响。方法将NOR1基因通过脂质体转染入HepG2细胞后,抽提细胞总RNA,运用RT-PCR检测IL-8mRNA的水平,用ELISA检测细胞培养上清液IL-8的表达水平。结果细胞培养上清液IL-8蛋白水平,转染NOR1基因组明... 目的探讨NOR1基因对HepG2细胞IL-8水平的影响。方法将NOR1基因通过脂质体转染入HepG2细胞后,抽提细胞总RNA,运用RT-PCR检测IL-8mRNA的水平,用ELISA检测细胞培养上清液IL-8的表达水平。结果细胞培养上清液IL-8蛋白水平,转染NOR1基因组明显高于空白组和对照组(P<0.01);而转染NOR1基因组与转染空质粒组IL-8mRNA的表达水平无显著差异(P>0.05);结论NOR1基因诱导HepG2细胞IL-8蛋白水平表达增高。 展开更多
关键词 肝肿瘤 白介素8 nor1基因
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新克隆的基因NOR_1对鼻咽癌细胞株HNE_1细胞生长的影响 被引量:10
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作者 聂新民 桂嵘 +3 位作者 李登清 周鸣 黄祖发 李桂源 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第8期777-780,共4页
NOR1是与鼻咽癌密切相关的抑瘤/易感基因候选者之一,将NOR1基因的全长cDNA片段亚克隆至pcDNA3.1(+)的表达载体中,通过脂质体介导转染入鼻咽癌细胞系HNE1,RT-PCR、RNA印迹方法筛选高效表达NOR1的细胞株,并借助细胞生长曲线、软琼脂生长... NOR1是与鼻咽癌密切相关的抑瘤/易感基因候选者之一,将NOR1基因的全长cDNA片段亚克隆至pcDNA3.1(+)的表达载体中,通过脂质体介导转染入鼻咽癌细胞系HNE1,RT-PCR、RNA印迹方法筛选高效表达NOR1的细胞株,并借助细胞生长曲线、软琼脂生长集落形成大小试验、流式细胞仪对转染细胞的生物学行为进行检测.结果发现转染了NOR1基因的HNE1细胞生长速度明显减慢,在软琼脂中的集落形成较对照组明显减小.流式细胞仪分析表明,NOR1可以延缓细胞由G0/G1期进入S期.结果表明NOR1基因可能在抑制鼻咽癌的发生发展中起重要作用,为进一步研究NOR1的功能研究打下基础. 展开更多
关键词 鼻咽肿瘤 nor1基因 细胞转染
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