当归芍药散通过调控NLRP3/Caspase-1信号通路抑制AD大鼠神经炎症的作用 被引量：24

1

作者 宋祯彦 夏小芳 +7 位作者 王玉珂 郑雨珊 陈佩莹 罗德勇 贺春香 于文静 李平 成绍武 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第19期1-8,共8页

目的:研究当归芍药散对β淀粉样蛋白1-42(Aβ1-42)诱导的阿尔茨海默病(AD)大鼠模型的神经保护作用及对NOD样受体3(NLRP3)/半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-1(Caspase-1)信号通路的调控作用。方法:大鼠脑内注射Aβ1-42构建AD动物模型,给予不... 目的:研究当归芍药散对β淀粉样蛋白1-42(Aβ1-42)诱导的阿尔茨海默病(AD)大鼠模型的神经保护作用及对NOD样受体3(NLRP3)/半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-1(Caspase-1)信号通路的调控作用。方法:大鼠脑内注射Aβ1-42构建AD动物模型,给予不同浓度的当归芍药散治疗。实验分为假手术组,模型组,当归芍药散高、中、低剂量干预组。Morris水迷宫实验检测动物学习记忆能力;苏木素-伊红(HE)染色和高尔基染色检测神经元形态功能;免疫荧光共定位检测NLRP3炎症小体活化情况;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测炎症因子白细胞介素-1β(IL-1β)和IL-18 mRNA表达情况;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测NLRP3,Caspase-1,IL-1β蛋白的表达水平。结果:与假手术组比较,模型组大鼠学习记忆能力显著降低(P<0.01);神经元形态功能受损;炎症因子IL-1β和IL-18 mRNA表达升高,NLRP3炎症小体活化增加,NLRP3,Caspase-1,IL-1β蛋白表达显著升高(P<0.01);与模型组比较,给予当归芍药散中、高剂量干预后,AD大鼠学习记忆能力明显增加(P<0.05,P<0.01);神经元形态功能明显恢复;炎症因子IL-1β和IL-18 mRNA表达显著降低,NLRP3炎症小体活化减少,NLRP3,Caspase-1,IL-1β蛋白表达显著降低(P<0.01)。结论:当归芍药散可能通过调控NLRP3/Caspase-1信号通路抑制炎症小体活化,抑制神经炎症反应,从而发挥神经保护作用。 展开更多

关键词 当归芍药散 阿尔茨海默病(AD) β-淀粉样蛋白(Aβ) nod样受体3(nlrp3)炎症小体 半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-1(Caspase-1)

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抵挡汤对糖尿病心肌病小鼠NLRP3炎症小体的作用及机制 被引量：10

2

作者 尚鑫 任晓霞 +1 位作者 陈栋 常柏 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第9期19-25,共7页

目的:探讨不同剂量抵挡汤对糖尿病小鼠心肌炎性病变的影响。方法:选取60只C57BL/6J小鼠,随机分为正常组(10只)和模型组(50只)。模型组小鼠采用高脂饲料联合链脲佐菌素(STZ)腹腔注射制备糖尿病小鼠模型,模型制备成功后继续高脂饲料喂养,... 目的:探讨不同剂量抵挡汤对糖尿病小鼠心肌炎性病变的影响。方法:选取60只C57BL/6J小鼠,随机分为正常组(10只)和模型组(50只)。模型组小鼠采用高脂饲料联合链脲佐菌素(STZ)腹腔注射制备糖尿病小鼠模型,模型制备成功后继续高脂饲料喂养,8周后采用超声成像平台检测小鼠心功能,出现心功能减退,则糖尿病心肌病小鼠造模成功,剔除未成模小鼠,最终成模小鼠40只,模型组小鼠按照心功能随机分为模型组、抵挡汤低、中、高(1.5,3,6 g·kg^(-1))和辛伐他汀组(0.001 5 g·kg^(-1)),每组8只。超声成像平台检测小鼠心功能,全自动生化仪检测小鼠空腹血糖(FBG),甘油三酯(TG),总胆固醇(TC),苏木素-伊红(HE)染色观察心肌组织病理学改变,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测心肌组织NOD样受体3(NLRP3),硫氧还蛋白相互作用蛋白(TXNIP),半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-1(Caspase-1),白细胞介素-1β(IL-1β)蛋白水平,检测心肌组织活性氧(ROS)含量。结果:与正常组比较,模型组的FBG,TC,TG的水平显著升高(P<0.01),左室射血分数(EF),左室短轴缩短率(FS)数值显著降低(P<0.01),ROS表达明显升高(P<0.05),心肌组织中NLRP3,TXNIP,Caspase-1,IL-1β表达明显升高(P<0.05)。与模型组比较,抵挡汤中、高剂量组及辛伐他汀组FBG,TC,TG水平明显降低(P<0.05);抵挡汤各剂量组及辛伐他汀组EF,FS均有改善(P<0.05),抵挡汤中剂量组变化更为明显(P<0.05);HE染色结果发现,抵挡汤能够改善小鼠心肌组织病理学变化;抵挡汤各剂量组及辛伐他汀组小鼠ROS表达水平明显减少,抵挡汤中剂量组变化更为明显;抵挡汤各剂量组NLRP3,TXNIP,Caspase-1,IL-1β表达明显降低,抵挡汤中剂量降低心肌组织NLRP3,TXNIP,Caspase-1表达的效果更为明显;抵挡汤高剂量降低心肌组织IL-1β表达的效果更为明显。结论:抵挡汤可通过抑制NLRP3炎症小体的激活,改善糖尿病心肌病小鼠心肌炎性病变。 展开更多

关键词 抵挡汤 糖尿病心肌病 nod样受体3(nlrp3)炎症小体 炎症反应 氧化应激

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基于NLRP3炎症小体探讨地奥心血康抗动脉粥样硬化作用机制 被引量：7

3

作者 何祥 李国莺 +1 位作者 汪丹丹 陈光亮 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第20期55-62,共8页

目的:研究地奥心血康(Di’ao Xinxuekang,DXXK)对小鼠RAW264.7巨噬细胞和动脉粥样硬化(Atherosclerosis,AS)大鼠胸主动脉NOD样受体3(NLRP3)炎症小体的影响,探讨其抗AS的作用机制。方法:氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)刺激RAW264.7细胞建立体... 目的:研究地奥心血康(Di’ao Xinxuekang,DXXK)对小鼠RAW264.7巨噬细胞和动脉粥样硬化(Atherosclerosis,AS)大鼠胸主动脉NOD样受体3(NLRP3)炎症小体的影响,探讨其抗AS的作用机制。方法:氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)刺激RAW264.7细胞建立体外模型,MCC950和DXXK干预,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-1β(IL-1β)含量,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测NLRP3,衔接蛋白凋亡相关斑点样蛋白(ASC)及半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-1(Caspase-1)mRNA和蛋白的表达。60只雄性SD大鼠随机分为正常组,模型组,阿托伐他汀组(2 mg·kg^(-1)),DXXK高、中、低剂量组(100,30,10 mg·kg^(-1)),每组10只。采用高脂饲料+维生素D2建立AS模型,全自动生化分析仪检测血脂水平,计算AS指数(AI);ELISA检测血清TNF-α,IL-1β含量;Real-time PCR和Western blot检测胸主动脉NLRP3,ASC,Caspase-1 mRNA和蛋白的表达;苏木素-伊红(HE)染色和天狼星红染色观察腹主动脉及主动脉窦病理形态学变化。结果:与正常组比较,模型组RAW264.7细胞TNF-α,IL-1β与NLRP3,ASC,Caspase-1mRNA和蛋白表达显著升高(P<0.01);与模型组比较,各药物组上述指标明显降低(P<0.05,P<0.01)。与模型组比较,DXXK组大鼠胆固醇(TC),甘油三酯(TG),低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C),AI显著降低,高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)明显升高(P<0.05,P<0.01),血清TNF-α,IL-1β与胸主动脉NLRP3,ASC,Caspase-1 mRNA和蛋白表达明显降低(P<0.05,P<0.01),腹主动脉病变及主动脉窦纤维增生明显改善。结论:DXXK具有显著的抗AS作用,抑制NLRP3炎症小体可能是其作用机制之一。 展开更多

关键词 地奥心血康 nod样受体3(nlrp3)炎症小体 动脉粥样硬化 作用机制

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柴胡加龙骨牡蛎汤对抑郁大鼠海马NLRP3通路的免疫调节作用 被引量：18

4

作者 尚立芝 毛梦迪 +9 位作者 许二平 张明远 周春雨 王国强 李耀洋 刘保光 白明 栗俞程 汪保英 陈晓辉 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第24期33-39,共7页

目的:探讨柴胡加龙骨牡蛎汤对抑郁大鼠海马NOD样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体通路的作用及其机制。方法:60只雄性SD大鼠随机平均分为6组,分别为正常组、模型组、柴胡加龙骨牡蛎汤高、中、低剂量组,NLRP3抑制剂(MCC950)组。除正常组外,其余... 目的:探讨柴胡加龙骨牡蛎汤对抑郁大鼠海马NOD样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体通路的作用及其机制。方法:60只雄性SD大鼠随机平均分为6组,分别为正常组、模型组、柴胡加龙骨牡蛎汤高、中、低剂量组,NLRP3抑制剂(MCC950)组。除正常组外,其余采用孤养联合慢性不可预见性应激(CUMS)21 d,制备抑郁大鼠模型。柴胡加龙骨牡蛎汤高、中、低组分别灌胃13,6.5,3.25 g·kg^(-1)柴胡加龙骨牡蛎汤溶液,MCC950组腹腔注射1 mg·kg^(-1),正常组、模型组灌胃等体积生理盐水,给药21 d期间持续追加造模。采用糖水偏好实验(SPT)和新奇摄食实验评价大鼠的抑郁行为,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测海马组织匀浆中白细胞介素-1β(IL-1β)和IL-18含量,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组大鼠海马中NLRP3,凋亡相关微粒蛋白(ASC)及半胱氨酸天门冬氨酸蛋白水解酶-1(Caspase-1)蛋白表达。结果:与正常组比较,模型组糖水偏好率显著降低(P<0.01),新奇摄食时间显著延长(P<0.01);海马组织中NLRP3,ASC,Caspase-1蛋白表达显著增强(P<0.01),IL-1β和IL-18水平显著升高(P<0.01)。与模型组比较,柴胡加龙骨牡蛎汤高、中组糖水偏好率显著提高(P<0.01),新奇摄食时间显著缩短(P<0.01);海马中NLRP3,ASC,Caspase-1蛋白表达明显减弱(P<0.05,P<0.01),IL-1β和IL-18水平显著降低(P<0.01)。结论:柴胡加龙骨牡蛎汤可减轻CUMS诱导的抑郁行为,其机制可能与抑制NLRP3炎症小体通路有关。 展开更多

关键词 抑郁症 柴胡加龙骨牡蛎汤 炎症 海马 nod样受体蛋白3(nlrp3)炎症小体

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抵挡汤对糖尿病大血管病变小鼠主动脉NLRP3炎症小体活化炎症级联反应的作用机制 被引量：15

5

作者 傅红敏 任秋月 常柏 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第11期1-8,共8页

目的:观察糖尿病大血管病变进程,探讨不同剂量抵挡汤对糖尿病大血管病变的影响。方法:选取4周龄雄性载脂蛋白E敲除(ApoE-/-)小鼠,采用高脂喂养联合链脲佐菌素(STZ)诱导制备糖尿病大血管病变模型,并随机分为模型组、抵挡汤高、中、低剂... 目的:观察糖尿病大血管病变进程,探讨不同剂量抵挡汤对糖尿病大血管病变的影响。方法:选取4周龄雄性载脂蛋白E敲除(ApoE-/-)小鼠,采用高脂喂养联合链脲佐菌素(STZ)诱导制备糖尿病大血管病变模型,并随机分为模型组、抵挡汤高、中、低剂量组和辛伐他汀组;并以同批次同周龄ApoE-/-小鼠仅高脂喂养,作为ApoE-/-组;取相同遗传背景的C57BL/6小鼠常规喂养作为正常组。分别于实验第8,20周取材。观察不同时期各组小鼠主动脉病理特点及斑块面积占比,比较各组小鼠血糖、血脂、氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)水平,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测主动脉NOD样受体3(NLRP3),半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)蛋白表达,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清中白细胞介素-1β(IL^(-1)β),白细胞介素-18(IL^(-1)8),白细胞介素-1α(IL^(-1)α),肿瘤坏死因子-α(TNF-α)炎症因子。结果:与正常组比较,ApoE-/-组、模型组内斑块占比显著增高(P<0.01),与模型组比较,各给药组能明显降低血管内斑块占比(P<0.05);与正常组比较,ApoE-/-组、模型组主动脉NLRP3,Caspase-1蛋白表达水平显著升高(P<0.01),血清中IL^(-1)β,IL^(-1)8,IL^(-1)α,TNF-α显著升高(P<0.01),与模型组比较,各给药组能够明显抑制主动脉NLRP3,Caspase-1蛋白的表达,降低血清中IL^(-1)β,IL^(-1)8,IL^(-1)α,TNF-α等炎症因子水平(P<0.05),且以中剂量组抑制作用最强(P<0.05)。结论:抵挡汤能独立于降糖、降脂之外改善糖尿病大血管病变,这可能与下调NLRP3,Caspase-1蛋白表达,减轻炎症级联反应相关。 展开更多

关键词 糖尿病 大血管病变 nod样受体(3nlrp3)炎症小体 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-(1Caspase-1)

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NLRP3炎症小体与糖尿病心肌病的关系及中医药调控研究进展 被引量：11

6

作者 张赛 陈正涛 +3 位作者 唐诗韵 谢春光 杜联 高泓 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第16期250-263,共14页

糖尿病心肌病(DCM)是糖尿病的并发症之一,是指发生在糖尿病中,其发病机制区别于其他心血管疾病如冠心病、心脏瓣膜病、亦或先天性心脏病的一种特发类心肌病,亦是多年以来糖尿病患者的主要致死病因之一。研究表明,DCM的发病机制与胰岛素... 糖尿病心肌病(DCM)是糖尿病的并发症之一,是指发生在糖尿病中,其发病机制区别于其他心血管疾病如冠心病、心脏瓣膜病、亦或先天性心脏病的一种特发类心肌病,亦是多年以来糖尿病患者的主要致死病因之一。研究表明,DCM的发病机制与胰岛素抵抗、多种炎症反应激活、氧化应激增加、冠状动脉微循环受阻、晚期糖基化终产物(AGEs)积累等过程有密切联系。而在多种炎症反应中,NOD样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体激活可通过炎症的级联反应诱导分泌出大量促炎细胞因子,继而介导细胞焦亡过程,促进心肌损伤。目前基于NLRP3炎症小体在DCM损伤防治重要作用功能,国内外开展了大量中医药实验研究,证明了黄芪多糖、人参皂苷Rb_(1)等中药提取物或单味中药如云芝、冬虫夏草亦或抵挡汤、加味桃核承气汤等组方制剂及针刺、中医运动疗法等可通过调控NLRP3炎症小体的相关通路从而抑制其组装或激活,降低炎症反应,进而抑制DCM中心肌的重构,改善DCM的心脏功能。该文就NLRP3炎症小体与DCM的关系及中医药在此领域中发挥抗炎效应的研究进展进行综述,旨在为DCM开发治疗手段提供新的思路。 展开更多

关键词 nod样受体蛋白3(nlrp3)炎症小体 糖尿病心肌病 中医药

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柴胡清肝汤干预NLRP3/IL-1β通路治疗肉芽肿性小叶性乳腺炎模型大鼠的作用机制 被引量：11

7

作者 周瑶 刘丽芳 +5 位作者 柳佳璐 龚婕 刘舒雷 赵丹 凌洁 范洪桥 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第15期1-7,共7页

目的:探讨柴胡清肝汤(CHQGT)治疗肉芽肿性小叶性乳腺炎(GLM)模型大鼠的作用机制。方法:将60只雌性大鼠分为正常组、模型组、醋酸泼尼松龙组(0.0018 g·kg^(-1))、柴胡清肝汤低、中、高剂量组(4.5、8.9、17.8 g·kg^(-1)),采用GL... 目的:探讨柴胡清肝汤(CHQGT)治疗肉芽肿性小叶性乳腺炎(GLM)模型大鼠的作用机制。方法:将60只雌性大鼠分为正常组、模型组、醋酸泼尼松龙组(0.0018 g·kg^(-1))、柴胡清肝汤低、中、高剂量组(4.5、8.9、17.8 g·kg^(-1)),采用GLM病变组织与弗氏佐剂混合后的组织匀浆进行造模,造模成功后药物干预组均给予相应的处理因素,正常组、模型组给予等量生理盐水。14 d后肉眼观察小鼠乳腺变化;苏木素-伊红(HE)染色观察取材的乳腺组织病理学改变;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测NOD样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体、胱天蛋白酶-1(Caspase-1)、白细胞介素-1β(IL-1β)m RNA表达;蛋白免疫印迹法(Western bolt)检测NLRP3、Caspase-1、IL-1β、白细胞介素-18(IL-18)的蛋白表达情况。结果:与正常组比较,模型组大鼠肉眼可见乳房明显红肿,且乳腺炎症指数显著升高(P<0.01),病理学改变包括形成以乳腺小叶为中心的肉芽肿,伴见大量淋巴细胞、浆细胞等炎性细胞浸润,模型组大鼠乳腺组织中的NLRP3、Caspase-1及IL-1βm RNA相对表达量显著增加(P<0.01),NLRP3、Caspase1、IL-1β和IL-18蛋白的表达显著增加(P<0.01);与模型组比较,各治疗组大鼠乳房红肿均有改善,柴胡清肝汤中、高剂量组及泼尼松龙组经治后炎症指数均有不同程度下降(P<0.05,P<0.01),乳腺的炎症程度明显改善,病理学方面巨噬细胞、淋巴细胞、浆细胞等炎性细胞均有不同程度减少,柴胡清肝汤高剂量组、泼尼松龙组均能够明显下调NLRP3、Caspase-1及IL-1βm RNA的表达(P<0.05,P<0.01),降低NLRP3、Caspase-1、IL-1β和IL-18蛋白的表达(P<0.05,P<0.01)。结论:柴胡清肝汤能够抑制炎症,治疗大鼠GLM,其可能机制与抑制NLRP3/IL-1β信号通路有关,这为“清消法”防治GLM提供了新的靶点。 展开更多

关键词 肉芽肿性小叶性乳腺炎 肉芽肿性小叶性乳腺炎动物模型 柴胡清肝汤 清消法 nod样受体蛋白3(nlrp3)炎症小体 nlrp3/白细胞介素-1β(IL-1β)信号通路

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牡丹花总黄酮对痛风性肾病大鼠NLRP3炎症小体及炎症因子表达的影响 被引量：11

8

作者 白莉 刘广运 +3 位作者 魏湘萍 李宁 张晓萍 苗明三 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第9期43-51,共9页

目的:探究牡丹花总黄酮对大鼠痛风性肾病模型保护作用的可能机制。为治疗痛风性肾病的药物研究提供科研数据支撑。方法:使用腺嘌呤合并乙胺丁醇复制大鼠痛风性肾病模型,大鼠随机每12只分为空白组、模型组、别嘌醇组(42 mg·kg^(-1)... 目的:探究牡丹花总黄酮对大鼠痛风性肾病模型保护作用的可能机制。为治疗痛风性肾病的药物研究提供科研数据支撑。方法:使用腺嘌呤合并乙胺丁醇复制大鼠痛风性肾病模型,大鼠随机每12只分为空白组、模型组、别嘌醇组(42 mg·kg^(-1))、阳性药痛风舒片组(600 mg·kg^(-1))、牡丹花总黄酮高、中、低剂量组(TFPF,260、130、65 mg·kg^(-1));酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测大鼠血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-18(IL-18)含量,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测大鼠肾脏组织匀浆中转化生长因子-β1(TGF-β1)、IL-1β含量;苏木素-伊红(HE)染色观察肾脏组织细胞形态变化;原位末端标记法(TUNEL)观察肾脏组织细胞DNA损伤情况;免疫组化法观察肾脏NOD样受体蛋白3(NLRP3)、胱天蛋白酶-1(Caspase-1)、IL-1β蛋白表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测肾脏组织中NLRP3、Caspase-1、核转录因子-κB(NF-κB)蛋白的表达量。结果:与空白组比较,模型组大鼠血清中TNF-α、MCP-1、IL-1β、IL-18含量均显著增加(P<0.01),模型组大鼠肾脏NLRP3、Caspase-1、NF-κB、IL-1β表达量均显著升高(P<0.01),肾组织细胞呈现胞质肿胀、细胞膜破裂,细胞核固缩断裂数量增加,模型组大鼠肾组织细胞TUNEL染色阳性率显著升高(P<0.01),大鼠肾组织匀浆中IL-1β、TGF-β1的含量均显著上升(P<0.01);与模型组比较,牡丹花总黄酮高、中剂量组可不同程度的降低大鼠血清中炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-18含量(P<0.05,P<0.01),牡丹花总黄酮高剂量组MCP-1含量明显降低(P<0.01),牡丹花总黄酮高、中剂量组明显降低肾组织匀浆中TGF-β1含量(P<0.05,P<0.01),牡丹花总黄酮中剂量组肾组织匀浆中IL-1β含量显著降低(P<0.01);HE染色显示牡丹花总黄酮各剂量组可不同程度的改善肾小管上皮细胞状态,减轻胞质肿胀,细胞核固缩的数� 展开更多

关键词 痛风性肾病 牡丹花总黄酮 nod样受体蛋白3(nlrp3)炎症小体 胱天蛋白酶-1(Caspase-1) 细胞焦亡

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猫须草水提物对痛风性肾病大鼠的肾脏保护作用 被引量：12

9

作者 符静泉 戴莉琳 +3 位作者 韦曼莉 黄纯莹 付书婕 蒋伟哲 《中药材》 CAS 北大核心 2020年第11期2785-2789,共5页

目的:探讨猫须草水提物对痛风性肾病大鼠的肾脏保护作用。方法:将60只雄性SD大鼠分为6组,即正常对照组、模型组、别嘌醇阳性对照组及猫须草水提物高、中、低剂量组。用腺嘌呤和酵母饲料造模的同时,分别给予相应药物灌胃。30 d后观察肾... 目的:探讨猫须草水提物对痛风性肾病大鼠的肾脏保护作用。方法:将60只雄性SD大鼠分为6组,即正常对照组、模型组、别嘌醇阳性对照组及猫须草水提物高、中、低剂量组。用腺嘌呤和酵母饲料造模的同时,分别给予相应药物灌胃。30 d后观察肾脏特征,计算肾指数(RI),检测大鼠血清尿酸(UA)水平、血清及肝脏黄嘌呤氧化酶(XO)水平,以Real⁃time PCR法测定大鼠肾脏URAT1、OAT1 mRNA表达,Western blot测定大鼠肾脏NOD样受体蛋白3(NLRP3)、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、胱天蛋白酶⁃1(Caspase⁃1)及碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的蛋白表达。结果:与模型组比较,猫须草水提物各剂量组和别嘌醇组的肾指数降低,肾损伤均有所减轻。猫须草水提物高、中剂量组及别嘌醇组血清UA显著降低、血清及肝脏XO水平及URAT1 mRNA和NLRP3、ASC、Caspase⁃1、bFGF蛋白表达显著降低,OAT1 mRNA表达显著升高。结论:猫须草水提物的降尿酸作用可能与上调URAT1 mR⁃NA表达及下调OAT1 mRNA表达有关,其对痛风性肾病大鼠具有较好的肾脏保护作用,其机制可能与下调肾组织中NLRP3、ASC、Caspase⁃1,bFGF蛋白表达有关。 展开更多

关键词 猫须草水提物 痛风性肾病 尿酸盐转运体1(URAT1) 有机阴离子转运蛋白1(OAT1) nod样受体蛋白3(nlrp3)炎症小体 碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)

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基于NLRP3/ASC/Caspase-1信号通路探讨独活醇提物对MSU诱导的痛风性关节炎的治疗作用 被引量：6

10

作者 黑晓晶 吕耀中 +2 位作者 李良 章晨峰 肖伟 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第13期79-87,共9页

目的通过体内和体外实验探讨独活醇提物(DH50)对尿酸钠(MSU)晶体诱导的痛风性关节炎的治疗作用及作用机制。方法体内实验:将50只雄性SD大鼠,随机分为正常组、模型组、地塞米松组(DXMS,0.07 mg·kg^(-1))、DH50低剂量组(DH50-D,9 mg&... 目的通过体内和体外实验探讨独活醇提物(DH50)对尿酸钠(MSU)晶体诱导的痛风性关节炎的治疗作用及作用机制。方法体内实验:将50只雄性SD大鼠,随机分为正常组、模型组、地塞米松组(DXMS,0.07 mg·kg^(-1))、DH50低剂量组(DH50-D,9 mg·kg^(-1))、高剂量组(DH50-G,18 mg·kg^(-1))5组(n=10)。连续灌胃给药7 d,正常组和模型组给予等体积纯水,第5天向大鼠右侧踝关节注射MSU建立痛风性关节炎模型。测量造模后4、8、24、48 h的大鼠足跖容积并对关节炎症评分,苏木素-伊红(HE)染色检测大鼠滑膜组织病理形态的改变,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测大鼠滑膜组织匀浆中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素^(-1)β(IL^(-1)β)、白细胞介素-6(IL-6)的含量变化,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测滑膜组织中NOD样受体蛋白3(NLRP3)、胱天蛋白酶^(-1)(Caspase^(-1))、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、IL^(-1)β、环氧化酶-2(COX-2)的蛋白表达情况。体外实验:使用MSU(75 mg·L^(-1))刺激RAW264.7细胞建立细胞炎症模型,同时设置正常组、模型组、地塞米松组(DXMS,100μmol·L^(-1))、DH50低质量浓度组(DH50-D,25 mg·L^(-1))、DH50中质量浓度组(DH50-Z,50 mg·L^(-1))、DH50高质量浓度组(DH50-G,100 mg·L^(-1)),噻唑蓝(MTT)比色法检测各组细胞活力,ELISA检测细胞培养上清中TNF-α含量,Western blot检测细胞中NLRP3、活化的(cleaved)Caspase^(-1)、IL^(-1)β、TNF-α、COX-2的蛋白表达情况。结果体内实验:与正常组比较,模型组大鼠足跖肿胀程度加深、关节炎症评分显著升高(P<0.01),滑膜组织炎性浸润严重,组织匀浆中炎症因子含量显著升高(P<0.01),NLRP3、Caspase^(-1)、ASC、IL^(-1)β、COX-2蛋白表达明显上调(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,DH50低、高剂量组大鼠足跖肿胀程度减轻、关节炎症指数降低,炎性浸润减轻,组织匀浆中炎症因子含量显著降低(P<0.01),相关蛋白表达均有不同程度的下调(P<0 展开更多

关键词 痛风性关节炎 尿酸钠结晶 独活醇提物 炎症因子 nod样受体蛋白3(nlrp3)炎症小体

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中医药调控NLRP3炎症小体治疗糖尿病肾病的研究进展 被引量：5

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作者 赵哲 白敏 +3 位作者 靳玉秋 田萌媛 陈光顺 刘臻华 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第23期197-206,共10页

糖尿病肾病(DN)是慢性肾脏病(CKD)主要病因,加重了终末期肾脏病(ESRD)的患病率,严重威胁人类健康。DN病理机制十分复杂,其中炎症反应是糖尿病肾病级联损伤过程中的关键病理环节。因此,针对糖尿病肾病炎症反应的治疗有利于缓解DN的疾病... 糖尿病肾病(DN)是慢性肾脏病(CKD)主要病因,加重了终末期肾脏病(ESRD)的患病率,严重威胁人类健康。DN病理机制十分复杂,其中炎症反应是糖尿病肾病级联损伤过程中的关键病理环节。因此,针对糖尿病肾病炎症反应的治疗有利于缓解DN的疾病进展。NOD样受体蛋白3(NLRP3)是一种经典的蛋白酶体,其作为先天免疫反应的诱导剂,NLRP3炎症小体被激活后产生和释放炎症介质,触发细胞焦亡和自噬失控,介导促肾纤维化的应激信号,参与DN肾脏的发生与发展。NLRP3炎症小体作为诱导炎症反应的核心位点广泛参与了DN疾病进程,可能是DN疾病进展的新靶点。中药单体及复方在糖尿病肾病的防治中起到越来越重要的作用,最新研究发现中医药有效防治DN与调控NLRP3炎症小体激活关系密切。从NLRP3炎症小体角度探究中医药治疗DN发生发展的作用机制的研究较多,但尚缺乏系统综述。该文通过分析汇总近年来国内外文献,从NLRP3炎症小体组装与激活,在糖尿病肾病的作用机制及中医药通过相关途径调控NLRP3炎症小体防治DN方面进行综述,为中医药对NLRP3炎症小体调控研究提供参考,以期为防治DN提供新靶点和新策略。 展开更多

关键词 中医药 糖尿病肾病 nod样受体蛋白3(nlrp3)炎症小体 焦亡 自噬 肾纤维化

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解毒通络调肝方干预TGR5/cAMP信号通路靶向NLRP3炎症小体保护胰岛β细胞的作用机制 被引量：1

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作者 张琦 肖洋 +3 位作者 徐菁晗 刘添娇 王丽 朴春丽 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第11期95-103,共9页

目的:探讨解毒通络调肝方通过胆汁酸G蛋白偶联受体5(TGR5)/环状磷酸腺苷(cAMP)信号通路靶向NOD样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体保护胰岛β细胞的干预作用。方法:选用32只SPF级雄性db/db小鼠随机分为模型组、解毒通络调肝方低、高剂量组(3.6... 目的:探讨解毒通络调肝方通过胆汁酸G蛋白偶联受体5(TGR5)/环状磷酸腺苷(cAMP)信号通路靶向NOD样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体保护胰岛β细胞的干预作用。方法:选用32只SPF级雄性db/db小鼠随机分为模型组、解毒通络调肝方低、高剂量组(3.6、7.2 g·kg^(-1))、二甲双胍组(0.2 g·kg^(-1)),8只db/m小鼠作为空白组,药物干预8周,每2周检测各组小鼠空腹血糖(FBG),并在末次给药后,进行口服糖耐量实验(OGTT),酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测空腹胰岛素(FINS)并计算β细胞功能稳态指数(HOMA-β)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-1β水平。苏木素-伊红(HE)染色观察小鼠胰腺组织病理学改变,免疫荧光测定小鼠胰腺组织胰岛素(Insulin)的表达,蛋白免疫印迹法(Western blot)和实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测TGR5/cAMP信号通路和NLRP3炎症小体关键靶点的蛋白、mRNA的表达。结果:与空白组比较,模型组小鼠FBG、OGTT、FINS、IL-6、TNF-α和IL-1β显著升高(P<0.01);与模型组比较,药物治疗6周后,解毒通络调肝方组和二甲双胍组的FBG水平显著下降(P<0.01);OGTT实验结果表明,与模型组比较,各给药小组小鼠各时间点的血糖均有降低(P<0.05,P<0.01),解毒通络调肝方各剂量组和二甲双胍组FINS、TNF-α和IL-6水平明显降低(P<0.05,P<0.01),解毒通络调肝方高剂量组和二甲双胍组IL-1β水平显著降低(P<0.01)。胰腺病理显示模型组小鼠的胰岛形状不规则,分布不均匀,有萎缩的征象,解毒通络调肝方干预后,其细胞计数增加,边界更清晰;免疫荧光结果表示,空白组小鼠的胰岛细胞排列有序,形态饱满,伴有适当的胰岛素分泌,而模型组胰岛细胞形态扭曲,结构萎缩,胰岛素分泌变少,解毒通络调肝方各剂量组和二甲双胍组小鼠的胰岛素含量显著增加。与空白组比较,模型组小鼠胰腺组织中NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、胱天� 展开更多

关键词 解毒通络调肝方 胰岛Β细胞 胆汁酸G蛋白偶联受体5(TGR5)/环状磷酸腺苷(cAMP)信号通路 nod样受体蛋白3(nlrp3)炎症小体

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细胞焦亡与肝脏疾病的相关性及中医药研究进展 被引量：7

13

作者 陈勇 覃乐 +2 位作者 叶晓雪 王竟静 周至品 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第21期232-241,共10页

细胞焦亡又称细胞炎性坏死,其形态学特征、发生及调控机制不同于凋亡、坏死等细胞死亡方式,是近年来发现并证实的一种依赖半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶(Caspase)的新型程序性细胞死亡方式。研究表明,细胞焦亡与肝脏疾病发生过程密切相关... 细胞焦亡又称细胞炎性坏死,其形态学特征、发生及调控机制不同于凋亡、坏死等细胞死亡方式,是近年来发现并证实的一种依赖半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶(Caspase)的新型程序性细胞死亡方式。研究表明,细胞焦亡与肝脏疾病发生过程密切相关,在酒精性肝病(ALD),非酒精性脂肪性肝病(NAFLD),肝纤维化和肝癌等病变过程中可能发挥着重要作用。细胞焦亡主要通过经典途径NOD样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体活化Caspase-1,进而裂解效应蛋白消化道皮肤素D(GSDMD),释放白细胞介素-18(IL-18),白细胞介素-1β(IL-1β)等促炎细胞因子引起肝细胞炎性损伤,进而促进肝病的发生发展。临床上使用中药治疗肝脏疾病疗效独特,不良反应较低。中药干预肝脏疾病后,其阻断细胞焦亡信号通路方式为①抑制NLRP3炎症小体多蛋白复合物的组装和激活;②降低Caspase-1或Caspase-4/Caspase-5/Caspase-11的活性;③抑制GSDMD的裂解,减少IL-18和IL-1β促炎细胞因子的释放。通过这几个方面阻断焦亡信号通路,减轻肝脏炎症程度,从而发挥抗肝病作用。因此,深入研究细胞焦亡有利于认识肝脏疾病发生发展和转归中的作用,增强或抑制焦亡可能为中药防治肝病提供新策略。目前针对经典焦亡信号通路中的关键蛋白NLRP3炎症小体成为中药抗肝病靶点之一。该文简要概述了细胞焦亡与肝脏疾病的关系,对近年来中药单体、复方、有效部位和提取物的干预情况进行归纳总结,为进一步探索细胞焦亡致病机制及中药治疗肝脏疾病提供重要指导。 展开更多

关键词 中药 肝脏疾病 细胞焦亡 nod样受体蛋白3(nlrp3)炎症小体

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NLRP3炎症小体在IgA肾病中的作用及中药干预进展

14

作者 刘永芳 周莉 +3 位作者 刘晖扬 黄睿 丰志滢 尹甜甜 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期269-279,共11页

免疫球蛋白(Ig)A肾病是目前公认最常见的原发性肾小球疾病,高达20%~40%的患者在发病后20年内发展为终末期肾病。针对糖基化缺陷的IgA1免疫复合物在系膜区沉积以及随后T淋巴细胞激活引起的炎症被认为是该疾病的主要原因,先天固有免疫也... 免疫球蛋白(Ig)A肾病是目前公认最常见的原发性肾小球疾病,高达20%~40%的患者在发病后20年内发展为终末期肾病。针对糖基化缺陷的IgA1免疫复合物在系膜区沉积以及随后T淋巴细胞激活引起的炎症被认为是该疾病的主要原因,先天固有免疫也参与了发病。核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3是新发现的一种模式识别受体,在多种肾脏固有细胞如肾小管上皮细胞、系膜细胞和足细胞上均有表达,受外界刺激活化后可与凋亡相关斑点样蛋白(ASC)形成NOD样受体蛋白3(NLRP3)炎症体,进一步活化胱天蛋白酶-1(Caspase-1),引起白细胞介素-18(IL-18)与白细胞介素-1β(IL-1β)的成熟与释放,参与炎症反应。越来越多证据显示,NLRP3炎症小体参与了IgA肾病的发病及进展,与足细胞、系膜细胞、肾小球内皮细胞及肾小管上皮细胞等肾脏内固有细胞的损伤密切相关。中药可通过作用于NLRP3炎症小体及相关分子,调节炎性因子及其信号通路,发挥治疗IgA肾病的作用及干预其进展。该文系统综述了NLRP3炎症小体在IgA肾病中的作用,以及中药干预IgA肾病NLRP3炎症小体的临床与实验研究进展,以期为中药干预NLRP3炎症小体这一靶点的进一步研究与应用提供参考。 展开更多

关键词 免疫球蛋白(Ig)A肾病 nod样受体蛋白3(nlrp3)炎症小体 中医药 炎症

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抑制NLRP3炎症小体激活可调节自噬改善多囊卵巢综合征颗粒细胞凋亡

15

作者 符山花 包利利 +3 位作者 赵达 李俊 林芳婷 胡荣 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期1646-1652,共7页

目的:在多囊卵巢综合征(PCOS)患者中探讨NOD样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体的表达及其与颗粒细胞凋亡的关系。方法:收集17例PCOS患者(PCOS组)和20例非PCOS患者(对照组)的卵泡液与卵巢颗粒细胞,ELISA检测卵泡液中促炎因子TNF-α、IL-1β和IL... 目的:在多囊卵巢综合征(PCOS)患者中探讨NOD样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体的表达及其与颗粒细胞凋亡的关系。方法:收集17例PCOS患者(PCOS组)和20例非PCOS患者(对照组)的卵泡液与卵巢颗粒细胞,ELISA检测卵泡液中促炎因子TNF-α、IL-1β和IL-18等表达水平,RT-PCR和Western blot检测颗粒细胞中NLRP3 mRNA和NLRP3炎症小体相关蛋白NLRP3、含CARD的凋亡相关斑点样蛋白(ASC)及裂解型天冬氨酸蛋白水解酶1(cleaved caspase-1)和自噬相关蛋白LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ与p62的表达水平;TUNEL法检测两组受试者颗粒细胞的凋亡水平;体外培养人卵巢癌颗粒细胞系KGN细胞,siRNA干扰技术将沉默NLRP3的siRNA(si-NLRP3)和阴性对照序列(si-NC)转染入细胞中,并采用TNF-α进行刺激以模拟PCOS相关的细胞损伤;将KGN细胞按处理方式的不同分为4组:Ctrl组、TNF-α组、TNF-α+si-NLRP3组和TNF-α+si-NC组;ELISA检测各组细胞上清液中脱氢表雄酮(DHEA)、睾酮和IL-1β与IL-18水平;TUNEL法检测各组KGN细胞的凋亡水平;Western blot检测各组KGN细胞中LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、p62、NLRP3、ASC与cleaved caspase-1蛋白表达水平和NF-κB信号通路中NF-κB p-p65的水平(NF-κB p-p65/NF-κB p65)。结果:与对照组相比,PCOS患者卵泡液中TNF-α、IL-1β和IL-18的表达和颗粒细胞中LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、NLRP3的mRNA与NLRP3、ASC和cleaved caspase-1的蛋白表达和细胞的凋亡水平均明显升高(P<0.05或P<0.01),而p62的蛋白表达显著降低(P<0.01);与Ctrl组相比,TNF-α组、TNF-α+si-NC组和TNF-α+si-NLRP3组细胞上清液中DHEA、睾酮和IL-1β与IL-18水平和细胞中LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、ASC与cleaved caspase-1蛋白表达及NF-κB p-p65的水平和细胞凋亡率均明显升高(P<0.05或P<0.01),而p62蛋白却显著降低(P<0.01),NLRP3除在TNF-α+si-NLRP3组明显降低外(P<0.01),在TNF-α组、TNF-α+si-NC组中的表达均明显升高(P<0.01);但与TNF-α组相比,TNF-α+si-NLRP3组的上述检测指标变化趋势均明显降低(P<0.05),TNF-α+si 展开更多

关键词 多囊卵巢综合征 nod样受体蛋白3(nlrp3)炎症小体 颗粒细胞 自噬 凋亡

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加味桃核承气汤对糖尿病心肌病大鼠NLRP3炎症小体的影响 被引量：5

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作者 张亚楠 丁英钧 +2 位作者 徐华洲 李子良 司秋菊 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第16期59-65,共7页

目的:探讨加味桃核承气汤对糖尿病心肌病大鼠NOD样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体激活的影响。方法:选取3~4周龄SPF级雄性SD大鼠,随机分为正常组和造模组。造模组大鼠采用高脂饲料喂养4周后,给予链脲佐菌素(STZ)腹腔注射(35 mg·kg^(-1)... 目的:探讨加味桃核承气汤对糖尿病心肌病大鼠NOD样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体激活的影响。方法:选取3~4周龄SPF级雄性SD大鼠,随机分为正常组和造模组。造模组大鼠采用高脂饲料喂养4周后,给予链脲佐菌素(STZ)腹腔注射(35 mg·kg^(-1))制备糖尿病大鼠模型,再按照空腹血糖随机分为模型组、加味桃核承气汤低、高剂量组(11.7、23.4 g·kg^(-1))、盐酸二甲双胍组(67.5 mg·kg^(-1))。各组连续灌胃给药8周后经超声成像平台检测大鼠心脏功能及结构。股动脉取血检测大鼠空腹血糖(FBG)、甘油三酯(TC)、总胆固醇(TG);苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠心肌病理形态学改变;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测大鼠血清白细胞介素^(-1)β(IL^(-1)β)及白细胞介素^(-1)8(IL^(-1)8)水平;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测心肌组织NLRP3、ASC、Caspase^(-1)、p-NF-κB p65蛋白表达的影响。结果:与正常组比较,模型组大鼠FBG、TC、TG水平显著升高(P<0.01),左室射血分数(EF)、左室短轴缩短率(FS)明显降低(P<0.05),HE染色可见心肌细胞肥大、心肌纤维化,血清中IL^(-1)β、IL^(-1)8含量及心肌组织NLRP3、ASC、Caspase^(-1)、p-NF-κB p65蛋白表达均显著增高(P<0.01)。与模型组比较,加味桃核承气汤低、高剂量组及二甲双胍组可有效降低大鼠FBG、TC、TG水平(P<0.05),EF、FS均明显改善(P<0.05),大鼠心肌组织病理学损伤明显改善,同时血清IL^(-1)β、IL^(-1)8含量及心肌组织NLRP3、ASC、Caspase^(-1)、p-NF-κB p65蛋白表达均明显降低(P<0.05),其中加味桃核承气汤高剂量组改善更明显。结论:桃核承气汤加味可通过抑制NLRP3炎症小体激活从而发挥保护心肌作用。 展开更多

关键词 加味桃核承气汤 糖尿病心肌病 nod样受体蛋白3(nlrp3)炎症小体 炎症反应

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NLRP3炎症小体在糖尿病创面愈合中的作用及中医药干预的研究进展 被引量：4

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作者 牛文晶 刘鹏 +3 位作者 郭燕玲 周鑫 许彪 王军 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第24期253-260,共8页

糖尿病创面久不愈合已成为严重的医学问题,可导致感染、截肢,甚至危及生命,同时造成了巨大社会经济负担。炎症状态的慢性化是糖尿病创面愈合过程延长的重要原因。NOD样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体是一种细胞内蛋白复合物,包括NLRP3、凋亡... 糖尿病创面久不愈合已成为严重的医学问题,可导致感染、截肢,甚至危及生命,同时造成了巨大社会经济负担。炎症状态的慢性化是糖尿病创面愈合过程延长的重要原因。NOD样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体是一种细胞内蛋白复合物,包括NLRP3、凋亡相关颗粒样蛋白(ASC)、胱天蛋白酶-1前体(pro-Caspase-1),激活后可释放促炎因子白细胞介素-1β(IL-1β)和白细胞介素-18(IL-18)参与炎症反应。NLRP3炎症小体的激活与多种炎症性疾病的进展相关,研究发现糖尿病创面微循环障碍、晚期糖基化终产物累积、氧化应激损伤、巨噬细胞长期浸润等多种因素均能对NLRP3炎症小体产生影响,从而导致创面持续的炎症状态。因此,靶向NLRP3炎症小体,减少其过度激活,抑制其过度表达,成为治疗糖尿病创面的新策略。文章从糖尿病创面病理改变与NLRP3炎症小体相关联的角度,总结了调控糖尿病创面氧化应激、中性粒细胞外诱捕网(NETs)/NLRP3炎症小体轴、诱导巨噬细胞向M2型极化、减少晚期糖基化终产物的过量产生及促进自噬等方面,降低NLRP3炎症小体过度表达以促进创面修复的相关研究,并分析了目前中药有效成分及复方抑制NLRP3炎症小体激活的可能作用机制,以期为促进糖尿病创面愈合提供新的靶点,为中医药抗炎、促愈的机制研究提供方向参考。 展开更多

关键词 糖尿病创面 nod样受体蛋白3(nlrp3)炎症小体 中药

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霍山石斛多糖调控NLRP3炎症小体对帕金森病模型神经炎性损伤的抑制作用 被引量：1

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作者 尚小龙 徐陈陈 +6 位作者 董健健 慈春玲 张培 张良杰 金洪洋 李婕 王训 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第11期97-105,共9页

目的:研究霍山石斛多糖(DHP)对帕金森病(PD)模型神经元炎性损伤的抑制机制。方法:将SH-SY5Y细胞分为空白组、模型组和DHP组,噻唑蓝(MTT)比色法检测干预后各组SH-SY5Y细胞存活率,比色分析法检测细胞乳酸脱氢酶(LDH)、活性氧(ROS)、丙二醛... 目的:研究霍山石斛多糖(DHP)对帕金森病(PD)模型神经元炎性损伤的抑制机制。方法:将SH-SY5Y细胞分为空白组、模型组和DHP组,噻唑蓝(MTT)比色法检测干预后各组SH-SY5Y细胞存活率,比色分析法检测细胞乳酸脱氢酶(LDH)、活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)的水平;将小胶质细胞(BV-2)分为空白组、模型组、DHP组和MCC950组(对照组),应用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)和白细胞介素-18(IL-18)含量;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测NOD样受体蛋白3(NLRP3)、接头蛋白凋亡相关的点状蛋白(ASC)、胱天蛋白酶-1(Caspase-1)及IL-1β蛋白的表达量。C57BL/6小鼠设置空白组、模型组、DHP低剂量(100 mg·kg^(-1))组、DHP高剂量(350 mg·kg^(-1))组及MCC950组(对照组),每组10只。通过平衡木实验、悬挂实验和转棒实验观察小鼠运动平衡和协调能力;免疫荧光染色法检测小鼠中脑黑质小胶质细胞Iba-1和酪氨酸羟化酶(TH)表达水平;FJB染色检测中脑黑质多巴胺神经元损伤情况;ELISA检测小鼠中脑组织IL-1β、IL-18和TNF-α等炎症因子表达水平;Western blot检测NLRP3、ASC、Caspase-1和IL-1β蛋白表达水平。结果:与空白组比较,模型组细胞存活率降低,LDH、ROS和MDA水平升高(P<0.05),SOD水平降低(P<0.05);与模型组比较,DHP组细胞存活率升高,LDH、ROS和MDA水平降低(P<0.01),SOD水平升高(P<0.01)。与空白组比较,BV-2细胞模型组炎症因子IL-1β、IL-18和TNF-α水平升高(P<0.05),NLRP3、Caspase-1、IL-1β及ASC蛋白表达增多(P<0.05);与模型组比较,DHP组及MCC950组炎症因子IL-1β、IL-18和TNF-α水平降低(P<0.01),NLRP3、Caspase-1、IL-1β及ASC蛋白表达减少(P<0.01)。与空白组比较,模型组小鼠通过平衡木时间增多(P<0.05),转棒实验在棒时间减少(P<0.05),IL-1β、IL-18和TNF-α水平升高(P<0.05),Iba-1表达增多(P<0.05),TH表达水平降低(P<0.05),中脑黑� 展开更多

关键词 帕金森病 霍山石斛多糖 氧化应激 神经炎症 nod样受体蛋白3(nlrp3)炎症小体

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