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NLRP3炎症小体介导的炎症反应参与糖尿病导致的肾损伤和脂代谢异常 被引量：32
1
作者 朱艳 梁子辉 +4 位作者 任韫卓 吴明 韩伟霞 肖夏 杜春阳 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期53-58,共6页
目的:观察NLRP3在糖尿病肾组织炎症及胆固醇代谢中的作用及机制。方法:实验小鼠分为4组:对照(WT)组、糖尿病(WT+STZ)组、NLRP3基因敲除(NKO)组和NLRP3基因敲除+糖尿病(NKO+STZ)组。腹腔注射STZ构建糖尿病小鼠模型。观察小鼠血尿生化指... 目的:观察NLRP3在糖尿病肾组织炎症及胆固醇代谢中的作用及机制。方法:实验小鼠分为4组:对照(WT)组、糖尿病(WT+STZ)组、NLRP3基因敲除(NKO)组和NLRP3基因敲除+糖尿病(NKO+STZ)组。腹腔注射STZ构建糖尿病小鼠模型。观察小鼠血尿生化指标及肾组织形态学;电镜及油红O染色观察肾组织脂滴形成情况;Western blot方法检测NLRP3、ASC、caspase-1、IL-1β、IL-18及胆固醇代谢指标SCAP、SREBP-2、HMGCR、LDLR、LXRα和ABCA1的蛋白表达情况及p38 MAPK的磷酸化情况。结果:与WT组小鼠相比,糖尿病小鼠肾组织的NLRP3表达和p38 MAPK的磷酸化水平显著升高;肾组织内炎症明显,胆固醇含量增加伴肾功能受损;敲除NLRP3显著减轻糖尿病小鼠肾组织炎症反应及胆固醇沉积,同时抑制p38 MAPK的磷酸化。结论:NLRP3介导的炎症反应在糖尿病肾损伤及脂代谢异常中发挥重要作用,这种作用可能与p38 MAPK信号通路的活化密切相关。 展开更多
关键词 糖尿病肾病 nlrp3蛋白 炎症 胆固醇 P38 MAPK信号通路
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右美托咪定通过c-Fos/NLRP3/caspase-1级联抑制LPS诱发的小胶质细胞炎症反应 被引量：9
2
作者 邴海龙 张希峣 +1 位作者 王朋飞 储勤军 《临床麻醉学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期798-802,共5页
目的探讨右美托咪定通过c-Fos/NLRP3/caspase-1级联抑制脂多糖(LPS)诱发的小胶质细胞炎症反应。方法选取新生的SD大鼠,取其小胶质细胞进行原代培养及分离纯化。采用LPS诱导建立小胶质细胞炎症模型。采用MTT法选取右美托咪定抑制LPS诱导... 目的探讨右美托咪定通过c-Fos/NLRP3/caspase-1级联抑制脂多糖(LPS)诱发的小胶质细胞炎症反应。方法选取新生的SD大鼠,取其小胶质细胞进行原代培养及分离纯化。采用LPS诱导建立小胶质细胞炎症模型。采用MTT法选取右美托咪定抑制LPS诱导小胶质细胞炎症反应的最适宜浓度。将细胞分为三组:对照组、LPS组和右美托咪定治疗组(D组)。采用实时定量PCR法测定细胞中IL-1β和TNF-α的mRNA表达量;采用ELISA法检测细胞上清液中IL-1β和TNF-α的含量;采用Western blot法检测原癌基因c-Fos、NLRP3和caspase-1的蛋白含量。结果与对照组比较,LPS组小胶质细胞中炎性因子IL-1β和TNF-α的mRNA表达量均明显升高(P<0.05);D组IL-1β和TNF-α的mRNA表达量明显低于LPS组(P<0.05)。与对照组比较,LPS组中小胶质细胞中炎性因子IL-1β和TNF-α的含量均明显增加(P<0.05);而D组IL-1β和TNF-α的含量明显低于LPS组(P<0.05)。与对照组比较,LPS组小胶质细胞中c-Fos、NLRP3和caspase-1的蛋白含量均明显增加(P<0.01);而D组c-Fos、NLRP3和caspase-1的蛋白含量明显低于LPS组(P<0.05)。结论右美托咪定可抑制LPS诱发的小胶质细胞中炎性因子IL-1β和TNF-α的mRNA表达量及蛋白含量,推测其作用机制可能与抑制c-Fos/NLRP3/caspase-1级联反应有关。 展开更多
关键词 右美托咪定 脂多糖 C-FOS nlrp3蛋白 CASPASE-1 炎症反应 小胶质细胞
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18α甘草次酸对葡聚糖硫酸钠诱导小鼠急性溃疡性结肠炎的保护作用及机制研究
3
作者 张娟 周萍 穆先敏 《中国医师杂志》 CAS 2024年第2期234-239,共6页
目的探究18α甘草次酸(18α-GA)对葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导小鼠急性溃疡性结肠炎(UC)的保护作用,为18α-GA的临床应用提供理论依据和实验基础。方法将40只雄性C57BL/6J小鼠随机分为5组:DSS模型组,阳性药对照组,18α-GA高、中、低剂量组,每... 目的探究18α甘草次酸(18α-GA)对葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导小鼠急性溃疡性结肠炎(UC)的保护作用,为18α-GA的临床应用提供理论依据和实验基础。方法将40只雄性C57BL/6J小鼠随机分为5组:DSS模型组,阳性药对照组,18α-GA高、中、低剂量组,每组8只,5组小鼠均采用3%DSS溶液连续喂养7 d建立急性UC动物模型,同时各组分别每天腹腔注射100 mg/kg生理盐水、100 mg/kg柳氮磺吡啶、40 mg/kg 18α-GA、20 mg/kg 18α-GA、10 mg/kg 18α-GA。每天测量并记录小鼠的体重,评估小鼠疾病活动指数(DAI)。第8天处死小鼠,取小鼠结肠测量其长度;切片观察结肠黏膜并进行病理学评分;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测结肠组织中NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)炎症小体通路相关蛋白表达;酶联免疫吸附试验(ELISA)测定结肠组织中IL-1β含量。结果与DSS模型组比较,18α-GA高、中剂量组第7天时的体重减轻幅度明显更小(均P<0.05);结肠长度更长(均P<0.05),结肠黏膜病理学评分明显更低(均P<0.05);结肠组织中GSDMD、cleaved-caspase1及IL-1β的表达显著更低(均P<0.05);18α-GA高剂量组DAI评分更低(P<0.05);结肠组织中NLRP3表达更低(P<0.05)。结论18α-GA可通过抑制NLRP3炎症小体通路的激活,改善DSS诱导的小鼠急性溃疡性结肠炎。 展开更多
关键词 结肠炎 溃疡性 18α-甘草次酸 nlrp3蛋白 白细胞介素1Β 炎性肠疾病
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NLRP3炎性复合体与肺纤维化关系研究新进展 被引量：6
4
作者 况菊 谢敏 《华西医学》 CAS 2017年第6期936-939,共4页
肺纤维化包括一系列以肺间质及实质细胞外基质沉积、纤维形成、对肺结构不可逆性破坏为特点的异质性疾病。NLRP3炎性复合体主要是通过促进白细胞介素(interleukin,IL)-1β和IL-18成熟、分泌,从而在包括肺纤维化在内的多种病理过程中起... 肺纤维化包括一系列以肺间质及实质细胞外基质沉积、纤维形成、对肺结构不可逆性破坏为特点的异质性疾病。NLRP3炎性复合体主要是通过促进白细胞介素(interleukin,IL)-1β和IL-18成熟、分泌,从而在包括肺纤维化在内的多种病理过程中起重要作用。目前新的研究发现NLRP3蛋白可以不经过复合体的形成而影响肺纤维化。该文对NLRP3炎性复合体及NLRP3蛋白参与肺纤维化的研究新进展进行了综述。 展开更多
关键词 nlrp3炎性复合体 nlrp3蛋白 肺纤维化 肌成纤维细胞 转化生长因子Β
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MCC950对大鼠脑缺血再灌注损伤后NLRP3炎性小体活化的影响 被引量：2
5
作者 潘海英 张楠 +1 位作者 周悦 李晓云 《中国新药与临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第12期754-758,共5页
目的探讨MCC950对脑缺血再灌注损伤大鼠神经功能的保护作用及可能的机制。方法48只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、溶剂组和MCC950组,每组12只。制备大鼠脑缺血再灌注损伤模型后,MCC950组腹腔注射MCC9503 mg·kg^(-1),qd×... 目的探讨MCC950对脑缺血再灌注损伤大鼠神经功能的保护作用及可能的机制。方法48只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、溶剂组和MCC950组,每组12只。制备大鼠脑缺血再灌注损伤模型后,MCC950组腹腔注射MCC9503 mg·kg^(-1),qd×7 d,溶剂组则以同样的方式给予等量的生理盐水,假手术组和模型组不作任何药物干预。于再灌注24 h和末次给药后,利用Zea-Longa法对各组大鼠进行神经功能缺损评分,TTC染色法测定脑梗死体积,实时荧光定量PCR术检测脑梗死区组织中NLRP3、ASC和caspase-1基因表达,Western blot法检测脑梗死区组织中NLRP3、ASC、pro-caspase-1和caspase-1蛋白表达,酶联免疫吸附试验检测脑梗死区组织中白细胞介素(IL)-1β和IL-18水平。结果与假手术组比较,模型组、溶剂组和MCC950组大鼠再灌注24 h后和末次给药后神经功能缺损评分升高,脑梗死体积百分比升高,脑梗死区组织中NLRP3、ASC和caspase-1 mRNA和蛋白表达量升高,pro-caspase-1蛋白表达量降低,IL-1β和IL-18水平升高,差异均有显著意义(P<0.05)。与模型组和溶剂组比较,MCC950组大鼠末次给药后神经功能缺损评分降低,脑梗死体积百分比降低,脑梗死区组织中NLRP3、ASC和caspase-1 mRNA和蛋白表达量降低,pro-caspase-1蛋白表达量升高,IL-1β和IL-18水平降低,差异均有显著意义(P<0.05)。结论MCC950可有效改善脑缺血再灌注损伤大鼠神经功能,减少脑梗死体积,其作用机制可能与抑制NLRP3炎性小体活化介导的炎症反应有关。 展开更多
关键词 脑缺血 再灌注损伤 MCC950 nlrp3蛋白 大鼠
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NLRP3炎性复合体及其在移植物抗宿主病中的作用 被引量：1
6
作者 仲小敏 徐开林 《国际输血及血液学杂志》 CAS 2015年第1期45-49,共5页
核苷酸结合寡聚化结构域样受体（NLR）家族含热蛋白结构域蛋白（NLRP）3炎性复合体为大分子蛋白复合物,通过半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶（caspase）-1调控细胞因子白细胞介素（IL）-1β、-18成熟与分泌,诱导caspase-1依赖性细胞死亡（pyropt... 核苷酸结合寡聚化结构域样受体（NLR）家族含热蛋白结构域蛋白（NLRP）3炎性复合体为大分子蛋白复合物,通过半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶（caspase）-1调控细胞因子白细胞介素（IL）-1β、-18成熟与分泌,诱导caspase-1依赖性细胞死亡（pyroptosis）,其激活过程受到严密调控.近年来,多项研究结果显示NLRP3炎性复合体与移植物抗宿主病（GVHD）的发生、发展及其严重程度密切相关.笔者拟就NLRP3炎性复合体及其在GVHD防治中的作用进行综述. 展开更多
关键词 nlrp3蛋白 人 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶 移植物抗宿主病
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猪NLRP3蛋白的原核表达与多克隆抗体制备 被引量：1
7
作者 张艳 王文秀 +2 位作者 刘海隆 曹宗喜 谭树义 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期1075-1079,共5页
为了获得猪源NLRP3重组蛋白以及针对猪NLRP3蛋白的多克隆抗体,本试验采用原核表达技术对猪源NLRP3蛋白的主要抗原区域进行了截短表达与鉴定,并以重组蛋白为免疫原免疫兔制备兔抗NLRP3蛋白多克隆抗体。结果显示,经RT-PCR方法扩增到大小为... 为了获得猪源NLRP3重组蛋白以及针对猪NLRP3蛋白的多克隆抗体,本试验采用原核表达技术对猪源NLRP3蛋白的主要抗原区域进行了截短表达与鉴定,并以重组蛋白为免疫原免疫兔制备兔抗NLRP3蛋白多克隆抗体。结果显示,经RT-PCR方法扩增到大小为864 bp的NLRP3蛋白的主要抗原区域基因;将目的片段定向克隆至pET-32α原核表达载体,转化大肠埃希菌BL21,经IPTG诱导获得了大小为50 000的重组蛋白;重组蛋白经纯化后Western blot检测其可与抗His标签单克隆抗体发生特异性反应;以纯化蛋白为免疫原制备的兔抗NLRP3蛋白多克隆抗体的抗体效价达1∶25 600,Western blot检测其可与NLRP3重组蛋白发生特异性反应。结果表明,获得了具有良好反应活性的NLRP3重组蛋白与多克隆抗体,为研究NLRP3蛋白的结构与功能、NLRP3蛋白与猪炎症性疾病的相互作用机制奠定了基础。 展开更多
关键词 猪 nlrp3蛋白 原核表达 多克隆抗体
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NLRP3炎性复合体在异基因造血干细胞移植不同预处理方案所致肝损伤中的作用比较 被引量：1
8
作者 黄玉金 房婷 +6 位作者 付金玉 吴进燕 化静 刘迷迷 郭娜 徐开林 曾令宇 《国际输血及血液学杂志》 CAS 2014年第6期501-506,共6页
目的 探讨NOD样受体蛋白（NLRP）3炎性复合体在异基因造血干细胞移植（allo-HSCT）不同预处理方案中所致肝损伤的作用.方法 选择50只无特殊病原体（SPF）级BALB/c（H-2Kd）雄性小鼠作为研究对象.将其采用计算机随机分组法分为实验组（n... 目的 探讨NOD样受体蛋白（NLRP）3炎性复合体在异基因造血干细胞移植（allo-HSCT）不同预处理方案中所致肝损伤的作用.方法 选择50只无特殊病原体（SPF）级BALB/c（H-2Kd）雄性小鼠作为研究对象.将其采用计算机随机分组法分为实验组（n=40）和对照组（n=10）,再按照allo-HSCT前预处理方案不同,将实验组受鼠分为白消安/环磷酰胺（BU/CY）预处理组（n=20）和全身照射（TBI）预处理组（n=20）.实验过程中对动物的处置符合动物伦理学标准.于移植后第15天处死各组受鼠,收取其骨髓及肝脏标本,检测骨髓嵌合率和白细胞计数,并计算肝脏指数.将肝脏标本分成二部分,一部分通过苏木精-伊红（HE）染色、免疫组织化学染色及Masson 3色染色分析肝脏组织的形态学变化,进行肝静脉闭塞病（HVOD）病理学评分;另一部分采用实时荧光定量聚合酶链反应（PCR）技术检测各组受鼠肝脏组织中炎性细胞因子白细胞介素（IL）-1β、-18的相对表达量,评价细胞因子在移植后肝脏损伤中的作用;并检测细胞因子水解酶半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶（caspase）-1与NLRP3炎性复合体在各移植受鼠肝脏组织中的相对表达量,分析其在不同预处理方案所致HVOD中的作用.结果 ①实验组受鼠骨髓细胞均成功植入,在移植后第15天,嵌合率均大于98.0％.②BU/CY预处理组受鼠并发HVOD的病理损伤程度较TBI预处理组严重,BU/CY预处理组受鼠的肝脏指数水平低于TBI预处理组;TBI预处理组受鼠中,5只受鼠的HVOD病理评分为中度,5只为重度,而BU/CY预处理组10只受鼠为重度.③BU/CY预处理组受鼠炎性细胞因子IL 1β、-18的相对表达量是TBI预处理组的13.9倍和5.5倍,两组比较,差异均有统计学意义（P＜0.05）.④BU/CY预处理组受鼠caspase-1的相对表达量为TBI预处理组的19.5倍,二者比较,差异有统计学意义（P＜0.05）;BU/CY预处理组受鼠NLRP3的相对� 展开更多
关键词 nlrp3蛋白 人类 细胞因子 白消安 环磷酰胺 全身照射 肝静脉闭塞病
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加味四妙散对急性痛风性关节炎大鼠的疗效及对滑膜组织中嘌呤能离子通道型受体7 NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3表达的影响
9
作者 付朝江 贺渊哲 +2 位作者 杨卓 李昂 肖群飞 《中国药物与临床》 CAS 2024年第6期341-347,F0003,共8页
目的通过研究加味四妙散干预急性痛风性关节炎大鼠滑膜组织中嘌呤能离子通道型受体7(P2X7R)、NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)表达的影响,探讨加味四妙散在防治急性痛风性关节炎的疗效及抗炎作用机制。方法选择雄性SD大鼠60只,... 目的通过研究加味四妙散干预急性痛风性关节炎大鼠滑膜组织中嘌呤能离子通道型受体7(P2X7R)、NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)表达的影响,探讨加味四妙散在防治急性痛风性关节炎的疗效及抗炎作用机制。方法选择雄性SD大鼠60只,按照随机数字表法分为6组,分别为空白对照组、模型组、秋水仙碱组、加味四妙散低剂量组、加味四妙散中剂量组、加味四妙散高剂量组,每组10只。空白对照组给予等体积0.9%氯化钠注射液在相应的部位,其余5组复制高尿酸血症并急性痛风性关节炎大鼠模型。加味四妙散组予加味四妙散低、中、高剂量水提液(4.24 g/kg、8.48 g/kg、16.96 g/kg)灌胃、秋水仙碱组予秋水仙碱混悬液(3 mg/kg)灌胃。模型组予等量0.9%氯化钠注射液灌胃。经过4 h、8 h、12 h、24 h和48 h的治疗,对右踝关节的肿胀情况及大鼠步态进行观察。末次给药2 h后,通过腹主动脉采血,采用生化法检测血清尿酸浓度、肝肾功能及血清三磷酸腺苷(ATP)水平,酶联免疫吸附试验(ELISA)测定血清中白细胞介素(IL)-1β、IL-8含量,取受试踝关节滑膜组织,苏木精-伊红染色(HE)观察滑膜组织病理情况,利用蛋白免疫印迹法检测滑膜组织中NLRP3、P2X7R蛋白的表达。结果除空白对照组外,各组大鼠的踝关节肿胀率从造模后4~8 h开始上升,24 h达高峰后下降。在造模48 h后,秋水仙碱组和加味四妙散的低、中、高剂量组的肿胀率减轻,步态逐渐改善(P<0.05),与空白组比较,模型组中滑膜组织表现出关节炎病理改变,显微镜下可见滑膜脱落、坏死,滑膜细胞增生,相较于模型组,加味四妙散的低、中、高剂量组以及秋水仙碱组在血清ATP、IL-1β、血尿酸、IL-8均降低,滑膜组织关节炎病理情况得到改善。滑膜组织P2X7R、NLRP3蛋白表达均降低(P<0.05),与秋水仙碱组相比,加味四妙散对大鼠肝肾功能的损害较小(P<0.05)� 展开更多
关键词 加味四妙散 高尿酸血症 关节炎 痛风性 P2X7R、nlrp3蛋白
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