IL-21和CCL19修饰可提高NKP30 CAR-T细胞对肺癌的杀伤效率并促进其肿瘤浸润

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作者 周智锋 柳硕岩 +7 位作者 李洁羽 陈明秋 林辉 陈宇杰 陈伟杰 林军鹏 周航 郑庆丰 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第10期1926-1936,共11页

目的探讨细胞因子IL-21和趋化因子CCL19修饰的NKP30 CAR-T细胞是否增强对肺癌的杀伤和浸润作用。方法在NKP30 CAR基础上融合基因IL-21和CCL19构建IL-21-CCL19 NKP30 CAR;CAR-T细胞的培养使用CD3CD28单抗及细胞因子IL-2刺激;流式细胞术... 目的探讨细胞因子IL-21和趋化因子CCL19修饰的NKP30 CAR-T细胞是否增强对肺癌的杀伤和浸润作用。方法在NKP30 CAR基础上融合基因IL-21和CCL19构建IL-21-CCL19 NKP30 CAR;CAR-T细胞的培养使用CD3CD28单抗及细胞因子IL-2刺激;流式细胞术检测免疫细胞表型;迁移实验检测IL-21对免疫细胞的迁移作用;乳酸脱氢酶(LDH)及成球实验检测CAR-T细胞的杀伤及浸润能力;酶联免疫斑点技术(ELISPOT)检测IFN-γ的分泌数量;ELISA检测IL-21及CCL19的分泌情况;体内实验中,将肿瘤细胞显微注射到斑马鱼卵黄囊,构建斑马鱼移植瘤模型,24 h后将免疫细胞注射至同样部位,体式荧光显微镜拍摄荧光。结果NKP30配体(B7H6)在正常组织及血液细胞不表达,在肺癌细胞上高表达(90%以上)。IL-21-CCL19 NKP30 CAR-T细胞与NKP30 CAR-T细胞和常规T细胞相比,具有更强的增殖能力、迁移能力及中心记忆T细胞的形成(P<0.001),免疫抑制分子CTLA4与PD1显著降低(P<0.005),对肺癌细胞具有更强的杀伤能力(P<0.001),伴随IFN-γ数量明显增加(P<0.001)。IL-21-CCL19 CAR-T细胞杀伤肺癌细胞中产生大量细胞因子IL‑21(3152.33±526.74 pg/mL)和趋化因子CCL19(1853±211.95 pg/mL)。体内实验中,CAR-T细胞和普通T细胞比较,具有较强的杀伤能力和增殖能力,但2种CAR-T细胞无明显差异(P>0.05)。结论IL-21-CCL19 NKP30 CAR-T细胞更容易浸润到肿瘤内部,有效杀伤肿瘤细胞,同时产生更多的记忆T细胞。 展开更多

关键词 肺癌 nkp30 嵌合抗原受体基因修饰T淋巴细胞 IL-21 CCL19

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基于NK细胞受体的CAR-T细胞疗法在实体瘤治疗中的研究进展 被引量：3

2

作者 张玉莹 林怡婷 +2 位作者 王首占 初明 王月丹 《中国医药导刊》 2022年第11期1055-1061,共7页

嵌合抗原受体(CAR)T细胞免疫疗法属于过继性细胞免疫治疗,通过将CAR的特异性与T细胞免疫作用相结合,再经过特异性识别对恶性肿瘤细胞进行杀伤。NK细胞是免疫系统中发挥细胞毒作用最重要的细胞之一,主要依赖于其细胞膜表面的激活性受体... 嵌合抗原受体(CAR)T细胞免疫疗法属于过继性细胞免疫治疗,通过将CAR的特异性与T细胞免疫作用相结合,再经过特异性识别对恶性肿瘤细胞进行杀伤。NK细胞是免疫系统中发挥细胞毒作用最重要的细胞之一,主要依赖于其细胞膜表面的激活性受体和抑制性受体参与天然免疫和适应性免疫。基于NK细胞受体的CAR-T细胞可以识别表达其配体的病毒感染或者突变恶性细胞,具有多靶点、广谱性、不易耐药的特点,可以用于多种血液系统及实体性恶性肿瘤的治疗,应用前景良好。本研究梳理了CAR-T细胞疗法的原理及其局限性,以及基于NK细胞受体的CAR-T细胞疗法,分析了实体瘤中CAR-T细胞细胞免疫治疗的主要困难及其解决策略,重点探讨了NK细胞激活性受体NKG2D、NKp30及其配体分别在肿瘤治疗中的研究和应用,以期为基于NK细胞受体的CAR-T细胞疗法治疗实体瘤提供借鉴。 展开更多

关键词 细胞治疗 NK细胞受体 实体瘤 NKG2D nkp30

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NK细胞毒受体抗肝细胞癌的研究进展

3

作者 韩志毅 孙新锋 +5 位作者 马文峰 张卫 邢宇锋 冯文杏 周小舟 周大桥 《中西医结合肝病杂志》 CAS 2018年第4期214-216,共3页

目的：肝细胞癌（HCC）已经成为全球最常见的恶性肿瘤之一，成为我国第二大癌症死因。随着对免疫学研究的深入及免疫治疗的开展，发现免疫细胞具有显著的抗癌作用，但其具体机制及作用靶点尚不清楚。HCC患者免疫力低下，NCRs数量减少，N... 目的：肝细胞癌（HCC）已经成为全球最常见的恶性肿瘤之一，成为我国第二大癌症死因。随着对免疫学研究的深入及免疫治疗的开展，发现免疫细胞具有显著的抗癌作用，但其具体机制及作用靶点尚不清楚。HCC患者免疫力低下，NCRs数量减少，NK活性降低是HCC发展、转移的一个重要因素，NCRs是NK细胞发挥免疫杀伤的重要机制，增强NCRs活性是NK细胞发挥抗肿瘤作用的重要方法，笔者主要综述了目前关于固有免疫细胞NK通过NCRs发挥抗肿瘤作用机制的研究进展，探讨通过激活或增强NCRs增强NK细胞活性，改善HCC患者NK细胞活性低下，提高其抗HCC的作用。 展开更多

关键词 NK细胞毒受体 HCC NK nkp46 nkp44 nkp30

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新型共刺激分子B7-H6的研究进展 被引量：2

4

作者 韩艳玲 吕雪莹 《国际免疫学杂志》 CAS 2013年第4期287-289,共3页

B7-H6是近年来发现的共刺激分子B7家族新成员，主要表达于肿瘤组织，B7-H6是B7家族第一个特异表达在肿瘤组织中的成员，能够促进NK细胞的活化，负向调节肿瘤逃逸和固有免疫。目前对于B7-H6与其配体NKp30的相互作用的确切机制尚未完全明... B7-H6是近年来发现的共刺激分子B7家族新成员，主要表达于肿瘤组织，B7-H6是B7家族第一个特异表达在肿瘤组织中的成员，能够促进NK细胞的活化，负向调节肿瘤逃逸和固有免疫。目前对于B7-H6与其配体NKp30的相互作用的确切机制尚未完全明确，故对近年来关于B7-H6的分子结构、表达与分布情况，配体分子NKp30与肿瘤的关系研究很有意义。 展开更多

关键词 B7-H6 nkp30 肿瘤

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启动NK细胞细胞毒活性的自然细胞毒受体和协同受体

5

作者 胡建国 《蚌埠医学院学报》 CAS 2002年第6期560-562,共3页

关键词 受体 抗原 自然细胞毒受体 nkp46 nkp44 nkp30 2B4

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B7家族成员B7-H6在肿瘤免疫中的研究进展 被引量：3

6

作者 陈颖 何杨 莫骏 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第12期932-934,共3页

B7-H6是B7家族新成员，能够绑定受体NKp30启动NKp30依赖的固有免疫应答。B7-H6在正常组织细胞不表达而选择性的表达在一些肿瘤细胞和恶性血液病患者的血和骨髓，属于肿瘤诱导的自身分子。在感染和肿瘤状态下，应激能够调控B7-H6的表达... B7-H6是B7家族新成员，能够绑定受体NKp30启动NKp30依赖的固有免疫应答。B7-H6在正常组织细胞不表达而选择性的表达在一些肿瘤细胞和恶性血液病患者的血和骨髓，属于肿瘤诱导的自身分子。在感染和肿瘤状态下，应激能够调控B7-H6的表达。共刺激分子B7-H6作为连接固有免疫与适应性免疫应答的桥梁，在肿瘤免疫治疗方面的运用前景广泛，大量针对B7-H6的肿瘤靶向治疗方法在荷瘤小鼠身上取得了显著疗效”。本文就B7-H6在肿瘤免疫方面的研究进展展开综述。 展开更多

关键词 肿瘤免疫 B7家族 家族成员 固有免疫应答 nkp30 血液病患者 共刺激分子 治疗方法

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新型共刺激分子B7-H6的研究现状 被引量：1

7

作者 仵菲斐 克晓燕 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期295-298,共4页

B7-H6是近年来发现的新型共刺激分子,在正常细胞无表达,较特异性地表达于肿瘤细胞,并可在炎症状态下诱导表达于抗原呈递细胞,可被去乙酰化酶抑制剂下调表达。B7-H6通过NK细胞表面N Kp30活化NK细胞而杀伤肿瘤及转化细胞,并释放TNFα、IF... B7-H6是近年来发现的新型共刺激分子,在正常细胞无表达,较特异性地表达于肿瘤细胞,并可在炎症状态下诱导表达于抗原呈递细胞,可被去乙酰化酶抑制剂下调表达。B7-H6通过NK细胞表面N Kp30活化NK细胞而杀伤肿瘤及转化细胞,并释放TNFα、IFNγ等细胞因子。细胞表面的B7-H6分子脱落后形成可溶性分子。B7-H6/N Kp30通路可能参与了干燥综合征的发生。因此,B7-16/NKp30通路可能成为肿瘤、炎症、自身免疫性疾病等治疗的新靶点。 展开更多

关键词 B7-H6 NK细胞 nkp30 肿瘤免疫

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新型NKp30 CAR-T细胞的构建及其对HGC27胃癌细胞杀伤作用的研究

8

作者 张玉莹 茅鹤婷 +8 位作者 黄仲佳 林怡婷 马腾云 李燕 高翔 陈佳钰 初明 谢雍 王月丹 《生命的化学》 CAS 2022年第5期911-920,共10页

本研究通过构建携带以NKp30为基础的嵌合抗原受体(CAR)的慢病毒载体,利用第三代慢病毒质粒表达系统在HEK-293T细胞中包装获得慢病毒,并在Jurkat细胞中检测慢病毒滴度达7.6×10^(6)U/m L。然后,转染人外周血T细胞,制备NKp30 CAR-T细... 本研究通过构建携带以NKp30为基础的嵌合抗原受体(CAR)的慢病毒载体,利用第三代慢病毒质粒表达系统在HEK-293T细胞中包装获得慢病毒,并在Jurkat细胞中检测慢病毒滴度达7.6×10^(6)U/m L。然后,转染人外周血T细胞,制备NKp30 CAR-T细胞,利用流式细胞术检测CAR的转导效率约为71.9%,分别利用7-AAD法、ELISA法和CFSE法检测其对胃癌细胞系杀伤效率、干扰素-γ的分泌水平以及增殖能力的影响,并通过流式细胞术检测NKp30 CAR-T细胞的分子标志物。结果显示,NKp30CAR-T细胞对表达B7-H6分子的HGC27胃癌细胞系具有显著的杀伤作用,杀伤效率明显高于T细胞对照组(P<0.05),但对MKN74和AGS细胞系的杀伤效率与T细胞对照组无统计学差异(P>0.05);与HGC27细胞共培养后,NKp30 CAR-T细胞分泌干扰素-γ的水平和增殖能力明显高于T细胞对照组(P<0.05)。流式细胞术结果显示,大部分NKp30 CAR-T细胞的表型为中央记忆性T细胞。通过本研究获得的NKp30CAR-T细胞可通过NKp30受体识别并杀伤胃癌靶细胞。 展开更多

关键词 nkp30 嵌合抗原受体 B7-H6 T细胞 胃癌

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乙型肝炎病毒X蛋白对B7-H6基因的激活作用

9

作者 邹勇 杨小安 +2 位作者 郑常龙 潘兴飞 徐启桓 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 2018年第3期255-258,共4页

目的探讨乙型肝炎病毒X蛋白（HBx）对人B7-H6基因的激活作用。方法提取人基因组DNA作为模版，聚合酶链反应（polymerase chain reaction，PCR）获取约2.2 Kb B7-H6基因启动子DNA片段，扩增产物经KpnI和HindⅢ双酶切后插入到pGL3-Basic... 目的探讨乙型肝炎病毒X蛋白（HBx）对人B7-H6基因的激活作用。方法提取人基因组DNA作为模版，聚合酶链反应（polymerase chain reaction，PCR）获取约2.2 Kb B7-H6基因启动子DNA片段，扩增产物经KpnI和HindⅢ双酶切后插入到pGL3-Basic中构建双荧光素酶报告基因pGL3-B7-H6，测序正确后分别与HBV病毒蛋白S、C和X的真核表达质粒pCMV-HBs、pCMV-HBc和pCMV-HBx共转染HepG2细胞，检测荧光素酶活性变化，然后用不同剂量的pCMV-HBx表达质粒与pGL3-B7-H6共转染HepG2细胞，Western blot检测B7-H6蛋白表达水平。结果本研究克隆出的B7-H6基因启动子片段序列与GenBank中记录一致，pGL3-B7-H6构建成功。pGL3-B7-H6启动子质粒转染HepG2细胞荧光素酶活性较转染空载体pGL3-Basic组显著增加（5.24±1.25 vs. 1.12±0.31，P＝0.005）。pGL3-B7-H6启动子质粒与pCMV-HBx质粒共转染HepG2细胞，荧光素酶活性较对照组显著增加（17.60±3.36 vs. 6.73±1.36，P＝0.001）。Western blot结果显示，HBx蛋白可显著增强B7-H6蛋白的表达。结论本研究发现HBx蛋白可能增强B7-H6基因启动子的转录活性并促进B7-H6蛋白的表达。 展开更多

关键词 nkp30 B7-H6 启动子 肝炎病毒 乙型

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B7-H6在恶性肿瘤中的研究进展

10

作者 刘学静(综述) 徐燕颖(审校) 《实用肿瘤学杂志》 CAS 2021年第1期46-49,共4页

B7-H6是新近发现的免疫球蛋白超家族成员,是NK细胞表面活化性受体NKP30的膜结合配体。B7-H6较特异地表达于多种肿瘤组织,并且其表达水平与多种临床病理参数及预后显著相关。细胞表面B7-H6胞外域脱落后形成可溶性B7-H6,下调NKP30介导的N... B7-H6是新近发现的免疫球蛋白超家族成员,是NK细胞表面活化性受体NKP30的膜结合配体。B7-H6较特异地表达于多种肿瘤组织,并且其表达水平与多种临床病理参数及预后显著相关。细胞表面B7-H6胞外域脱落后形成可溶性B7-H6,下调NKP30介导的NK细胞毒性及细胞因子的分泌。研究发现B7-H6通过蛋白酶抑制剂、Myc、异常的免疫应答、增殖和抗凋亡等调控机制促进恶性肿瘤的发生发展。目前对B7-H6基因的干预治疗是一种新型的肿瘤治疗策略,相关的免疫治疗正在探索中。总之,B7-H6已被证明是一种潜在的生物标志物和有价值的治疗靶点,可用于癌症的诊断、治疗和预后评估。 展开更多

关键词 B7-H6 sB7-H6 nkp30 肿瘤免疫 免疫治疗

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B7家族成员B7H6在肿瘤中的研究进展

11

作者 李德勤 陈剑 《临床医学进展》 2022年第7期6149-6155,共7页

B7H6又称NCR3LG1,是NK细胞表面受体NKp30的配体。NK细胞是先天免疫细胞,在识别和杀死肿瘤细胞方面发挥着关键作用。B7H6在不同类型的癌症中表达,并且与预后良好或不良相关。B7H6通过调节肿瘤生物学行为发挥多方面的作用。目前B7H6可能... B7H6又称NCR3LG1,是NK细胞表面受体NKp30的配体。NK细胞是先天免疫细胞,在识别和杀死肿瘤细胞方面发挥着关键作用。B7H6在不同类型的癌症中表达,并且与预后良好或不良相关。B7H6通过调节肿瘤生物学行为发挥多方面的作用。目前B7H6可能成为免疫治疗的关键潜在靶点。 展开更多

关键词 B7H6 nkp30 癌症 免疫治疗

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原发性失眠患者外周血淋巴细胞亚群与NK细胞及其活化性受体表达水平及意义 被引量：5

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作者 徐天朝 杨冀 +3 位作者 王奇 张岩 韩菲 于卉影 《临床军医杂志》 CAS 2019年第3期268-271,共4页

目的探讨原发性失眠患者外周血淋巴细胞亚群与NK细胞及其活化性受体的表达水平。方法选取北部战区总医院心理科收治的33例原发性失眠患者为观察组,另选取同期健康体检者11例为健康组。采用流式细胞术检测两组外周血淋巴细胞亚群比例、N... 目的探讨原发性失眠患者外周血淋巴细胞亚群与NK细胞及其活化性受体的表达水平。方法选取北部战区总医院心理科收治的33例原发性失眠患者为观察组,另选取同期健康体检者11例为健康组。采用流式细胞术检测两组外周血淋巴细胞亚群比例、NK细胞的活化性受体和细胞毒活性。结果与健康组比较,观察组患者NK细胞表面NKp30受体表达降低(P<0.05);NKp30受体表达与匹兹堡睡眠质量指数量表评分呈负相关(P<0.05);与健康组比较,靶细胞刺激后观察组NK细胞脱颗粒作用减弱(P<0.05)。结论原发性失眠患者外周血中NK细胞表面NKp30受体表达减少,NK细胞脱颗粒作用减弱。失眠越严重,NKp30表达越低,脱颗粒作用减弱越显著。 展开更多

关键词 失眠 淋巴细胞亚群 NK细胞 nkp30受体

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NKp30受体在肿瘤和感染性疾病中的研究进展 被引量：3

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作者 杨冀 于卉影 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第10期1585-1589,1595,共6页

NK细胞是机体抗感染和抗肿瘤的第一道天然防线,其活性主要受其表面的活化性和抑制性两类受体调控。NKp30作为NK细胞活化性受体,通过与其相应配体结合在对肿瘤和病原体感染细胞的免疫监视及杀伤中发挥着重要的作用。而在一些患者血清中... NK细胞是机体抗感染和抗肿瘤的第一道天然防线,其活性主要受其表面的活化性和抑制性两类受体调控。NKp30作为NK细胞活化性受体,通过与其相应配体结合在对肿瘤和病原体感染细胞的免疫监视及杀伤中发挥着重要的作用。而在一些患者血清中发现高浓度的可溶性配体,这些配体可与NKp30结合,降低NKp30介导的NK细胞杀伤活性。另外,在组织中主要表达NKp30a、b、c三种剪切异构体,三种异构体的表达谱对多种疾病的预后具有潜在的评估价值,并且与疾病的临床症状相关。因此,NKp30可能成为肿瘤和感染性疾病免疫治疗的新靶点及疾病早期评价的新指标。 展开更多

关键词 nkp30受体 免疫监视 肿瘤 感染性疾病

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自然杀伤细胞表面受体NKp30的研究进展 被引量：1

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作者 康富标 孙殿兴 《国际免疫学杂志》 CAS 2015年第1期89-92,共4页

自然杀伤（NK）细胞无需预先致敏即可快速杀伤靶细胞，是机体发挥抗肿瘤免疫和抗感染免疫的重要执行者。NK细胞的活化与否取决于细胞表面活化性受体和抑制性受体信号的平衡。NKp30是NK细胞表面的一种重要的活化性受体，可接收相应配体如... 自然杀伤（NK）细胞无需预先致敏即可快速杀伤靶细胞，是机体发挥抗肿瘤免疫和抗感染免疫的重要执行者。NK细胞的活化与否取决于细胞表面活化性受体和抑制性受体信号的平衡。NKp30是NK细胞表面的一种重要的活化性受体，可接收相应配体如BAG-6、B7-H6等分子信号进而激活NK细胞，发挥抗肿瘤和抗感染免疫作用。同时NKp30也是肿瘤细胞和病原体发生免疫逃逸的重要靶点，可通过多种机制逃逸NK细胞杀伤。此外，NKp30还参与了NK细胞和树突状细胞（DCs）间的双向免疫调节。 展开更多

关键词 nkp30受体 自然杀伤细胞 免疫逃逸 免疫监视

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自然杀伤细胞表面NKp30受体的研究进展

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作者 王玲 徐燕颖 《天津医科大学学报》 2019年第5期544-547,共4页

自然杀伤细胞(NK cells)是机体的固有免疫细胞,参与了病毒感染细胞和肿瘤的清除。NK细胞的活化受其表面活化性受体和抑制性受体的共同调控;而NKp30是其膜表面一类重要的活化性受体自然细胞毒性受体的一种。多项研究结果表明NKp30参与了... 自然杀伤细胞(NK cells)是机体的固有免疫细胞,参与了病毒感染细胞和肿瘤的清除。NK细胞的活化受其表面活化性受体和抑制性受体的共同调控;而NKp30是其膜表面一类重要的活化性受体自然细胞毒性受体的一种。多项研究结果表明NKp30参与了自然杀伤细胞抗肿瘤及抗病毒感染的免疫过程,并在其中发挥了重要的作用。该文就自然杀伤细胞表面NKp30受体的研究进展进行综述。 展开更多

关键词 自然杀伤细胞 nkp30受体 肿瘤 病毒

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