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不同盐度下“吉丽”罗非鱼(尼罗罗非鱼♀×萨罗罗非鱼♂)NKCC1a mRNA的组织特异性表达 被引量：8
1
作者 王兵 范武江 李思发 《中国水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期515-522,共8页
应用实时荧光定量PCR技术(qRT-PCR),以"吉丽"罗非鱼[尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus,♀)×萨罗罗非鱼(Sarotherodon melanotheron,♂)]为材料,研究NKCC1a基因表达的盐度组织特异性。研究结果表明:(1)NKCC1a基因mRNA表... 应用实时荧光定量PCR技术(qRT-PCR),以"吉丽"罗非鱼[尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus,♀)×萨罗罗非鱼(Sarotherodon melanotheron,♂)]为材料,研究NKCC1a基因表达的盐度组织特异性。研究结果表明:(1)NKCC1a基因mRNA表达量存在显著的组织特异性,在低于25盐度环境中,NKCC1a mRNA在鳃、肝、肾及肠中均有表达;当盐度从0提高到48时,表达量在鳃中与盐度变化呈高度正相关(R>0.9,P<0.01),在肠和肾中与盐度变化呈负相关(R≈0.7,P<0.05),但在肝中则不受盐度变化的影响。(2)当盐度提高到64,NKCC1a基因mRNA表达量在鳃和肠3 h后达最高值,5 h后下降,前后变化差异显著(P<0.05);表达量在肝中则是在5 h后达最高值,变化差异也显著(P<0.05);表达量在肾中持续下降,但差异不显著。以上结果揭示,在盐度高于25的环境中,"吉丽"罗非鱼主要由鳃组织的NKCC1a排出多余的离子以维持鱼体的水盐平衡,由此认为鳃组织在"吉丽"罗非鱼高渗透压调节中起最主要作用。 展开更多
关键词 罗非鱼 nkcc1a基因 mRNA表达 组织特异性 盐度
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黑鲷NKCC1分子特征及其对急性盐度胁迫的表达响应 被引量：4
2
作者 林李泉 刘明珠 +3 位作者 林国荣 黄帅帅 李梦梦 童桂香 《广西科学院学报》 2021年第2期133-143,共11页
为了解黑鲷(Acanthopagrus schlegelii)在盐度胁迫过程中的适应机制,本研究利用基因扩增、聚类分析、荧光定量PCR等技术对NKCC1基因进行生物信息学分析以及在不同组织中的表达特征研究,并探讨其在急性盐度胁迫下的表达机制。结果表明NK... 为了解黑鲷(Acanthopagrus schlegelii)在盐度胁迫过程中的适应机制,本研究利用基因扩增、聚类分析、荧光定量PCR等技术对NKCC1基因进行生物信息学分析以及在不同组织中的表达特征研究,并探讨其在急性盐度胁迫下的表达机制。结果表明NKCC1基因的开放阅读框(Open Reading Frame,ORF)为3504 bp,共编码1167个氨基酸,预测蛋白分子量为127.19 kDa,理论等电点为5.75。结构域分析表明黑鲷NKCC1分子为跨膜蛋白,并包含一个典型的Na^(+)-K^(+)-Cl^(-)共同转运蛋白SLC12A结构域,且在不同物种中具有很高的保守性;序列比对分析表明黑鲷NKCC1氨基酸序列与金头鲷NKCC1a的同源性最高,为97.8%;组织表达分析表明黑鲷NKCC1基因在所检测的12个组织,即肝脏、肾脏、心、脑、眼、鳃、鳍条、脾脏、皮肤、肠、性腺和白肌中均有表达,其中在肾脏、鳃和肠中表达量最高,并显著高于其他组织(P<0.05);在低盐度胁迫下,NKCC1基因在鳃组织中的表达量对盐度变化响应十分迅速,而在肾脏组织中,低盐度和高盐度胁迫都会在不同时间点抑制NKCC1基因的表达量。综上所述,本研究为解析NKCC1基因在黑鲷调节渗透压和离子平衡过程中的功能机制奠定了基础,并为促进黑鲷养殖产业的可持续发展提供一定的技术理论。 展开更多
关键词 黑鲷 nkcc1基因 Na^(+)-K^(+)-Cl^(-) 急性盐度胁迫 渗透压
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急性盐度胁迫下黄鳍棘鲷NKCC1a分子特征及其表达 被引量：1
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作者 李亚玲 朱克诚 +6 位作者 刘宝锁 郭华阳 郭梁 张楠 杨静文 江世贵 张殿昌 《广东海洋大学学报》 CAS 北大核心 2022年第2期20-28,共9页
【目的】研究NKCC1a基因在急性盐度胁迫下对黄鳍棘鲷(Acanthopagrus latus)的渗透压调控机理。【方法】用生物信息学软件分析NKCC1a的序列特征,用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术检测其在黄鳍棘鲷各组织内的表达情况及其在盐度0、8、16、... 【目的】研究NKCC1a基因在急性盐度胁迫下对黄鳍棘鲷(Acanthopagrus latus)的渗透压调控机理。【方法】用生物信息学软件分析NKCC1a的序列特征,用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术检测其在黄鳍棘鲷各组织内的表达情况及其在盐度0、8、16、24(对照)和32条件下的表达模式。【结果】NKCC1a开放阅读框(ORF)大小为3435 bp,共编码1144个氨基酸,存在一个经典的Na+-K+-Cl-协同转运蛋白SLC12A结构域,且在不同物种中有高保守性。NKCC1a在13个组织中均有表达,在脑中表达量最高,显著高于其他组织(P<0.05);其次为鳃,在性腺和肝脏中表达量则显著低于其他组织(P<0.05)。盐度胁迫6 h时,在淡水组(盐度0)中NKCC1a表达量显著上升(P<0.05);在盐度为8和16处理组中,NKCC1a表达量先降低后逐渐升高,随后趋于平稳;在盐度32处理组,表达量呈先升高后降低最后又升高趋势,在24 h时最大。【结论】NKCC1a基因在黄鳍棘鲷盐度适应中发挥重要作用。 展开更多
关键词 黄鳍棘鲷 nkcc1a 基因表达 急性盐度胁迫
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编码Na-K-2Cl的基因缺陷小鼠出现听觉和平衡功能障碍及内耳形态异常 被引量：1
4
作者 褚汉启 熊浩 +3 位作者 韩芳 吴振恭 黄孝文 崔永华 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第9期1823-1827,共5页
目的:培育突变型纯合子NKCC1-/-、杂合子NKCC1+/-及野生型NKCC1+/+小鼠,将这3种基因型小鼠作为实验平台,研究NKCC1离子通道(Na-K-2Cl,co-transporter)在耳蜗听觉平衡功能中的作用,并观察不同基因型小鼠的内耳形态特征。方法:利用同窝生... 目的:培育突变型纯合子NKCC1-/-、杂合子NKCC1+/-及野生型NKCC1+/+小鼠,将这3种基因型小鼠作为实验平台,研究NKCC1离子通道(Na-K-2Cl,co-transporter)在耳蜗听觉平衡功能中的作用,并观察不同基因型小鼠的内耳形态特征。方法:利用同窝生各个基因型小鼠NKCC1-/-(突变纯合子)、NKCC1+/-(杂合子)和NKCC1+/+(野生型)为实验对象,采用听觉脑干反应(ABR)和耳蜗内电位(EP)检测技术,对各基因型小鼠的听觉功能和EP进行检测;同时利用光学显微镜观察不同基因型小鼠的内耳形态变化。结果:NKCC1+/+野生型小鼠听力正常,ABR检测的click短音阈值为[(23.13±3.78)dB,SPL];EP为(98±16)mV。NKCC1+/-杂合子小鼠听力低于同窝生的NKCC1+/+野生型小鼠,ABR检测其Click短音阈值为[(38.49±12.29)dB,SPL],EP为(78±7)mV。NKCC1+/+和NKCC1+/-小鼠ABR的阈值均值在各个频率的差异显著(P<0.01);两者EP的均值差异也显著(P<0.05)。NKCC1-/-突变型纯合子小鼠呈现全聋,ABR各个频率在100dB均无反应,其EP接近消失(4mV±6mV)。NKCC1-/-突变型纯合子小鼠表现出听觉功能丧失和旋转为主的平衡失调。光镜下NKCC1+/+野生型小鼠和NKCC1+/-杂合子小鼠的耳蜗解剖结构无明显异常;NKCC1-/-突变纯合子小鼠的耳蜗出现前庭膜塌陷、内淋巴腔缩小而致中阶完全消失,并有血管纹萎缩、Corti器缺失、螺旋神经节萎缩;且球囊和椭圆囊膜迷路失去正常结构并出现塌陷等病理改变。结论:NKCC1离子通道在内耳K+循环和维系内耳正常听觉平衡功能中起重要作用。NKCC1通道的缺失或功能受限,均可导致耳蜗内淋巴K+负荷水平,进而影响耳蜗的听觉平衡功能。 展开更多
关键词 nkcc1 基因敲除 钾 耳蜗 听力 耳蜗内电位
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