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参龙煎剂调控细胞凋亡铁死亡抑制NFIL3防治特发性肺纤维化的机制 被引量：7
1
作者 潘嘉祥 吕晓东 +5 位作者 庞立健 臧凝子 姜昕 刘创 张浩洋 于睿智 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第5期2481-2488,共8页
目的:探讨参龙煎剂对特发性肺纤维化(IPF)细胞铁死亡及凋亡与炎症的关系,以及抗IPF机制。方法:将60只Wistar大鼠随机分为空白组、假手术组、模型组、参龙煎剂组、吡非尼酮组。博来霉素(BLM)5 mg/kg诱导建立IPF模型,28 d取材。HE染色法... 目的:探讨参龙煎剂对特发性肺纤维化(IPF)细胞铁死亡及凋亡与炎症的关系,以及抗IPF机制。方法:将60只Wistar大鼠随机分为空白组、假手术组、模型组、参龙煎剂组、吡非尼酮组。博来霉素(BLM)5 mg/kg诱导建立IPF模型,28 d取材。HE染色法观察肺组织的病理变化,Masson染色观察肺纤维化状态,免疫组化明确肺泡上皮细胞α-SMA、E-cadherin表达水平。免疫荧光染色对肺组织凋亡和铁死亡水平进行检测,及其与NFIL3共定位,明确纤维组织中凋亡和铁死亡水平的差异,细胞铁死亡及凋亡与炎症的关系。结果:体内实验结果显示,参龙煎剂组可改善IPF大鼠一般情况,缓解呼吸急促,改善心率、精神状态等;改善肺组织病变程度;抑制肺组织胶原蛋白与α-SMA表达,提升E-cadherin表达水平;测序结果显示参龙煎剂明显减少NFIL3的表达水平;与模型组比较,参龙煎剂组Tunel与α-SMA共定位显著增多(P<0.01),FSP1与α-SMA共定位显著减少(P<0.01)。体外实验结果显示,与模型组比较,含药血清组凋亡水平显著升高(P<0.01);与模型组比较,含药血清组细胞迁移水平下降,铁死亡抑制剂组迁移能力提高,铁死亡诱导剂组细胞迁移能力下降;与模型组比较,参龙煎剂组FSP1与NFIL3共定位显著减少(P<0.05);与模型组比较,参龙煎剂组Caspase12、Bax表达水平显著升高(P<0.01),Bcl-2、FSP1、NFIL3、TNF-α表达水平显著降低(P<0.01,P<0.05)。结论:参龙煎剂可能通过凋亡和铁死亡途径抑制炎症反应,进而抑制肌成纤维细胞转化防治IPF。 展开更多
关键词 参龙煎剂 铁死亡 凋亡 炎症 nfil3 成纤维细胞-肌成纤维细胞转化 肺虚络瘀 特发性肺纤维化
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miR-32-5p靶向NFIL3基因促进脂多糖诱导的肺上皮细胞凋亡和炎性反应 被引量：1
2
作者 李金秀 夏天 康寿磊 《河北医药》 CAS 2021年第1期57-61,共5页
目的探讨miR-32-5p对脂多糖诱导的肺上皮细胞凋亡和炎性反应的影响及机制。方法用终浓度为30μg/ml的脂多糖刺激A549细胞为LPS组,以未经任何处理的细胞作为对照(NG)组;设置miR-con组、miR-32-5p组、anti-miR-con组、anti-miR-32-5p组、L... 目的探讨miR-32-5p对脂多糖诱导的肺上皮细胞凋亡和炎性反应的影响及机制。方法用终浓度为30μg/ml的脂多糖刺激A549细胞为LPS组,以未经任何处理的细胞作为对照(NG)组;设置miR-con组、miR-32-5p组、anti-miR-con组、anti-miR-32-5p组、LPS+anti-miR-con组、LPS+anti-miR-32-5p组、LPS+pcDNA-con组、LPS+pcDNA-NFIL3组、LPS+anti-miR-32-5p+si-con组、LPS+anti-miR-32-5p+si-NFIL3组,转染均采用脂质体法。qRT-PCR检测miR-32-5p和NFIL3 mRNA表达水平;Western Blot检测蛋白表达;流式细胞术检测细胞凋亡;酶联免疫吸附法(ELISA)检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白介素-6(IL-6)的表达;双荧光素酶报告基因检测实验检测荧光活性。结果脂多糖可抑制NFIL3的表达,促进miR-32-5p的表达。miR-32-5p低表达和高表达NFIL3抑制脂多糖诱导的肺上皮细胞凋亡,降低IL-6、TNF-α的水平,抑制cleave-caspase-3的表达。miR-32-5p靶向调控NFIL3的表达,敲减NFIL3可以部分逆转miR-32-5p对脂多糖诱导的肺上皮细胞凋亡和炎性反应的抑制作用。结论miR-32-5p能抑制脂多糖诱导的A549细胞凋亡和炎性反应,其机制与上调NFIL3及抑制炎性因子TNF-α、IL-6的表达有关。 展开更多
关键词 miR-32-5p nfil3 肺上皮细胞 凋亡 炎性反应
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