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牛膝多肽促大鼠海马神经元突起的生长 被引量：4
1
作者 袁颖 周松林 +1 位作者 顾晓松 丁斐 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期696-701,共6页
目的研究牛膝多肽(ABPP)对体外培养的大鼠海马神经元突起生长的促进作用及其对生长相关蛋-白43(GAP-43)和神经丝蛋白(NF-H)mRNA和蛋白表达的影响。方法以体外原代培养的胎鼠海马神经元为研究模型,通过四甲基偶氮唑盐(MTT)检测ABPP对海... 目的研究牛膝多肽(ABPP)对体外培养的大鼠海马神经元突起生长的促进作用及其对生长相关蛋-白43(GAP-43)和神经丝蛋白(NF-H)mRNA和蛋白表达的影响。方法以体外原代培养的胎鼠海马神经元为研究模型,通过四甲基偶氮唑盐(MTT)检测ABPP对海马神经元细胞活性的影响,通过免疫荧光细胞化学法,采用Image-Pro Express软件测量不同浓度ABPP(0.1mg/L、0.5mg/L、1.0mg/L)加药24h,对海马神经元神经突起生长的影响;通过实时荧光定量PCR法定量分析不同浓度ABPP(0.1mg/L、0.5mg/L、1.0mg/L)加药6h,对海马神经元GAP-43和NF-H基因表达的影响;采用免疫印迹法观察不同浓度ABPP(0.1mg/L、0.5mg/L、1.0mg/L)加药24h后,对海马神经元GAP-43和NF-H蛋白表达的影响。同时应用胞外信号调节激酶(ERK)特异性拮抗剂PD98059与ABPP共培养海马神经元,分析ABPP对海马神经元的作用与ERK通路的关系。结果ABPP可有效地促进海马神经元突起的生长,加药后24h浓度为1.0mg/L,作用最强;实时荧光定量RT-PCR、免疫荧光细胞化学法和免疫印迹检测的结果表明,ABPP能增加体外培养的海马神经元GAP-43和NF-H的mRNA和蛋白表达,PD98059可抑制该过程。结论ABPP能促进体外培养的海马神经元神经突起的生长,其作用与上调GAP-43和NF-H基因的表达相关,并可能与ERK通路有关。 展开更多
关键词 牛膝多肽 海马神经元 生长相关蛋白-43 神经丝蛋白-h 免疫荧光组织化学 实时荧光定量PCF免疫印迹 大鼠
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壳寡糖促神经元生长的作用 被引量：2
2
作者 蒋茂荣 蒋志超 丁斐 《苏州大学学报（医学版）》 CAS 2012年第6期749-753,759,共6页
目的研究壳寡糖(COSs)对大鼠神经元生长的影响。方法以体外培养的背根神经节(DRG)和DRG神经元为研究模型,通过神经丝蛋白-H(NF-H)免疫荧光细胞化学染色和Leica QWin软件检测不同浓度壳寡糖(0.0、0.1、0.2 mg/ml)作用5 d对DRG和DRG神经... 目的研究壳寡糖(COSs)对大鼠神经元生长的影响。方法以体外培养的背根神经节(DRG)和DRG神经元为研究模型,通过神经丝蛋白-H(NF-H)免疫荧光细胞化学染色和Leica QWin软件检测不同浓度壳寡糖(0.0、0.1、0.2 mg/ml)作用5 d对DRG和DRG神经元突起生长的影响;通过Western blot检测不同浓度壳寡糖(0.05、0.1、0.2 mg/ml)作用DRG神经元12 h后,对DRG神经元中NF-H和生长相关蛋白-43(GAP-43)表达的影响。结果与对照组相比,中、高剂量壳寡糖(0.1、0.2 mg/ml)显著促进DRG突起的生长(均P<0.01);0.2 mg/ml剂量的壳寡糖明显促进DRG神经元突起的生长(P<0.05)。与对照组相比,体外培养的DRG神经元加入壳寡糖作用12 h后,0.2 mg/ml剂量壳寡糖组的NF-H和GAP-43表达量明显增加(分别P<0.05和<0.01)。结论壳寡糖可有促进体外培养的DRG和DRG神经元突起的生长,并可促进NF-H、GAP-43的表达。 展开更多
关键词 壳寡糖 背根神经节 DRG神经元 nf—h GAP-43
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Tropic1808在PC12细胞中的表达 被引量：2
3
作者 刘梅 张琦 +1 位作者 刘炎 丁斐 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期372-375,共4页
目的构建稳定表达tropic1808基因的PC12细胞株,并通过观察稳定株中高分子量神经丝蛋白(NF-H)的表达以初步观察该基因的作用。方法构建重组真核表达载体pcDNA-HA-tropic1808,转染PC12细胞,经G418筛选、Westernblot鉴定。采用RT-PCR,实时P... 目的构建稳定表达tropic1808基因的PC12细胞株,并通过观察稳定株中高分子量神经丝蛋白(NF-H)的表达以初步观察该基因的作用。方法构建重组真核表达载体pcDNA-HA-tropic1808,转染PC12细胞,经G418筛选、Westernblot鉴定。采用RT-PCR,实时PCR,Westernblot和细胞组织化学方法观察tropic1808稳定株中NF-H的表达。结果Westernblot检测表明,tropic1808基因稳定表达,RT-PCR,实时PCR,Westernblot和细胞组织化学方法均观察到NF-H在tropic1808稳定株中的表达高于空载体对照。结论Tropic1808基因可以在PC12稳定表达且NF-H在tropic1808稳定株中表达上升。 展开更多
关键词 Tropicl808 PCI2 真核表达 nf-h WESTERN BLOT RT-PCR 实时PCR
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钒酸盐对神经元内NF-H及NLY的影响 被引量：2
4
作者 黄瑛 石玉秀 +2 位作者 郭玉坤 徐彦平 刘冬娟 《电子显微学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期503-504,共2页
关键词 钒酸盐 神经元 nf-h NLY 神经丝蛋白 显微结构 电子显微镜 磷酸化
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乌灵菌粉对脑缺血再灌注模型小鼠纹状体髓鞘的保护作用
5
作者 舒忙巧 彭正午 +3 位作者 何珊珊 陈云春 王化宁 张雅红 《神经疾病与精神卫生》 2016年第6期646-649,F0002,共5页
目的探讨乌灵菌粉水提物对脑缺血再灌注模型小鼠神经功能的保护作用及纹状体髓磷脂碱性蛋白（MBP）和高分子量神经丝蛋白（NF-H）水平的影响。方法将40只昆明小鼠随机分为对照组、模型组、乌灵菌粉低剂量组和乌灵菌粉高剂量组。对照组... 目的探讨乌灵菌粉水提物对脑缺血再灌注模型小鼠神经功能的保护作用及纹状体髓磷脂碱性蛋白（MBP）和高分子量神经丝蛋白（NF-H）水平的影响。方法将40只昆明小鼠随机分为对照组、模型组、乌灵菌粉低剂量组和乌灵菌粉高剂量组。对照组进行假手术（皮肤切开，分离颈动脉），模型组及乌灵菌粉组通过右侧颈内动脉栓线术，建立大脑中动脉闭塞（MCAO）模型，对照组和模型组术后即刻腹腔注射生理盐水，乌灵菌粉组则注射不同剂量的乌灵菌粉水提物（0.3g/kg和0.6g/kg），术后24h进行神经功能评分及2,3,5-氯化三苯基四氮唑（TTC）染色；应用免疫组化观察小鼠纹状体内MBP和NF-H的表达情况。结果（1）模型组小鼠出现明显的神经功能障碍，乌灵菌粉高剂量组神经功能评分明显高于模型组（P〈0.01）。（2）TTC结果提示，模型组脑组织损伤侧出现明显梗死灶，给予乌灵菌粉水提物（0.6g/kg）干预后脑梗死容积明显减少，差异有统计学意义（P〈0.05）。（3）模型组MBP和NF-H染色的吸光度显著低于对照组，乌灵菌粉高剂量组MBP和NF-H染色的吸光度均高于模型组，差异有统计学意义（P〈0.05）。结论乌灵菌粉可以改善MCAO模型小鼠神经功能，并对髓鞘和神经纤维具有保护作用。 展开更多
关键词 脑缺血再灌注 髓磷脂碱性蛋白质类 乌灵菌粉 高分子量神经丝蛋白
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NF-H基因参与K562/A02细胞多药耐药机制形成的研究 被引量：5
6
作者 谭耀红 杨纯正 +6 位作者 赵春华 齐静 彭晖 王建祥 周圆 肖瑛 兰岚 《中华肿瘤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期328-332,共5页
目的　分析K5 6 2 /A0 2细胞多药耐药性 (MDR)分子机制 ,寻找可能参与K5 6 2 /A0 2细胞耐药机制的新基因。方法　通过长期逐步增加K5 6 2细胞培养液中阿霉素 (ADM)的浓度 ,诱导出多药耐药细胞株K5 6 2 /A0 2 ,利用cDNAmicroarray比较K5 ... 目的　分析K5 6 2 /A0 2细胞多药耐药性 (MDR)分子机制 ,寻找可能参与K5 6 2 /A0 2细胞耐药机制的新基因。方法　通过长期逐步增加K5 6 2细胞培养液中阿霉素 (ADM)的浓度 ,诱导出多药耐药细胞株K5 6 2 /A0 2 ,利用cDNAmicroarray比较K5 6 2和K5 6 2 /A0 2基因表达的差别 ,从中选择NF H基因进行RT PCR和免疫细胞化学验证 ,并利用反义核酸技术和细胞内ADM浓度的测定 ,进一步验证该基因与K5 6 2 /A0 2细胞多药耐药的关系。结果　通过比较发现 ,有 12个基因可能参与了K5 6 2 /A0 2细胞的耐药机制 ,其中 7个基因在K5 6 2 /A0 2中被下调 ,5个基因被上调。本研究结果显示 ,NF H基因在K5 6 2 /A0 2细胞中高表达 ,并且 ,将NF H和mdr1反义核酸同时转入K5 6 2 /A0 2细胞后 ,可明显提高细胞内ADM浓度 ,而单独转入NF H反义核酸效果不明显。结论　K5 6 2 /A0 2细胞耐药表型的形成是多因素的 ,除了P 糖蛋白 (P gp)等常见因素外 ,可能还有NF 展开更多
关键词 nf-h基因 K562/A02细胞 多药耐药机制 MDR 阿霉素 K562/A02基因
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中重型创伤性脑损伤患者早期血清pNF-H、AQP4变化及临床意义 被引量：5
7
作者 李红闪 郭毅 史彦芳 《中外医学研究》 2015年第9期9-11,共3页
目的:探讨中重型创伤性脑损伤患者早期血清p NF-H、AQP4水平变化及临床意义。方法:选取中重型创伤性脑损伤患者30例(观察组)及健康体检者15例(对照组),应用ELISA法检测患者伤后24 h内及伤后48、72、120 h血清中p NF-H、AQP4水平,分析其... 目的:探讨中重型创伤性脑损伤患者早期血清p NF-H、AQP4水平变化及临床意义。方法:选取中重型创伤性脑损伤患者30例(观察组)及健康体检者15例(对照组),应用ELISA法检测患者伤后24 h内及伤后48、72、120 h血清中p NF-H、AQP4水平,分析其变化趋势与疾病演变和预后的关系。结果:观察组患者各时间点血清p NF-H、AQP4浓度较对照组显著高,差异有统计学意义(P<0.05),血清AQP4高峰出现于伤后72 h。重型颅脑损伤患者血清p NF-H、AQP4浓度明显高于中型患者。预后恶劣组患者血清AQP4、p NF-H浓度显著高于预后良好组(P<0.05)。结论:中重型创伤性脑损伤早期患者血清AQP4及p NF-H水平测定有助于评估的病情严重程度和预后。 展开更多
关键词 创伤性脑损伤 水通道蛋白4 神经丝蛋白h磷酸化亚型 AQUAPORIN-4
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原代培养脊髓神经元神经丝蛋白NF-H表达与免疫电镜观察 被引量：1
8
作者 王涛 郑伟 《沈阳医学院学报》 2004年第2期73-76,共4页
目的:研究原代培养脊髓神经元NF-H表达及免疫电镜的分布,为神经丝结构异常所致的神经疾病奠定实验基础。方法:采用神经细胞培养技术、免疫组织化学与免疫电镜技术,进行原代培养脊髓神经元的神经丝蛋白NF-H的表达,并用图像分析仪对NF-H... 目的:研究原代培养脊髓神经元NF-H表达及免疫电镜的分布,为神经丝结构异常所致的神经疾病奠定实验基础。方法:采用神经细胞培养技术、免疫组织化学与免疫电镜技术,进行原代培养脊髓神经元的神经丝蛋白NF-H的表达,并用图像分析仪对NF-H表达进行了定量分析测定。结果:原代培养脊髓神经元中,神经丝蛋白的NF-H的表达,随细胞发育的逐渐成熟呈日趋上升趋势。免疫电镜观察可见神经丝蛋白呈电子密度高的丝絮状沉淀,均匀分布在细胞质中,在突起中呈束状排列。结论:神经丝蛋白的NF-H表达的增加,伴随着神经元的发育初期到成熟的形态结构变化,与培养时间成正相关。 展开更多
关键词 原代培养 脊髓神经元 神经丝蛋白nf-h 免疫电镜 免疫组织化学 神经疾病
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NF-H在无症状颈动脉狭窄患者血清中的表达与认知功能的关系
9
作者 郭蕾 王建红 +3 位作者 杨树 王多姿 袁晓帆 郭富强 《阿尔茨海默病及相关病杂志》 2020年第3期226-231,共6页
目的:探讨无症状颈动脉狭窄患者颈动脉支架术前及术后血清神经丝蛋白重链(NF-H)表达与患者认知功能的关系。方法:入选2018年5月—2019年8月于四川省人民医院神经内科住院的40例伴有轻度认知功能损害的无症状颈动脉狭窄患者作为实验组,... 目的:探讨无症状颈动脉狭窄患者颈动脉支架术前及术后血清神经丝蛋白重链(NF-H)表达与患者认知功能的关系。方法:入选2018年5月—2019年8月于四川省人民医院神经内科住院的40例伴有轻度认知功能损害的无症状颈动脉狭窄患者作为实验组,对照组为40例健康人群。用酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定实验组CAS术前、术后3月血清NF-H水平以及对照组血清NF-H水平。分别在CAS术前1周、术后3个月用简易智力状态检查量表(MMSE)及蒙特利尔认知评估量表(MoCA)评价患者认知功能。比较术前、术后3月血清NF-H表达差异及患者术前及术后3个月认知功能变化。结果:实验组术前患者血清NF-H水平高于对照组(P<0.01),实验组术前MMSE评分为(26.08±1.59)分低于对照组MMSE评分(27.93±2.95)分(P<0.05),实验组术前MoCA评分明显低于对照组:(24.48±1.89)分个月vs.(27.97±1.21)分(P<0.01);与术前实验组相比,术后3个月实验组血清NF-H水平显著下降(P<0.01),这与实验组CAS术后3个月的后认知功能改善相符,实验组认知功能术前术后比较:MMSE(26.08±1.59)分vs.(27.48±1.95)分,P<0.05、MoCA(24.48±1.89)分vs.(26.83±.49)分,P<0.05;Pearson相关性分析得出,患者血清NF-H水平与患者MMSE评分及MoCA评分均呈负相关(P<0.01)。结论:无症状颈动脉狭窄患者存在不同程度的脑损伤及认知功能障碍,颈动脉支架术可有效改善颈动脉狭窄相关的认知功能损害,脑损伤标志物NF-H可能成为早期识别认知功能损害及监测颈动脉支架术后患者认知功能改变的生物学标志物。 展开更多
关键词 颈动脉狭窄 颈动脉支架术 nf-h、MMSE MOCA 认知功能
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低分子量神经丝蛋白(NF-L)的体外组装
10
作者 佟向军 陈建国 翟中和 《实验生物学报》 CSCD 1998年第3期223-231,共9页
利用超速离心和离子交换层析技术,从牛脊髓中分离纯化了神经丝蛋白三组分:NF-L,NF-M和NF-H。应用电镜负染色和金属投影方法研究神经丝的形态结构与NF-L的体外组装,结果表明:神经丝由10nm的核心纤维与外周的丝状突起组成;在近似生理条件... 利用超速离心和离子交换层析技术,从牛脊髓中分离纯化了神经丝蛋白三组分:NF-L,NF-M和NF-H。应用电镜负染色和金属投影方法研究神经丝的形态结构与NF-L的体外组装,结果表明:神经丝由10nm的核心纤维与外周的丝状突起组成;在近似生理条件下,NF-L可在60min内组装成10nm纤维,纤维由4根亚丝缠绕而成;在碱性缓冲液中,NaCl能促进NF-L装配成短纤维,这种10nm的短纤维无法连接成长纤维。 展开更多
关键词 神经丝蛋白 分离 纯化 体外装配 组装过程
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