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以hsa-miR-491-3p为靶标的反义寡核苷酸对NCI-H446细胞生物学特性的影响 被引量:3
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作者 官士珍 付玉荣 +3 位作者 伊正君 李猛 裴景亮 高昆山 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期171-176,共6页
背景与目的:miRNAs是一类小分子RNA,参与转录后调控。前期研究结果显示,hsa-miR-491-3p在肺癌和肾癌组织中高表达,目前鲜见其功能研究的报道。本研究旨在探讨以hsa-miR-491-3p为靶标的反义寡核苷酸对人小细胞肺癌NCI-H446细胞生物学特... 背景与目的:miRNAs是一类小分子RNA,参与转录后调控。前期研究结果显示,hsa-miR-491-3p在肺癌和肾癌组织中高表达,目前鲜见其功能研究的报道。本研究旨在探讨以hsa-miR-491-3p为靶标的反义寡核苷酸对人小细胞肺癌NCI-H446细胞生物学特性的影响。方法:合成以hsa-miR-491-3p为靶标的反义寡核苷酸和随机对照序列,转染NCI-H446细胞。实验分4组:空白对照组(组1)、空白转染组(组2)、随机对照组(组3)和反义寡核苷酸组(组4)。用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法筛选最佳作用浓度,Hoechst33258染色检测细胞核的形态变化,流式细胞术检测细胞凋亡和周期变化,划痕实验检测细胞的迁移能力。结果:转染反义寡核苷酸后细胞生长受到抑制,最佳作用浓度为0.5μmol/L。Hoechst33258染色各组的凋亡率分别为(6.67±0.58)%、(7.00±1.00)%、(6.67±1.53)%和(26.33±1.53)%,组4的凋亡率明显高于前3组,差异有统计学意义(P<0.001)。流式细胞仪检测各组的凋亡率分别为(2.44±0.60)%、(2.59±0.85)%、(2.62±1.11)%和(5.22±0.40)%,组4的凋亡率明显高于前3组,差异有统计学意义(P<0.01),且G1期细胞增多,S期细胞减少。划痕实验显示各组细胞24 h的迁移距离分别为(196.88±39.13)、(163.06±21.28)、(225.49±23.42)和(77.41±6.07)μm,组4细胞的迁移距离小于前3组(P<0.05),迁移能力减弱。结论:以hsa-miR-491-3p为靶标的反义寡核苷酸能够抑制NCI-H446细胞增殖,诱导其凋亡,并降低其侵袭能力。 展开更多
关键词 hsa-miR-491-3p 反义寡核苷酸 细胞凋亡 nci-h446细胞
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重组人血管内皮抑制素联合EP方案对小细胞肺癌细胞株NCI-H446的增殖抑制和促细胞凋亡作用 被引量:2
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作者 叶翔赟 陆舜 陈智伟 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期239-243,共5页
目的:本研究旨在评估依托泊苷(etoposide,VP-16)、顺铂(cisplatin,DDP)(EP方案)联合重组人血管内皮抑制素对小细胞肺癌(small-cell lung cancer,SCLC)NCI-H446细胞的促凋亡和抑制细胞增殖的协同作用。方法:EP方案、重组人血管内皮抑制... 目的:本研究旨在评估依托泊苷(etoposide,VP-16)、顺铂(cisplatin,DDP)(EP方案)联合重组人血管内皮抑制素对小细胞肺癌(small-cell lung cancer,SCLC)NCI-H446细胞的促凋亡和抑制细胞增殖的协同作用。方法:EP方案、重组人血管内皮抑制素单药以及EP方案联合重组人血管内皮抑制素作用于NCI-H446细胞72h后,采用CCK-8(cell counting kit-8)法测定药物对NCI-H446细胞的增殖抑制作用,FCM检测药物对NCI-H446细胞的细胞周期分布的影响,ELISA法检测药物对NCI-H446细胞分泌血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial cell growth factor,VEGF)水平的影响。结果:EP方案联合重组人血管内皮抑制素的细胞增殖抑制率明显高于EP方案组(P<0.01)。EP方案组和EP方案联合重组人血管内皮抑制素组的NCI-H446细胞大多被阻滞于G1期,EP方案联合重组人血管内皮抑制素组的NCI-H446细胞凋亡率显著高于EP方案组(P<0.01)。与EP方案和重组人血管内皮抑制素单药相比,EP方案联合重组人血管内皮抑制素可显著抑制NCI-H446细胞分泌VEGF(P<0.05)。结论:EP方案联合重组人血管内皮抑制素在抑制SCLCNCI-H446细胞增殖和促细胞凋亡方面,具有协同作用。 展开更多
关键词 细胞 血管内皮细胞生长因子受体 重组人血管内皮抑制素 依托泊苷 顺铂 细胞增殖 细胞凋亡 nci-h446细胞
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热疗联合紫杉醇对NCI-H446细胞增殖和VEGF mRNA表达的影响 被引量:2
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作者 张瑞芳 王威 吴拥军 《河南医学研究》 CAS 2010年第3期263-265,269,共4页
目的:观察热疗联合紫杉醇对NCI-H446细胞增殖作用以及VEGF mRNA表达的影响。方法:将NCI-H446细胞分组,Ⅰ热疗组(43℃加热90 min);Ⅱ紫杉醇组;Ⅲ热疗联合紫杉醇组;Ⅳ对照组(常规培养细胞)。分别在处理72 h后用MTT法检测4组细胞增殖情况;R... 目的:观察热疗联合紫杉醇对NCI-H446细胞增殖作用以及VEGF mRNA表达的影响。方法:将NCI-H446细胞分组,Ⅰ热疗组(43℃加热90 min);Ⅱ紫杉醇组;Ⅲ热疗联合紫杉醇组;Ⅳ对照组(常规培养细胞)。分别在处理72 h后用MTT法检测4组细胞增殖情况;RT-PCR检测各组细胞中VEGF mRNA的表达量。结果:加热抑制了NCI-H446细胞的增殖;单独应用紫杉醇随着药物浓度的倍比增大,增殖抑制率逐渐增大;加热联合紫杉醇与对应浓度单独使用比较差异有统计学意义(P<0.05)。加热降低了NCI-H446细胞中VEGF mRNA的表达;加热联合紫杉醇组中NCI-H446细胞中VEGF mRNA的表达量明显减少,与对应浓度紫杉醇组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:43℃加热90 min联合紫杉醇对NCI-H446细胞增殖有抑制作用,并降低了VEGF mRNA的表达量。 展开更多
关键词 热疗 紫杉醇 nci-h446细胞 增殖抑制率 VEGF MRNA
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人小细胞肺癌NCI-H446细胞成瘤组织中HSG及WNT/Ca^(2+)信号通路相关基因表达 被引量:1
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作者 吴闽付 陶金艳 葛正行 《癌症进展》 2019年第5期533-535,共3页
目的探究细胞增殖抑制基因(HSG)、WNT5A、WNT11对人小细胞肺癌NCI-H446细胞成瘤的影响并探讨其作用机制。方法采用裸鼠成瘤技术在裸鼠皮下培养NCI-H446细胞肿瘤组织,采用实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应检测成瘤组织与癌旁组织中HSG、... 目的探究细胞增殖抑制基因(HSG)、WNT5A、WNT11对人小细胞肺癌NCI-H446细胞成瘤的影响并探讨其作用机制。方法采用裸鼠成瘤技术在裸鼠皮下培养NCI-H446细胞肿瘤组织,采用实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应检测成瘤组织与癌旁组织中HSG、WNT5A、WNT11基因的相对表达量。结果 20只接种NCIH446细胞悬液的裸鼠中,1只裸鼠于操作过程中死亡,15只裸鼠成功成瘤,成瘤率为78.9%。肿瘤组织中WNT5A、WNT11基因的相对表达量明显高于癌旁组织(P﹤0.01);肿瘤组织中HSG基因的相对表达量明显低于癌旁组织(P﹤0.01)。结论 HSG基因可能具有抑制小细胞肺癌成瘤的作用,WNT/Ca2+信号通路在NCI-H446细胞成瘤组织中大量开放并可能参与其成瘤过程。 展开更多
关键词 细胞肺癌 nci-h446细胞 细胞增殖抑制基因 WNT/Ca^2+信号通路
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奥沙利铂诱导人小细胞肺癌NCI-H446细胞凋亡的研究 被引量:1
5
作者 李玉芳 仲宁 +1 位作者 沈文香 王金志 《现代肿瘤医学》 CAS 2011年第7期1315-1318,共4页
目的:研究奥沙利铂对人肺癌细胞株NCI-H446生长抑制及诱导凋亡的作用并探讨其机制。方法:以不同浓度的奥沙利铂作用于NCI-H446细胞,应用采用噻唑蓝(MTT)法检测奥沙利铂对NCI-H446细胞生长的抑制作用。Hoechst33258荧光染色法观察细胞凋... 目的:研究奥沙利铂对人肺癌细胞株NCI-H446生长抑制及诱导凋亡的作用并探讨其机制。方法:以不同浓度的奥沙利铂作用于NCI-H446细胞,应用采用噻唑蓝(MTT)法检测奥沙利铂对NCI-H446细胞生长的抑制作用。Hoechst33258荧光染色法观察细胞凋亡形态学变化;流式细胞术检测细胞周期和凋亡;分光光度法检测caspase-3、caspase-8、caspase-9的活性。结果:奥沙利铂可抑制NCI-H446细胞的生长并具有时间和剂量依赖性,Hoechst 33258荧光染色可见典型的细胞凋亡特征,流式细胞仪检测到细胞阻滞于S期和sub-G1峰。经过奥沙利铂诱导,caspase-3、caspase-9活性被上调,较对照组明显升高(P<0.05),caspase-8活性未见明显改变(P>0.05)。结论:奥沙利铂具有抑制肺癌细胞株NCI-H446增殖及诱导凋亡作用,此作用可能通过激活内源性凋亡途径实现。 展开更多
关键词 奥沙利铂 nci-h446细胞 凋亡 细胞周期
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无机汞诱导人小细胞肺癌NCI_H446细胞凋亡的分子机制研究 被引量:1
6
作者 李丹 于蕾 +1 位作者 袁海波 丁会 《中国实验诊断学》 2012年第12期2173-2176,共4页
目的探讨无机汞(Inorganic mercury,IM)诱导NCI-H446细胞凋亡发生的分子机制。方法应用流式细胞术检测无机汞对NCI_H446细胞凋亡的影响;采用RT-PCR及Western Blot法检测无机汞作用NCI-H446细胞后促凋亡基因Bax、凋亡抑制基因Bcl-2、凋... 目的探讨无机汞(Inorganic mercury,IM)诱导NCI-H446细胞凋亡发生的分子机制。方法应用流式细胞术检测无机汞对NCI_H446细胞凋亡的影响;采用RT-PCR及Western Blot法检测无机汞作用NCI-H446细胞后促凋亡基因Bax、凋亡抑制基因Bcl-2、凋亡蛋白酶Caspase-3mRNA及蛋白水平的变化。结果不同浓度无机汞作用NCI-H446细胞后,随着剂量的升高可以看到凋亡率增加,无机汞组细胞Bcl-2mRNA及蛋白表达水平低于对照组,并存在着时间依赖性降低趋势,至24h达到最低;Bax及Caspase-3mRNA及蛋白表达水平均高于对照组,并存在着时间依赖性增高趋势,至24h达到最高。结论无机汞通过下调凋亡抑制基因Bcl-2mRNA水平、上调凋亡促进基因BaxmRNA水平,进而激活Caspase-3来调控NCI-H446细胞凋亡的发生。 展开更多
关键词 无机汞 nci-h446细胞 细胞凋亡
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小细胞肺癌组织显著低表达的SPIDR通过降低血清依赖促进NCI-H446细胞增殖 被引量:1
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作者 张泽忠 贾玉琳 +7 位作者 其力格尔 方一 李春晖 厉建蕾 顾晔 邓子新 张海平 马伟 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第10期1026-1033,共8页
目的:探讨同源重组修复途径关键调控蛋白SPIDR在小细胞肺癌(small cell lung cancer,SCLC)中的作用与机制。方法:收集2013年1月至2015年1月上海肺科医院进行肿瘤手术切除、气管镜穿刺的SCLC患者癌组织标本60例及正常人群肺组织标本44例,... 目的:探讨同源重组修复途径关键调控蛋白SPIDR在小细胞肺癌(small cell lung cancer,SCLC)中的作用与机制。方法:收集2013年1月至2015年1月上海肺科医院进行肿瘤手术切除、气管镜穿刺的SCLC患者癌组织标本60例及正常人群肺组织标本44例,qRT-PCR检测临床组织样本SPIDR mRNA表达水平;经稳定过表达SPIDR改变NCI-H446细胞表达水平后,采用MTT、小鼠荷瘤实验等实验方法,在体内、体外探究SPIDR表达水平对SCLC细胞增殖等影响。结果:吸烟与患者SCLC的发生显著有关(P<0.01);SPIDR m RNA在SCLC组织样本中的表达显著低于正常肺组织(P<0.01)。人肺胚成纤维细胞株MRC-5中SPIDR mRNA和蛋白表达水平明显高于SCLC细胞株NCI-H446(均P<0.05)。在10%胎牛血清常规培养体系中,过表达SPIDR对NCI-H446细胞增值和化疗药物敏感性无明显影响(均P>0.05),但小鼠荷瘤实验从第9天开始,过表达SPIDR组(pMSCV-SPIDR)的瘤体积与原始NCI-H446组和空载体组(pMSCV)开始出现明显差异,第27天pMSCV-SPIDR组移植瘤平均体积分别比原始NCI-H446组与空载体组缩小58.99%和61.84%(均P<0.01)。在含1%~3%胎牛血清的非常规培养体系中,过表达SPIDR的NCI-H446细胞增殖速度显著低于原始NCI-H446组和空载体组(P<0.05或P<0.01)。结论:SCLC组织中SPIDR表达水平明显低于正常肺组织,过表达SPIDR的NCI-H446细胞体内及体外低血清含量培养(<3%)生长速度显著低于对照组,表明SPIDR以低血清浓度依赖方式影响SCLC细胞增殖。 展开更多
关键词 细胞肺癌 nci-h446细胞 同源重组修复 SPIDR 血清依赖
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突变型K-ras siRNA抑制肺癌A549细胞的增殖和迁移并诱导细胞凋亡 被引量:1
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作者 王启钊 刁勇 +2 位作者 吕颖慧 李招发 许瑞安 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期564-569,共6页
目的:构建靶向K-ras的siRNA,研究K—rassiRNA对K-ras基因突变型肺癌细胞A549及K-ras野生型小细胞肺癌细胞NCI—H446生长和迁移的抑制作用。方法:设计并人工合成4条K.rassiRNA(针对野生型K-ras基因的K—rassiRNA1-K—rassiRNA3;针... 目的:构建靶向K-ras的siRNA,研究K—rassiRNA对K-ras基因突变型肺癌细胞A549及K-ras野生型小细胞肺癌细胞NCI—H446生长和迁移的抑制作用。方法:设计并人工合成4条K.rassiRNA(针对野生型K-ras基因的K—rassiRNA1-K—rassiRNA3;针对突变型K-ras基因的K—rassiRNA4),并分别转入A549和NCI—H446细胞。RT—PCR和Westernblotting检测不同K—rassiRNA对K—rasmRNA和蛋白表达的影响,MTr法检测不同K—rassiRNA对A549和NCI—H446细胞增殖的抑制作用。Transwell实验和Hoechst33258染色检测K—rassiRNA对细胞迁移和凋亡的影响。结果:靶向突变型K-ras的K.rassiR—NA4能特异性抑制A549细胞中K-ras的表达,但对N-ras和H-ras的表达没有影响。K—rassiRNA4抑制A549细胞的增殖,但不影响含野生型K-ras基因的NCI—H446细胞的增殖。K—rassiRNA4还能诱导A549细胞凋亡、抑制A549细胞迁移。结论:针对突变型K-ras基因的siRNA可特异性抑制K-ras突变型肺癌细胞的增殖和迁移,并诱导该细胞凋亡,K—rassiRNA可望用于K-ras突变型肿瘤特别是肺癌的个体化治疗。 展开更多
关键词 肺肿瘤 RNAi K-RAS A549细胞 ncih446细胞
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高/低侵袭转移性肺癌干细胞模型的建立 被引量:1
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作者 曾芳 刘晓光 乐涵波 《医学研究杂志》 2012年第7期62-66,共5页
目的以人肺癌NCI-H446细胞为研究对象,建立一种高/低侵袭性肺癌干细胞(high/low invasion lung tumor stemcells,H/L-ILTSCs)模型,并鉴定其生物学特性。方法首先,利用transwell小室迁移实验分离高/低迁移性NCI-H446细胞。取高/低迁移性N... 目的以人肺癌NCI-H446细胞为研究对象,建立一种高/低侵袭性肺癌干细胞(high/low invasion lung tumor stemcells,H/L-ILTSCs)模型,并鉴定其生物学特性。方法首先,利用transwell小室迁移实验分离高/低迁移性NCI-H446细胞。取高/低迁移性NCI-H446细胞采用transwell小室侵袭实验分离高/低侵袭转移性NCI-H446细胞。然后,以CD133、CD44为肺癌干细胞(lung tumor stem cells,LTSCs)表面标志,采用磁珠分选法分离NCI-H446细胞H/L-ILTSCs并进行纯度鉴定。最后,采用MTT法、transwell侵袭及免疫缺陷动物成瘤等实验,检测H-ILTSCs、L-ILTSCs及NCI-H446细胞的生长增殖,体外侵袭转移及体内成瘤能力。结果 H-ILTSCs生长增殖,体外侵袭转移及体内成瘤能力均高于L-ILTSCs及NCI-H446细胞,而L-ILTSCs与NCI-H446无显著差别。结论人肺癌细胞NCI-H446中可以分离和富集H/L-ILTSCs,且二者存在着干性差别。 展开更多
关键词 肺癌 ncih446细胞 侵袭转移性 肺癌干细胞 CD133 CD44
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洋地黄毒苷诱导小细胞肺癌NCI-H446细胞增殖和凋亡的影响 被引量:1
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作者 詹晓梅 肖义军 林婕 《福建师范大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期94-99,共6页
应用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测洋地黄毒苷对NCI-H446细胞增殖的抑制效果;用AO-EB染色、DNA凝胶电泳分析以及AnnexinⅤ检测法检测细胞凋亡;用碘化丙啶(PI)染色测定其周期变化,利用激光共聚焦显微镜观察细胞内活性氧(ROS)和钙离子(Ca2+)... 应用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测洋地黄毒苷对NCI-H446细胞增殖的抑制效果;用AO-EB染色、DNA凝胶电泳分析以及AnnexinⅤ检测法检测细胞凋亡;用碘化丙啶(PI)染色测定其周期变化,利用激光共聚焦显微镜观察细胞内活性氧(ROS)和钙离子(Ca2+)的变化.结果显示洋地黄毒苷明显抑制NCI-H446细胞增殖,AO-EB染色、DNA电泳及AnnexinV检测法显示细胞有明显的凋亡现象,PI染色显示处于S期的细胞增多,激光共聚焦显微镜观察表明细胞内活性氧和钙离子浓度均升高.表明洋地黄毒苷能明显抑制NCI-H446细胞增殖,且细胞被阻滞在S期.细胞内活性氧和钙离子浓度的增加可能与其诱导细胞凋亡有关. 展开更多
关键词 洋地黄毒苷 ncih446细胞 凋亡
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苗药抑癌汤对人肺癌NCI-H446细胞的影响 被引量:1
11
作者 王克林 李波 +1 位作者 葛正行 谌小军 《贵州中医药大学学报》 2021年第2期67-72,共6页
目的:探讨苗药抑癌汤浓缩液对人肺癌NCI-H446细胞的影响。方法:培养细胞加不同剂量苗药抑癌汤药处理,用CCK-8及流式检测细胞凋亡筛选苗药抑癌汤最佳浓度。按照最佳浓度处理细胞将细胞分为抑癌汤组(2.5 g/mL)顺铂组(0.6μg/mL)、顺铂(0.6... 目的:探讨苗药抑癌汤浓缩液对人肺癌NCI-H446细胞的影响。方法:培养细胞加不同剂量苗药抑癌汤药处理,用CCK-8及流式检测细胞凋亡筛选苗药抑癌汤最佳浓度。按照最佳浓度处理细胞将细胞分为抑癌汤组(2.5 g/mL)顺铂组(0.6μg/mL)、顺铂(0.6μg/mL)+二十分之一(0.125 g/mL)抑癌汤组、空白对照组,流式细胞术检测细胞周期、凋亡,划痕实验检测细胞迁移能力,Transwell实验检测细胞侵袭能力。结果:与对照组比较其余三组细胞活力显著下降(P<0.05),细胞凋亡率提高,细胞周期停滞于G2期。结论:抑癌汤能显著抑制NCI-H446细胞增殖、迁移与侵袭,并诱导NCI-H446细胞凋亡,且抑癌汤结合顺铂效果更佳。 展开更多
关键词 苗药抑癌汤 nci-h446细胞 顺铂
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甲基汞对人类小细胞肺癌NCI-H446细胞周期的影响
12
作者 丁会 左孟华 +1 位作者 李丹 李志超 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第23期2305-2307,共3页
目的研究氯化甲基汞(MMC)对小细胞肺癌NCI-H446细胞周期的影响。方法采用流式细胞仪检测了MMC对NCI-H446细胞细胞周期的作用,并与目前最常用的化疗药顺铂(DDP)和同样具有剧毒的三氧化二砷(As2O3)做比较。结果MMC、DDP能使NCI-H446细胞... 目的研究氯化甲基汞(MMC)对小细胞肺癌NCI-H446细胞周期的影响。方法采用流式细胞仪检测了MMC对NCI-H446细胞细胞周期的作用,并与目前最常用的化疗药顺铂(DDP)和同样具有剧毒的三氧化二砷(As2O3)做比较。结果MMC、DDP能使NCI-H446细胞表现为G0/G1期细胞数剂量依赖性明显增加,S期细胞数呈剂量依赖性明显减少;As2O3组细胞表现为明显的G2/M期剂量依赖性增加,S期细胞数剂量依赖性减少。结论MMC、As2O3、DDP均能诱导小细胞肺癌细胞株的细胞周期阻滞,但阻滞作用发生在细胞周期的不同时相。 展开更多
关键词 甲基汞 细胞肺癌 ncih446细胞 细胞周期
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氯化甲基汞诱导NCI-H446细胞凋亡的体外实验研究
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作者 丁会 王建国 +2 位作者 李丹 刘伟 李志超 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第24期3215-3217,共3页
目的探讨氯化甲基汞(MMC)诱导NCI-H446细胞凋亡发生的可能机制。方法通过分子生物学方法,检测调控细胞凋亡的关键基因Bcl-2、Bax和caspase-3在mRNA水平的表达情况。结果MMC组细胞Bcl-2mRNA水平低于对照组,并存在着时间依赖性降低趋势,至... 目的探讨氯化甲基汞(MMC)诱导NCI-H446细胞凋亡发生的可能机制。方法通过分子生物学方法,检测调控细胞凋亡的关键基因Bcl-2、Bax和caspase-3在mRNA水平的表达情况。结果MMC组细胞Bcl-2mRNA水平低于对照组,并存在着时间依赖性降低趋势,至24h达到最低;Bax及caspase-3mRNA水平高于对照组,并存在着时间依赖性增高趋势,至24h达到最高。结论MMC能够在体外诱导NCI-H446细胞发生凋亡。 展开更多
关键词 氯化甲基汞 nci-h446细胞 细胞凋亡
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淫羊藿苷对NCI-H446细胞增殖和凋亡的影响
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作者 王露 王文志 +2 位作者 徐建 夏进 梁宗安 《华西医学》 CAS 2015年第8期1401-1405,共5页
目的探讨淫羊藿苷对人小细胞肺癌细胞株NCI-H446的作用及其机制。方法将对数生长期NCI-H446细胞分成对照组和淫羊藿苷组。对照组细胞常规培养,淫羊藿苷组细胞培养体系中加入淫羊藿苷(8μmol/L)。各组细胞培养48 h后,利用噻唑蓝检测细胞... 目的探讨淫羊藿苷对人小细胞肺癌细胞株NCI-H446的作用及其机制。方法将对数生长期NCI-H446细胞分成对照组和淫羊藿苷组。对照组细胞常规培养,淫羊藿苷组细胞培养体系中加入淫羊藿苷(8μmol/L)。各组细胞培养48 h后,利用噻唑蓝检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡;实时定量聚合酶链式反应检测细胞Janus激酶2(JAK2)和信号转导子与转录激活子3(STAT3)基因表达;蛋白质印迹法检测细胞中JAK2、STAT3、磷酸化JAK2(p-JAK2)、磷酸化STAT3(p-STAT3)、Bax和BCL-2蛋白的变化。结果与对照组相比,淫羊藿苷组NCI-H446细胞增殖率明显下降(P<0.05),凋亡率明显升高,NCI-H446细胞JAK2 m RNA与STAT3 m RNA无明显差异。蛋白质印迹法检测显示,淫羊藿苷组NCI-H446细胞JAK2、STAT3总蛋白无明显变化(P>0.05);但p-JAK2、p-STAT3和Bax蛋白明显增加,而BCL-2明显减少(P<0.05)。结论淫羊藿苷能抑制NCI-H446细胞增殖,促进NCI-H446细胞凋亡,其作用可能是通过影响JAK2/STAT3信号传导通路实现的。 展开更多
关键词 淫羊藿苷 nci-h446细胞 增殖 凋亡 Janus激酶2/信号转导子与转录激活子3
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低剂量X射线照射对荷人小细胞肺癌(NCI-H446)裸小鼠移植瘤细胞凋亡相关基因mRNA表达的影响 被引量:7
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作者 姜宏宇 王冠军 丁艳华 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第11期1373-1375,共3页
目的研究低剂量照射(LDR)对荷人小细胞肺癌(NC I-H446)裸小鼠移植瘤细胞凋亡相关基因mRNA表达的影响。方法对荷人小细胞肺癌裸小鼠进行全身深部X射线照射,采用原位杂交技术检测荷人小细胞肺癌裸小鼠移植瘤组织的p53、Bcl-2、Bax的mRNA... 目的研究低剂量照射(LDR)对荷人小细胞肺癌(NC I-H446)裸小鼠移植瘤细胞凋亡相关基因mRNA表达的影响。方法对荷人小细胞肺癌裸小鼠进行全身深部X射线照射,采用原位杂交技术检测荷人小细胞肺癌裸小鼠移植瘤组织的p53、Bcl-2、Bax的mRNA表达水平。结果D1(75 mGy)、D2(4Gy)照射后,小细胞肺癌细胞的p53、Bax的mRNA表达呈上升趋势,Bcl-2的mRNA表达呈下降趋势,但与假照组(0 mGy)比较,无明显差异;D1+D2组的p53、Bax的mRNA表达明显增多,Bcl-2 mRNA表达显著下降,与假照组(0 mGy)比较有统计学差异(P<0.05)。结论LDR在一定程度上可能上调了小细胞肺癌细胞的p53、Bax的mRNA表达,下调了Bcl-2 mRNA的表达,同时对其后的大剂量照射有协同作用。 展开更多
关键词 低剂量照射 人小细胞肺癌nci-h446细胞 凋亡 原位杂交
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基于蛋白组学分析旋毛虫原肌球蛋白过表达对小细胞肺癌NCI-H446细胞蛋白组分的影响 被引量:1
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作者 王灏轩 朱莹莹 +2 位作者 程露阳 郭文平 杜娈英 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第8期758-765,共8页
目的研究旋毛虫原肌球蛋白(tropomyosin,Tm)过表达对人小细胞肺癌(small cell lung cancer,SCLC)NCI-H446细胞蛋白组分的影响。方法本研究通过串联质谱标记(Tandem mass tags,TMT)技术结合生物信息学分析旋毛虫Tm过表达对NCI-H446细胞... 目的研究旋毛虫原肌球蛋白(tropomyosin,Tm)过表达对人小细胞肺癌(small cell lung cancer,SCLC)NCI-H446细胞蛋白组分的影响。方法本研究通过串联质谱标记(Tandem mass tags,TMT)技术结合生物信息学分析旋毛虫Tm过表达对NCI-H446细胞蛋白组分的影响。比较旋毛虫Tm(Tm-pcDNA3.1)过表达和转染空载体(pcDNA3.1)48 h后NCI-H446细胞的蛋白组分,利用Uniprot数据库检索差异表达蛋白(Differentially expressed protein,DEPs)并对所得DEPs进行基因本体论(GO)富集分析。从STRING数据库获得DEPs相互作用数据,利用Cytoscape 3.9.0软件构建蛋白互作网络并筛选中心节点蛋白。通过Western blot对随机选取的中心节点蛋白NDRG1进行验证。结果旋毛虫Tm转染NCI-H446细胞48 h后,筛选出DEPs 70个,其中34个上调,36个下调;GO功能富集分析显示,DEPs主要涉及转录后的调控、免疫应答的调节等生物学功能;分析蛋白互作网络获得5个下调的中心节点蛋白:细胞周期蛋白G相关激酶(GAK)、组蛋白H3-7(H3-7)、辛普勒金Symplekin(SYMPK)、N-myc下游调节因子1(NDRG1)、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶N2(PKN2);Westrne blot结果显示旋毛虫Tm降低NCI-H446细胞中NDRG1的表达。结论旋毛虫TM能引起NCI-H446细胞蛋白组分的显著变化;旋毛虫Tm可能通过下调NCI-H446细胞中GAK、H3-7、SYMPK、NDRG1、PKN2的表达发挥其生物学作用。 展开更多
关键词 旋毛虫 原肌球蛋白 细胞肺癌nci-h446细胞 蛋白组学
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人肺癌NCI-H446细胞生成肿瘤干细胞球 被引量:2
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作者 乐涵波 刘晓光 曾芳 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期500-505,共6页
目的探索人肺癌NCI-H446细胞系干细胞球体的培养,并鉴定其生物学特性。方法用无血清培养基培养人肺癌NCI-H446细胞得到肿瘤细胞球。将肿瘤细胞球传代扩增,并用含血清培养基培养促使其分化;四甲基偶氮唑盐(MTT)比色检测肿瘤球和普通NCI-H... 目的探索人肺癌NCI-H446细胞系干细胞球体的培养,并鉴定其生物学特性。方法用无血清培养基培养人肺癌NCI-H446细胞得到肿瘤细胞球。将肿瘤细胞球传代扩增,并用含血清培养基培养促使其分化;四甲基偶氮唑盐(MTT)比色检测肿瘤球和普通NCI-H446细胞的增殖能力,并将肿瘤球和普通NCI-H446细胞分别植入裸鼠皮下,观察肿瘤形成;Transwell侵袭实验检测肿瘤球和普通NCI-H446细胞的侵袭能力的不同;流式细胞术检测CD133、CD44在肿瘤球和普通NCI-H446细胞中的表达,并筛选细胞表面标志物。结果在无血清培养基中,人肺癌NCI-H446细胞可以形成少量的肿瘤细胞球,并显示很强的自我更新和增殖能力,在含血清环境中能够诱导肿瘤球分化而贴壁生长;在动物实验中,接种5×105个细胞时,肿瘤球细胞较普通NCI-H446细胞显示更强的致瘤能力;在侵袭实验中,肿瘤球细胞的侵袭能力高于普通NCI-H446细胞;干细胞标志物CD133及CD44在肿瘤球细胞的表达较普通NCI-H446细胞明显增高。结论人肺癌细胞NCI-H446中存在癌干细胞,且可以通过无血清培养、分离和富集。 展开更多
关键词 肺癌 nci-h446细胞 无血清培养 癌干细胞 细胞表面标志 流式细胞
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抑癌汤对人肺癌NCI-H446细胞增殖抑制作用的体外实验研究 被引量:2
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作者 李亚娜 葛正行 +1 位作者 杜进军 杨秀萍 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期487-489,共3页
目的通过自拟方抑制癌汤对人肺癌NCI-H446细胞株进行干扰研究,探讨其增殖抑制作用。希望从苗药中药组方中找到抑制肺癌细胞增殖的新方法。方法将NCI-H446细胞进行培养,绘制NCI-H446细胞生长曲线,取处在对数生长期的NCI-H446细胞进行实... 目的通过自拟方抑制癌汤对人肺癌NCI-H446细胞株进行干扰研究,探讨其增殖抑制作用。希望从苗药中药组方中找到抑制肺癌细胞增殖的新方法。方法将NCI-H446细胞进行培养,绘制NCI-H446细胞生长曲线,取处在对数生长期的NCI-H446细胞进行实验。首先确定抑癌汤的作用浓度范围。取细胞的存活率为50%时的药物浓度范围作为抑癌汤的给药浓度参考。再将抑癌汤在该浓度范围内分为5个浓度组;实验分抑癌汤组、西药组、抑癌汤加西药组、空白组四组、每一组各4个复孔,进行对照研究。结果抑癌汤对NCI-H446细胞毒实验得到细胞存活率50%时的药物浓度范围在1~100μg/ml之间。抑癌汤加西药组优于抑癌汤组;抑癌汤加西药组优于西药组;西药组优于抑癌汤组;抑癌汤组优于空白组;抑癌汤加西药组优于空白组;西药组优于空白组。结论抑癌汤在体外对人肺小细胞肺癌NCI-H446细胞具有抑制作用,具有潜在药用价值,值得进一步深入研究。 展开更多
关键词 自拟方 抑癌汤 肺癌 ncih446细胞 增殖抑制作用
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放射耐受性人小细胞肺癌亚株的建立 被引量:1
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作者 刘静 田海梅 +3 位作者 李艳芬 李茉 王小兵 张伟 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2015年第10期51-54,I0007,共5页
目的建立肺癌NCI-H446细胞放射抗拒性亚株,为小细胞肺癌放射抗拒和逆转研究提供配对的细胞研究工具。方法通过梯度照射NCI-H446细胞株诱导其耐放射性(共7500c Gy),并通过检测细胞总的ATP含量的方法来监测细胞倍增时间,流式细胞仪检测细... 目的建立肺癌NCI-H446细胞放射抗拒性亚株,为小细胞肺癌放射抗拒和逆转研究提供配对的细胞研究工具。方法通过梯度照射NCI-H446细胞株诱导其耐放射性(共7500c Gy),并通过检测细胞总的ATP含量的方法来监测细胞倍增时间,流式细胞仪检测细胞周期分布,以及应用多靶单击模型SF=1-(1-e-D/D0)N拟合细胞存活曲线分析其放射敏感参数的变化。结果比较亲本与耐放射株的差异,放射生物学参数值分别为D0(1.9673,2.2756)、N(1.0016,2.6008)、Dq(0.6783,1.6860)、SF2(0.3623,0.7134),耐放射株SF2值为亲本的1.97倍,G2/M期细胞所占比由18.52%下降到7.84%。耐放射株的细胞形态发生变化,倍增时间比敏感株延长。结论通过梯度照射建立了小细胞肺癌NCI-H446的耐放射亚株NCI-H446-R,与亲本细胞相比放射生物学参数有显著差异(P<0.05),本研究成果为研究小细胞肺癌放射抗拒及耐放射逆转提供了新的细胞模型。 展开更多
关键词 放射抗拒 细胞肺癌 nci-h446细胞 细胞周期
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