^(125)I-RC-160的标记及与NCI-H446细胞体外受体结合特性的研究 被引量：4

1

作者 李富军 汪静 +1 位作者 邓敬兰 李焰 《核技术》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期321-326,共6页

为探索高比活度12 5I -生长抑素类似物 (RC - 160 )的制备及与小细胞肺癌 (SCLC)细胞株-NCI-H4 46体外受体结合特性。12 5I -RC - 160采用氯胺T法标记 ,C18反向色谱柱纯化 ,硅胶纸层析检测。12 5I-RC - 160与NCI -H4 46细胞进行体外结... 为探索高比活度12 5I -生长抑素类似物 (RC - 160 )的制备及与小细胞肺癌 (SCLC)细胞株-NCI-H4 46体外受体结合特性。12 5I -RC - 160采用氯胺T法标记 ,C18反向色谱柱纯化 ,硅胶纸层析检测。12 5I-RC - 160与NCI -H4 46细胞进行体外结合实验、饱和结合实验和竞争结合实验。12 5I -RC - 160标记率为 5 4.34 % ,比活度 1.85TBq/ (mmol·L- 1) ,放射化学纯度 (RCP)为 92 % ;Scatchard作图提示 ,Kd 为 1.71× 10 - 10 mol/L ,Bmax为 1.0 6× 10 5个 /细胞。制备的12 5I -RC - 160达到体外受体配体结合分析的标准 ;12 5I-RC - 160与NCI -H4 46的结合具有温度时间依赖性、可饱和性、可逆性及特异 ;12 5I -RC - 160与NCI -H4 46细胞生长抑素受体的结合符合单位点系统。 展开更多

关键词 RC-160 标记 nci-h446 细胞体外受体 结合特性 生长抑素 小细胞肺癌 碘125 受体介导核素治疗 放射性核素

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BCSC-1基因异位表达对人小细胞肺癌细胞增殖的抑制效应 被引量：3

2

作者 袁芳 鞠吉雨 +3 位作者 唐媛媛 邸大琳 王丽娜 孙萍 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期336-341,共6页

背景与目的:人乳腺癌候选抑制蛋白1(breast cancer suppressor candidate 1,BCSC-1)基因已被证实是一种新型抑癌基因,在多种肿瘤细胞均存在表达缺失的现象。该研究通过将BCSC-1基因转染至人小细胞肺癌细胞株NCI-H446,探讨BCSC-1基因异... 背景与目的:人乳腺癌候选抑制蛋白1(breast cancer suppressor candidate 1,BCSC-1)基因已被证实是一种新型抑癌基因,在多种肿瘤细胞均存在表达缺失的现象。该研究通过将BCSC-1基因转染至人小细胞肺癌细胞株NCI-H446,探讨BCSC-1基因异位表达对NCI-H446细胞增殖的抑制效应。方法:用PCR扩增BCSC-1 cDNA,构建真核重组表达载体pcDNA3.1/v5-HisB-BCSC-1。通过脂质体把pcDNA3.1/v5-HisB-BCSC-1和空质粒pcDNA3.1/v5-HisB转染入野生型NCI-H446细胞。以转染空质粒pcDNA3.1/v5-HisB的NCI-H446细胞为对照组,野生型NCI-H446细胞为空白对照组。采用流式细胞仪检测细胞周期;MTT法检测细胞增殖;免疫组化确认BCSC-1基因和CD44分子在NCI-H446细胞中的表达。结果:成功构建了真核重组表达载体pcDNA3.1/v5-HisB-BCSC-1,制备了BCSC-1基因异位高表达的NCI-H446稳定细胞株。细胞周期分析显示,异位表达BCSC-1的NCI-H446细胞大部分阻滞在G0/G1期,明显高于对照组和空白组(P<0.01)。MTT法检测显示,异位表达BCSC-1的NCI-H446细胞与对照组、空白组相比,生长速度明显减慢(P<0.05)。免疫组化显示异位表达BCSC-1的NCI-H446细胞CD44表达增高。结论:BCSC-1基因的异位表达对NCI-H446细胞的恶性增殖行为有明显的抑制作用,这种抑制作用可能与细胞周期阻滞和黏附分子CD44表达增高有关。 展开更多

关键词 BCSC-1基因 nci h446细胞 生长曲线 细胞周期 CD44

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重组人血管内皮抑制素联合EP方案对小细胞肺癌细胞株NCI-H446的增殖抑制和促细胞凋亡作用 被引量：2

3

作者 叶翔赟 陆舜 陈智伟 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期239-243,共5页

目的:本研究旨在评估依托泊苷(etoposide,VP-16)、顺铂(cisplatin,DDP)(EP方案)联合重组人血管内皮抑制素对小细胞肺癌(small-cell lung cancer,SCLC)NCI-H446细胞的促凋亡和抑制细胞增殖的协同作用。方法:EP方案、重组人血管内皮抑制... 目的:本研究旨在评估依托泊苷(etoposide,VP-16)、顺铂(cisplatin,DDP)(EP方案)联合重组人血管内皮抑制素对小细胞肺癌(small-cell lung cancer,SCLC)NCI-H446细胞的促凋亡和抑制细胞增殖的协同作用。方法:EP方案、重组人血管内皮抑制素单药以及EP方案联合重组人血管内皮抑制素作用于NCI-H446细胞72h后,采用CCK-8(cell counting kit-8)法测定药物对NCI-H446细胞的增殖抑制作用,FCM检测药物对NCI-H446细胞的细胞周期分布的影响,ELISA法检测药物对NCI-H446细胞分泌血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial cell growth factor,VEGF)水平的影响。结果:EP方案联合重组人血管内皮抑制素的细胞增殖抑制率明显高于EP方案组(P<0.01)。EP方案组和EP方案联合重组人血管内皮抑制素组的NCI-H446细胞大多被阻滞于G1期,EP方案联合重组人血管内皮抑制素组的NCI-H446细胞凋亡率显著高于EP方案组(P<0.01)。与EP方案和重组人血管内皮抑制素单药相比,EP方案联合重组人血管内皮抑制素可显著抑制NCI-H446细胞分泌VEGF(P<0.05)。结论:EP方案联合重组人血管内皮抑制素在抑制SCLCNCI-H446细胞增殖和促细胞凋亡方面,具有协同作用。 展开更多

关键词 癌 小细胞肺 血管内皮细胞生长因子受体 重组人血管内皮抑制素 依托泊苷 顺铂 细胞增殖 细胞凋亡 nci-h446细胞

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不同IL-15基因转染对NCI-H446肿瘤细胞增殖的影响 被引量：2

4

作者 王智华 王润田 +3 位作者 丁军颖 张征峥 邓郁青 王平 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期639-641,共3页

目的探讨不同形式IL-15基因转染对人小细胞肺癌细胞株NCI-H446细胞增殖的影响。方法用本室已构建的3种转染不同IL-15基因(原型、成熟肽及以IL-2信号肽替代IL-15信号肽的改型IL-15基因)的NCI-H446细胞模型:CIL-15、CIL-15mp和CIL-2sp-IL-... 目的探讨不同形式IL-15基因转染对人小细胞肺癌细胞株NCI-H446细胞增殖的影响。方法用本室已构建的3种转染不同IL-15基因(原型、成熟肽及以IL-2信号肽替代IL-15信号肽的改型IL-15基因)的NCI-H446细胞模型:CIL-15、CIL-15mp和CIL-2sp-IL-15mp,以野生株NCI-H446细胞(CW)为对照,台盼蓝拒染计数法测定细胞生长曲线、MTT法检测细胞增殖、流式细胞术分析细胞周期的变化、RT-PCR法检测cyclinD1和cyclinE的表达。结果与CW相比,CIL-15、CIL-15mp和CIL-2sp-IL-15mp增殖速率依次减慢、G0/G1期细胞比例依次增加、S期细胞和细胞周期蛋白cyclinE表达依次减少、cyclinD1表达无变化。结论3种IL-15基因转染均有使NCI-H446细胞增殖明显减慢的作用,强度依次为改型>成熟肽>原型;这种作用与降低NCI-H446细胞cyclinE的表达有关(r=0.953,P<0.05),与cyclinD1的表达无关(r=0.155,P>0.05)。 展开更多

关键词 IL-15 基因转染 nci-h446 细胞增殖 细胞周期

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人小细胞肺癌NCI-H446细胞成瘤组织中HSG及WNT/Ca^(2+)信号通路相关基因表达 被引量：1

5

作者 吴闽付 陶金艳 葛正行 《癌症进展》 2019年第5期533-535,共3页

目的探究细胞增殖抑制基因(HSG)、WNT5A、WNT11对人小细胞肺癌NCI-H446细胞成瘤的影响并探讨其作用机制。方法采用裸鼠成瘤技术在裸鼠皮下培养NCI-H446细胞肿瘤组织,采用实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应检测成瘤组织与癌旁组织中HSG、... 目的探究细胞增殖抑制基因(HSG)、WNT5A、WNT11对人小细胞肺癌NCI-H446细胞成瘤的影响并探讨其作用机制。方法采用裸鼠成瘤技术在裸鼠皮下培养NCI-H446细胞肿瘤组织,采用实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应检测成瘤组织与癌旁组织中HSG、WNT5A、WNT11基因的相对表达量。结果 20只接种NCIH446细胞悬液的裸鼠中,1只裸鼠于操作过程中死亡,15只裸鼠成功成瘤,成瘤率为78.9%。肿瘤组织中WNT5A、WNT11基因的相对表达量明显高于癌旁组织(P﹤0.01);肿瘤组织中HSG基因的相对表达量明显低于癌旁组织(P﹤0.01)。结论 HSG基因可能具有抑制小细胞肺癌成瘤的作用,WNT/Ca2+信号通路在NCI-H446细胞成瘤组织中大量开放并可能参与其成瘤过程。 展开更多

关键词 小细胞肺癌 nci-h446细胞 细胞增殖抑制基因 WNT/Ca^2+信号通路

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小细胞肺癌组织显著低表达的SPIDR通过降低血清依赖促进NCI-H446细胞增殖 被引量：1

6

作者 张泽忠 贾玉琳 +7 位作者 其力格尔 方一 李春晖 厉建蕾 顾晔 邓子新 张海平 马伟 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第10期1026-1033,共8页

目的:探讨同源重组修复途径关键调控蛋白SPIDR在小细胞肺癌(small cell lung cancer,SCLC)中的作用与机制。方法:收集2013年1月至2015年1月上海肺科医院进行肿瘤手术切除、气管镜穿刺的SCLC患者癌组织标本60例及正常人群肺组织标本44例,... 目的:探讨同源重组修复途径关键调控蛋白SPIDR在小细胞肺癌(small cell lung cancer,SCLC)中的作用与机制。方法:收集2013年1月至2015年1月上海肺科医院进行肿瘤手术切除、气管镜穿刺的SCLC患者癌组织标本60例及正常人群肺组织标本44例,qRT-PCR检测临床组织样本SPIDR mRNA表达水平;经稳定过表达SPIDR改变NCI-H446细胞表达水平后,采用MTT、小鼠荷瘤实验等实验方法,在体内、体外探究SPIDR表达水平对SCLC细胞增殖等影响。结果:吸烟与患者SCLC的发生显著有关(P<0.01);SPIDR m RNA在SCLC组织样本中的表达显著低于正常肺组织(P<0.01)。人肺胚成纤维细胞株MRC-5中SPIDR mRNA和蛋白表达水平明显高于SCLC细胞株NCI-H446(均P<0.05)。在10%胎牛血清常规培养体系中,过表达SPIDR对NCI-H446细胞增值和化疗药物敏感性无明显影响(均P>0.05),但小鼠荷瘤实验从第9天开始,过表达SPIDR组(pMSCV-SPIDR)的瘤体积与原始NCI-H446组和空载体组(pMSCV)开始出现明显差异,第27天pMSCV-SPIDR组移植瘤平均体积分别比原始NCI-H446组与空载体组缩小58.99%和61.84%(均P<0.01)。在含1%～3%胎牛血清的非常规培养体系中,过表达SPIDR的NCI-H446细胞增殖速度显著低于原始NCI-H446组和空载体组(P<0.05或P<0.01)。结论:SCLC组织中SPIDR表达水平明显低于正常肺组织,过表达SPIDR的NCI-H446细胞体内及体外低血清含量培养(<3%)生长速度显著低于对照组,表明SPIDR以低血清浓度依赖方式影响SCLC细胞增殖。 展开更多

关键词 小细胞肺癌 nci-h446细胞 同源重组修复 SPIDR 血清依赖

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奥沙利铂诱导人小细胞肺癌NCI-H446细胞凋亡的研究 被引量：1

7

作者 李玉芳 仲宁 +1 位作者 沈文香 王金志 《现代肿瘤医学》 CAS 2011年第7期1315-1318,共4页

目的:研究奥沙利铂对人肺癌细胞株NCI-H446生长抑制及诱导凋亡的作用并探讨其机制。方法:以不同浓度的奥沙利铂作用于NCI-H446细胞,应用采用噻唑蓝(MTT)法检测奥沙利铂对NCI-H446细胞生长的抑制作用。Hoechst33258荧光染色法观察细胞凋... 目的:研究奥沙利铂对人肺癌细胞株NCI-H446生长抑制及诱导凋亡的作用并探讨其机制。方法:以不同浓度的奥沙利铂作用于NCI-H446细胞,应用采用噻唑蓝(MTT)法检测奥沙利铂对NCI-H446细胞生长的抑制作用。Hoechst33258荧光染色法观察细胞凋亡形态学变化;流式细胞术检测细胞周期和凋亡;分光光度法检测caspase-3、caspase-8、caspase-9的活性。结果:奥沙利铂可抑制NCI-H446细胞的生长并具有时间和剂量依赖性,Hoechst 33258荧光染色可见典型的细胞凋亡特征,流式细胞仪检测到细胞阻滞于S期和sub-G1峰。经过奥沙利铂诱导,caspase-3、caspase-9活性被上调,较对照组明显升高(P<0.05),caspase-8活性未见明显改变(P>0.05)。结论:奥沙利铂具有抑制肺癌细胞株NCI-H446增殖及诱导凋亡作用,此作用可能通过激活内源性凋亡途径实现。 展开更多

关键词 奥沙利铂 nci-h446细胞 凋亡 细胞周期

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无机汞诱导人小细胞肺癌NCI_H446细胞凋亡的分子机制研究 被引量：1

8

作者 李丹 于蕾 +1 位作者 袁海波 丁会 《中国实验诊断学》 2012年第12期2173-2176,共4页

目的探讨无机汞(Inorganic mercury,IM)诱导NCI-H446细胞凋亡发生的分子机制。方法应用流式细胞术检测无机汞对NCI_H446细胞凋亡的影响;采用RT-PCR及Western Blot法检测无机汞作用NCI-H446细胞后促凋亡基因Bax、凋亡抑制基因Bcl-2、凋... 目的探讨无机汞(Inorganic mercury,IM)诱导NCI-H446细胞凋亡发生的分子机制。方法应用流式细胞术检测无机汞对NCI_H446细胞凋亡的影响;采用RT-PCR及Western Blot法检测无机汞作用NCI-H446细胞后促凋亡基因Bax、凋亡抑制基因Bcl-2、凋亡蛋白酶Caspase-3mRNA及蛋白水平的变化。结果不同浓度无机汞作用NCI-H446细胞后,随着剂量的升高可以看到凋亡率增加,无机汞组细胞Bcl-2mRNA及蛋白表达水平低于对照组,并存在着时间依赖性降低趋势,至24h达到最低;Bax及Caspase-3mRNA及蛋白表达水平均高于对照组,并存在着时间依赖性增高趋势,至24h达到最高。结论无机汞通过下调凋亡抑制基因Bcl-2mRNA水平、上调凋亡促进基因BaxmRNA水平,进而激活Caspase-3来调控NCI-H446细胞凋亡的发生。 展开更多

关键词 无机汞 nci-h446细胞 细胞凋亡

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甲基汞对人类小细胞肺癌NCI-H446细胞周期的影响

9

作者 丁会 左孟华 +1 位作者 李丹 李志超 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第23期2305-2307,共3页

目的研究氯化甲基汞(MMC)对小细胞肺癌NCI-H446细胞周期的影响。方法采用流式细胞仪检测了MMC对NCI-H446细胞细胞周期的作用,并与目前最常用的化疗药顺铂(DDP)和同样具有剧毒的三氧化二砷(As2O3)做比较。结果MMC、DDP能使NCI-H446细胞... 目的研究氯化甲基汞(MMC)对小细胞肺癌NCI-H446细胞周期的影响。方法采用流式细胞仪检测了MMC对NCI-H446细胞细胞周期的作用,并与目前最常用的化疗药顺铂(DDP)和同样具有剧毒的三氧化二砷(As2O3)做比较。结果MMC、DDP能使NCI-H446细胞表现为G0/G1期细胞数剂量依赖性明显增加,S期细胞数呈剂量依赖性明显减少;As2O3组细胞表现为明显的G2/M期剂量依赖性增加,S期细胞数剂量依赖性减少。结论MMC、As2O3、DDP均能诱导小细胞肺癌细胞株的细胞周期阻滞,但阻滞作用发生在细胞周期的不同时相。 展开更多

关键词 甲基汞 小细胞肺癌 nci—h446细胞 细胞周期

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氯化甲基汞诱导NCI-H446细胞凋亡的体外实验研究

10

作者 丁会 王建国 +2 位作者 李丹 刘伟 李志超 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第24期3215-3217,共3页

目的探讨氯化甲基汞(MMC)诱导NCI-H446细胞凋亡发生的可能机制。方法通过分子生物学方法,检测调控细胞凋亡的关键基因Bcl-2、Bax和caspase-3在mRNA水平的表达情况。结果MMC组细胞Bcl-2mRNA水平低于对照组,并存在着时间依赖性降低趋势,至... 目的探讨氯化甲基汞(MMC)诱导NCI-H446细胞凋亡发生的可能机制。方法通过分子生物学方法,检测调控细胞凋亡的关键基因Bcl-2、Bax和caspase-3在mRNA水平的表达情况。结果MMC组细胞Bcl-2mRNA水平低于对照组,并存在着时间依赖性降低趋势,至24h达到最低;Bax及caspase-3mRNA水平高于对照组,并存在着时间依赖性增高趋势,至24h达到最高。结论MMC能够在体外诱导NCI-H446细胞发生凋亡。 展开更多

关键词 氯化甲基汞 nci-h446细胞 细胞凋亡

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肺癌细胞株APC基因启动子甲基化对其转录的影响 被引量：10

11

作者 张丽霞 潘世扬 +7 位作者 陈丹 谢而付 高丽 束永前 陆祖宏 程璐 杨迪 张寄南 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2007年第6期576-580,共5页

背景与目的:抑癌基因家族性腺瘤样结肠息肉病易感基因(adenomatous polyposis coli,APC)启动子区的高甲基化在很多肿瘤中被发现,与这些肿瘤的发生发展相关。本实验室在肺癌患者肿瘤组织中检测到APC甲基化率达47%,为了研究其在肺癌细胞... 背景与目的:抑癌基因家族性腺瘤样结肠息肉病易感基因(adenomatous polyposis coli,APC)启动子区的高甲基化在很多肿瘤中被发现,与这些肿瘤的发生发展相关。本实验室在肺癌患者肿瘤组织中检测到APC甲基化率达47%,为了研究其在肺癌细胞株中的甲基化情况,并进一步了解甲基化对其转录的影响,本研究检测了3株肺癌细胞的抑癌基因APC启动子甲基化状态及其对该基因转录水平的影响。方法:提取3株肺癌细胞株(肺腺癌细胞株SPC-A1、小细胞肺癌细胞株NCI-H446、大细胞肺癌细胞株NCI-H460)的DNA,以经转甲基处理和未做处理的脐带血DNA为阳性、阴性对照,亚硫酸氢盐化学修饰后,用甲基化特异性基因扩增(methylation specific-polymerase chain reaction,MSP)和甲基化基因芯片对APC基因启动子1ACpG岛甲基化进行研究,并用实时荧光定量PCR(real time-polymerase chain reaction)技术,以Sybr-GreenⅠ为荧光染料,β-actin基因为内参照,检测mRNA转录;对甲基化阳性的NCI-H460细胞,分别用1、5、10、15μmol/L的5′-杂氮-2'-脱氧胞嘧啶(5-aza-2-deoxycytidine,5-aza-dC)试剂进行脱甲基化,提取RNA,荧光定量检测其转录变化。结果:SPC-A1和NCI-H446细胞APC甲基化阴性,NCI-H460细胞APC甲基化阳性;甲基化芯片检测NCI-H460细胞在APC启动子1A5个CpG位点均存在甲基化(687、707、714、719、726),SPC-A1和NCI-H446甲基化阴性,荧光定量结果NCI-H460的APC转录较SPC-A1和NCI-H446有明显的下降,仅为二者平均的30.04%;经5-aza-dC脱甲基化作用后,NCI-H460细胞的APC表达增加了约5～10倍,其中10μmol/L浓度作用下,APC表达增加最多。结论:肺癌细胞株NCI-H460中存在APC基因高甲基化,5-aza-dC脱甲基化试剂可以激活其转录。 展开更多

关键词 肺癌细胞株 APC MSP 甲基化芯片 5-AZA-DC 实时荧光定量PCR

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旋毛虫排泄分泌蛋白对小细胞肺癌NCI-H446细胞凋亡的影响 被引量：8

12

作者 常红敏 赵蕾 +4 位作者 王小杰 方艳辉 李丹 罗婧梅 杜娈英 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期299-303,共5页

目的研究旋毛虫肌幼虫排泄分泌蛋白对人小细胞肺癌NCI-H446细胞凋亡的影响。方法旋毛虫肌幼虫培养24 h,收集培养液,取上清,即为旋毛虫肌幼虫排泄分泌蛋白。将人小细胞肺癌NCI-H446细胞(编号A054)随机分为3组,实验组(A组)和细胞凋亡组(B... 目的研究旋毛虫肌幼虫排泄分泌蛋白对人小细胞肺癌NCI-H446细胞凋亡的影响。方法旋毛虫肌幼虫培养24 h,收集培养液,取上清,即为旋毛虫肌幼虫排泄分泌蛋白。将人小细胞肺癌NCI-H446细胞(编号A054)随机分为3组,实验组(A组)和细胞凋亡组(B组)的NCI-H446细胞(5×106/ml)分别与旋毛虫排泄分泌蛋白(终浓度为0.3 mg/ml)和顺铂(6.4μg/ml)共培养24 h,空白对照组(C组)的NCI-H446细胞培养24 h,不作任何处理。RT-PCR检测3组NCI-H446细胞中凋亡抑制基因Bcl-2、凋亡相关基因Fas和Fas配体(Fasl)mRNA的表达水平。以抗原癌基因C-myc标签鼠单克隆抗体为一抗,蛋白质印迹(Western blotting)检测3组细胞C-myc蛋白的表达情况。免疫荧光检测3组NCI-H446细胞中C-myc蛋白阳性表达情况。结果 RT-PCR结果显示,经旋毛虫排泄分泌蛋白处理的NCI-H446细胞(A组),Bcl-2 mRNA相对表达水平最低,为(0.575±0.047),与B(0.850±0.073)、C组(0.975±0.069)比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。A组Fas mRNA相对表达量最高,为(0.975±0.115),B(0.817±0.121)、C组(0.769±0.061)相对较低(P<0.05)。A、B和C组细胞Fasl mRNA相对表达水平分别为0.669±0.051、0.787±0.124、0.875±0.125(P<0.05)。A、B和C组细胞Fas/Fasl mRNA比值分别为1.475、1.038和0.878。Western blotting分析结果显示,A组C-myc相对表达水平最低(0.566±0.054),B(1.074±0.069)、C组(1.172±0.026)相对较高(P<0.05)。免疫荧光定位结果显示,旋毛虫排泄分泌蛋白和顺铂作用后24 h,C-myc蛋白在细胞浆/细胞核表达。结论旋毛虫排泄分泌蛋白可促进人小细胞肺癌细胞系NCI-H446细胞凋亡,可能是通过调节凋亡蛋白C-myc表达、进而抑制Bcl-2 mRNA的表达并调节Fas/Fasl mRNA比例来实现的。 展开更多

关键词 旋毛虫 排泄分泌蛋白 小细胞肺癌 nci-h446 凋亡基因 凋亡蛋白

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志苓胶囊对人小细胞肺癌细胞系NCI-H446增殖抑制和诱导凋亡的影响 被引量：7

13

作者 陈英玉 潘云苓 +3 位作者 刘庭波 潘明继 胡辉亮 胡建达 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期531-534,共4页

目的研究志苓胶囊(ZLJN)对人小细胞肺癌细胞系NCI-H446增殖影响及诱导凋亡作用。方法将志苓胶囊按其不同的中西药成分配制成不同浓度的中药组、西药组和复方组,与NCI-H446共培养后,采用MTT比色法、集落形成试验,分别检测细胞存活率和集... 目的研究志苓胶囊(ZLJN)对人小细胞肺癌细胞系NCI-H446增殖影响及诱导凋亡作用。方法将志苓胶囊按其不同的中西药成分配制成不同浓度的中药组、西药组和复方组,与NCI-H446共培养后,采用MTT比色法、集落形成试验,分别检测细胞存活率和集落形成率。通过流式细胞仪进行DNA倍体分析、Bcl-2蛋白表达、线粒体跨膜电位及Caspase-3活性检测;DNA片段化分析法、Annexin V-FITC标记法、TdT酶介导的原位缺口末端标记法(TUNEL)检测凋亡细胞。结果不同浓度的药物组与NCI-H446共培养后,细胞生长明显受抑制,细胞集落形成率明显降低,呈浓度依赖性;各药物组处理后的细胞线粒体跨膜电位和Bcl-2蛋白表达水平下降,Caspase-3活性增强;琼脂糖凝胶电泳可见典型的DNA梯形带;各药物组均检测到明显的亚二倍体G1峰(凋亡峰);Annexin V-FITC法检测到早期凋亡细胞;TUNEL法检测到晚期凋亡细胞。复方组诱导细胞凋亡作用强于中药组和西药组。结论志苓胶囊可以有效抑制NCI-H446细胞增殖,诱导其凋亡,细胞线粒体跨膜电位水平降低,Caspase-3活性增强和Bcl-2表达下调可能参与了该过程。 展开更多

关键词 小细胞肺癌细胞系nci-h446 志苓胶囊 增殖 凋亡

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低剂量X射线照射对荷人小细胞肺癌(NCI-H446)裸小鼠移植瘤细胞凋亡相关基因mRNA表达的影响 被引量：7

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作者 姜宏宇 王冠军 丁艳华 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第11期1373-1375,共3页

目的研究低剂量照射(LDR)对荷人小细胞肺癌(NC I-H446)裸小鼠移植瘤细胞凋亡相关基因mRNA表达的影响。方法对荷人小细胞肺癌裸小鼠进行全身深部X射线照射,采用原位杂交技术检测荷人小细胞肺癌裸小鼠移植瘤组织的p53、Bcl-2、Bax的mRNA... 目的研究低剂量照射(LDR)对荷人小细胞肺癌(NC I-H446)裸小鼠移植瘤细胞凋亡相关基因mRNA表达的影响。方法对荷人小细胞肺癌裸小鼠进行全身深部X射线照射,采用原位杂交技术检测荷人小细胞肺癌裸小鼠移植瘤组织的p53、Bcl-2、Bax的mRNA表达水平。结果D1(75 mGy)、D2(4Gy)照射后,小细胞肺癌细胞的p53、Bax的mRNA表达呈上升趋势,Bcl-2的mRNA表达呈下降趋势,但与假照组(0 mGy)比较,无明显差异;D1+D2组的p53、Bax的mRNA表达明显增多,Bcl-2 mRNA表达显著下降,与假照组(0 mGy)比较有统计学差异(P<0.05)。结论LDR在一定程度上可能上调了小细胞肺癌细胞的p53、Bax的mRNA表达,下调了Bcl-2 mRNA的表达,同时对其后的大剂量照射有协同作用。 展开更多

关键词 低剂量照射 人小细胞肺癌nci-h446细胞株 凋亡 原位杂交

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志苓胶囊对小细胞肺癌细胞株NCI-H446细胞凋亡及h-TERT、CD44表达的影响 被引量：4

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作者 陈英玉 潘云苓 +3 位作者 郑志宏 潘明继 胡建达 刘庭波 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期1382-1386,共5页

目的研究志苓胶囊(抗癌复方Ⅱ号)对人小细胞肺癌细胞株NCI-H446诱导凋亡作用机制以及对细胞黏附分子表达的影响。方法将志苓胶囊按其不同的中西药成份配制成相应的中药组、西药组和复方组,与NCI-H446共培养后,倒置显微镜观察、Hochest33... 目的研究志苓胶囊(抗癌复方Ⅱ号)对人小细胞肺癌细胞株NCI-H446诱导凋亡作用机制以及对细胞黏附分子表达的影响。方法将志苓胶囊按其不同的中西药成份配制成相应的中药组、西药组和复方组,与NCI-H446共培养后,倒置显微镜观察、Hochest33258荧光染色法检测凋亡细胞,RT-PCR、Western blot、流式细胞仪分别检测bcl-2、bax、hTERT基因mRNA和相应蛋白表达水平变化以及黏附分子CD44的表达变化。结果NCI-H446经不同的药物组处理后,倒置显微镜、Hochest33258荧光染色可观察到细胞凋亡形态学改变,bcl-2基因mRNA和蛋白表达水平均有不同程度下降,bax基因表达水平则有不同程度增强,复方组改变最明显,各药物组与对照组比较差异具有显著性(P<0.01)。中药组和西药组hTERT基因和蛋白表达水平未见明显改变,复方组表达水平下调,与对照组比较差异具有显著性(P<0.01)。各药物组CD44表达水平降低,其中复方组降低水平最明显(P<0.01)。结论志苓胶囊可能通过下调NCI-H446细胞bcl-2、hTERT基因和CD44分子表达,增强bax基因表达,从而诱导NCI-H446细胞凋亡,抑制细胞黏附、转移。 展开更多

关键词 小细胞肺癌细胞株nci-h446 志苓胶囊 凋亡 hTERT CD44

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小白菊内酯对人小细胞肺癌NCI-H446细胞增殖及凋亡作用研究 被引量：3

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作者 刘捷 徐玲 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期414-419,共6页

目的:研究小白菊内酯(parthenolide,PTL)对人小细胞肺癌(small cell lung cancer,SCLC)细胞株NCI-H446增殖及凋亡作用的影响及其可能的分子机制。方法:NCI-H446细胞株由武汉大学细胞库提供,PTL购于Gene Operation公司,将NCIH446细胞株... 目的:研究小白菊内酯(parthenolide,PTL)对人小细胞肺癌(small cell lung cancer,SCLC)细胞株NCI-H446增殖及凋亡作用的影响及其可能的分子机制。方法:NCI-H446细胞株由武汉大学细胞库提供,PTL购于Gene Operation公司,将NCIH446细胞株分为对照组和实验组(1.5μg/m L组、2.0μg/m L组、2.5μg/m L组和3.0μg/m L组),向实验组细胞培养基中加入对应浓度PTL处理细胞,对照组中加入等体积无血清培养基。MTT比色法观测不同浓度PTL对NCI-H446细胞增殖的影响;Hochest 33258染色后,荧光显微镜下观察细胞核形态学变化;流式细胞术(flow cytometry,FCM)分析细胞凋亡率;RT-PCR分别检测不同浓度组PTL处理48 h后细胞中NF-κB、Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9基因的表达状态,Wsetern blot检测NF-κB、Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9蛋白的表达状态。结果:PTL抑制小细胞肺癌NCI-H446细胞增殖并呈浓度依赖性;Hochest33258染色结果显示,PTL作用NCI-H446细胞48 h后,细胞数量减少,细胞核固缩碎裂,形成凋亡小体,导致细胞凋亡;流式细胞术检测显示,PTL处理NCI-H446细胞后,细胞凋亡率与药物浓度梯度呈浓度依赖性,差异有统计学意义(P<0.05);RT-PCR及Wsetern blot结果显示,与对照组比较,经PTL处理的NCI-H446细胞中NF-κB m RNA及蛋白表达下调,同时Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9 m RNA及蛋白表达上调,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:PTL能抑制NCI-H446细胞的增殖并诱导其发生凋亡,PTL的作用机制可能与抑制NF-κB信号通路及活化Caspase系统有关。 展开更多

关键词 小白菊内酯 小细胞肺癌hCI-h446 细胞增殖 细胞凋亡

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人肺癌NCI-H446细胞生成肿瘤干细胞球 被引量：2

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作者 乐涵波 刘晓光 曾芳 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期500-505,共6页

目的探索人肺癌NCI-H446细胞系干细胞球体的培养,并鉴定其生物学特性。方法用无血清培养基培养人肺癌NCI-H446细胞得到肿瘤细胞球。将肿瘤细胞球传代扩增,并用含血清培养基培养促使其分化;四甲基偶氮唑盐(MTT)比色检测肿瘤球和普通NCI-H... 目的探索人肺癌NCI-H446细胞系干细胞球体的培养,并鉴定其生物学特性。方法用无血清培养基培养人肺癌NCI-H446细胞得到肿瘤细胞球。将肿瘤细胞球传代扩增,并用含血清培养基培养促使其分化;四甲基偶氮唑盐(MTT)比色检测肿瘤球和普通NCI-H446细胞的增殖能力,并将肿瘤球和普通NCI-H446细胞分别植入裸鼠皮下,观察肿瘤形成;Transwell侵袭实验检测肿瘤球和普通NCI-H446细胞的侵袭能力的不同;流式细胞术检测CD133、CD44在肿瘤球和普通NCI-H446细胞中的表达,并筛选细胞表面标志物。结果在无血清培养基中,人肺癌NCI-H446细胞可以形成少量的肿瘤细胞球,并显示很强的自我更新和增殖能力,在含血清环境中能够诱导肿瘤球分化而贴壁生长;在动物实验中,接种5×105个细胞时,肿瘤球细胞较普通NCI-H446细胞显示更强的致瘤能力;在侵袭实验中,肿瘤球细胞的侵袭能力高于普通NCI-H446细胞;干细胞标志物CD133及CD44在肿瘤球细胞的表达较普通NCI-H446细胞明显增高。结论人肺癌细胞NCI-H446中存在癌干细胞,且可以通过无血清培养、分离和富集。 展开更多

关键词 肺癌 nci-h446细胞系 无血清培养 癌干细胞 细胞表面标志 流式细胞术 人

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白藜芦醇下调NF-κB介导的MMP-9表达抑制人NCI-H446细胞的侵袭迁移 被引量：2

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作者 刘玉斌 曹爱国 +1 位作者 李之茂 谢静 《实用预防医学》 CAS 2013年第9期1141-1144,共4页

目的观察白藜芦醇对肺癌细胞基质金属蛋白酶9(MMP-9)表达的影响,并探讨其可能的分子机制。方法体外培养人小细胞肺癌NCI-H446细胞,用不同浓度的白藜芦醇刺激。小室侵袭实验检测NCI-H446细胞的迁移与侵袭;Western blot检测MMP-9表达以及... 目的观察白藜芦醇对肺癌细胞基质金属蛋白酶9(MMP-9)表达的影响,并探讨其可能的分子机制。方法体外培养人小细胞肺癌NCI-H446细胞,用不同浓度的白藜芦醇刺激。小室侵袭实验检测NCI-H446细胞的迁移与侵袭;Western blot检测MMP-9表达以及NF-κB p65亚基核转位;荧光素酶报告基因分析MMP-9和NF-κB活性。结果 50 nM白藜芦醇孵育24 h后,其迁移与侵袭率分别降低了37%和33%;Western blot显示,白藜芦醇能抑制p65核转位;此外,白藜芦醇能以剂量依赖性方式抑制MMP-9的转录活性,NF-κB突变后报告基因活性显著降低。结论白藜芦醇可通过抑制NF-κB介导的MMP表达从而抑制NCI-H446细胞侵袭迁移。 展开更多

关键词 白藜芦醇 肺癌细胞 nci-h446 基质金属蛋白酶 NF-ΚB

原文传递

ATM蛋白在不同肺癌细胞株中表达差异与放射敏感性关系的研究 被引量：2

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作者 任涛 谭榜宪 陈晓品 《世界肿瘤杂志》 2008年第4期256-258,共3页

目的 通过对ATM蛋白在不同肺癌细胞株中表达差异与放射敏感性关系的研究，为下一步研究打下基础。方法利用细胞集落形成实验研究肺癌细胞株A549、NCI—H446的放射敏感性差异，并结合免疫荧光实验和激光共聚焦扫描（LSCM）技术来探讨两... 目的 通过对ATM蛋白在不同肺癌细胞株中表达差异与放射敏感性关系的研究，为下一步研究打下基础。方法利用细胞集落形成实验研究肺癌细胞株A549、NCI—H446的放射敏感性差异，并结合免疫荧光实验和激光共聚焦扫描（LSCM）技术来探讨两细胞株中ATM蛋白的表达差异与放射敏感性之间的关系。结果集落形成实验中，在接受2、4、6、8Gy剂量照射时，A549和NCI—H446两肺癌细胞株的存活分数分别为81．0％、32．4％、12．0％、3．5％和52．4％、17．0％、3．2％、0．7％。ATM蛋白定位于细胞浆和胞核；利用LSCM分析两细胞株中ATM蛋白的表达差异，A549细胞ATM蛋白荧光强度（71．188＋13．379）较NCI-H446细胞（47．478±19．032）明显增强（P〈0．0001），有统计学意义。结论两肺癌细胞株A549和NCI-H446具有放射敏感性差异，ATM蛋白在两细胞株中的表达亦有差异显著性，表明其表达量可能与放射敏感性呈负相关。 展开更多

关键词 ATM蛋白 肺癌细胞株(A549 nci—h446) LSCM 放射敏感性

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放射耐受性人小细胞肺癌亚株的建立 被引量：1

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作者 刘静 田海梅 +3 位作者 李艳芬 李茉 王小兵 张伟 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2015年第10期51-54,I0007,共5页

目的建立肺癌NCI-H446细胞放射抗拒性亚株,为小细胞肺癌放射抗拒和逆转研究提供配对的细胞研究工具。方法通过梯度照射NCI-H446细胞株诱导其耐放射性(共7500c Gy),并通过检测细胞总的ATP含量的方法来监测细胞倍增时间,流式细胞仪检测细... 目的建立肺癌NCI-H446细胞放射抗拒性亚株,为小细胞肺癌放射抗拒和逆转研究提供配对的细胞研究工具。方法通过梯度照射NCI-H446细胞株诱导其耐放射性(共7500c Gy),并通过检测细胞总的ATP含量的方法来监测细胞倍增时间,流式细胞仪检测细胞周期分布,以及应用多靶单击模型SF=1-(1-e-D/D0)N拟合细胞存活曲线分析其放射敏感参数的变化。结果比较亲本与耐放射株的差异,放射生物学参数值分别为D0(1.9673,2.2756)、N(1.0016,2.6008)、Dq(0.6783,1.6860)、SF2(0.3623,0.7134),耐放射株SF2值为亲本的1.97倍,G2/M期细胞所占比由18.52%下降到7.84%。耐放射株的细胞形态发生变化,倍增时间比敏感株延长。结论通过梯度照射建立了小细胞肺癌NCI-H446的耐放射亚株NCI-H446-R,与亲本细胞相比放射生物学参数有显著差异(P<0.05),本研究成果为研究小细胞肺癌放射抗拒及耐放射逆转提供了新的细胞模型。 展开更多

关键词 放射抗拒 小细胞肺癌 nci-h446细胞株 细胞周期

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