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山柰酚通过Met/PI3K/Akt/mTOR通路诱导非小细胞肺癌NCI-H1650细胞发生自噬进而影响其增殖 被引量:2
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作者 朱志明 周绮纯 +7 位作者 王娟娟 邓芷茵 唐青 吴万垠 王晰 万信良 莫瀚丹 王苏美 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第11期965-972,共8页
目的:探讨山柰酚诱导人非小细胞肺癌(NSCLC)NCI-H1650细胞发生自噬及其机制。方法:常规培养NCI-H1650细胞,用不同浓度山柰酚处理细胞,用CCK-8法、MTT法以及EdU法检测山柰酚对NCI-H1650细胞增殖能力的影响,用自噬双标记腺病毒mCherry-EGF... 目的:探讨山柰酚诱导人非小细胞肺癌(NSCLC)NCI-H1650细胞发生自噬及其机制。方法:常规培养NCI-H1650细胞,用不同浓度山柰酚处理细胞,用CCK-8法、MTT法以及EdU法检测山柰酚对NCI-H1650细胞增殖能力的影响,用自噬双标记腺病毒mCherry-EGFR-LC3感染实验检测山柰酚对NCI-H1650细胞发生自噬的影响,用WB法检测山柰酚处理后NCI-H1650细胞中自噬相关蛋白及Met/PI3K/Akt/mTOR信号通路相关蛋白的表达,用qPCR法检测山柰酚处理后NCI-H1650细胞中Met mRNA的表达。采用荧光素酶标记A549-luc细胞建立裸鼠移植瘤模型后用山柰酚进行处理,用活体动物成像技术观察移植瘤生长情况,用WB法检测移植瘤组织中自噬相关蛋白以及Met/PI3K/Akt/mTOR信号通路相关蛋白的表达。结果:山柰酚能显著抑制NCI-H1650细胞的增殖能力(P<0.05),山柰酚处理后NCI-H1650细胞内的自噬小体数量明显增加(P<0.05)、自噬标志蛋白LC3B和beclin1表达均明显上调(均P<0.05)、P62表达明显下调(P<0.05),山柰酚可明显抑制NCI-H1650细胞中Met mRNA和蛋白的表达(均P<0.05)、抑制p-PI3K p85、PI3K p85、p-Akt和p-mTOR蛋白表达(均P<0.05)。山柰酚抑制A549细胞裸鼠移植瘤的生长(P<0.05)和影响其体内自噬、Met/PI3K/Akt/mTOR通路相关蛋白的表达(均P<0.05)。结论:山柰酚通过影响Met/PI3K/Akt/mTOR通路诱导NSCLC NCI-H1650细胞发生自噬,进而抑制其增殖能力。 展开更多
关键词 山柰酚 非小细胞肺癌 nci-h1650细胞 A549细胞 细胞自噬 Met/PI3K/Akt/mTOR通路 增殖
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黄连碱经活性氧中介物-线粒体途径诱导肺癌NCI-H1650细胞凋亡 被引量:2
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作者 杨凡 李欣 +4 位作者 章婷婷 李建荣 祝艺华 胡亚辉 刘华 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2017年第24期4033-4037,共5页
目的研究黄连碱对人非小细胞肺癌NCI-H1650细胞增殖的影响和其用于人非小细胞肺癌临床治疗的潜在价值。方法 MTT法分析黄连碱处理对NCI-H1650细胞增殖的影响,Western blot检测细胞凋亡相关基因Bax、Bcl-2和细胞色素C的蛋白表达水平。流... 目的研究黄连碱对人非小细胞肺癌NCI-H1650细胞增殖的影响和其用于人非小细胞肺癌临床治疗的潜在价值。方法 MTT法分析黄连碱处理对NCI-H1650细胞增殖的影响,Western blot检测细胞凋亡相关基因Bax、Bcl-2和细胞色素C的蛋白表达水平。流式细胞术分析Annexin V/PI标记的细胞凋亡。荧光酶标仪分析细胞内活性氧中介物水平。结果黄连碱能够以时间和剂量依赖性的方式显著抑制NCIH1650细胞增殖。黄连碱处理24 h诱导NCI-H1650细胞内活性氧中介物水平增加和细胞凋亡,同时细胞内Bax基因表达上调、Bcl-2基因表达下调,并发生细胞色素C从线粒体向细胞浆的转移。流式细胞术检测发现黄连碱处理导致NCI-H1650细胞凋亡发生。使用活性氧抑制物N-乙酰半胱氨酸则可显著抵抗黄连碱对NCI-H1650细胞的增殖抑制和细胞凋亡。结论黄连碱通过诱导活性氧中介物水平增加激发NCI-H1650细胞发生线粒体途径介导的细胞凋亡。黄连碱具有用于抗人非小细胞肺癌临床治疗的潜在价值。 展开更多
关键词 黄连碱 细胞凋亡 活性氧中介物 非小细胞肺癌 nci-h1650细胞
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