一例N-乙酰谷氨酸合成酶缺乏症家系的基因分析与产前诊断

1

作者 陈佳 袁慧珍 +5 位作者 谢康 郭珍 阳彦 邹永毅 陈格 刘艳秋 《中华医学遗传学杂志》 CAS CSCD 2020年第12期1360-1363,共4页

目的探讨1例N-乙酰谷氨酸合成酶缺乏症家系的遗传学病因,并为该家系再次生育提供遗传咨询和产前诊断。方法应用Trio全外显子组测序寻找N-乙酰谷氨酸合成酶缺乏症家系的致病原因。根据美国医学遗传学与基因组学学会(American College of ... 目的探讨1例N-乙酰谷氨酸合成酶缺乏症家系的遗传学病因,并为该家系再次生育提供遗传咨询和产前诊断。方法应用Trio全外显子组测序寻找N-乙酰谷氨酸合成酶缺乏症家系的致病原因。根据美国医学遗传学与基因组学学会(American College of Medical Genetics and Genomics,ACMGG)推荐的基因变异临床意义分类标准对检出的变异进行分类,评估其致病风险。该家系再次生育时,应用Sanger测序针对检出的变异进行产前诊断。结果Trio全外显子组测序结果显示:患儿NAGS基因存在c.68delG和c.796G>C复合杂合变异,其父母分别携带c.796G>C和c.68delG杂合变异。上述变异均未见文献报道,根据ACMGG变异判读指南,c.68delG为"疑似致病"变异(PVS1+PM2),c.796G>C为"临床意义不明确"变异(PM2+BP4)。Sanger测序验证了Trio全外显子组测序的检测结果,并在羊水细胞中仅检测出c.796G>C杂合变异。该胎儿出生后6个月随访,未发现明显异常。结论NAGS基因c.68delG和c.796G>C复合杂合变异可能为该家系中患儿的致病原因,基因检测结果为家系的遗传咨询和产前诊断提供了依据。 展开更多

关键词 N-乙酰谷氨酸合成酶缺乏症 高氨血症 尿素循环障碍 nags基因 产前诊断

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奶牛乳铁蛋白基因启动子区PCR-RFLP分析与乳房炎的相关性 被引量：12

2

作者 张利军 蔡亚非 +3 位作者 刘庆华 宋维龙 李莲 王根林 《福建农林大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2005年第1期87-91,共5页

采用CMT方法检测奶牛的乳房炎发病情况.筛选 90头分别设为对照组(健康奶牛)、隐性乳房炎组 (试验组Ⅰ )和临床乳房炎组(试验组Ⅱ),每组 30头.检测每头奶牛的NAGase活性,并用限制性片段长度多态性 (RFLP)分析技术,检测乳铁蛋白(Lf)基因... 采用CMT方法检测奶牛的乳房炎发病情况.筛选 90头分别设为对照组(健康奶牛)、隐性乳房炎组 (试验组Ⅰ )和临床乳房炎组(试验组Ⅱ),每组 30头.检测每头奶牛的NAGase活性,并用限制性片段长度多态性 (RFLP)分析技术,检测乳铁蛋白(Lf)基因启动子区域的RFLP多态性.结果表明:不同组别的奶牛之间NAGase活性差异显著 (P<0. 01),且Lf基因启动子区域存在RFLP多态性,说明该多态性与乳房炎存在一定关系,可能是奶牛乳房炎的一个分子标记. 展开更多

关键词 奶牛乳房炎 隐性乳房炎 F基因 PCR-RFLP分析 分子标记 多态性 乳铁蛋白 nag 基因启动子区 相关性

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肿瘤相关基因NAG6、NAG-7、BRD7在胃癌中的表达 被引量：2

3

作者 张晓梅 王晓艳 +3 位作者 沈守荣 向秋 李江 谭琛 《中华消化杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第12期733-736,共4页

目的　NAG6、NAG 7、BRD7为最近克隆的肿瘤相关新基因 ,对它们在胃癌及癌旁组织中的表达进行检测 ,探讨这些基因在胃癌发生发展中的作用。方法　采用RT PCR、Northern杂交、点杂交方法检测 34例胃癌和癌旁组织中这些基因的表达。结果　... 目的　NAG6、NAG 7、BRD7为最近克隆的肿瘤相关新基因 ,对它们在胃癌及癌旁组织中的表达进行检测 ,探讨这些基因在胃癌发生发展中的作用。方法　采用RT PCR、Northern杂交、点杂交方法检测 34例胃癌和癌旁组织中这些基因的表达。结果　胃癌组织中 ,有 61 .8% (2 1 / 34)NAG6基因表达缺失 ,NAG6在胃癌组织中的表达较癌旁组织显著下调 (P <0 .0 1 ) ,但NAG6表达下调与胃癌淋巴结或远处转移无明显关系 (P >0 .0 5)。NAG 7基因在胃癌和癌旁组织中表达率分别为 88.2 % (30 / 34)和 82 .3 % (2 8/ 34)。BRD7基因在胃癌及癌旁组织中均有表达。RT PCR、Northern杂交、点杂交结果均显示NAG 7、BRD7基因在胃癌与癌旁组织之间的表达差异无显著性。同时 ,点杂交也证实NAG6在胃癌组织中表达下调。结论　NAG6基因在胃癌组织中表达显著下调 ,这可能在胃癌的发生发展过程中起重要作用 ,但可能与淋巴结或远处转移无关。BRD7、NAG 7基因在胃癌中未发现表达水平改变 。 展开更多

关键词 肿瘤相关基因 nag6 nag-7 BRD7 胃癌 基因表达

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NAG7基因转染对鼻咽癌细胞生长的影响 被引量：9

4

作者 谭琛 李江 +5 位作者 王洁如 彭聪 谢奕 曹利 李小玲 李桂源 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2002年第3期372-377,共6页

为了探讨鼻咽癌表达下调基因NAG7对鼻咽癌细胞系HNE1生长的影响 ,构建了NAG7基因的真核表达载体pcDNA3 1(+) /NAG7,并采用脂质体转染技术将真核重组体pcDNA3 1(+) /NAG7质粒和真核空载体pcDNA3 1(+)质粒分别导入HNE1细胞 ,经G4 18筛选... 为了探讨鼻咽癌表达下调基因NAG7对鼻咽癌细胞系HNE1生长的影响 ,构建了NAG7基因的真核表达载体pcDNA3 1(+) /NAG7,并采用脂质体转染技术将真核重组体pcDNA3 1(+) /NAG7质粒和真核空载体pcDNA3 1(+)质粒分别导入HNE1细胞 ,经G4 18筛选后获得稳定转染细胞克隆 ,RT PCR和RNA印迹检测NAG7基因的表达 ,并通过细胞生长曲线、裸鼠接种和流式细胞等方法对转染细胞的生物学行为进行检测 .结果显示 :转染NAG7基因后 ,基因表达增加 ,细胞生长倍增时间较空载体转染和HNE1明显延长 ,流式细胞技术检测表明 ,NAG7可延缓细胞由G0～G1期进入S期 ;裸鼠接种实验显示转染NAG7基因后的HNE1细胞致瘤性受到抑制 .上述结果表明 :NAG7基因转染后鼻咽癌细胞生长受到抑制 。 展开更多

关键词 nag7 基因转染 鼻咽癌细胞 细胞转染 基因表达 裸鼠 癌细胞生长

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cDNA微阵列技术分析NAG7基因对鼻咽癌细胞基因表达谱的影响 被引量：6

5

作者 谭琛 李江 +4 位作者 彭聪 张秋红 唐珂 李小玲 李桂源 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2003年第1期99-106,共8页

运用cDNA微阵列技术分析NAG7基因重表达对HNE1细胞基因表达谱的影响 .抽提HNE1细胞和pcDNA3 1(+) /NAG7/HNE1细胞总RNA ,分离 polyAmRNA ,将mRNA逆转录为cDNA ,并在逆转录过程中用33P dATP进行标记 ,与含有 16 15 0个基因和表达序列标签... 运用cDNA微阵列技术分析NAG7基因重表达对HNE1细胞基因表达谱的影响 .抽提HNE1细胞和pcDNA3 1(+) /NAG7/HNE1细胞总RNA ,分离 polyAmRNA ,将mRNA逆转录为cDNA ,并在逆转录过程中用33P dATP进行标记 ,与含有 16 15 0个基因和表达序列标签 (EST)的cDNA表达阵列膜杂交 ,获得基因表达图谱 .ArrayGauge软件分析NAG7基因的重表达所导致的鼻咽癌细胞HNE1基因表达谱改变 ,并用RNA印迹对微阵列杂交结果进行验证 .结果分析表明 ,2倍以上的差异表达基因或EST 179个 ,其中表达上调的 91个 ,表达下调的 88个 ;已明确基因表达产物的上调基因 2 9个 ,下调基因 37个 .在差异表达基因中 ,涉及基因转录调控、信号转导、细胞生长、细胞代谢和细胞凋亡等基因 .RNA印迹证实生长阻滞特异蛋白 1(gas 1)基因表达上调 .特别值得关注的是 ,先前的蛋白质组研究结果亦发现NAG7基因可导致生长阻滞特异蛋白 1表达上调 ,说明gas 1基因在NAG7重表达的HNE1细胞中具有重要作用 ,这为深入研究NAG7基因的作用环节和机理提供了重要的线索 . 展开更多

关键词 CDNA微阵列 nag7基因 gasl基因 鼻咽癌细胞 基因表达谱

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鼻咽癌相关基因NAG7对鼻咽癌细胞周期及凋亡的影响(英文) 被引量：7

6

作者 谭琛 彭聪 +4 位作者 黄宇琛 张秋红 唐珂 李小玲 李桂源 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2002年第5期449-455,共7页

背景与目的:NAG7基因是我室克隆的鼻咽癌相关的肿瘤抑制候选基因,其功能与作用机制目前尚不清楚。研究鼻咽癌相关的潜在抑瘤基因NAG7对鼻咽癌细胞系(HNE1)细胞周期和细胞凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法:采用脂质体转染技术将NAG7基... 背景与目的:NAG7基因是我室克隆的鼻咽癌相关的肿瘤抑制候选基因,其功能与作用机制目前尚不清楚。研究鼻咽癌相关的潜在抑瘤基因NAG7对鼻咽癌细胞系(HNE1)细胞周期和细胞凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法:采用脂质体转染技术将NAG7基因导入HNE1细胞,建立稳定表达NAG7的细胞株,Northernblot分析转染细胞NAG7基因的表达,并采用流式细胞技术检测细胞周期、细胞周期素及细胞凋亡的改变,并用westernblo验证。结果:NAG7基因重表达的HNE1细胞与空载体转染的HNE1和HNE1细胞相比:G0/G1期细胞数增加(P0.05),S期细胞数减少;细胞凋亡数目增加(P<0.05);细胞周期素A、D1、E表达明显降低(P<0.05),细胞周期素B1表达降低,Westernblot检测亦证实cyclin-D1和cyclin-E表达明显下调。结论:NAG7的重表达导致细胞周期素表达下调,从而延缓细胞经G1期进入S周期及诱导细胞凋亡增加进而抑制NPC细胞的过度增殖。 展开更多

关键词 鼻咽肿瘤 细胞周期 细胞周期素 细胞凋亡 nag7基因

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鼻咽癌细胞中表达上调的新基因NAG23(FBXO30)的克隆与分析 被引量：6

7

作者 李忠花 曹利 +7 位作者 向娟娟 张必成 向秋 唐珂 周鸣 李小玲 李伟芳 李桂源 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2001年第9期906-910,共5页

目的:分离位于6号染色体长臂鼻咽癌高频等位基因不平衡位点D6S1581(6q25.3-27)附近与鼻咽癌相关的新基因。方法:运用差异RT-PCR检测定位于D6S1581附近的11个表达序列标签(expressedsequencetags,EST)在正常人鼻咽上皮细胞和鼻咽癌细胞... 目的:分离位于6号染色体长臂鼻咽癌高频等位基因不平衡位点D6S1581(6q25.3-27)附近与鼻咽癌相关的新基因。方法:运用差异RT-PCR检测定位于D6S1581附近的11个表达序列标签(expressedsequencetags,EST)在正常人鼻咽上皮细胞和鼻咽癌细胞系中的表达水平,并对其中一个表达上调的EST在鼻咽癌组织和正常鼻咽组织中的表达情况进行分析。用Northern杂交验证其表达差异并检测其在多脏器中的表达及其所代表基因的转录本大小。利用生物信息学资源克隆并获得其全长cDNA,对该序列进行初步分析。结果:获得了一个位于6q25.3-27的在鼻咽癌中表达上调的新基因,命名为NAG23(FBXO30)(GenBank收录编号:AF248640)。该基因在68.9%的鼻咽癌活检组织中表达上调,cDNA全长3301bp,预测其开放阅读框编码一个含390个氨基酸的胞浆蛋白,该蛋白含一个F-box基序。结论:NAG23基因是一个在鼻咽癌中表达上调的新基因,很可能编码一新的F-box蛋白。NAG23可能参与了鼻咽癌的发生发展。 展开更多

关键词 鼻咽肿瘤 基因克隆 F-BOX蛋白 nag23基因

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NAG11和NAG12基因转染对鼻咽癌细胞生长的影响 被引量：1

8

作者 余鹰 曹利 +5 位作者 朱诗国 张必成 李忠花 向娟娟 李小玲 李桂源 《生命科学研究》 CAS CSCD 2001年第2期177-183,共7页

为了考察鼻咽癌表达下调 /缺失基因 NAG1 1和 NAG1 2对鼻咽癌细胞系 HNE1生长的影响 ,构建了NAG1 1和 NAG1 2基因真核表达载体 pc DNA3.1 ( +) /NAG1 1和 pc DNA3.1 ( +) /NAG1 2 ,采用脂质体转染技术将真核重组质粒和空载体质粒分别导... 为了考察鼻咽癌表达下调 /缺失基因 NAG1 1和 NAG1 2对鼻咽癌细胞系 HNE1生长的影响 ,构建了NAG1 1和 NAG1 2基因真核表达载体 pc DNA3.1 ( +) /NAG1 1和 pc DNA3.1 ( +) /NAG1 2 ,采用脂质体转染技术将真核重组质粒和空载体质粒分别导入 HNE1细胞 ,观察转染后 HNE1细胞生物学特性的变化 .结果显示 ,NAG1 1重表达对 HNE1细胞生长和细胞周期没有明显的影响 ,而 NAG1 2重表达对 HNE1细胞有生长抑制作用 ,与空载体转染组相比 ,倍增时间由 2 4 .1 h延长至 31 .1 h,停滞于 G0 -G1期细胞数由 51 .4 2 %增加至68.1 4 % .以上实验进一步说明鼻咽癌是多基因改变的疾病 ,NAG1 2的重表达有助于鼻咽癌恶性表型的逆转 . 展开更多

关键词 鼻咽肿瘤 nag11基因 nag12基因 基因表达 基因转染 癌细胞

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NAG7基因转染HNE1细胞后下调蛋白质的鉴定及其意义(英文) 被引量：3

9

作者 谭琛 李江 +4 位作者 王洁如 张小梅 曹莉 梁宋平 李桂源 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期687-692,共6页

NAG7基因是我室克隆的与鼻咽癌相关的肿瘤抑制候选基因 .将NAG7编码框的cDNA片段克隆至pGEM3.1(+ )的表达载体 ,经脂质体转染入HNE1细胞 ,经G4 18筛选 ,并运用PCR技术证实 .建立含NAG7基因稳定转染的细胞系 ,抽提细胞总蛋白质 ,双向凝... NAG7基因是我室克隆的与鼻咽癌相关的肿瘤抑制候选基因 .将NAG7编码框的cDNA片段克隆至pGEM3.1(+ )的表达载体 ,经脂质体转染入HNE1细胞 ,经G4 18筛选 ,并运用PCR技术证实 .建立含NAG7基因稳定转染的细胞系 ,抽提细胞总蛋白质 ,双向凝胶电泳分离蛋白质 ,对表达下调的蛋白质点进行质谱分析 ,获得的肽质指纹经SWISS PROT数据库分析以鉴定蛋白质点 .鉴定出的 7个下调蛋白质包括纤溶酶原、收缩蛋白、Ras 相关蛋白Rab 36及ARF 相关蛋白等 .通过对蛋白质性质和功能的分析 ,发现这些蛋白质参与了细胞信号的转导、蛋白质的转运及细胞代谢等众多事件 .因此 。 展开更多

关键词 蛋白质组 nag7基因 二维电泳 质谱 信号传导 表达下调 鼻咽癌 肿瘤抑制候选基因

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染色体7q32-ter最小共同缺失区鼻咽癌抑瘤基因候选者的筛选 被引量：2

10

作者 张小慧 钱骏 +6 位作者 王洁如 董利 曹利 周鸣 唐珂 李伟芳 李桂源 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2000年第11期961-965,共5页

目的：在明确 7q32- ter区域等位基因杂合性丢失最小共同缺失区位于以 D7S509为中心的 D7S500- D7S509- D7S495的基础上，筛选和克隆位于该区内鼻咽癌相关的候选抑瘤基因。方法：应用定位—候选克隆策略筛选位于该最小共同缺失区的 3′... 目的：在明确 7q32- ter区域等位基因杂合性丢失最小共同缺失区位于以 D7S509为中心的 D7S500- D7S509- D7S495的基础上，筛选和克隆位于该区内鼻咽癌相关的候选抑瘤基因。方法：应用定位—候选克隆策略筛选位于该最小共同缺失区的 3′末端 ESTs(expressed sequence tags,ESTs),RT- PCR和 Northern杂交筛选出在鼻咽癌细胞株和活检组织中表达下调的 ESTs,采用 cDNA克隆测序和生物信息学资源获取候选 EST的全长 cDNA。 Southern杂交和甲基化分析研究候选基因表达下调的机制。结果：筛选 D7S500- D7S495区域内的 12个代表新基因的 3′末端 ESTs序列，发现一个 EST（ AI290024）在鼻咽癌细胞株及 50％（ 6/12）的鼻咽癌活检组织中表达下调， Multiple Tissue Northern(MTNTM) Blot杂交结果显示该 EST在心、肝、肾等多种组织中存在大小 2.0 kb的转录本。通过测定包含该 EST的 cDNA克隆，获得该新基因（命名为 NAG- 22基因） 2.3 kb转录本的全长 cDNA(GenBank登录号： AF247820),编码 77AA，含有 disintegrin的结构域。 NAG22在 NPC中表达下调的机制不是高甲基化和基因拷贝数的丢失。结论： NAG22是定位于 7q32- ter最小共同缺失区的一个与鼻咽癌相关的抑瘤基因候选者。 展开更多

关键词 鼻咽肿瘤 7q32-ter 最小共同缺失区 nag22

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鼻咽癌相关基因NAG7编码产物的表达和定位分析

11

作者 谭琛 董利 +4 位作者 李江 曹利 彭聪 李小玲 李桂源 《生命科学研究》 CAS CSCD 2002年第1期74-78,共5页

为了研究NAG7基因编码产物的特性和在活细胞内定位与表达 ,首先利用生物信息学分析NAG7编码蛋白的一般性质并预测其定位 ,再通过构建增强型绿色荧光蛋白 (Enhancegreenfluorescentprotein ,EGFP)与NAG7融合基因的真核表达载体pEGFP C2 ... 为了研究NAG7基因编码产物的特性和在活细胞内定位与表达 ,首先利用生物信息学分析NAG7编码蛋白的一般性质并预测其定位 ,再通过构建增强型绿色荧光蛋白 (Enhancegreenfluorescentprotein ,EGFP)与NAG7融合基因的真核表达载体pEGFP C2 NAG7,通过脂质体介导分别转染非洲绿猴肾细胞系COS7和人鼻咽癌细胞系HNE1 ,瞬时表达后荧光显微镜观察NAG7基因编码蛋白的活细胞内定位及表达 .研究结果表明NAG7的编码产物可在COS7细胞中高表达并定位于细胞浆 ,而在HNE1细胞中虽也定位于胞浆 ,但仅有极少数细胞存在表达 。 展开更多

关键词 鼻咽癌 nag7基因 绿色荧光蛋白 细胞定位 编码产物 表达

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新生儿肾功能损害早期单个核细胞载脂蛋白H基因表达与尿NAG RBP结果比较 被引量：1

12

作者 吴志军 黄上明 +5 位作者 陈睿 胡彬 陈幽 朱远鹏 卢光进 韩玉昆 《中国当代儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第8期649-652,共4页

目的探讨尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)、视黄醇结合蛋白(RBP)及血载脂蛋白H(apoH)基因表达在新生儿肾功能损害早期诊断中的价值。方法对60例可能伴肾功能损害的新生儿在入院48h内分别检测外周血单个核细胞apoH基因表达、肌酐和尿... 目的探讨尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)、视黄醇结合蛋白(RBP)及血载脂蛋白H(apoH)基因表达在新生儿肾功能损害早期诊断中的价值。方法对60例可能伴肾功能损害的新生儿在入院48h内分别检测外周血单个核细胞apoH基因表达、肌酐和尿素氮与尿NAG酶活性、RBP及尿常规两次,两次间隔12～24h。结果60例新生儿中第1次尿NAG异常率83.3%,RBP异常率76.7%,apoH阳性率为73.3%;第2次尿NAG,RBP及apoH异常率分别为66.7%,76.7%,70.0%。以上3个指标第1次及第2次异常率比较,差异均无显著性意义(P>0.05)。但3个指标同血尿素氮和肌酐异常率比较,除第2次尿NAG与血尿素氮异常率比较差异无显著性意义外,其他均显著或极显著高于血尿素氮和肌酐异常发生率。结论新生儿肾功能损害早期尿RBP和血apoH基因表达与NAG酶的诊断价值相同。血apoH基因表达和尿NAG及RBP较血肌酐和尿素氮在肾小管损害早期更敏感。 展开更多

关键词 载脂蛋白H基因表达 视黄醇结合蛋白 nag 肾功能损害 新生儿

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