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Cell-free mitochondrial DNA quantification in ischemic stroke patients for non-invasive and real-time monitoring of disease status 被引量:1
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作者 Nusrath Fathima Sandhya Manorenj +1 位作者 Sandeep Kumar Vishwakarma Aleem Ahmed Khan 《World Journal of Translational Medicine》 2022年第2期14-28,共15页
BACKGROUND Acute ischemic stroke(AIS)is one of the major causes of the continuous increasing rate of global mortality due to the lack of timely diagnosis,prognosis,and management.This study provides a primitive platfo... BACKGROUND Acute ischemic stroke(AIS)is one of the major causes of the continuous increasing rate of global mortality due to the lack of timely diagnosis,prognosis,and management.This study provides a primitive platform for non-invasive and cost-effective diagnosis and prognosis of patients with AIS using circulating cellfree mitochondrial DNA(cf-mtDNA)quantification and validation.AIM To evaluate the role of cf-mtDNA as s non-invasive,and affordable tool for realtime monitoring and prognosticating AIS patients at disease onset and during treatment.METHODS This study enrolled 88 participants including 44 patients with AIS and 44 healthy controls with almost similar mean age group at stroke onset,and at 24 h and 72 h of treatment.Peripheral blood samples were collected from each study participant and plasma was separated using centrifugation.The cf-mtDNA concentration was quantified using nanodrop reading and validated through real-time quantitative polymerase chain reaction(RT-qPCR)of NADH-ubiquinone oxidoreductase chain 1(ND1)relative transcript expression levels.RESULTS Comparative analysis of cf-mtDNA concentration in patients at disease onset showed significantly increased levels compared to control individuals for both nanodrop reading,as well as ND1 relative expression levels(P<0.0001).Intergroup analysis of cf-mtDNA concentration using nanodrop showed significantly reduced levels in patients at 72 h of treatment compared to onset(P<0.01).However,RT-qPCR analysis showed a significant reduction at 24 h and 72 h of treatment compared to the disease onset(P<0.001).The sensitivity and specificity were relatively higher for RT-qPCR than nanodrop-based cfmtDNA quantification.Correlation analysis of both cf-mtDNA concentration as well as ND1 relative expression with National Institute of Health Stroke Scale score at baseline showed a positive trend.CONCLUSION In summary,quantitative estimation of highly pure cf-mtDNA provides a simple,highly sensitive and specific,non-invasive,and affordable approach for real-time 展开更多
关键词 Cell-free mitochondrial DNA nadh-ubiquinone oxidoreductase chain 1 Ischemic stroke Circulating biomarker National Institute of Health Stroke Scale score Stroke assessment Severity and outcome
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Roles of MT-ND1 in Cancer
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作者 Yi-chun XU Jun SU +2 位作者 Jia-jing ZHOU Qing YUAN Jun-song HAN 《Current Medical Science》 SCIE CAS 2023年第5期869-878,共10页
The energy shift toward glycolysis is one of the hallmarks of cancer.Complex I is a vital enzyme complex necessary for oxidative phosphorylation.The mitochondrially encoded NADH:ubiquinone oxidoreductase core subunit ... The energy shift toward glycolysis is one of the hallmarks of cancer.Complex I is a vital enzyme complex necessary for oxidative phosphorylation.The mitochondrially encoded NADH:ubiquinone oxidoreductase core subunit 1(MT-ND1)is the largest subunit coded by mitochondria of complex I.The present study summarizes the structure and biological function of MT-ND1.From databases and literature,the expressions and mutations of MT-ND1 in a variety of cancers have been reviewed.MT-ND1 may be a biomarker for cancer diagnosis and prognosis.It is also a potential target for cancer therapy. 展开更多
关键词 mitochondrially encoded nadh:ubiquinone oxidoreductase core subunit 1 CANCER BIOMARKER MUTATION
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线粒体电子传递呼吸链及其生物学意义的研究进展 被引量:24
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作者 徐婷 李华 +2 位作者 鲁姗姗 张红旗 葛均波 《复旦学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期250-255,261,共7页
线粒体为细胞的生命活动提供基本能量。其内膜上的呼吸链酶传递氢和电子到ATP酶复合体,用于合成能量及维持跨内膜氢离子梯度循环。细胞生存所需能量的95%由线粒体呼吸链提供,主要由位于线粒体内膜上的5个复合体(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ)组... 线粒体为细胞的生命活动提供基本能量。其内膜上的呼吸链酶传递氢和电子到ATP酶复合体,用于合成能量及维持跨内膜氢离子梯度循环。细胞生存所需能量的95%由线粒体呼吸链提供,主要由位于线粒体内膜上的5个复合体(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ)组成的线粒体呼吸链酶完成,即NADPH-泛醌、琥珀酸-泛醌还原酶、泛醌-Cytc还原酶、细胞色素c氧化酶及ATP合成酶。本文对线粒体呼吸链Ⅰ/Ⅱ/Ⅲ/Ⅳ/Ⅴ的分子结构、功能及生物学意义等进行了综述。 展开更多
关键词 烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)-泛醌还原酶 琥珀酸-泛醌还原酶(SQR) 泛醌-细胞色素c还原酶(QCR) 细胞色素c氧化酶(COX) ATP合成酶
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捻转血矛线虫NADH:泛醌氧化还原酶结构域包含蛋白基因的克隆表达及功能分析 被引量:5
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作者 吴玲燕 王玉俭 +4 位作者 温玉玲 严若峰 徐立新 宋小凯 李祥瑞 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期722-730,共9页
选取捻转血矛线虫NADH:泛醌氧化还原酶结构域包含蛋白(NDUDC)基因进行克隆表达,并对其功能进行研究。采用RT-PCR方法对NDUDC基因进行克隆,构建表达载体得到重组蛋白质,Western blot分析蛋白质的抗原特性;采血分离山羊外周血单个核细胞(P... 选取捻转血矛线虫NADH:泛醌氧化还原酶结构域包含蛋白(NDUDC)基因进行克隆表达,并对其功能进行研究。采用RT-PCR方法对NDUDC基因进行克隆,构建表达载体得到重组蛋白质,Western blot分析蛋白质的抗原特性;采血分离山羊外周血单个核细胞(PBMCs)与重组蛋白质共培养,利用间接免疫荧光试验检验重组蛋白质与细胞的结合情况;以不同质量浓度(0、10、20、40μg·mL-1)重组蛋白质刺激细胞,测定其对细胞增殖、细胞迁移和NO分泌的影响。结果表明,重组蛋白质能够有效刺激细胞增殖,显著提高细胞迁移能力以及增加NO的分泌。可见NDUDC蛋白具有较强的抗原性,可刺激细胞发挥免疫功能。 展开更多
关键词 捻转血矛线虫 山羊 nadh:泛醌氧化还原酶结构域包含蛋白 外周血单个核细胞
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ACTN4通过靶向NDUFV1对食管鳞状细胞癌的细胞增殖的影响
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作者 冯成 程晓敏 +5 位作者 谢一清 康利平 孙璋然 范旭 耿慧武 刘晓颖 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2022年第11期1790-1795,共6页
目的探究α-辅肌动蛋白-4(ACTN4)在食管鳞状细胞癌(ESCC)中的表达情况及其对ESCC细胞增殖的影响。方法采用免疫组化实验检测ESCC组织及配对正常组织中ACTN4的表达,统计学方法分析ACTN4与临床病理特征的相关性;构建ACTN4 shRNA慢病毒表... 目的探究α-辅肌动蛋白-4(ACTN4)在食管鳞状细胞癌(ESCC)中的表达情况及其对ESCC细胞增殖的影响。方法采用免疫组化实验检测ESCC组织及配对正常组织中ACTN4的表达,统计学方法分析ACTN4与临床病理特征的相关性;构建ACTN4 shRNA慢病毒表达载体,利用慢病毒包装技术建立ACTN4稳定低表达的ESCC细胞株,Western blot检测敲低效果,克隆形成实验检测ACTN4敲低对细胞增殖的影响;基于前期黑色素瘤A375细胞中ACTN4敲低的蛋白质组学分析结果,选取候选下游靶蛋白并在ESCC细胞中进行验证。结果免疫组化实验结果显示,ESCC组织中的ACTN4表达量高于正常组织(P<0.0001);成功构建ACTN4 shRNA慢病毒质粒并获得稳定低表达ACTN4的ECA109细胞株;克隆形成实验结果表明,ACTN4敲低抑制ECA109细胞的增殖;ESCC细胞中ACTN4的敲低下调NADH∶泛素氧化还原酶核心亚基V1(NDUFV1)蛋白的表达。结论ESCC细胞中,高表达的ACTN4能够促进细胞增殖,并上调NDUFV1的蛋白表达。 展开更多
关键词 食管鳞状细胞癌 α-辅肌动蛋白-4 细胞增殖 nadh∶泛素氧化还原酶核心亚基V1
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NADH:泛醌氧化还原酶复合体组装因子2在肝癌组织中的异常表达和功能探讨
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作者 朱影 谷兴璐 +1 位作者 赵晓航 孙玉琳 《肝癌电子杂志》 2022年第1期29-35,共7页
目的:基于肿瘤基因组图谱(the cancer genome atlas,TCGA)数据库的多组学数据,分析线粒体呼吸链复合体I组装因子NADH∶泛醌氧化还原酶复合体组装因子2(NADH∶ubiquinone oxidoreductase complex assembly factor 2,NDUFAF2)基因在肝癌... 目的:基于肿瘤基因组图谱(the cancer genome atlas,TCGA)数据库的多组学数据,分析线粒体呼吸链复合体I组装因子NADH∶泛醌氧化还原酶复合体组装因子2(NADH∶ubiquinone oxidoreductase complex assembly factor 2,NDUFAF2)基因在肝癌组织中的表达、临床及预后意义,并探讨其参与肝癌发生发展的可能机制。方法:利用TCGA肝癌样本的RNA测序、全外显子组测序、单核苷酸多态芯片和DNA甲基化测序数据,分析NDUFAF2在肝癌中的表达特征及其异常高表达的可能机制。基于TCGA肝癌RNA测序数据获得与NDUFAF2高度相关性的共表达基因,进行Reactome、MSigDB通路和人类表型富集分析,并利用Cytoscape软件绘制功能网络。结果:对TCGA肝癌RNA测序数据的表达和生存分析显示,线粒体呼吸链复合体的全部亚基中,仅NDUFAF2在肝癌组织中显著高表达,且与不良的总生存率和无复发生存率均相关。肝癌组织中NDUFAF2的高表达与性别、人种、肿瘤分化程度和微血管侵犯显著相关(P均<0.05)。基因扩增和肝癌驱动基因TP53和CTNNB1的突变,以及MYC扩增是造成NDUFAF2高表达的可能原因。对肝癌组织中与NDUFAF2共表达的411个基因的富集分析显示,NDUFAF2可能通过调控细胞能量产生、氧化应激、RNA加工、蛋白翻译和c-Myc、mTORC1相关信号传导通路,促进肝癌的发生发展。结论:NDUFAF2在肝癌组织中的高表达可能通过调控RNA加工和蛋白翻译等生物学通路参与细胞癌变,可作为潜在的肝癌预后预测标志物和新的治疗干预靶点。 展开更多
关键词 nadh:泛醌氧化还原酶复合体组装因子2 肝癌 公共数据挖掘 预后 表达调控 肿瘤发生发展
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毛鱼藤酮与鱼藤酮杀虫活性的比较 被引量:30
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作者 曾鑫年 张善学 +1 位作者 方剑锋 韩建勇 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期611-616,共6页
毛鱼藤酮是从杀虫植物毛鱼藤根中分离的杀虫活性物质。以菜粉蝶、甘蓝蚜、柑桔全爪螨、小菜蛾和黄曲条跳甲为试虫比较测定了毛鱼藤酮与鱼藤酮的毒杀、拒食、生长发育干扰和忌避产卵活性。结果表明 :毛鱼藤酮的杀虫活性依昆虫种类而异 ,... 毛鱼藤酮是从杀虫植物毛鱼藤根中分离的杀虫活性物质。以菜粉蝶、甘蓝蚜、柑桔全爪螨、小菜蛾和黄曲条跳甲为试虫比较测定了毛鱼藤酮与鱼藤酮的毒杀、拒食、生长发育干扰和忌避产卵活性。结果表明 :毛鱼藤酮的杀虫活性依昆虫种类而异 ,对柑桔全爪螨、小菜蛾、黄曲条跳甲的活性与鱼藤酮相当 ,其LC50 没有显著差异 ,而对甘蓝蚜和菜粉蝶的活性显著低于鱼藤酮。毛鱼藤酮和鱼藤酮对昆虫均具拒食活性 ,但前者比后者弱。毛鱼藤酮还与鱼藤酮一样对昆虫有一定的生长发育干扰和忌避产卵作用。NADH 泛醌氧化还原酶抑制活性测定结果显示 ,毛鱼藤酮的抑制活性低于鱼藤酮 ,二者抑制中浓度 (IC50 )分别为 5 2 7nmol·mL- 1 和 2 5 8nmol·mL- 1 。根据拒食、受药途径和酶抑制的试验结果分析认为 ,毛鱼藤酮在浸叶处理时对某些昆虫有较高杀虫活性是由于其比鱼藤酮有较低的拒食活性 。 展开更多
关键词 毛鱼藤酮 鱼藤酮 杀虫活性 比较 植物杀虫剂 生物活性 nadh-泛醌氧化还原酶 抑制剂
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丁苯酞诱导缺氧条件下NDUFA4L2蛋白的高表达并参与脑保护的机制 被引量:3
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作者 肖本杰 高丽 耿冠男 《实用老年医学》 CAS 2019年第10期954-957,共4页
目的探索NDUFA4L2蛋白在缺氧环境下大鼠肾上腺髓质嗜铬细胞瘤细胞(pheochromocytoma cell,PC12)中的表达及其与丁苯酞介导的脑保护作用机制的关系。方法以PC12细胞为载体,制作PC12细胞缺氧模型,观察不同缺氧时间段(0、6、12、18、24、48... 目的探索NDUFA4L2蛋白在缺氧环境下大鼠肾上腺髓质嗜铬细胞瘤细胞(pheochromocytoma cell,PC12)中的表达及其与丁苯酞介导的脑保护作用机制的关系。方法以PC12细胞为载体,制作PC12细胞缺氧模型,观察不同缺氧时间段(0、6、12、18、24、48 h)PC12细胞形态变化,采用蛋白免疫印迹法(Western blot)半定量分析不同缺氧时间段及不同浓度丁苯酞预处理后PC12细胞中NDUFA4L2蛋白的表达情况。结果PC12细胞缺氧损伤、外形变化严重程度与缺氧时间有关;NDUFA4L2蛋白在PC12细胞缺氧24 h内Western blot定量检测呈高表达趋势,高表达程度与缺氧时间无相关性;丁苯酞预处理后,NDUFA4L2蛋白表达水平均较未预处理组显著增高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论NDUFA4L2蛋白在缺氧24 h内可能对PC12细胞损伤有保护作用;丁苯酞可能通过诱导NDUFA4L2蛋白表达起到脑保护作用。 展开更多
关键词 NDUFA4L2 嗜铬细胞瘤细胞 丁苯酞 脑保护 机制
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NADH脱氢酶(泛醌)黄素蛋白2基因突变相关白质脑病一家系报道
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作者 任守芸 张仲斌 +2 位作者 张捷 刘明 吴晔 《中华实用儿科临床杂志》 CSCD 北大核心 2017年第12期920-923,共4页
目的分析NADH脱氢酶(泛醌)黄素蛋白2(NDUFV2)基因突变所致白质脑病一家系兄弟2例患儿的临床及影像学特点,以提高临床医师对本病的认识及对此病的早期识别。方法收集并分析先证者及其家系成员的临床资料,分析其临床症状和头颅磁共... 目的分析NADH脱氢酶(泛醌)黄素蛋白2(NDUFV2)基因突变所致白质脑病一家系兄弟2例患儿的临床及影像学特点,以提高临床医师对本病的认识及对此病的早期识别。方法收集并分析先证者及其家系成员的临床资料,分析其临床症状和头颅磁共振成像(MRI)特点,并对2例患儿进行长期随访。先后采用Saner测序、靶向捕获二代测序、全外显子组基因测序技术对该家系2例患儿及其父母进行遗传学分析。结果1.临床特点及随访:2例患儿分别于出生后4个月和1岁起病,表现为运动功能快速倒退、肌张力增高、病理征阳性,随访过程中病情相对稳定静止或逐渐好转,鸡尾酒疗法后病情有好转。2.头颅MRI特点:以深部白质受累为主,均为脑室周围长T1、长T2、液体衰减反转恢复序列(FLAIR)高信号,病灶呈团块状对称分布,病灶内信号不均匀,均伴囊性改变,弥散加权像(DWI)病灶呈团块状高信号。随访发现急性期后病灶多逐渐好转,但仍保留囊性改变,DWI呈线状或点状高信号,范围较前缩小。3.基因突变分析:先证者及其弟弟NDUFV2基因均存在复合杂合突变:c.467T〉A和c.404G〉C,其中前者遗传自父亲,后者遗传自母亲,均为国际上未报道的新突变。结论本研究报道的2例患儿与国际上已报道的12例患儿肥厚性心肌病合并脑病及Leigh综合征2种表型截然不同,以亚急性起病之后相对静止的白质脑病为临床表型,扩大了NDUF~基因的临床表型谱。明确了该白质脑病家系中的致病基因为NDUFV2基因突变,为该家庭进行准确的遗传咨询提供了可能。 展开更多
关键词 白质脑病 线粒体呼吸链酶复合物I nadh脱氢酶(泛醌)黄素蛋白2基因
原文传递
NDUFA4L2在胶质瘤组织中的表达及意义
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作者 李春芽 陈远兵 +2 位作者 梁银华 唐淼 曹武阳 《中国临床新医学》 2021年第11期1127-1130,共4页
目的探讨乳酸脱氢酶A的α复合体4-L2(NDUFA4L2)在胶质瘤中的表达情况及临床意义。方法利用癌症基因组图谱(TCGA)、中国胶质瘤基因组图谱(CGGA)数据库分析NDUFA4L2在胶质瘤中的mRNA表达情况,分析其与患者临床病理分级和预后的关系。进一... 目的探讨乳酸脱氢酶A的α复合体4-L2(NDUFA4L2)在胶质瘤中的表达情况及临床意义。方法利用癌症基因组图谱(TCGA)、中国胶质瘤基因组图谱(CGGA)数据库分析NDUFA4L2在胶质瘤中的mRNA表达情况,分析其与患者临床病理分级和预后的关系。进一步收集不同级别的胶质瘤组织标本行免疫组化检测,验证NDUFA4L2在不同级别胶质瘤中蛋白表达的差异。收集62例胶质瘤患者的组织标本和随访资料,采用RT-PCR法检测NDUFA4L2在胶质瘤中的表达并分析其与预后的关系。结果通过分析TCGA、CGGA数据库,发现胶质瘤组织中NDUFA4L2的表达随着肿瘤分级的增高而增高(P<0.05),高表达NDUFA4L2预示着患者生存期较短。在临床标本验证中的结果与上述生物信息学分析相一致。结论NDUFA4L2在胶质瘤组织中的表达与病理分期和预后有关,可能是胶质瘤的一个潜在肿瘤标志物。 展开更多
关键词 胶质瘤 乳酸脱氢酶A的α复合体4-L2 预后
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