目的建立单管双向荧光PCR方法快速测定人NAD（P）H：醌氧化还原酶1[NAD（P）H：quinone oxidoreductase 1，NQ01]基因609C／T多态性。方法以人NQ01基因中的609C／T位点，设计双向引物，优化反应条件，应用SYBR Green Ⅰ双向荧光PCR扩增...目的建立单管双向荧光PCR方法快速测定人NAD（P）H：醌氧化还原酶1[NAD（P）H：quinone oxidoreductase 1，NQ01]基因609C／T多态性。方法以人NQ01基因中的609C／T位点，设计双向引物，优化反应条件，应用SYBR Green Ⅰ双向荧光PCR扩增191份人基因组DNA标本，并通过对产物进行熔解曲线分析，根据产物Tm值进行等位基因单核苷酸多态性分型。对其中62份标本用经典的PCR-限制性片段长度多态方法进行基因型分型，验证结果准确性。结果62份样本的单管双向荧光PCR方法的基因型结果与PCR-限制性片段长度多态法分型结果符合率100％。191份样本中，纯合野生型（CC）占28％，杂合型（CT）占50％，纯合突变型（TT）占22％。结论单管双向荧光PCR方法检测NQ01基因609C／T多态性，操作简便、反应过程快速，结果直观，敏感性、准确性和稳定性好，适用于临床样本检测及流行病学调查研究。展开更多
文摘目的建立单管双向荧光PCR方法快速测定人NAD（P）H：醌氧化还原酶1[NAD（P）H：quinone oxidoreductase 1，NQ01]基因609C／T多态性。方法以人NQ01基因中的609C／T位点，设计双向引物，优化反应条件，应用SYBR Green Ⅰ双向荧光PCR扩增191份人基因组DNA标本，并通过对产物进行熔解曲线分析，根据产物Tm值进行等位基因单核苷酸多态性分型。对其中62份标本用经典的PCR-限制性片段长度多态方法进行基因型分型，验证结果准确性。结果62份样本的单管双向荧光PCR方法的基因型结果与PCR-限制性片段长度多态法分型结果符合率100％。191份样本中，纯合野生型（CC）占28％，杂合型（CT）占50％，纯合突变型（TT）占22％。结论单管双向荧光PCR方法检测NQ01基因609C／T多态性，操作简便、反应过程快速，结果直观，敏感性、准确性和稳定性好，适用于临床样本检测及流行病学调查研究。
