蝉花虫草活性成分的抗惊厥作用 被引量：27

1

作者 朱碧纯 柴一秋 +3 位作者 章思思 彭秀秀 金轶伟 陈官菊 《菌物学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期619-627,共9页

本研究采用活性追踪的方法,逐步从人工培养蝉花虫草分离获得A(50%乙醇回流提取)、B(膜分离)、C(大孔树脂洗脱)和D(Sephadex LH20柱纯化)等4种样品,单一化合物D纯度为98.62%,鉴定为N6‐(2‐羟乙基)腺苷[N6‐(2‐hydroxyethyl)‐adenosine... 本研究采用活性追踪的方法,逐步从人工培养蝉花虫草分离获得A(50%乙醇回流提取)、B(膜分离)、C(大孔树脂洗脱)和D(Sephadex LH20柱纯化)等4种样品,单一化合物D纯度为98.62%,鉴定为N6‐(2‐羟乙基)腺苷[N6‐(2‐hydroxyethyl)‐adenosine,HEA]。研究各样品对戊四唑(pentylenetetrazol,PTZ)诱导的小鼠惊厥模型的影响,以及选择性腺苷A1受体(AA1R)拮抗剂DPCPX或选择性腺苷A2A受体(AA2AR)拮抗剂ZM241385对HEA作用的影响,并采用苏木精‐伊红(hematoxylin‐eosin,HE)染色、免疫组化(immunohistochemical,IHC)染色和蛋白质免疫印迹(Western blot,WB)等技术进一步探究HEA抗惊厥作用的机制。结果表明,各样品(i.p.)均有抗惊厥活性,HEA(40–60mg/kg,i.p.)能显著延长惊厥小鼠的存活时间和降低死亡率,DPCPX(2mg/kg,i.p.)能够拮抗HEA的抗惊厥作用,而ZM241385无此作用;HE、IHC和WB的结果进一步揭示DPCPX显著降低HEA的作用。综上所述,蝉花虫草的HEA具有抗惊厥作用,并且可能通过激活腺苷A1受体而起作用。 展开更多

关键词 金蝉花 n6‐(2‐羟乙基)腺苷 腺苷受体 抗惊厥 机理

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五种虫草无性型菌株产腺苷类物质的分析 被引量：13

2

作者 刘波 康冀川 +4 位作者 雷帮星 何劲 文庭池 孟泽彬 潘丽丽 《菌物学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期405-412,共8页

采用分光光度计法对虫草菌丝体中腺苷类组分的提取方法进行研究,采用薄层层析法和高效液相色谱法对虫草菌丝体中的腺嘌呤、腺苷、虫草菌素、N6-(2-羟乙基)腺苷等4种物质进行定性和定量分析。结果表明,虫草菌丝体中腺苷类组分的提取方法... 采用分光光度计法对虫草菌丝体中腺苷类组分的提取方法进行研究,采用薄层层析法和高效液相色谱法对虫草菌丝体中的腺嘌呤、腺苷、虫草菌素、N6-(2-羟乙基)腺苷等4种物质进行定性和定量分析。结果表明,虫草菌丝体中腺苷类组分的提取方法采用蒸馏水超声波提取30min效果较好,所测5种虫草菌株都能产腺苷和腺嘌呤,在蛹草拟青霉菌株中含有虫草菌素,在粉被玛利亚霉和蝉拟青霉菌株中含有N6-(2-羟乙基)腺苷,同时发现N6-(2-羟乙基)腺苷的累积与培养时间有一定关系。 展开更多

关键词 虫草 腺苷 虫草菌素 n6-(2-羟乙基)腺苷 检测

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蝉花虫草镇痛化合物对痛风大鼠转录组及Adora1等疼痛相关基因的影响 被引量：11

3

作者 朱伟坚 柴一秋 +2 位作者 金轶伟 厉晓腊 俞晓平 《菌物学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期48-59,共12页

本研究采用活性追踪的方法从蝉花虫草Ophiocordyceps sobolifera中分离提取了镇痛活性物质N^6-(2-羟乙基)腺苷[N^6-(2-hydroxyethyl)-adenosine,HEA],并通过转录组测序技术探索了HEA对痛风模型大鼠疼痛相关基因的影响。结果表明932个基... 本研究采用活性追踪的方法从蝉花虫草Ophiocordyceps sobolifera中分离提取了镇痛活性物质N^6-(2-羟乙基)腺苷[N^6-(2-hydroxyethyl)-adenosine,HEA],并通过转录组测序技术探索了HEA对痛风模型大鼠疼痛相关基因的影响。结果表明932个基因存在差异表达,将差异基因与在线疼痛基因大数据及相关文献进行比对,发现了57个疼痛相关基因,其中12个基因与镇痛相关,包括上调表达的腺苷A1受体基因(Adora1)及A2A受体基因(Adora2a)。应用Western blot的方法验证了HEA(7.5mg/kg)诱导镇痛靶标受体腺苷A1受体(A1R)表达上调、腺苷A2A受体(A2AR)表达下调。选择性A1R拮抗剂DPCPX显著抑制HEA对A1R的上调表达作用。综上所述,蝉花虫草的镇痛活性物质为HEA,而HEA可能通过激活腺苷A1R、下调A2AR及调控一系列疼痛相关基因发挥其镇痛作用。 展开更多

关键词 n6-(2-羟乙基)腺苷 尿酸钠 腺苷A1受体 腺苷A2A受体 腺苷A1受体拮抗剂DPCPX

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蛹虫草中N_6-(2-羟乙基)腺苷的提取分离及对小鼠睡眠的影响 被引量：11

4

作者 陈玉皎 孙嘉辰 +3 位作者 张晓倩 杜思邈 赵平 张耀洲 《中国新药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第7期813-817,共5页

目的:探讨蛹虫草中N6-(2-羟乙基)腺苷对小鼠睡眠的影响。方法:蛹虫草子实体通过溶剂提取和色谱分离得到N6-(2-羟乙基)腺苷。N6-(2-羟乙基)腺苷通过小鼠自发活动实验、延长戊巴比妥钠睡眠时间实验、戊巴比妥钠阈下剂量催眠实验观察其对... 目的:探讨蛹虫草中N6-(2-羟乙基)腺苷对小鼠睡眠的影响。方法:蛹虫草子实体通过溶剂提取和色谱分离得到N6-(2-羟乙基)腺苷。N6-(2-羟乙基)腺苷通过小鼠自发活动实验、延长戊巴比妥钠睡眠时间实验、戊巴比妥钠阈下剂量催眠实验观察其对小鼠睡眠的影响。结果:N6-(2-羟乙基)腺苷可减少正常小鼠机体的自主活动性;与正常对照组比,N6-(2-羟乙基)腺苷高剂量组能显著性延长戊巴比妥钠诱导的小鼠睡眠时间(P<0.01);中、高剂量组能显著增加戊巴比妥钠睡眠持续时间(P<0.05,P<0.01)和缩短小鼠戊巴比妥钠睡眠潜伏期(P<0.05)。结论:蛹虫草中N6-(2-羟乙基)腺苷具有明显的镇静、催眠作用,可有效地改善睡眠质量。 展开更多

关键词 蛹虫草 n6-(2-羟乙基)腺苷 睡眠

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广义虫草类真菌来源的N^6‐(2‐羟乙基)腺苷的研究开发现状与思考 被引量：10

5

作者 刘宽博 王芬 +1 位作者 柴一秋 董彩虹 《菌物学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期6-13,共8页

N^6-(2-羟乙基)腺苷(简称HEA)是虫草菌丝体中得到的第一个生物来源的钙离子拮抗剂,具有抑制癌细胞生长、降低炎症反应、保护肾脏、镇静、镇痛和抗惊厥等多种功效,已经成为一个研究热点。本文对HEA的菌株来源、生理功能、生物合成、提取... N^6-(2-羟乙基)腺苷(简称HEA)是虫草菌丝体中得到的第一个生物来源的钙离子拮抗剂,具有抑制癌细胞生长、降低炎症反应、保护肾脏、镇静、镇痛和抗惊厥等多种功效,已经成为一个研究热点。本文对HEA的菌株来源、生理功能、生物合成、提取纯化、化学合成的研究现状等方面进行了总结,对有关专利进行了评价和分析,提出从种质资源入手拓宽HEA来源,优化HEA的提取纯化方法,并深入探究其生物合成途径,为HEA的深入研究和开发应用提供指导。 展开更多

关键词 n6-(2-羟乙基)腺苷 菌株来源 合成 纯化

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粉被虫草静置发酵产N^6-(2-羟乙基)腺苷培养基组分及前体物的筛选 被引量：7

6

作者 雷帮星 曾祥羽 +3 位作者 李世楠 康冀川 何劲 文庭池 《菌物学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期103-113,共11页

在静置培养条件下,对粉被虫草cp菌株产N6‐(2‐羟乙基)腺苷(简称HEA)的培养基及其组分进行优化。采用单因素实验方法,以HPLC法对cp菌丝体中HEA进行检测,以HEA的产量为指标,结果表明查氏培养基有利于cp菌株产HEA,其产量是沙氏和PD培养基... 在静置培养条件下,对粉被虫草cp菌株产N6‐(2‐羟乙基)腺苷(简称HEA)的培养基及其组分进行优化。采用单因素实验方法,以HPLC法对cp菌丝体中HEA进行检测,以HEA的产量为指标,结果表明查氏培养基有利于cp菌株产HEA,其产量是沙氏和PD培养基的3.7倍和4.48倍。以查氏培养基为基础培养基,进行碳、氮源的筛选中,最有利于cp菌株产HEA的是蔗糖和硝酸钠;在无机盐的筛选中,K2HPO4是促进cp菌株累积HEA最主要的无机盐,其HEA产量较CK增长了5 822.37%(提高了58.2倍);在查氏培养基上添加不同前体物和氨基酸,发现其结构类似物腺苷、次黄嘌呤和腺嘌呤都有促进cp菌株累积HEA的能力,其中腺苷和次黄嘌呤能提高其产量60%以上;而组氨酸是最有利于cp菌株累积HEA的氨基酸,产量达到(45.56±2.8)mg/L,较CK提高HEA产量251.68%,其次是L‐谷氨酸增产184.19%。 展开更多

关键词 粉被虫草 粉被玛利亚霉 n6-(2-羟乙基)腺苷 cp菌株 前体物 氨基酸 静置发酵

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不同培养基对蝉花培养物核苷类成分的影响 被引量：5

7

作者 张忠亮 陈桃宝 +3 位作者 尹彬 崔俏俏 张霜霜 王玉芹 《药物评价研究》 CAS 2016年第5期804-812,共9页

目的建立高效液相色谱(HPLC)法同时检测蝉花培养物4种核苷类成分,分析不同斜面培养基及固体培养基对4种核苷类成分的影响。方法建立4种核酸类成分——尿苷、鸟苷、腺苷、N6-(2-羟乙基)腺苷的HPLC检测方法,应用Waters Symmetry shield TM... 目的建立高效液相色谱(HPLC)法同时检测蝉花培养物4种核苷类成分,分析不同斜面培养基及固体培养基对4种核苷类成分的影响。方法建立4种核酸类成分——尿苷、鸟苷、腺苷、N6-(2-羟乙基)腺苷的HPLC检测方法,应用Waters Symmetry shield TMRP C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱;流动相为水-甲醇,梯度洗脱;体积流量1.0 m L/min;柱温30℃;进样量10μL;检测波长260 nm;外标法测定4种核苷类成分水平。对包括假单胞菌选择培养基(PSA)、沙氏葡萄糖琼脂培养基(SDAY,1 000 m L中含葡萄糖量分别为20、30、40 g)在内的斜面培养基和包括江苏农垦(SCM)、烟农24(YN-24)、烟农15(YN-15)、济麦22(JM-22)在内的固体培养基培养的蝉花培养物中4种核酸类成分水平进行测定,利用SPSS16.0统计软件对测定结果进行多重统计分析,验证并找出引起差异的原因。结果建立的HPLC法,4种核苷类成分分离度良好,精密度、稳定性、重复性、加样回收率、耐用性均符合要求;4种不同的斜面培养基对尿苷成分基本无影响(P>0.05),PSA对腺苷、鸟苷、N6-(2-羟乙基)腺苷的水平有明显促进作用(P<0.05);固体培养基SCM的4种核苷类成分的水平较高。结论培养基种类对蝉花培养物核苷类成分变化有直接的影响,确定蝉花虫草的生产工艺时,应充分考虑培养基的选择,同时结合产品成分和生产成本等因素进行综合评价。 展开更多

关键词 蝉花培养物 尿苷 鸟苷 腺苷 n6-(2-羟乙基)腺苷 高效液相色谱 培养基

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蛹虫草N6-(2-羟乙基)腺苷与多糖组合给药对小鼠睡眠的影响 被引量：4

8

作者 聂开美 杜思邈 +4 位作者 陈梅 李成溪 吴玉乾 陈玉皎 曹军 《食药用菌》 2021年第3期216-221,共6页

为开发出预防和治疗失眠的食用菌保健食品或药品,以蛹虫草为原料获得虫草多糖和N6-(2-羟乙基)腺苷,采用45%的虫草多糖配比55%的N6-(2-羟乙基)腺苷组合给药小白鼠,通过小鼠自发活动实验、延长戊巴比妥钠睡眠时间实验等,观察组合给药对小... 为开发出预防和治疗失眠的食用菌保健食品或药品,以蛹虫草为原料获得虫草多糖和N6-(2-羟乙基)腺苷,采用45%的虫草多糖配比55%的N6-(2-羟乙基)腺苷组合给药小白鼠,通过小鼠自发活动实验、延长戊巴比妥钠睡眠时间实验等,观察组合给药对小鼠镇静催眠的的影响,并进一步开展小鼠急性毒性实验初步考察配比给药的安全剂量。结果:N6-(2-羟乙基)腺苷与虫草多糖在实验配比条件下给药,可改善小鼠睡眠质量,与单独N6-(2-羟乙基)腺苷给药相比,提高了小鼠入睡率。 展开更多

关键词 蛹虫草 n6-(2-羟乙基)腺苷 虫草多糖 药理作用 睡眠

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细脚棒束孢E3菌株产N6-(2-羟乙基)腺苷的液体发酵条件优化 被引量：4

9

作者 雷帮星 何劲 +3 位作者 康冀川 余信 桂江伟 文庭池 《食用菌学报》 北大核心 2014年第2期63-66,共4页

以N6-(2-羟乙基)腺苷[N6-(2-hydroxyethyl)-adenosine,HEA]的产量为评价指标,查氏培养基为基础培养基,分别筛选液体静置发酵的光照、温度、时间、培养基初始pH、装液量和接种量,结果表明:有利于细脚棒束孢(Isaria tenuipes)E3菌株产HEA... 以N6-(2-羟乙基)腺苷[N6-(2-hydroxyethyl)-adenosine,HEA]的产量为评价指标,查氏培养基为基础培养基,分别筛选液体静置发酵的光照、温度、时间、培养基初始pH、装液量和接种量,结果表明:有利于细脚棒束孢(Isaria tenuipes)E3菌株产HEA的发酵条件为黑暗或荧光、黄光,培养温度为25~28℃,培养时间为110d,培养基的初始pH为6.0~7.0,装液量为50%,接种量为2.5%。 展开更多

关键词 细脚棒束孢 n6-(2-羟乙基)腺苷 发酵

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不同大孔树脂对粉被虫草中N^6-(2-羟乙基)腺苷的分离特性研究 被引量：1

10

作者 唐远江 雷帮星 +1 位作者 康冀川 刘玉秋 《山地农业生物学报》 2015年第6期53-57,78,共6页

为选择合适的大孔树脂分离粉被虫草中的N6-(2-羟乙基)腺苷(HEA),通过静态吸附与解吸附试验对4种大孔树脂吸附和解吸附HEA的效果进行比较,并对洗脱条件进行优化。结果表明DM-130树脂对HEA的吸附量最大、解吸率较高;该树脂的最佳动态吸附... 为选择合适的大孔树脂分离粉被虫草中的N6-(2-羟乙基)腺苷(HEA),通过静态吸附与解吸附试验对4种大孔树脂吸附和解吸附HEA的效果进行比较,并对洗脱条件进行优化。结果表明DM-130树脂对HEA的吸附量最大、解吸率较高;该树脂的最佳动态吸附条件是上样量为2倍树脂床体积(BV),吸附时间为6 h;最佳动态洗脱条件是依次用3 BV蒸馏水,1 BV 5%乙醇和3.5 BV 10%乙醇冲洗柱床。在该条件下,经HPLC分析测定,洗脱液中HEA的峰面积百分比达到89.15%。 展开更多

关键词 大孔树脂 n6-(2-羟乙基)腺苷 吸附 解吸附

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小菜蛾腺苷受体基因PxAdoR克隆及杀虫靶标作用

11

作者 方鸣 柴一秋 +3 位作者 陈官菊 章金明 吕要斌 黄勃 《中国生物防治学报》 CSCD 北大核心 2016年第6期712-720,共9页

利用蝉花虫草Ophiocordyceps sobolifera代谢产物N6-（2-羟乙基）腺苷（HEA）作用于小菜蛾Plutella xylostella L.获得差异表达的片段,采用RT-PCR和RACE技术从小菜蛾中克隆全长1828 bp的小菜蛾腺苷受体（Plutella xylostella adenosine ... 利用蝉花虫草Ophiocordyceps sobolifera代谢产物N6-（2-羟乙基）腺苷（HEA）作用于小菜蛾Plutella xylostella L.获得差异表达的片段,采用RT-PCR和RACE技术从小菜蛾中克隆全长1828 bp的小菜蛾腺苷受体（Plutella xylostella adenosine receptor,Px Ado R）基因,通过生物信息学软件预测和分析蛋白质结构,Px Ado R为分子量49.2 k D,没有信号肽,疏水性不稳定蛋白,具有7次跨膜螺旋结构的一类G蛋白偶联受体（G protein coupled receptor,GPCRs）。利用HEA及哺乳动物腺苷受体A2a R抑制剂SCH58261处理小菜蛾2龄幼虫,结果显示联合使用HEA和SCH58261后36~60 h,可使HEA引起的小菜蛾2龄幼虫的校正死亡率显著降低（42.7%~53.9%,P〈0.05）;而联合用药后36、48、60 h小菜蛾2龄幼虫体重增长抑制率由43.3%、38.3%、46.2%显著降低（P〈0.05）到13.2%、10.3%、8.6%。本研究表明SCH58261能显著降低HEA引起的小菜蛾2龄幼虫的死亡率和体重增长抑制率,HEA可能是通过Px Ado R而起作用,Px Ado R基因可以作为新的杀虫靶点用于害虫控制研究。 展开更多

关键词 腺苷受体 基因克隆 腺苷受体抑制剂 蛋白结构 n6-(2-羟乙基)腺苷

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蝉花虫草提取物N^6-(2-羟乙基)腺苷对小鼠肾脏缺血再灌注损伤的保护作用 被引量：25

12

作者 彭秀秀 柴一秋 +3 位作者 朱碧纯 金轶伟 厉晓腊 喻林升 《菌物学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期311-320,共10页

研究蝉花虫草提取物N^6-(2-羟乙基)腺苷[N^6-(2-hydroxyethyl)-adenosine,HEA]对小鼠肾脏缺血再灌注损伤(ischemia reperfusion,IR)的影响。选择20–25g雄性C57BL/6小鼠,随机分成5组。假手术组小鼠仅接受腹中线开腹、游离双侧肾蒂及缝... 研究蝉花虫草提取物N^6-(2-羟乙基)腺苷[N^6-(2-hydroxyethyl)-adenosine,HEA]对小鼠肾脏缺血再灌注损伤(ischemia reperfusion,IR)的影响。选择20–25g雄性C57BL/6小鼠,随机分成5组。假手术组小鼠仅接受腹中线开腹、游离双侧肾蒂及缝合腹部操作;IR组小鼠制成肾脏IR模型,不给药;HEA低剂量组、HEA中剂量组、HEA高剂量组分别在建立肾脏缺血再灌注模型前15min腹腔注射HEA(2.5mg/kg、5mg/kg和7.5mg/kg)。再灌注24h后检测各组肾功能指标血清肌酐(serum creatinine,Scr)和尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)水平。苏木精-伊红染色后用光学显微镜观察肾脏组织形态学改变。电镜和TUNEL分析法观察肾小管上皮细胞凋亡状况。实时荧光定量RT-PCR检测细胞间粘附分子-1(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)、白细胞介素(interleukin-1β,IL-1β)和肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)等基因的m RNA的表达情况。结果显示,与假手术组比较,IR组BUN和Scr水平明显升高(P<0.01,P<0.05);肾脏病理表现为上皮细胞碎片和管型,且最为严重;与IR组比较,HEA 7.5mg/kg组血清BUN和Scr水平显著降低(P<0.05);HEA 5mg/kg组和HEA 7.5mg/kg组肾损伤情况明显改善(P<0.05,P<0.01);电镜观察可知HEA 7.5mg/kg组明显改善肾小管上皮细胞的损伤程度,并且保护线粒体和细胞核膜的完整性。原位末端标记法[terminal dexynucleotidyl transferase(Td T)-mediated d UTP nick end labeling,TUNEL]显示HEA治疗组凋亡细胞数量明显低于IR组(P<0.01)。HEA治疗组ICAM-1、IL-1β和TNF-αm RNA的水平均低于IR组(P<0.01)。所以预处理HEA 7.5mg/kg对肾脏缺血再灌注有保护作用。 展开更多

关键词 n^6‐(2‐羟乙基)腺苷 缺血再灌注损伤 肾脏病理 细胞凋亡 促炎症因子

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蛹虫草子实体中N6-(2-羟乙基)-腺苷的分离纯化及抗肿瘤作用 被引量：24

13

作者 朱丽娜 薛俊杰 +3 位作者 刘艳芳 周帅 张劲松 唐庆九 《食用菌学报》 北大核心 2013年第1期62-65,共4页

为明确蛹虫草(Cordyceps militaris)核苷类化合物HPLC图谱中未知峰化学成分,运用NKA-II大孔吸附树脂、C-18柱分离纯化和结晶等方法,从蛹虫草子实体水提物中得到了未知峰的结晶粉末,通过1 HNMR,13 CNMR、ESI-MS等波谱分析,鉴定出化合物为... 为明确蛹虫草(Cordyceps militaris)核苷类化合物HPLC图谱中未知峰化学成分,运用NKA-II大孔吸附树脂、C-18柱分离纯化和结晶等方法,从蛹虫草子实体水提物中得到了未知峰的结晶粉末,通过1 HNMR,13 CNMR、ESI-MS等波谱分析,鉴定出化合物为N6-(2-羟乙基)-腺苷。该化合物对K562肿瘤细胞具有抑制作用,半数抑制有效浓度为0.1μmol/mL。 展开更多

关键词 蛹虫草 核苷 n6-(2-羟乙基)-腺苷 K562肿瘤细胞

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虫草类产品中5种核苷类成分的测定及蛹虫草质量分析 被引量：7

14

作者 李赫宇 于滢慧 +3 位作者 张东星 陈旻君 晏仁义 於洪建 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2018年第22期5410-5417,共8页

目的建立HPLC法对4种常见虫草类样本[蛹虫草、发酵虫草菌粉(Cs-4)、中华被毛孢和冬虫夏草]中尿苷、鸟苷、腺苷、虫草素和N6-(2-羟乙基)-腺苷5种核苷类成分进行含量测定,比较成分差异,确定蛹虫草的特征成分,为控制蛹虫草及其提取物的质... 目的建立HPLC法对4种常见虫草类样本[蛹虫草、发酵虫草菌粉(Cs-4)、中华被毛孢和冬虫夏草]中尿苷、鸟苷、腺苷、虫草素和N6-(2-羟乙基)-腺苷5种核苷类成分进行含量测定,比较成分差异,确定蛹虫草的特征成分,为控制蛹虫草及其提取物的质量提供科学依据。方法采用岛津ODS-3 C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-水进行梯度洗脱,体积流量为0.8 mL/min,检测波长为260 nm,柱温为30℃。结果蛹虫草样品均含有尿苷、鸟苷、腺苷、虫草素和N6-(2-羟乙基)-腺苷,而CS-4、中华被毛孢和冬虫夏草中未检测到虫草素和N6-(2-羟乙基)-腺苷。供试品制备方法对核苷类成分的影响较大,蛹虫草粉采用6种方法制备供试品溶液,发现用水超声提取180 min获得的尿苷、鸟苷和腺苷的含量最高,且在24 h内稳定。虫草素性质稳定,而N6-(2-羟乙基)-腺苷对热和酸都不太稳定;其中4种制备方法测得的虫草素和N6-(2-羟乙基)-腺苷含量一致。结论为蛹虫草及其提取物的质量分析提供了依据,以特征成分虫草素和N6-(2-羟乙基)-腺苷为指标可更好地对蛹虫草及其提取物的质量进行控制。 展开更多

关键词 蛹虫草 发酵虫草菌粉 中华被毛孢 冬虫夏草 尿苷 鸟苷 腺苷 虫草素 n6-(2一羟乙基)-腺苷 高效液相色谱法

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不同粒径对蛹虫草活性成分溶出量的影响 被引量：4

15

作者 张德斌 翟文姣 +4 位作者 刘国香 宫岩 刘璐瑶 谷春梅 郭绍芬 《食品科技》 CAS 北大核心 2021年第12期204-209,共6页

为探究粒径对蛹虫草活性的影响,采用不同的药典筛对蛹虫草粉末筛分出不同粒径的蛹虫草粉末,并测定蛹虫草的多糖、腺苷、虫草素、N6-2-羟乙基腺苷的含量。结果表明:不同粒径对蛹虫草多糖、腺苷、虫草素、N6-2-羟乙基腺苷溶出量具有极显... 为探究粒径对蛹虫草活性的影响,采用不同的药典筛对蛹虫草粉末筛分出不同粒径的蛹虫草粉末,并测定蛹虫草的多糖、腺苷、虫草素、N6-2-羟乙基腺苷的含量。结果表明:不同粒径对蛹虫草多糖、腺苷、虫草素、N6-2-羟乙基腺苷溶出量具有极显著的影响(P<0.01)。150目筛分的蛹虫草粉末的多糖含量高达22.99 mg/g,显著高于其他粒径的蛹虫草粉末。100目筛分的蛹虫草粉末的腺苷含量高达2220.165 μg/g,显著高于其他粒径的蛹虫草粉末。而120目筛分的蛹虫草粉末的N6-2-羟乙基腺苷含量高达2202.015 μg/g,显著高于其他粒径的蛹虫草粉末。100目筛分的蛹虫草粉末的虫草素含量高达1429.182 μg/g,显著高于粒径相对大的蛹虫草粉末,而100、120、200目筛分对蛹虫草粉末的虫草素含量无显著影响(P>0.01)。 展开更多

关键词 蛹虫草 多糖 腺苷 虫草素 n6-2-羟乙基腺苷 粒径

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高速逆流色谱分离制备蛹虫草中虫草素和N^6-(2-羟乙基)-腺苷 被引量：4

16

作者 张忠 周帅 +4 位作者 刘艳芳 张劲松 朱丽娜 冯娜 唐庆九 《菌物学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期742-749,共8页

采用高速逆流色谱(HSCCC)技术从蛹虫草子实体粗提物中分离制备高纯度虫草素和N6-(2-羟乙基)-腺苷。利用高效液相色谱(HPLC)测定目标产物在溶剂体系中的分配系数,优化HSCCC分离虫草素和N6-(2-羟乙基)-腺苷的溶剂体系,确定了以乙酸乙酯-... 采用高速逆流色谱(HSCCC)技术从蛹虫草子实体粗提物中分离制备高纯度虫草素和N6-(2-羟乙基)-腺苷。利用高效液相色谱(HPLC)测定目标产物在溶剂体系中的分配系数,优化HSCCC分离虫草素和N6-(2-羟乙基)-腺苷的溶剂体系,确定了以乙酸乙酯-正丁醇-1.5%氨水(1:4:5,V/V/V)为HSCCC的两相溶剂体系,并运用此溶剂体系,上相为固定相,下相为流动相,主机转速850r/min,流动相流速为1.5m L/min,检测波长为254nm条件下进行分离制备,在250min内从200mg蛹虫草子实体粗提物中一步分离得到10.8mg纯度99%的虫草素和6.1mg纯度98%的N6-(2-羟乙基)-腺苷。该方法简便、快速,为虫草素和N6-(2-羟乙基)-腺苷的大量制备建立了基础。 展开更多

关键词 高速逆流色谱 蛹虫草 分离 虫草素 n6-(2-羟乙基)-腺苷

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一株蝉拟青霉产N^6-(2-羟乙基)腺苷静置发酵条件的研究 被引量：3

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作者 雷帮星 康冀川 +3 位作者 何劲 文庭池 钱一鑫 何珺 《菌物学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第10期1415-1426,共12页

为了提高蝉拟青霉122菌株中N^6‐(2‐羟乙基)腺苷(HEA)的产量。采用静置液体培养方法,以HEA产量为指标,筛选得到122菌株在查氏培养基上的HEA产量优于沙氏和PD培养基;以查氏培养基为基础培养基,在26℃培养40d时,HEA产量达到最大;在黑暗... 为了提高蝉拟青霉122菌株中N^6‐(2‐羟乙基)腺苷(HEA)的产量。采用静置液体培养方法,以HEA产量为指标,筛选得到122菌株在查氏培养基上的HEA产量优于沙氏和PD培养基;以查氏培养基为基础培养基,在26℃培养40d时,HEA产量达到最大;在黑暗条件培养优于光照条件培养;最优碳源是蔗糖和葡萄糖;最优氮源是磷酸氢二铵;最优无机盐是KH_2PO_4;最优前体物为次黄嘌呤;最适氨基酸为L‐谷氨酸。正交实验结果表明蔗糖是影响122菌株产HEA的最主要的因子,在筛选出的优化培养基上得到122菌株HEA的最大产量为(130.22±0.60)mg/L,较优化前HEA的产量提高9.73倍。 展开更多

关键词 蝉拟青霉 n^6-(2-羟乙基)腺苷 静置发酵 前体物 氨基酸

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HPLC法检测蝉拟青霉中N6-(2-羟乙基)-腺苷含量

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作者 李慧雯 艾仁丽 谭艾娟 《湖北农业科学》 2022年第19期114-118,共5页

为了建立蝉拟青霉(Paecilomyces cicadae)5704s中N6-(2-羟乙基)-腺苷(HEA)含量测定方法,以去离子水为溶剂,采用超声辅助水浴法提取HEA,基于HPLC法测定其含量。经优化确定色谱条件为Agilent ZORBAX Extend-C色谱柱(250 mm×4.6 mm,5... 为了建立蝉拟青霉(Paecilomyces cicadae)5704s中N6-(2-羟乙基)-腺苷(HEA)含量测定方法,以去离子水为溶剂,采用超声辅助水浴法提取HEA,基于HPLC法测定其含量。经优化确定色谱条件为Agilent ZORBAX Extend-C色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇∶5 mmol/L乙酸铵(含0.1%甲酸),梯度洗脱,检测波长为260 nm,流速为1.0 mL/min,柱温为25℃,进样量为10μL。结果显示,HEA浓度为0.25~100.00μg/mL时,峰面积和HEA含量之间线性关系良好,R^(2)=0.9999,仪器的检出限为0.25μg/mL,平均回收率为97.73%~108.95%,RSD为0.37%~1.29%,测得样品中HEA含量为0.78 mg/g。该方法简便、快捷、准确、稳定,适用于蝉拟青霉5704s菌丝体中HEA的测定。 展开更多

关键词 蝉拟青霉(Paecilomyces cicadae) n6-(2-羟乙基)-腺苷(HEA) HPLC 检测

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不同培养条件对粉被虫草产N6-(2-羟乙基)腺苷的影响 被引量：3

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作者 雷帮星 康冀川 +4 位作者 曾祥羽 李世楠 何劲 文庭池 钱一鑫 《菌物研究》 CAS 2013年第2期154-154,共1页

N6-(2-羟乙基)腺苷[N6-(2-hydroxyethyl)-Adenosine,HEA],又名茧草菌素,是一种钙离子拮抗剂,具有抗紫外辐射、抗血小板凝结和镇痛等效用,是集医药保健、化妆品等多项开发潜力于一身的生物资源,也是衡量虫草制品质量的一个重要生物活性... N6-(2-羟乙基)腺苷[N6-(2-hydroxyethyl)-Adenosine,HEA],又名茧草菌素,是一种钙离子拮抗剂,具有抗紫外辐射、抗血小板凝结和镇痛等效用,是集医药保健、化妆品等多项开发潜力于一身的生物资源,也是衡量虫草制品质量的一个重要生物活性物质指标。该研究采用高效液相色谱法对菌丝体中HEA进行检测,以HEA的产量为指标,考察不同培养方法、培养基及其组分、前体物和氨基酸对粉被虫草(Cordyceps pruinosaPetch)cp菌株产HEA的影响。结果表明:在沙氏培养基上,静置培养120 d,cp菌株HEA的产量明显优于摇床培养20 d和发酵罐培养3 d的产量,说明随培养时间的延长,cp菌株中HEA的累积会逐步增加。在静置培养条件下,cp菌株在查氏培养基上HEA的产量明显优于沙氏培养基和PD培养基,HEA的产量是沙氏培养基的3.7倍,是PD培养基的4.48倍。以查氏培养基为基础培养基,静置培养120 d进行碳、氮源的筛选中,最有利于cp菌株产HEA的是蔗糖和硝酸钠;在无机盐的筛选中,K2HPO4是促进cp菌株累积HEA最主要的无机盐,其HEA产量较对照(不添加无机盐的查氏培养基)提高了58.2倍;在查氏培养基上添加不同前体物和氨基酸,发现其结构类似物腺苷、次黄嘌呤和腺嘌呤都有促进cp菌株累积HEA的能力,其中腺苷和次黄嘌呤的效果最好,能提高HEA产量60%以上;添加的14种氨基酸中有组氨酸、L-谷氨酸、甘氨酸、天门冬酰胺、丝氨酸、亮氨酸、L-丙氨酸、赖氨酸和精氨酸等9种氨基酸能促进cp菌株产HEA的能力,其中组氨酸是最有利于cp菌株累积HEA的氨基酸,其HEA产量较ck(查氏培养基)提高251.68%,HEA产量达到(45.56±2.8)mg/L,菌丝体中HEA含量达到(4 633.10±65.65)μg/g。 展开更多

关键词 粉被虫草 粉被马利白霉 n6-(2-羟乙基)腺苷 cp菌株 前体物 氨基酸 静置发酵

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蝉花中N^(6)-(2-羟乙基)-腺苷提取工艺优化及结构鉴定

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作者 艾仁丽 谭艾娟 吕世明 《食用菌学报》 CSCD 北大核心 2023年第2期65-74,共10页

在单因素实验基础上,采用响应面法考察液料比、水浴温度、水浴时间对提取物中N6-(2-羟乙基)-腺苷[N^(6)-(2-hydroxyethyl) adenosine,HEA]含量的影响,优化出HEA的最佳提取工艺:以超纯水为溶剂、液料比118∶1、超声时间25 min、水浴温度2... 在单因素实验基础上,采用响应面法考察液料比、水浴温度、水浴时间对提取物中N6-(2-羟乙基)-腺苷[N^(6)-(2-hydroxyethyl) adenosine,HEA]含量的影响,优化出HEA的最佳提取工艺:以超纯水为溶剂、液料比118∶1、超声时间25 min、水浴温度24℃、水浴时间3.8 h,获得提取物中HEA含量为(0.836±0.030) mg·g^(-1)。采用大孔树脂、酸性氧化铝层析柱和半制备高效液相色谱仪(semi preparative high performance liquid chromatography,SP-HPLC)分离纯化提取液中HEA,采用核磁共振及电喷雾电离质谱(electrospray ionization mass spectrometry,ESI-MS)和核磁共振氢谱(proton nuclear magnetic resonance spectroscopy,^(1)H NMR)鉴定分离出的物质为HEA,经高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)分析其纯度为99.32%。 展开更多

关键词 n^(6)-(2-羟乙基)-腺苷(HEA) 高效液相色谱法(HPLC) 响应面法(RSM) 结构鉴定

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