N糖基化抑制对脑胶质瘤细胞株SWO-38 N-GSLs合成的影响

1

作者 张健 张积仁 汪森明 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2000年第5期321-324,共4页

目的　探讨N糖基化抑制对肿瘤细胞中性鞘糖脂 (N GSLs)合成的影响。方法　以衣霉素 (Tunicamycin)为N 糖基化抑制剂 ,观察其对胶质瘤细胞株SWO 38糖蛋白及N GSLs合成的影响。结果　当衣霉素浓度≥ 5ug ml,作用时间≥ 8小时 ,它可以在体... 目的　探讨N糖基化抑制对肿瘤细胞中性鞘糖脂 (N GSLs)合成的影响。方法　以衣霉素 (Tunicamycin)为N 糖基化抑制剂 ,观察其对胶质瘤细胞株SWO 38糖蛋白及N GSLs合成的影响。结果　当衣霉素浓度≥ 5ug ml,作用时间≥ 8小时 ,它可以在体外选择性地抑制N糖蛋白的合成 ,同时也抑制N GSLs的合成 ,而对N GSLs单一组分的相对百分含量无明显影响。结论　N 糖基化抑制剂在抑制细胞N糖蛋白合成的同时 ,对细胞N GSLs的合成也有抑制作用。 展开更多

关键词 n糖基化抑制 n糖蛋白 中性鞘糖脂 脑胶质瘤

下载PDF 职称材料

二维电泳和质谱技术鉴定肝癌血清差异表达的N-连接糖蛋白 被引量：5

2

作者 王明 黄志红 +8 位作者 雷鹏 王明丽 晁玮霞 马瑾 卜旺雨 张娟 牛保华 马远方 齐义军 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期482-489,共8页

缺乏有效的早期诊断方法是导致肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)预后极差的主要原因之一.蛋白质异常糖基化与恶性肿瘤细胞侵袭、转移等生物学过程关系密切,人体内至少有50%的蛋白质发生了糖基化修饰.本实验采用IgY12去除血清高... 缺乏有效的早期诊断方法是导致肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)预后极差的主要原因之一.蛋白质异常糖基化与恶性肿瘤细胞侵袭、转移等生物学过程关系密切,人体内至少有50%的蛋白质发生了糖基化修饰.本实验采用IgY12去除血清高丰度蛋白、多植物凝集素亲和层析技术分别从20例肝癌和年龄、性别匹配的20例非癌慢性肝病患者血清中纯化N-连接糖蛋白、二维电泳分析差异表达的蛋白质斑点,质谱检测、生物信息学等技术鉴定了18个差异表达的糖蛋白和/或其异质体(12种高表达和6种低表达).ExPASy数据库比对结果表明,本实验鉴定的糖蛋白质分子含有至少1个已报道的N-糖基化位点.这些差异表达的糖蛋白属于急性期反应蛋白,分别具有蛋白酶抑制、生物转运、凝血和纤溶等功能,表明肝癌的发生发展过程中机体产生的急性期反应物可能是潜在的肝癌血清标志物. 展开更多

关键词 肝细胞癌 二维电泳 质谱 n-连接糖蛋白 血清生物标志物

下载PDF 职称材料

牛初乳和牛常乳乳清N-糖蛋白质的差异分析 被引量：4

3

作者 曹雪妍 刘瑛 +8 位作者 杨梅 杨宁 梁肖娜 武俊瑞 乌日娜 陶冬冰 刘彪 叶文慧 岳喜庆 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第12期160-167,共8页

为阐明牛乳蛋白质N-糖基化,采用糖蛋白质组学技术,在牛初乳和牛常乳乳清中共鉴定到154 个N-糖蛋白和246 个糖基化位点,其中,牛初乳鉴定到117 个N-糖蛋白和183 个糖基化位点;牛常乳鉴定到109 个N-糖蛋白和145 个糖基化位点。初乳中丛生蛋... 为阐明牛乳蛋白质N-糖基化,采用糖蛋白质组学技术,在牛初乳和牛常乳乳清中共鉴定到154 个N-糖蛋白和246 个糖基化位点,其中,牛初乳鉴定到117 个N-糖蛋白和183 个糖基化位点;牛常乳鉴定到109 个N-糖蛋白和145 个糖基化位点。初乳中丛生蛋白(P17697)糖基化位点N-283表达量最高,常乳中α-乳白蛋白糖基化位点N-93表达量最高。考虑定量差异及有无差异,在牛初乳和牛常乳乳清中共鉴定到129 个糖蛋白的190 个差异表达糖基化位点。基因本体论功能注释表明,差异表达糖蛋白参与的生物学过程是生物调节、刺激性反应、多细胞生物过程、定位、免疫系统过程等;主要分布为细胞外区域和细胞器;主要的分子功能是结合作用、催化活性和分子功能调节。差异表达糖蛋白参与的代谢通路主要是补体与凝血级联、金黄色葡萄球菌感染和溶酶体等。此外,通过蛋白互作分析,找到一些具有高连接度的重要糖蛋白。本研究丰富了牛乳N-糖蛋白质组成及其糖基化位点信息,阐明了牛乳乳清N-糖基化的功能,为评价和改善牛乳品质、研发婴幼儿配方乳中糖蛋白质的改良及功能食品的生产提供了理论依据。 展开更多

关键词 牛乳初 牛常乳 乳清 n-糖蛋白 功能分析

下载PDF 职称材料

利用大肠杆菌生产N-糖蛋白和糖蛋白疫苗的研究进展 被引量：1

4

作者 马中瑞 韩东雷 +2 位作者 赵骏菲 陈梦琳 陈敏 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第11期92-98,共7页

近年来,随着对空肠弯曲杆菌蛋白N-糖基化修饰系统的研究不断深入,通过关键酶PglB和外源载体蛋白的导入等,此系统在大肠杆菌中的重建成功完成。目前,已能初步利用大肠杆菌生产多种N-糖蛋白。此技术为糖蛋白疫苗的生产开辟了新的途径。此... 近年来,随着对空肠弯曲杆菌蛋白N-糖基化修饰系统的研究不断深入,通过关键酶PglB和外源载体蛋白的导入等,此系统在大肠杆菌中的重建成功完成。目前,已能初步利用大肠杆菌生产多种N-糖蛋白。此技术为糖蛋白疫苗的生产开辟了新的途径。此外,通过关键酶表达量的提高和糖基化位点和序列的选择等措施,大肠杆菌蛋白N-糖基化系统的糖基化效率有了进一步提高,同时改善N-糖蛋白的免疫效果的研究亦取得较大进展。这些都为大规模生产糖蛋白疫苗提供了保障。 展开更多

关键词 n-糖蛋白 糖蛋白疫苗PglB 空肠弯曲杆菌 大肠杆菌 糖基化效率 免疫效果

原文传递

N-糖苷的化学合成

5

作者 金鹏 巨勇 赵玉芬 《化学通报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第8期565-571,共7页

介绍了近年来N-糖苷的合成方法和N-糖苷化学合成的前景和发展方向。

关键词 n-糖苷 n-糖肽 n-糖蛋白 化学合成

原文传递

二维电泳和质谱技术鉴定肝细胞癌相关N-连接糖蛋白 被引量：2

6

作者 王明丽 韩大正 +4 位作者 晁玮霞 刘瑞敏 赵云岗 张天 齐义军 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期495-502,共8页

目的鉴定与肝细胞癌(HCC)发生发展相关的差异表达N-连接糖蛋白。方法采用刀豆凝集素A(Con A)、晶状体凝集素(LCH)、雪花凝集素(GNA)等3种植物凝集素组成的亲和层析柱,分别从肝永生化细胞系L02和HCC细胞系Huh7、PLC5、SNU449中纯化N-连... 目的鉴定与肝细胞癌(HCC)发生发展相关的差异表达N-连接糖蛋白。方法采用刀豆凝集素A(Con A)、晶状体凝集素(LCH)、雪花凝集素(GNA)等3种植物凝集素组成的亲和层析柱,分别从肝永生化细胞系L02和HCC细胞系Huh7、PLC5、SNU449中纯化N-连接糖蛋白、二维电泳分析差异表达的蛋白质斑点,质谱、生物信息学等技术鉴定差异表达蛋白,Western blotting验证了转录调控肿瘤蛋白(TCTP)、上皮细胞黏附分子(Ep CAM)和膜联蛋白A2(annexin A2)在肝永生化及HCC细胞和HCC及癌旁组织中的表达规律,体外侵袭实验检测TCTP沉默后对SNU449的侵袭力影响。结果质谱、生物信息学等技术共鉴定出42个差异表达的蛋白质分子/异质体(HCC细胞中高、低表达的蛋白/异质体分别为14个、28个),代表32个蛋白质分子,其中的22个蛋白含有至少1个N糖基化位点(Net NGlyc 1.0预测)。这些差异表达的蛋白主要参与氧化还原内稳态维系、碳水化合物/能量代谢、糖酵解、抗凋亡等生物学过程。Western blotting检测表明,TCTP、Ep CAM和annexin A2在6个肝癌细胞系PLC5、Hep G2、SNU449、Huh7、HCC7721和SNU473及肝癌组织中表达显著升高,siRNA介导的TCTP沉默明显抑制了HCC细胞系SNU449的体外侵袭能力。结论 TCTP、Ep CAM和annexin可能参与了HCC发生发展过程,TCTP可能成为HCC靶向治疗的分子靶点之一。 展开更多

关键词 肝细胞癌 n-连接糖蛋白 植物凝集素 质谱 二维电泳

下载PDF 职称材料

基于质谱的N-糖蛋白分析进展

7

作者 田志新 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期662-673,共12页

N-连接糖基化是蛋白质上常见的翻译后修饰,在修饰位点上具有跟其他小分子修饰(如甲基化、乙酰化、磷酸化)同样的宏观不均一性,也就是蛋白质氨基酸序列上具有多个潜在的修饰位点。但相对于小分子修饰单一的结构,N-糖基化修饰具有来自不... N-连接糖基化是蛋白质上常见的翻译后修饰,在修饰位点上具有跟其他小分子修饰(如甲基化、乙酰化、磷酸化)同样的宏观不均一性,也就是蛋白质氨基酸序列上具有多个潜在的修饰位点。但相对于小分子修饰单一的结构,N-糖基化修饰具有来自不同单糖组成,序列结构、链接结构、异头异构,立体构象等多个结构维度的数以万计的结构。这使得N-糖基化在修饰位点上具有额外的微观不均一性,也就是说同一个N-糖基化位点可以以一定的化学计量比修饰不同的糖链。N-糖基化修饰以位点和结构特异的方式调控N-糖蛋白的结构和功能,疾病条件下差异表达的N-糖基化需通过位点和结构特异的定量分析来表征。本文主要介绍最新发展水平的基于质谱的位点和结构特异定量N-糖蛋白质组学及在生物医学中的应用。 展开更多

关键词 n-糖蛋白 糖基化位点 糖链结构 定性 定量

下载PDF 职称材料

传染性法氏囊病病毒细胞受体研究进展

8

作者 李乔木 李娅丽 +4 位作者 赵绪永 朱礼倩 田小辉 刘运超 王爱萍 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2009年第4期16-17,21,共3页

综述了国内外IBDV细胞受体的研究情况,概括介绍了近年来的研究进展,以期对IBDV细胞受体的结构和功能研究提供参考。

关键词 传染性法氏囊病病毒 细胞受体 n-连接糖蛋白 表面免疫球蛋白 鸡热激蛋白90

下载PDF 职称材料

小整联蛋白结合配体N-连结糖蛋白家族成员在牙发育中的作用 被引量：2

9

作者 侯超 李纾 《国际口腔医学杂志》 CAS 2011年第4期412-415,共4页

小整联蛋白结合配体N-连结糖蛋白家族是一组主要在牙和骨组织中表达的蛋白质,其基因具有通用的外显子内含子结构,影响细胞的增殖和分化。目前已知其包括骨桥蛋白、骨涎蛋白、牙本质基质蛋白-1、牙本质涎磷蛋白、细胞外基质磷酸糖蛋白和... 小整联蛋白结合配体N-连结糖蛋白家族是一组主要在牙和骨组织中表达的蛋白质,其基因具有通用的外显子内含子结构,影响细胞的增殖和分化。目前已知其包括骨桥蛋白、骨涎蛋白、牙本质基质蛋白-1、牙本质涎磷蛋白、细胞外基质磷酸糖蛋白和釉蛋白等6个成员,本文就其在牙发育过程中的作用作一综述。 展开更多

关键词 小整联蛋白结合配体n-连结糖蛋白家族 牙本质涎磷蛋白 牙本质基质蛋白 骨桥蛋白 骨涎蛋白 细胞外基质磷酸糖蛋白 釉蛋白

下载PDF 职称材料

小分子整联蛋白结合配体N-连接糖蛋白家族成员在牙髓干细胞分化过程中的作用

10

作者 霍丽珺 凌均 《国际口腔医学杂志》 CAS 2008年第6期690-693,共4页

体外诱导牙髓干细胞向成牙本质细胞分化并观察其过程,是目前研究牙髓干细胞分化机制和寻找其分化标志的主要方法。在成牙本质细胞分化和矿化过程中,小分子整联蛋白结合配体N-糖蛋白(SBLING)家族成员发挥着重要作用。下面就SBLING家族成... 体外诱导牙髓干细胞向成牙本质细胞分化并观察其过程,是目前研究牙髓干细胞分化机制和寻找其分化标志的主要方法。在成牙本质细胞分化和矿化过程中,小分子整联蛋白结合配体N-糖蛋白(SBLING)家族成员发挥着重要作用。下面就SBLING家族成员牙本质涎磷蛋白、牙本质基质蛋白-1和细胞外基质磷酸糖蛋白在牙髓干细胞分化过程中的作用作一综述。 展开更多

关键词 小分子整联蛋白结合配体n-糖蛋白家族 牙本质涎磷蛋白 牙本质基质蛋白 细胞外基质磷酸糖蛋白

下载PDF 职称材料

结构特异N-糖蛋白质组学研究进展

11

作者 毕明 田志新 《质谱学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2021年第5期897-913,I0009,共18页

N-连接糖基化修饰是蛋白质上常见的翻译后修饰,发生在特征氨基酸序列N-X-T/S/C(X≠P)中的天冬酰胺上。N-连接糖具有五糖核心结构,包括高甘露糖型、杂合型和复杂型等3种主要类型。N-糖基化在修饰位点上具有微观和宏观不均一性,其功能与... N-连接糖基化修饰是蛋白质上常见的翻译后修饰,发生在特征氨基酸序列N-X-T/S/C(X≠P)中的天冬酰胺上。N-连接糖具有五糖核心结构,包括高甘露糖型、杂合型和复杂型等3种主要类型。N-糖基化在修饰位点上具有微观和宏观不均一性,其功能与修饰位点和N-连接糖结构对应。对蛋白质N-糖基化位点和结构特异性的精准鉴定和定量,是基于质谱的N-糖蛋白质组学发现N-糖蛋白相关疾病诊断和预后标志物、药物靶点,以及研发高效靶向大分子药物的主要任务。随着高效富集材料、液相色谱分离技术、串联质谱和检测技术以及生物信息学数据库搜索方法的逐步发展和成熟,目前N-糖蛋白质组学已能够对体系中的N-糖基化进行高通量位点和结构特异性鉴定和定量。本文主要介绍N-糖蛋白质组学的样本制备、高效液相色谱-质谱联用分析、生物信息学数据处理等基本步骤,以及由这些步骤组成的完整分析流程的代表性应用研究。 展开更多

关键词 n-糖蛋白质组学 LC-MS/MS GPSeeker 结构特异性 鉴定 定量

下载PDF 职称材料

N-糖蛋白去糖基化酶(PNGase)的研究进展

12

作者 陈妍雯 袁舒颖 +6 位作者 刘瑞杰 张绍兴 邹琳 芦鑫荣 孔维溧 陈力 孙桂芹 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2022年第9期1630-1637,共8页

N-糖蛋白去糖基化酶(PNGase)是一种广泛存在于真菌、植物、哺乳动物中的去糖基化酶,可以水解N-糖蛋白或N-糖肽上天冬酰胺与寡糖链连接的化学键,并释放出完整的N-寡糖。PNGase在生物体内参与蛋白质降解、器官发育、个体生长等过程。人PNG... N-糖蛋白去糖基化酶(PNGase)是一种广泛存在于真菌、植物、哺乳动物中的去糖基化酶,可以水解N-糖蛋白或N-糖肽上天冬酰胺与寡糖链连接的化学键,并释放出完整的N-寡糖。PNGase在生物体内参与蛋白质降解、器官发育、个体生长等过程。人PNGase基因功能缺陷会导致先天性去糖基化障碍,小鼠PNGase缺陷会导致胚胎致死性,线虫PNGase缺陷使其寿命下降。本文对PNGase在不同物种的分布、蛋白质结构、酶学功能及生物学功能进行阐述,为PNGase的生理病理功能及致病机制的基础研究提供思路,为PNGase作为糖生物学工具酶或药物开发的创新应用研究奠定基础。 展开更多

关键词 n-糖蛋白去糖基化酶 分布 蛋白质结构 酶学功能 生物学功能

下载PDF 职称材料