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题名Cry1Ia蛋白N端信号肽对其蛋白表达量的影响
被引量：1
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作者
郭俊佩
刘璇
韩阜志
高建华
史宗勇
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机构
山西农业大学生命科学学院
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出处
《山西农业科学》
2021年第6期694-698,共5页
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基金
国家转基因重大专项(2018ZX08012001-009)。
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文摘
Cry1Ia是苏云金芽孢杆菌表达的分泌型Cry杀虫蛋白。为了研究Cry1Ia蛋白N端信号肽(Iasp)区域对其蛋白表达量的影响,梯度删除了N端氨基酸序列,将这些缺失突变体基因接入p ET28a Del表达载体,并转化大肠杆菌BL21 Star(DE3)感受态细胞,得到一系列缺失突变体,即Cry1Ia D5、Cry1Ia D10、Cry1Ia D13、Cry1Ia D16、Cry1Ia D24、Cry1Ia D32、Cry1Ia D44和Cry1Ia D73,分析其蛋白表达和m RNA热稳定性。结果显示,8种Cry1Ia蛋白突变体均成功表达,其中,Cry1Ia D32和Cry1Ia D44的表达量高于Cry1Ia,分别为Cry1Ia的1.43、1.12倍,Cry1Ia D13和Cry1Ia D16表达量与Cry1Ia基本持平,其余4种蛋白的表达量低于Cry1Ia;对m RNA起始密码子附近的核苷酸序列的二级结构进行预测发现,不同突变体该区域能够形成不同的茎环结构,且其热稳定性能具有一定的差异;进一步对蛋白相对表达量和m RNA结构热稳定性进行相关性分析表明,2个变量间无显著相关关系。研究结果可为揭示Iasp的功能奠定一定理论基础。
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关键词
苏云金芽孢杆菌
大肠杆菌
Cry1Ia蛋白
n端信号肽
原核表达
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Keywords
Bacillus thuringiensis
Escherichia coli
Cry1Ia protein
N-terminal signal peptide
prokaryotic expression
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分类号
Q78
[生物学—分子生物学]
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