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小反刍兽疫病毒N蛋白原核表达与间接ELISA检测方法的建立
被引量：
15
1
作者
孙雨
赵柏林
+7 位作者
王晓英
董浩
翟新验
曲萍
胡冬梅
杨天意
石慧
宋晓晖
《动物医学进展》
北大核心
2017年第1期6-10,共5页
小反刍兽疫病毒(PPRV)N蛋白是病毒粒子的主要结构蛋白,也是诊断小反刍兽疫的主要靶蛋白。为获得高效表达的可溶性N蛋白,并建立基于N蛋白的小反刍兽疫的间接ELISA检测方法,通过优化密码子、优化表达条件等条件探索,在大肠埃希菌表达系统...
小反刍兽疫病毒(PPRV)N蛋白是病毒粒子的主要结构蛋白,也是诊断小反刍兽疫的主要靶蛋白。为获得高效表达的可溶性N蛋白,并建立基于N蛋白的小反刍兽疫的间接ELISA检测方法,通过优化密码子、优化表达条件等条件探索,在大肠埃希菌表达系统中获得了高效表达的可溶性N蛋白,进一步基于N蛋白建立了间接ELISA检测方法,该方法对其他相关的羊类病原无交叉反应,其组内与组间变异系数均低于9%,具有良好的重复性。对480份临床血清样品进行检测,同时用法国IDVET竞争ELISA试剂盒进行比较,符合率达到98.33%。本研究为进一步开发成熟的小反刍兽疫抗体检测试剂盒奠定了基础。
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关键词
小反刍兽疫
n
活性
蛋白
可溶性表达与纯化
间接酶联免疫吸附试验
下载PDF
职称材料
小反刍兽疫病毒双抗原夹心时间分辨荧光免疫测定方法的建立
被引量：
10
2
作者
孙雨
宋晓晖
+7 位作者
董浩
赵柏林
曲萍
蒋菲
杨天意
张晨
杨林
王传彬
《动物医学进展》
北大核心
2019年第4期1-8,共8页
通过优化大肠埃希菌密码子、优化表达条件等方法,在大肠埃希菌表达系统中成功获得了可溶性的N蛋白与NH融合蛋白。进一步基于纯化的可溶性N蛋白与NH融合蛋白建立了小反刍兽疫病毒双抗原夹心时间分辨荧光免疫测定方法。该方法敏感性高,特...
通过优化大肠埃希菌密码子、优化表达条件等方法,在大肠埃希菌表达系统中成功获得了可溶性的N蛋白与NH融合蛋白。进一步基于纯化的可溶性N蛋白与NH融合蛋白建立了小反刍兽疫病毒双抗原夹心时间分辨荧光免疫测定方法。该方法敏感性高,特异性强,能够特异性的检测羊血清中的小反刍兽疫病毒抗体,与其他相关疫病病原无交叉反应;重复性试验组内与组间变异系数均小于10%。对292份临床血清样品进行检测,与法国IDVET竞争ELISA试剂盒比较,阳性样品符合率为92.47%,阴性样品符合率为97.26%,总的符合率为94.86%。该方法与传统的ELISA方法相比,具有敏感性、特异性相当,操作简单、快速,具有较高的推广应用价值。
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关键词
小反刍兽疫病毒
n
活性
蛋白
n
H融合
蛋白
可溶性表达与纯化
时间分辨荧光免疫测定方法
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职称材料
题名
小反刍兽疫病毒N蛋白原核表达与间接ELISA检测方法的建立
被引量：
15
1
作者
孙雨
赵柏林
王晓英
董浩
翟新验
曲萍
胡冬梅
杨天意
石慧
宋晓晖
机构
中国动物疫病预防控制中心
出处
《动物医学进展》
北大核心
2017年第1期6-10,共5页
基金
国家重点计划研发项目(2016YFD0500901)
文摘
小反刍兽疫病毒(PPRV)N蛋白是病毒粒子的主要结构蛋白,也是诊断小反刍兽疫的主要靶蛋白。为获得高效表达的可溶性N蛋白,并建立基于N蛋白的小反刍兽疫的间接ELISA检测方法,通过优化密码子、优化表达条件等条件探索,在大肠埃希菌表达系统中获得了高效表达的可溶性N蛋白,进一步基于N蛋白建立了间接ELISA检测方法,该方法对其他相关的羊类病原无交叉反应,其组内与组间变异系数均低于9%,具有良好的重复性。对480份临床血清样品进行检测,同时用法国IDVET竞争ELISA试剂盒进行比较,符合率达到98.33%。本研究为进一步开发成熟的小反刍兽疫抗体检测试剂盒奠定了基础。
关键词
小反刍兽疫
n
活性
蛋白
可溶性表达与纯化
间接酶联免疫吸附试验
Keywords
Peste des petits rumi
n
a
n
ts
n
active protei
n
soluble expressio
n
a
n
d purificatio
n
i
n
direct ELISA
分类号
S852.659.5 [农业科学—基础兽医学]
下载PDF
职称材料
题名
小反刍兽疫病毒双抗原夹心时间分辨荧光免疫测定方法的建立
被引量：
10
2
作者
孙雨
宋晓晖
董浩
赵柏林
曲萍
蒋菲
杨天意
张晨
杨林
王传彬
机构
中国动物疫病预防控制中心
出处
《动物医学进展》
北大核心
2019年第4期1-8,共8页
基金
科技部十三五重点研发项目(2016YFD0500901)
文摘
通过优化大肠埃希菌密码子、优化表达条件等方法,在大肠埃希菌表达系统中成功获得了可溶性的N蛋白与NH融合蛋白。进一步基于纯化的可溶性N蛋白与NH融合蛋白建立了小反刍兽疫病毒双抗原夹心时间分辨荧光免疫测定方法。该方法敏感性高,特异性强,能够特异性的检测羊血清中的小反刍兽疫病毒抗体,与其他相关疫病病原无交叉反应;重复性试验组内与组间变异系数均小于10%。对292份临床血清样品进行检测,与法国IDVET竞争ELISA试剂盒比较,阳性样品符合率为92.47%,阴性样品符合率为97.26%,总的符合率为94.86%。该方法与传统的ELISA方法相比,具有敏感性、特异性相当,操作简单、快速,具有较高的推广应用价值。
关键词
小反刍兽疫病毒
n
活性
蛋白
n
H融合
蛋白
可溶性表达与纯化
时间分辨荧光免疫测定方法
Keywords
Pestedes petits rumi
n
a
n
ts virus
n
activity protei
n
n
H fusio
n
protei
n
soluble expressio
n
a
n
d purificatio
n
time-resolved fluoroimmu
n
oassay
分类号
S852.659.5 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
作者
出处
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1
小反刍兽疫病毒N蛋白原核表达与间接ELISA检测方法的建立
孙雨
赵柏林
王晓英
董浩
翟新验
曲萍
胡冬梅
杨天意
石慧
宋晓晖
《动物医学进展》
北大核心
2017
15
下载PDF
职称材料
2
小反刍兽疫病毒双抗原夹心时间分辨荧光免疫测定方法的建立
孙雨
宋晓晖
董浩
赵柏林
曲萍
蒋菲
杨天意
张晨
杨林
王传彬
《动物医学进展》
北大核心
2019
10
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职称材料
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