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猪附红细胞体的体外连续培养 被引量：14
1
作者 李晓云 贾杏林 +5 位作者 石德时 肖运才 胡思顺 刘梅 袁宗辉 毕丁仁 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第8期1142-1146,共5页
临床疑似猪附红细胞体病猪红细胞,经Giemsa染色镜检及PCR扩增,证实感染猪附红细胞体(M.suis)。PCR扩增片段(781 bp)与M.suis已知序列(AJ504999)同源性达99.4%。经预试验对红细胞接种量、血清添加量、pH等条件优化后,选用添加新生牛血清... 临床疑似猪附红细胞体病猪红细胞,经Giemsa染色镜检及PCR扩增,证实感染猪附红细胞体(M.suis)。PCR扩增片段(781 bp)与M.suis已知序列(AJ504999)同源性达99.4%。经预试验对红细胞接种量、血清添加量、pH等条件优化后,选用添加新生牛血清、酵母浸出液、葡萄糖等成分的PPLO肉汤,将染虫红细胞接种到细胞培养板上,置于37℃、含5%CO2的培养箱培养,定期更换培养液,约72 h后红细胞溶血变为带虫血影(Ghost)。除首次接种外不添加任何红细胞,连续培养达280 d以上,染虫率维持近100%。对培养的带虫血影进行了光镜及扫描电镜观察、PCR鉴定、感染阴性红细胞试验、抗生素敏感性试验,证实与接种物为同一病原,并保持有感染阴性红细胞的能力。 展开更多
关键词 猪附红细胞体 PPLO肉汤 体外培养 血影
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猪附红细胞体的体外培养研究 被引量：4
2
作者 吴志明 闫若潜 +3 位作者 刘光辉 赵雪丽 张志凌 张健 《河南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期77-81,共5页
用RPMI-1640和胎牛血清按比例混合并添加肌苷作为体外培养猪附红细胞体(M.suis)的基础培养基,以无附红细胞体感染的兔红细胞泥作为培养寄生载体,置于体积分数为5%CO2的37℃生化恒温培养箱进行M.suis的体外培养研究.结果表明,培养时每24 ... 用RPMI-1640和胎牛血清按比例混合并添加肌苷作为体外培养猪附红细胞体(M.suis)的基础培养基,以无附红细胞体感染的兔红细胞泥作为培养寄生载体,置于体积分数为5%CO2的37℃生化恒温培养箱进行M.suis的体外培养研究.结果表明,培养时每24 h换培养液1次,每36 h传代1次,可连续传代40代次以上,并能保持最高感染率90%以上;感染M.suis的猪红细胞在4℃条件下可保持30 d以上而不发生溶血;兔红细胞接种新鲜制备的自然感染M.suis的猪红细胞,36 h后感染率可达91.6%,并一直维持到96 h,96 h后有少量细胞开始出现溶血;接种4℃条件下保存30 d以内自然感染M.suis的猪红细胞与新鲜制备的自然感染M.suis的猪红细胞对兔红细胞的感染率影响差异不显著. 展开更多
关键词 猪附红细胞体 体外培养 传代 感染率
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