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绵羊肺炎支原体Y98标准株P30外膜蛋白与IFN-γ的融合表达及其免疫原性
被引量:
3
1
作者
张亚宁
刘文青
+2 位作者
赵红艳
张乐祎
赵宝华
《中国兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第6期843-848,共6页
以绵羊肺炎支原体(Mycoplasma oumvipneonia,MO)标准株Y98的P30外膜蛋白为抗原,同时以细胞因子IFN-γ为佐剂,将两者串联融合表达。小鼠免疫保护试验结果显示,P30重组蛋白的免疫保护率为60%,IFN-γ重组蛋白的免疫保护率为20%,P30-IFN-γ...
以绵羊肺炎支原体(Mycoplasma oumvipneonia,MO)标准株Y98的P30外膜蛋白为抗原,同时以细胞因子IFN-γ为佐剂,将两者串联融合表达。小鼠免疫保护试验结果显示,P30重组蛋白的免疫保护率为60%,IFN-γ重组蛋白的免疫保护率为20%,P30-IFN-γ重组蛋白的免疫保护率达到80%。间接ELISA试验证实,经100μL与200μL P30-IFN-γ重组蛋白免疫小鼠的血清中,P30抗体效价分别为1∶32 000与1∶64 000。以上结果证实,所制备的重组蛋白对小鼠实验个体基本安全,且P30-IFN-γ重组蛋白中的细胞因子IFN-γ组分可以调节机体免疫机能,增强P30蛋白的免疫保护效果。
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关键词
绵羊肺炎支原体
P30基因
IFN-Γ
融合蛋白
原文传递
绵羊肺炎支原体标准株Y98外膜蛋白MOP30基因真核表达载体的构建及其在烟草中的瞬时表达
被引量:
3
2
作者
张亚宁
赵利峰
+1 位作者
张乐祎
赵宝华
《中国兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第10期1473-1477,共5页
以绵羊肺炎支原体(Mycoplasma oumvipneoniae,MO)标准株Y98基因组为模板,设计1对特异引物,PCR扩增得到798bp的P30目的基因(MOP30),将其定向克隆到pMD19-T Simple载体中进行测序分析。重组质粒进行XbaⅠ/BamHⅠ双酶切并回收目的片段,将...
以绵羊肺炎支原体(Mycoplasma oumvipneoniae,MO)标准株Y98基因组为模板,设计1对特异引物,PCR扩增得到798bp的P30目的基因(MOP30),将其定向克隆到pMD19-T Simple载体中进行测序分析。重组质粒进行XbaⅠ/BamHⅠ双酶切并回收目的片段,将目的基因亚克隆入黄色荧光蛋白(yellow fluorescent protein,YFP)表达载体pCAMBIA1300-YFP中构建重组融合表达质粒pCAMBIA1300-MOP30-YFP。双酶切验证后的融合表达质粒转化农杆菌(Agrobacterium)感受态细胞,侵染烟草(tobacco)叶片。通过激光共聚焦成像显微镜(cofocal imagingmicroscope)观察到融合表达的黄色荧光蛋白,Western-blotting试验得到57 000的特异条带,RT-PCR检测到MOP30基因在烟草叶片中转录。MOP30-YFP融合蛋白在烟草中的成功表达,为转基因植物疫苗防治绵羊支原体肺炎奠定了基础。
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关键词
绵羊肺炎支原体
MOP30基因
黄色荧光蛋白
真核表达
瞬时表达
转基因植物疫苗
原文传递
题名
绵羊肺炎支原体Y98标准株P30外膜蛋白与IFN-γ的融合表达及其免疫原性
被引量:
3
1
作者
张亚宁
刘文青
赵红艳
张乐祎
赵宝华
机构
河北师范大学生命科学学院
出处
《中国兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第6期843-848,共6页
基金
国家自然科学基金资助项目(NO:30871880)
文摘
以绵羊肺炎支原体(Mycoplasma oumvipneonia,MO)标准株Y98的P30外膜蛋白为抗原,同时以细胞因子IFN-γ为佐剂,将两者串联融合表达。小鼠免疫保护试验结果显示,P30重组蛋白的免疫保护率为60%,IFN-γ重组蛋白的免疫保护率为20%,P30-IFN-γ重组蛋白的免疫保护率达到80%。间接ELISA试验证实,经100μL与200μL P30-IFN-γ重组蛋白免疫小鼠的血清中,P30抗体效价分别为1∶32 000与1∶64 000。以上结果证实,所制备的重组蛋白对小鼠实验个体基本安全,且P30-IFN-γ重组蛋白中的细胞因子IFN-γ组分可以调节机体免疫机能,增强P30蛋白的免疫保护效果。
关键词
绵羊肺炎支原体
P30基因
IFN-Γ
融合蛋白
Keywords
mycoplasma
oumvipneoniae
P30
gene
IFN-γ
Fusion
protein
分类号
S852.62 [农业科学—基础兽医学]
原文传递
题名
绵羊肺炎支原体标准株Y98外膜蛋白MOP30基因真核表达载体的构建及其在烟草中的瞬时表达
被引量:
3
2
作者
张亚宁
赵利峰
张乐祎
赵宝华
机构
河北师范大学生命科学学院
出处
《中国兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第10期1473-1477,共5页
基金
国家自然科学基金资助项目(30871880)
文摘
以绵羊肺炎支原体(Mycoplasma oumvipneoniae,MO)标准株Y98基因组为模板,设计1对特异引物,PCR扩增得到798bp的P30目的基因(MOP30),将其定向克隆到pMD19-T Simple载体中进行测序分析。重组质粒进行XbaⅠ/BamHⅠ双酶切并回收目的片段,将目的基因亚克隆入黄色荧光蛋白(yellow fluorescent protein,YFP)表达载体pCAMBIA1300-YFP中构建重组融合表达质粒pCAMBIA1300-MOP30-YFP。双酶切验证后的融合表达质粒转化农杆菌(Agrobacterium)感受态细胞,侵染烟草(tobacco)叶片。通过激光共聚焦成像显微镜(cofocal imagingmicroscope)观察到融合表达的黄色荧光蛋白,Western-blotting试验得到57 000的特异条带,RT-PCR检测到MOP30基因在烟草叶片中转录。MOP30-YFP融合蛋白在烟草中的成功表达,为转基因植物疫苗防治绵羊支原体肺炎奠定了基础。
关键词
绵羊肺炎支原体
MOP30基因
黄色荧光蛋白
真核表达
瞬时表达
转基因植物疫苗
Keywords
mycoplasma
oumvipneoniae
MOP30
yellow
fluorescent
protein
eukaryotic
expression
transient
expression
transgenic
plant
vaccines
分类号
S852.62 [农业科学—基础兽医学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
绵羊肺炎支原体Y98标准株P30外膜蛋白与IFN-γ的融合表达及其免疫原性
张亚宁
刘文青
赵红艳
张乐祎
赵宝华
《中国兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013
3
原文传递
2
绵羊肺炎支原体标准株Y98外膜蛋白MOP30基因真核表达载体的构建及其在烟草中的瞬时表达
张亚宁
赵利峰
张乐祎
赵宝华
《中国兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012
3
原文传递
已选择
0
条
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参考文献
引证文献
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