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支原体通用PCR引物的设计及在诊断的应用 被引量：10
1
作者 尹秋生 马立人 王北宁 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2000年第3期61-62,共2页
目的　快速全面检测感染人体、动物和细胞培养的多种常见支原体。方法　从 12种支原体的 16S与 2 3SrRNA核酸序列中选择了两段高度保守的核酸序列 ,作为支原体通用引物 ,一次PCR扩增就能检测出 12种支原体。结果　用这对通用引物检测了... 目的　快速全面检测感染人体、动物和细胞培养的多种常见支原体。方法　从 12种支原体的 16S与 2 3SrRNA核酸序列中选择了两段高度保守的核酸序列 ,作为支原体通用引物 ,一次PCR扩增就能检测出 12种支原体。结果　用这对通用引物检测了 41份临床标本 ,16份细胞培养物和 2 0只大白鼠 ,阳性率分别为 14 6 %、 43 7%和 2 0 0 %。结论　用通用引物检测支原体具有覆盖面广、检测种数多、不易发生漏检等优点。 展开更多
关键词 支原体通用引物 支原体 细胞培养物 pcr
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PCR技术检测猪肺炎支原体的研究进展 被引量：17
2
作者 张旭 白方方 +5 位作者 武昱孜 刘茂军 冯志新 熊祺琰 张映 邵国青 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期54-60,共7页
猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae)是引起猪支原体肺炎的重要病原,该病常引起继发感染和混合感染,严重威胁养猪业发展,造成巨大的经济损失。利用PCR技术对猪支原体肺炎早期正确诊断具有非常重要的意义。从猪肺炎支原体的特异性靶... 猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae)是引起猪支原体肺炎的重要病原,该病常引起继发感染和混合感染,严重威胁养猪业发展,造成巨大的经济损失。利用PCR技术对猪支原体肺炎早期正确诊断具有非常重要的意义。从猪肺炎支原体的特异性靶基因、临床样品采集方法与样品DNA处理方法、关键技术因素及普通PCR技术、多重PCR技术、套式PCR技术、荧光定量PCR技术、芯片检测和环介导等温扩增技术等在猪肺炎支原体检测中的研究进展、主要优缺点及应用进行综述。 展开更多
关键词 猪支原体肺炎 猪肺炎支原体 pcr检测 临床样品采集
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PCR技术在鼠肺支原体检测中应用的初步研究 被引量：1
3
作者 黄冰 陈系古 +4 位作者 林勇 赖小敏 李彩霞 陈颖青 邱国光 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 1999年第2期90-94,共5页
目的　探讨PCR技术在鼠肺支原体检测中的应用,希望能建立一种可行、快速、敏感的检测方法。方法　使用支原体通用引物及鼠肺支原体特异性引物对14 份大鼠喉气管拭子洗液和拭子支原体培养液进行PCR扩增,2 % 琼脂糖电泳鉴定。另设M53 和AT... 目的　探讨PCR技术在鼠肺支原体检测中的应用,希望能建立一种可行、快速、敏感的检测方法。方法　使用支原体通用引物及鼠肺支原体特异性引物对14 份大鼠喉气管拭子洗液和拭子支原体培养液进行PCR扩增,2 % 琼脂糖电泳鉴定。另设M53 和ATCC19612 二株标准鼠肺支原体菌株作阳性对照。结果　通用引物对大鼠喉气管拭子洗液检出率8/14 ,拭子支原体培养液检出率14/14,鼠肺支原体特异引物PCR扩增对大鼠喉气管拭子洗液检出率0/14 ,拭子支原体培养液3/14。通用引物扩增M53 和ATCC19612 二株标准株均呈现阳性,而鼠肺支原体特异引物扩增M53 和ATCC19612,只有M53 呈现阳性。结论　PCR通用引物检测比普通分离培养省时省力,而我们采用国外某学者认为对鼠肺支原体有特异性的引物,是否可用于鼠肺支原体的特异性PCR 检查仍需进一步探讨。 展开更多
关键词 鼠肺 支原体检测 气管 检出率 大鼠 通用引物 支原体培养 特异引物 pcr技术 特异性引物
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绵羊肺炎支原体和精氨酸支原体双重PCR检测方法的建立及应用
4
作者 郑佳琪 黄海碧 +3 位作者 王晓晖 李真亚 邢蒙恩 郝永清 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2015年第9期2240-2245,共6页
为建立绵羊肺炎支原体和精氨酸支原体的双重PCR检测方法,本试验分别设计了绵羊肺炎支原体和精氨酸支原体的特异性引物,优化反应条件后对其特异性和敏感性进行评价,并对40份鼻拭子进行了检测。结果显示,该方法能同时扩增出绵羊肺炎支原体... 为建立绵羊肺炎支原体和精氨酸支原体的双重PCR检测方法,本试验分别设计了绵羊肺炎支原体和精氨酸支原体的特异性引物,优化反应条件后对其特异性和敏感性进行评价,并对40份鼻拭子进行了检测。结果显示,该方法能同时扩增出绵羊肺炎支原体545bp和精氨酸支原体806bp的特异性片段,而对其他病原的DNA扩增均为阴性。该双重PCR方法对绵羊肺炎支原体和精氨酸支原体的最低检测限分别为100和10pg/μL。40份鼻拭子检测结果显示,双重PCR检测方法与分离培养法符合率高达92.5%,均能鉴定出绵羊肺炎支原体和精氨酸支原体。结果表明,本研究建立的双重PCR方法可用于绵羊肺炎支原体和精氨酸支原体的临床快速诊断。 展开更多
关键词 绵羊肺炎支原体 精氨酸支原体 双重pcr
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两种猪肺炎支原体原位杂交检测方法的应用
5
作者 王占伟 熊褀琰 +3 位作者 冯志新 刘茂军 白方方 邵国青 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2012年第11期6-8,I0001,共4页
为了比较研究3种猪肺炎支原体(Mhp)的检测方法,利用已建立的显色原位杂交(CISH)和量子点荧光原位杂交(QD-FISH),并结合PCR方法,检测人工感染Mhp的试验猪、自然感染Mhp的试验猪和疑似感染Mhp的临床样品。结果显示,3种检测方法对人工感染... 为了比较研究3种猪肺炎支原体(Mhp)的检测方法,利用已建立的显色原位杂交(CISH)和量子点荧光原位杂交(QD-FISH),并结合PCR方法,检测人工感染Mhp的试验猪、自然感染Mhp的试验猪和疑似感染Mhp的临床样品。结果显示,3种检测方法对人工感染组和自然感染组的检测率均为100%;对临床样品,PCR的检测率为90%,CISH的检测率为70%,QD-FISH的检测率为75%。结果表明,用于检测Mhp感染,PCR是最佳检测方法,但CISH和QD-FISH在Mhp检测和致病机理研究方面具有一定的应用价值。 展开更多
关键词 猪肺炎支原体 pcr 显色原位杂交 量子点荧光原位杂交
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喘息性疾病支原体感染的研究
6
作者 刘晓平 考军 +2 位作者 王松青 周文丽 代秀琴 《青岛医药卫生》 1995年第7期3-4,共2页
我们应用聚合酶链反应(PCR)技术研究喘息性疾病支原体感染,发现阳性率为37.38％。它提示支原体感染与喘息性疾病发作有关。应当重视喘息性疾病支原体感染的情况。对比PCR和血冷凝集试验两种结果,PCR具有敏感、迅速、特异优点,值得临床... 我们应用聚合酶链反应(PCR)技术研究喘息性疾病支原体感染,发现阳性率为37.38％。它提示支原体感染与喘息性疾病发作有关。应当重视喘息性疾病支原体感染的情况。对比PCR和血冷凝集试验两种结果,PCR具有敏感、迅速、特异优点,值得临床推广应用。 展开更多
关键词 肺炎支原体 儿童 pcr
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一步法PCR检测大鼠肺支原体核酸的研究
7
作者 姚玉霞 丛斌 丁小英 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 1999年第1期61-64,共4页
一步法体外扩增结合Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交检测Ｍ５３鼠肺支原体标准株，设计一对特异寡核苷酸引物及探针，合成、纯化、建立了特异、敏感、快速的检测手段。扩增产物经琼脂糖凝胶电泳鉴定，结果显示鼠肺支原体Ｍ５３株基因组ＤＮＡ７１... 一步法体外扩增结合Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交检测Ｍ５３鼠肺支原体标准株，设计一对特异寡核苷酸引物及探针，合成、纯化、建立了特异、敏感、快速的检测手段。扩增产物经琼脂糖凝胶电泳鉴定，结果显示鼠肺支原体Ｍ５３株基因组ＤＮＡ７１０ｂｐ特异谱带。对５０只ＳＤ大鼠进行检测，结果ＰＣＲ方法检出率高于分离培养法，扩增产物行Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ杂交验证，采用碱性磷酸酶标记寡核苷酸探针，可与膜上特异靶ＤＮＡ序列杂交，而阴性对照无杂交信号。特异性实验检出１０ｐｇ的ＤＮＡ。充分说明一步法ＰＣＲ，具有高度、特异、灵敏、快速等优势，适应与大、小鼠监测中应用。 展开更多
关键词 支原体 鼠肺 SD大鼠 检出率 体外扩增 分离培养法 小鼠 杂交 扩增产物 pcr检测
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类风湿关节炎者解脲脲原体及人型支原体感染
8
作者 陆亚华 《现代实用医学》 2002年第1期15-16,共2页
目的　了解类风湿关节炎患者解脲脲原体和人型支原体感染状况。　方法　自 36例患者的咽部、睑结膜部、泌尿道及血液、关节液采取标本 ,应用nPCR进行解脲脲原体和人型支原体核酸检测。　结果　 36例患者中有 11例至少 1个部位检出 1种... 目的　了解类风湿关节炎患者解脲脲原体和人型支原体感染状况。　方法　自 36例患者的咽部、睑结膜部、泌尿道及血液、关节液采取标本 ,应用nPCR进行解脲脲原体和人型支原体核酸检测。　结果　 36例患者中有 11例至少 1个部位检出 1种支原体 ,占 30 .6 % ,其中泌尿道、咽、睑结膜、血液的阳性检出率依次分别为 38.5 %、17.2 %、9.1%和 3.4 %。　结论　类风湿关节炎患者多部位存在支原体感染 。 展开更多
关键词 类风湿关节炎 人型支原体 套式pcr 解脲脲原体
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