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噬菌体生物扩增法快速检测结核分枝杆菌方法学研究 被引量：62
1
作者 胡忠义 倪莲娣 +4 位作者 靳安佳 董惠贤 钟敏 李建农 翁心华 《中华结核和呼吸杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第12期801-805,共5页
目的　建立噬菌体生物扩增法快速检测结核分枝杆菌试验方法 ,探讨最佳检测条件。方法　应用分枝杆菌噬菌体感染结核分枝杆菌 ,比较各种检测条件对测定结果的影响 ,并将所建方法用于痰标本检测 ,结果与BIOTECLab公司产品比较。结果　 1&#... 目的　建立噬菌体生物扩增法快速检测结核分枝杆菌试验方法 ,探讨最佳检测条件。方法　应用分枝杆菌噬菌体感染结核分枝杆菌 ,比较各种检测条件对测定结果的影响 ,并将所建方法用于痰标本检测 ,结果与BIOTECLab公司产品比较。结果　 1× 10 9噬菌斑形成单位 (PFU) /ml的噬菌体 ,37℃感染 6 0min可检出 2 0 0～ 5 0 0条 /ml结核分枝杆菌。杀毒剂 10 0mmol/ml,室温作用 5min可完全灭活受试噬菌体。指示细胞浓度在 1× 10 8条 /ml时 ,形成的噬菌斑清晰 ,便于计数。加热灭活的细菌和指示细胞不被噬菌体感染。H3 7Rv、H3 7Ra和牛分枝杆菌参考菌株检测结果均为阳性 ,7种非分枝杆菌和 16种常见非结核分枝杆菌检测结果为阴性 ,4种非结核分枝杆菌 (偶然、胞内、金色、草分枝杆菌 )在高浓度时 (>1× 10 5条 /ml)检测结果为阳性。重复试验结果表明 ,本法批间和批内变异系数均<15 %。痰标本氢氧化钠 半胱氨酸液化方式的阳性检出率为 94 % (49/ 5 2 ) ,显著高于氢氧化钠液化结果的 6 2 % (32 / 5 2 ,χ2 =15 0 6 ,P <0 0 1) ;预培养 1d的阳性检出率为 6 5 % (5 1/ 78) ,显著高于未预培养结果的 4 0 % (31/ 78,χ2 =18 0 5 ,P <0 0 1)。临床标本检测结果表明 ,我们的试剂与进口试剂检测结果基本相同。结论　噬菌体? 展开更多
关键词 非结核分枝杆菌 噬菌体 检测结果 扩增 快速检测 痰标本 阳性 生物 结论 灵敏
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利用重组分支杆菌噬菌体快速筛选耐利福平结核分支杆菌 被引量：31
2
作者 吕斌 符志军 +3 位作者 徐顺清 陈志飞 李开赏 周宜开 《中华结核和呼吸杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第8期480-484,共5页
目的　采用基因工程技术构建的可表达荧光素酶的结核分支杆菌噬菌体进行结核分支杆菌利福平药敏试验研究 ,建立一种特异、灵敏、快速的利福平药敏试验方法。方法　采用生物发光方法分别检测重组分支杆菌噬菌体对不同细菌在不同浓度利福... 目的　采用基因工程技术构建的可表达荧光素酶的结核分支杆菌噬菌体进行结核分支杆菌利福平药敏试验研究 ,建立一种特异、灵敏、快速的利福平药敏试验方法。方法　采用生物发光方法分别检测重组分支杆菌噬菌体对不同细菌在不同浓度利福平培养基中的发光水平 ,并与罗氏培养基进行药敏试验比较。结果　在不同细菌中 ,噬菌体均特异地对分支杆菌有发光反应 ,分支杆菌的发光值与大肠杆菌相比差异有显著性 ,而大肠杆菌的发光值与阴性对照差异无显著性 (P >0 0 5 ) ;在各分支杆菌中 ,BCG的发光值最高 ,mc15 5次之 ,结核分支杆菌最低。在含利福平的培养基中 ,耐药结核分支杆菌的发光强度比非耐药结核分支杆菌强 ,其强度差异有显著性 (P <0 0 5 ) ;通过对不同浓度利福平进行筛选试验 ,得出最适于利福平药敏试验的利福平浓度为 2 μg/ml;采用该浓度的利福平对结核分支杆菌标准株和临床分离株进行药敏试验 ,结果与罗氏培养法的结果一致。温敏噬菌体Phage88的检测灵敏度在各种分支杆菌中均大于正常噬菌体Phage 40 ,差异有显著性 (P <0 0 5 )。　结论重组噬菌体可特异地检测结核分支杆菌利福平耐药性 ,灵敏度高 ,可在 72h内得到结果 ,Phage 88的效果优于Phage 40 ,采用温敏株可提高检测的灵敏度和特异性。 展开更多
关键词 分支杆菌噬菌体 利福平 药敏试验 结核分支杆菌
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噬菌体生物扩增法快速检测结核分枝杆菌标准化研究 被引量：23
3
作者 彭丽 罗永艾 王国治 《中华结核和呼吸杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第12期806-810,共5页
目的　对噬菌体生物扩增法快速检测和鉴别标本中分枝杆菌的方法学进行探讨。方法　对噬菌体生物扩增法的条件 :感染时间、杀灭胞外噬菌体的药物浓度和时间进行探讨和比较 ;观察不同分枝杆菌应用此法的检测灵敏度和特异性 ,以及对呼吸道... 目的　对噬菌体生物扩增法快速检测和鉴别标本中分枝杆菌的方法学进行探讨。方法　对噬菌体生物扩增法的条件 :感染时间、杀灭胞外噬菌体的药物浓度和时间进行探讨和比较 ;观察不同分枝杆菌应用此法的检测灵敏度和特异性 ,以及对呼吸道常见细菌的特异度 ;观察实验中所用噬菌体、杀菌剂、辅助细菌在 2 8～ 4 0周内的稳定性。结果　 (1)结核分枝杆菌与噬菌体感染 3～ 4h时感染效率较高 ,4 %硫酸亚铁胺 10 0 μl作用 5min能全部杀灭 1 1ml中 1× 10 9噬菌斑形成单位(PFU)的噬菌体 ;(2 ) 80～ 2 0 0集落形成单位 (CFU) /ml的结核分枝杆菌活菌能用此法检测出阳性结果 ,非结核分枝杆菌≤ 1× 10 3 CFU/ml时仅耻垢分枝杆菌出现阳性结果 ,特异性为 95 % ,而≥ 1× 10 4CFU/ml时结果依据不同的菌株而不同 ,呼吸道常见的非分枝杆菌细菌用此法的检测特异性为 10 0 % ;(3)液体 4℃保存实验中的主要成分 ,稳定性均较好。结论　应用噬菌体方法可以快速检测和鉴别结核分枝杆菌 ,所需试剂的稳定性较好 ,为广泛应用于临床检测提供了依据。 展开更多
关键词 噬菌体 结核分枝杆菌 扩增 快速检测 阳性结果 特异性 呼吸道 生物 标准化研究 观察实验
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吡嗪酰胺耐药性结核分枝杆菌的噬菌体检测技术研究 被引量：15
4
作者 敖军平 陈季武 +6 位作者 胡忠义 李建农 王洁 王庆 崔振玲 张文宏 翁心华 《中华结核和呼吸杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第9期625-628,共4页
目的建立噬菌体生物扩增法(PhaB)快速测定吡嗪酰胺耐药性,并探讨其在结核分枝杆菌吡嗪酰胺耐药性测定中的应用价值。方法应用建立的 PhaB 测定108株结核分枝杆菌临床分离株的吡嗪酰胺耐药性,并与绝对浓度法的药敏结果进行比较,对不符合... 目的建立噬菌体生物扩增法(PhaB)快速测定吡嗪酰胺耐药性,并探讨其在结核分枝杆菌吡嗪酰胺耐药性测定中的应用价值。方法应用建立的 PhaB 测定108株结核分枝杆菌临床分离株的吡嗪酰胺耐药性,并与绝对浓度法的药敏结果进行比较,对不符合的菌株进行最低抑菌浓度(MIC)测定和序列测定分析。结果 PhaB 检测吡嗪酰胺耐药性的最佳测定条件为 pH 值5.5、药物浓度200μg/ml、37℃作用48 h。用绝对浓度法检测108株结核分枝杆菌临床分离株,其中吡嗪酰胺敏感33株、耐药75株;用 PhaB 检测该108株结核分枝杆菌临床分离株,若以噬菌斑减少95%为判断标准,则吡嗪酰胺敏感32株,耐药76株。2种方法检测均为敏感的为28株,均为耐药的为71株,符合率为91.7%;2种方法检测结果不符的为9株,其中5株的 PhaB 结果与 MIC 结果相符,4株的结果不符,测序结果表明9株中有7株的 PhaB 结果与测序结果相符。如以绝对浓度法药敏结果为判断标准,PhaB 检测吡嗪酰胺耐药性的敏感性为94.7%,特异性为84.8%,阳性预测值为93.4%,阴性预测值为87.5%,准确性为91.7%。结论 PhaB 测定吡嗪酰胺耐药性简便、快速,3 d 即可获得药敏结果,可作为吡嗪酰胺耐药性的快速筛选方法。 展开更多
关键词 分枝杆菌 结核 微生物敏感性试验 分枝杆菌噬菌体 吡嗪酰胺
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噬菌体生物扩增法快速测定结核分枝杆菌利福平耐药性 被引量：13
5
作者 胡忠义 靳安佳 +4 位作者 陈慧萍 崔振玲 景玲杰 王洁 翁心华 《中华结核和呼吸杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第12期811-814,共4页
目的　建立快速测定结核分枝杆菌利福平耐药性的噬菌体生物扩增法 ,并探讨其在结核分枝杆菌利福平耐药性测定中的应用价值。方法　应用噬菌体生物扩增法测定 5 2 4株结核分枝杆菌利福平耐药性 ,并与绝对浓度法结果进行比较 ,对不符合的... 目的　建立快速测定结核分枝杆菌利福平耐药性的噬菌体生物扩增法 ,并探讨其在结核分枝杆菌利福平耐药性测定中的应用价值。方法　应用噬菌体生物扩增法测定 5 2 4株结核分枝杆菌利福平耐药性 ,并与绝对浓度法结果进行比较 ,对不符合的菌株采用BactecMGIT 96 0测定其最低抑菌浓度 (MIC)。结果　噬菌体法测定 5 2 4株结核分枝杆菌临床分离株利福平敏感 30 1株、耐药 2 2 3株 ,绝对浓度法敏感 313株、耐药 2 11株 ;两法测定均为敏感 2 88株、均为耐药 198株。在 38株噬菌体法与绝对浓度法测定结果不符的菌株中 ,35株噬菌体法与MIC测定结果相符合。如以绝对浓度法药敏结果为判断标准 ,则噬菌体法测定利福平耐药性的敏感性为 93 8%、特异性为 92 0 %、阳性预测值为88 8%、阴性预测值为 95 7%、准确性为 92 7%。结论　噬菌体生物扩增法测定利福平耐药性只需 2天时间 ,操作简便 ,不需特殊仪器设备 ,可作为结核分枝杆菌利福平耐药性的快速筛选方法。 展开更多
关键词 利福平 结核分枝杆菌 耐药性 噬菌体 扩增 测定结果 药敏结果 生物 敏感 结论
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利用噬菌体杀灭巨噬细胞内耻垢分枝杆菌的实验研究 被引量：9
6
作者 彭丽 陈保文 +3 位作者 罗永艾 沈小兵 黎友伦 王国治 《中华结核和呼吸杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第9期619-622,共4页
目的探讨噬菌体能否杀灭巨噬细胞内耻垢分枝杆菌,并成为减少细胞内活菌量的手段。方法将体外培养的已感染耻垢分枝杆菌的小鼠腹腔巨噬细胞随机分为4组生理盐水组,噬菌体高剂量组、中剂量组和低剂量组。分别加入生理盐水0.1ml、10#噬菌体... 目的探讨噬菌体能否杀灭巨噬细胞内耻垢分枝杆菌,并成为减少细胞内活菌量的手段。方法将体外培养的已感染耻垢分枝杆菌的小鼠腹腔巨噬细胞随机分为4组生理盐水组,噬菌体高剂量组、中剂量组和低剂量组。分别加入生理盐水0.1ml、10#噬菌体2.1×107噬菌斑形成单位(PFU)、2.1×106PFU和2.1×105PFU。通过洗涤去除细胞外的噬菌体与耻垢分枝杆菌,观察加入噬菌体24h后巨噬细胞内耻垢分枝杆菌活菌数量变化情况。并在电子显微镜下观察巨噬细胞吞噬噬菌体前后胞内改变情况。结果24h后生理盐水组巨噬细胞内活菌数的对数值为5.74±0.18,噬菌体高、中、低剂量组的活菌数对数值分别为4.77±0.08、4.97±0.17、5.33±0.13。生理盐水组的活菌数高于噬菌体高、中、低剂量组,其中生理盐水组与噬菌体高、中剂量组之间比较差异有统计学意义(P<0.01)。高、中剂量组间差异无统计学意义(P>0.05),高、低剂量组间差异有统计学意义(P<0.01)。电子显微镜显示噬菌体能感染细胞内的耻垢分枝杆菌,合成子代噬菌体。结论感染了分枝杆菌的巨噬细胞可以同时吞噬10#噬菌体,进入细胞内的噬菌体能感染裂解胞内分枝杆菌使活菌量减少,使噬菌体治疗分枝杆菌感染成为可能。 展开更多
关键词 噬菌体 巨噬细胞 分枝杆菌 细胞耻垢 电子显微镜
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噬菌体生物扩增法、DNA序列分析及单链构象多态性分析检测结核分枝杆菌耐药性 被引量：7
7
作者 韩喜琴 马玙 +5 位作者 高微微 李传友 陈效友 张宗德 古书香 姜广路 《中华结核和呼吸杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第12期815-819,共5页
目的　探讨和评价噬菌体生物扩增技术 (phageamplifiedbiologicallyassay,PhaB)用于检测结核分枝杆菌耐药性的应用价值。方法　本研究共选取了 91株利福平 (RFP)耐药株 (其中 82株为耐多药结核分枝杆菌 )、4 2株RFP敏感株、75株氧氟沙星... 目的　探讨和评价噬菌体生物扩增技术 (phageamplifiedbiologicallyassay,PhaB)用于检测结核分枝杆菌耐药性的应用价值。方法　本研究共选取了 91株利福平 (RFP)耐药株 (其中 82株为耐多药结核分枝杆菌 )、4 2株RFP敏感株、75株氧氟沙星 (OFLX)耐药株、4 0株OFLX敏感株 ,应用PhaB、DNA序列分析法和聚合酶链反应 单链构象多态性分析 (PCR SSCP) 3种检测方法 ,同时对同一菌株应用该 3种方法进行耐药性检测 ,以资分析与评价PhaB法的临床应用价值。结果　以绝对浓度法药敏试验结果为标准 ,检测RFP的药物敏感性 ,PhaB法的准确性为 93% ,敏感性为 92 % ,特异性为95 % ;DNA序列分析法的准确性为 93% ,敏感性为 90 % ,特异性为 10 0 % ;PCR SSCP法的准确性为90 % ,敏感性为 86 % ,特异性为 10 0 %。检测OFLX(OFLX)的药物敏感性 ,PhaB的准确性为 95 % ,敏感性为 95 % ,特异性为 95 % ;DNA序列分析法的准确性为 80 % ,敏感性为 71% ,特异性为 98% ;而PCR SSCP法的准确性为 75 % ,敏感性为 6 3% ,特异性为 98%。结论　PhaB法是一种操作简便、快速、敏感、与绝对浓度法符合率高的结核分枝杆菌耐药性检测方法 ,在 4 8～ 96h内可获得试验结果 ,具有良好的临床应用前景。 展开更多
关键词 DNA序列分析 特异性 结核分枝杆菌 敏感性 耐药性检测 耐药株 敏感株 生物 准确性 结论
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噬菌体生物扩增法快速检测结核分枝杆菌的临床应用 被引量：7
8
作者 陈俊林 顾德林 孙中德 《临床荟萃》 CAS 北大核心 2005年第18期1034-1036,共3页
目的探讨噬菌体生物扩增法(Phab)快速检测结核分枝杆菌的临床应用价值。方法应用Phab、BACTEC-460检测仪及厚涂片法共同检测206例痰标本。结果58例涂片阳性、BACTEC-460培养阳性的标本中,Phab检测阳性55例(94.8%);47例涂片阴性、BACTEC-... 目的探讨噬菌体生物扩增法(Phab)快速检测结核分枝杆菌的临床应用价值。方法应用Phab、BACTEC-460检测仪及厚涂片法共同检测206例痰标本。结果58例涂片阳性、BACTEC-460培养阳性的标本中,Phab检测阳性55例(94.8%);47例涂片阴性、BACTEC-460培养阳性的标本中,Phab检测阳性35例(74.4%);101例涂片阴性、BACTEC-460培养阴性的标本中,Phab检测阳性25例(24.8%)。结论Phab快速、简便、灵敏,有助于结核分枝杆菌的快速检测,可用于结核病的初步诊断,但测定条件的选择非常重要。 展开更多
关键词 分枝杆菌噬菌体 分枝杆菌 结核 快速检测
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分枝杆菌噬菌体基因组学研究概况
9
作者 刘珂君 张海鹏 王鹏 《中国防痨杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第10期1283-1292,共10页
分枝杆菌感染给全球带来了很大的健康负担,尤其是耐多药结核病(MDR-TB)对公共卫生和卫生安全的威胁,寻找一种有效对抗分枝杆菌感染的方法成为亟待解决的问题。分枝杆菌噬菌体是特异性感染分枝杆菌的病毒,可以通过裂解宿主菌导致其死亡... 分枝杆菌感染给全球带来了很大的健康负担,尤其是耐多药结核病(MDR-TB)对公共卫生和卫生安全的威胁,寻找一种有效对抗分枝杆菌感染的方法成为亟待解决的问题。分枝杆菌噬菌体是特异性感染分枝杆菌的病毒,可以通过裂解宿主菌导致其死亡。目前,大量的分枝杆菌噬菌体已被分离和完成全基因组测序,可以帮助我们深入了解噬菌体的遗传多样性和基因组结构,并推动其应用和发展。因此,本文综述了分枝杆菌噬菌体基因组学的一般特征及基因功能与表达,以提供分枝杆菌噬菌体治疗新思路。 展开更多
关键词 分枝杆菌感染 分枝杆菌噬菌体 基因组学 基因表达 综述文献(主题)
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分枝杆菌噬菌体的研究现状及应用进展 被引量：1
10
作者 杜毓 张海鹏 王鹏 《中国防痨杂志》 CAS CSCD 2023年第9期897-903,共7页
结核病、麻风病、布鲁里溃疡等一系列分枝杆菌感染性疾病已成为亟待解决的严峻问题,然而耐药分枝杆菌的出现,加剧了临床领域对此类疾病治疗的困难。分枝杆菌噬菌体在分枝杆菌感染引起疾病的诊断与治疗中逐渐彰显出巨大的潜力。笔者对分... 结核病、麻风病、布鲁里溃疡等一系列分枝杆菌感染性疾病已成为亟待解决的严峻问题,然而耐药分枝杆菌的出现,加剧了临床领域对此类疾病治疗的困难。分枝杆菌噬菌体在分枝杆菌感染引起疾病的诊断与治疗中逐渐彰显出巨大的潜力。笔者对分枝杆菌噬菌体的表型、基因组学及其应用现状等进行归纳总结,为分枝杆菌噬菌体进一步的研究和临床应用提供参考。 展开更多
关键词 分枝杆菌感染 抗药性 分枝杆菌噬菌体 综述文献(主题)
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噬菌体生物扩增法检测痰结核分枝杆菌的临床研究 被引量：4
11
作者 于秀丽 王秋月 +3 位作者 李艳玲 邢勇 侯刚 康健 《中国实用内科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第21期1697-1699,共3页
目的评价噬菌体生物扩增(PhaB)法检测痰中结核分枝杆菌的应用价值。方法分别应用PhaB法、直接涂片法、集菌涂片法和BACTECMGIT960快速培养法检测2005年8月至10月沈阳市胸科医院53例疑诊肺结核患者痰标本中结核分枝杆菌,并对检测结果进... 目的评价噬菌体生物扩增(PhaB)法检测痰中结核分枝杆菌的应用价值。方法分别应用PhaB法、直接涂片法、集菌涂片法和BACTECMGIT960快速培养法检测2005年8月至10月沈阳市胸科医院53例疑诊肺结核患者痰标本中结核分枝杆菌,并对检测结果进行比较。结果PhaB法、直接涂片法、集菌涂片法、BACTECMGIT960快速培养法检出阳性标本数分别为24,11,17和22份;以培养结果为评价标准,PhaB法的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值分别为86.4%,83.9%,79.2%和89.7%;集菌涂片法和PhaB法联合检测的敏感性为90.9%,特异性为83.9%,阳性、阴性预测值分别为80.0%和92.9%。结论PhaB法检测痰中结核菌操作简便,具有较高的敏感性和特异性,可作为临床结核分枝杆菌的快速检测方法;PhaB法联合集菌涂片法进行检测可进一步提高敏感性,减少漏诊率。 展开更多
关键词 分枝杆菌 结核 分枝杆菌噬菌体
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四种方法检测结核分枝杆菌耐药性结果的比较及方法评价 被引量：4
12
作者 王庆 金玉莲 +3 位作者 李建农 柴华 孙道霞 包训迪 《中华传染病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第11期690-694,共5页
目的比较噬菌体生物扩增法(PhaB)及分枝杆菌快速侦测系统(BacT—ALERT)测定结核杆菌(MTB)药物敏感度结果,研究其临床应用价值。方法应用PhaB、BacT-AIERT检测200株MTB对异烟肼(INH)、链霉素(SM)、乙胺丁醇(EMB)和利福平(RFP)的耐药性,... 目的比较噬菌体生物扩增法(PhaB)及分枝杆菌快速侦测系统(BacT—ALERT)测定结核杆菌(MTB)药物敏感度结果,研究其临床应用价值。方法应用PhaB、BacT-AIERT检测200株MTB对异烟肼(INH)、链霉素(SM)、乙胺丁醇(EMB)和利福平(RFP)的耐药性,并以传统的耐药性测定方法作为金标准,评价其敏感度、特异度和准确度。结果以绝对浓度法结果为判断标准:PhaB检测INH的敏感度、特异度和准确度分别为95.2%、88.3%和89.0%,检测SM的敏感度、特异度和准确度分别为95.1%、97.5%和98.0%.检测EMB的敏感度、特异度和准确度分别为100.0%、94.4%和94.5%,检测RFP的敏感度、特异度和准确度分别为95.7%、97.4%和97.0%;BacT- ALERT检测INH的敏感度、特异度和准确度分别为100.0%、97.2%和97.5%,检测SM的敏感度、特异度和准确度分别为92.7%、94.3%和94.0%,检测EMB的敏感度、特异度和准确度分别为100.0%、99.4%和99.5%。检测RFP敏感度、特异度和准确度分别为87.0%、93.5%和92.5%。以比例法结果为判断标准:PhaB检测INH的敏感度、特异度和准确度分别为58.3%、99.4%和94.5%,检测SM的敏感度、特异度和准确度分别为88.1%、96.8%和95.0%,检测EMB的敏感度、特异度和准确度分别为100.0%、94.4%和94.5%,检测RFP敏感度、特异度和准确度分别为88.0%、96.7%和94.5%。BacT—ALERT检测INH的敏感度、特异度和准确度分别为83.3%、97.7%和95.5%,检测SM的敏感度、特异度和准确度分别为88.1%、94.9%和93.5%,检测EMB的敏感度、特异度和准确度分别为100.0%、98.8%和99.0%,检测RFP敏感度、特异度和准确度分别为78.0%、96.0%和91.5%。结论PhaB法和BacT—ALERT法俭测MTB耐药性均具有较高的敏感度、特异度和准确度,可作为MTB耐药性的快速检测方法。 展开更多
关键词 分枝杆菌 结核 分枝杆菌噬菌体 抗药性 细菌 微生物敏感性试验
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高强度荧光分枝杆菌噬菌体φ2GFP10检测结核分枝杆菌对抗结核药物耐药性的价值 被引量：3
13
作者 罗晶晶 于霞 +4 位作者 马异峰 赵立平 尚媛媛 付育红 黄海荣 《中华结核和呼吸杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第10期755-759,共5页
目的 探讨高强度荧光分枝杆菌噬菌体φ2 GFP10检测MTB对抗结核药物耐药性的价值.方法 选取北京胸科医院2014年4-6月疑诊耐药结核病患者的MTB临床分离株128株,用φ2GFP10噬菌体法测定其对异烟肼、利福平和链霉素的敏感度,并以罗氏药敏试... 目的 探讨高强度荧光分枝杆菌噬菌体φ2 GFP10检测MTB对抗结核药物耐药性的价值.方法 选取北京胸科医院2014年4-6月疑诊耐药结核病患者的MTB临床分离株128株,用φ2GFP10噬菌体法测定其对异烟肼、利福平和链霉素的敏感度,并以罗氏药敏试验结果为对照评价其诊断价值.采用SPSS 17.0软件绘制荧光酶标仪法的受试者工作曲线,并确定临界值.结果 φ2 GFP10荧光噬菌体法检测异烟肼、利福平和链霉素的敏感度分别为100.0％（62/62）、98.1％ （53/54）和92.6％ （50/54）,特异度分别为84.8％ （56/66）、91.9％（68/74）和91.9％（68/74）.噬菌体法和传统检测方法对异烟肼、利福平和链霉素耐药性检测的一致性分别为0.92、0.95和0.92.噬菌体法检测利福平和链霉素的耐药性2d即可获得结果,而异烟肼为3d.结论 φ2 GFP10噬菌体法检测利福平、异烟肼和链霉素耐药的敏感度和特异度较高,且耗时短、成本低,有望成为一种快速、简便、经济的耐药结核病筛选方法. 展开更多
关键词 分枝杆菌 结核 分枝杆菌噬菌体
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噬菌体生物扩增技术在结核分枝杆菌药敏检测中的应用 被引量：2
14
作者 黄文焰 郑军 +3 位作者 李静宇 曾绍艺 谢育琴 伦秀红 《热带医学杂志》 CAS 2009年第2期182-184,共3页
目的探讨噬菌体生物扩增技术(PhaB)在结核分枝杆菌(MTB)耐药研究中的应用价值。方法应用PhaB法同时测定233株结核分枝杆菌分离株对异烟肼(INH)、链霉素(SM)、利福平(RFP)及左旋氧氟沙星(LEV)的耐药性,并用改良罗氏培养法(LJ)做对照,比... 目的探讨噬菌体生物扩增技术(PhaB)在结核分枝杆菌(MTB)耐药研究中的应用价值。方法应用PhaB法同时测定233株结核分枝杆菌分离株对异烟肼(INH)、链霉素(SM)、利福平(RFP)及左旋氧氟沙星(LEV)的耐药性,并用改良罗氏培养法(LJ)做对照,比较两种方法的检测结果。结果PhaB法检测INH、SM、RFP、LEV的药敏结果与改良罗氏培养法药敏结果相比符合率分别为97.4%、96.6%、95.3%、96.9%。同时检出耐多药菌株26株,占11.1%。结论PhaB法能快速进行结核分枝杆菌的药敏检测并与金标法LJ符合率高,可作为基层结防单位MTB耐药性的快速筛选方法。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 分枝杆菌噬菌体 微生物药物敏感性试验
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噬菌体生物扩增法早期诊断女性生殖器结核的临床研究 被引量：3
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作者 刘宝瑛 李艳 +3 位作者 郑磊 钟梅 余艳红 熊梦舟 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第7期1313-1314,共2页
目的探讨应用噬菌体生物扩增法(噬菌体法)检测白带中的结核分枝杆菌在早期诊断女性生殖器结核的临床价值。方法选择2005年1月-2007年9月间我院收治的86例病理确诊为女性生殖器结核的病人。所有病例在治疗前应用噬菌体法检测白带中的分... 目的探讨应用噬菌体生物扩增法(噬菌体法)检测白带中的结核分枝杆菌在早期诊断女性生殖器结核的临床价值。方法选择2005年1月-2007年9月间我院收治的86例病理确诊为女性生殖器结核的病人。所有病例在治疗前应用噬菌体法检测白带中的分枝杆菌,同时白带分别送检荧光定量PCR、涂片和培养检测分枝杆菌,对照检查结果。结果86例患者中噬菌体法45例阳性,阳性率52.3%,特异性为100%,PCR的阳性率为23.3%,假阳性率为20%;培养法5例阳性,阳性率5.8%;涂片法全部阴性。噬菌体法明显高于涂片和培养法(P<0.01)。结论噬菌体生物扩增法在诊断女性生殖器结核中具有较高的敏感性和特异性,为早期诊断女性生殖器结核提供重要的临床价值。 展开更多
关键词 女性生殖器结核 分枝杆菌噬菌体 分枝杆菌
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女性生殖器结核早期诊断的研究 被引量：2
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作者 刘宝瑛 黎燕琼 +6 位作者 李艳 邓惠娟 邓国华 黄晓进 廖春信 钟梅 余艳红 《临床肺科杂志》 2010年第2期201-202,共2页
目的探讨应用噬菌体生物扩增法（噬菌体法）和用TMA（Transcription Mediated Amplificatong转录酶主导基因）扩增法检测白带中的结核分枝杆菌在早期诊断女性生殖器结核的临床价值。方法2005年1月～2008年3月间我院收治的98例病理确诊... 目的探讨应用噬菌体生物扩增法（噬菌体法）和用TMA（Transcription Mediated Amplificatong转录酶主导基因）扩增法检测白带中的结核分枝杆菌在早期诊断女性生殖器结核的临床价值。方法2005年1月～2008年3月间我院收治的98例病理确诊为女性生殖器结核的病人。所有病例在治疗前应用噬菌体法和TMA检测白带中的分枝杆菌，同时白带分别送检荧光定量聚合酶链反应（PCR）、涂片和培养检测分枝杆菌，对照检查结果。结果98例患者中噬菌体法52例阳性，阳性率53．06％，特异性为100％；TMA法阳性50例，阳性率51．02％；PCR21例阳性，阳性率为21．42％；培养法5例阳性，阳性率5．1％；涂片法全部阴性。噬菌体法和TMA明显高于涂片和培养法（P〈0．01）。结论噬菌体生物扩增法和TMA在诊断女性生殖器结核中具有较高的敏感性和特异性，为早期诊断女性生殖器结核提供重要的临床价值。 展开更多
关键词 女性生殖器结核 分枝杆菌噬菌体 转录酶主导基因扩增法 分枝杆菌 诊断技术和方法
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结核分枝杆菌噬菌体法直接药敏试验的临床应用 被引量：1
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作者 崔幸琨 田艳生 +4 位作者 杨宝财 孙莉 李红光 王江勇 张卫 《临床荟萃》 CAS 2010年第6期485-488,F0002,共5页
目的探讨噬菌体微孔纸片法直接检测痰标本中结核分枝杆菌(MTB)及其对4种抗结核药物耐药性的临床应用价值。方法用噬菌体微孔纸片法检测215例痰标本中的MTB,同时检测其对链霉素、异烟肼、利福平和乙胺丁醇的耐药性。MTB检测结果与改良罗... 目的探讨噬菌体微孔纸片法直接检测痰标本中结核分枝杆菌(MTB)及其对4种抗结核药物耐药性的临床应用价值。方法用噬菌体微孔纸片法检测215例痰标本中的MTB,同时检测其对链霉素、异烟肼、利福平和乙胺丁醇的耐药性。MTB检测结果与改良罗氏培养法、噬菌体生物扩增法(PhaB法)结果进行比较,药敏试验结果与比例法、PhaB法结果进行比较。结果①微孔纸片法的MTB检测阳性率33.0%,改良罗氏培养法32.8%,PhaB法34.8%。以改良罗氏培养法结果为评价标准,微孔纸片法检测MTB的敏感度92.5%,特异度为94.9%,准确度94.1%,阳性预测值(PPV)为89.9%,阴性预测值(NPV)为96.3%。②微孔纸片法直接药敏试验成功率21.5%,涂阳痰标本成功率73.8%,均为痰菌(++)及以上标本。以比例法药敏结果为评价标准,微孔纸片法检测MTB对4种药物耐药性的敏感度、特异度、PPV、NPV和准确度分别为:(链霉素)91.7%、90.9%、78.6%、96.8%和91.1%;(异烟肼)86.7%、96.7%、92.9%、93.5%和93.3%;(利福平)89.5%、91.7%、85.0%、94.3%和88.9%;(乙胺丁醇)87.5%、86.2%、77.8%、92.6%和88.9%。结论微孔纸片法直接检测痰标本中MTB及其耐药性快速、简便、价廉,且观察结果直观,不需特殊仪器设备,适于基层医院推广应用。 展开更多
关键词 分枝杆菌 结核 分枝杆菌噬菌体 微生物药敏性试验
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噬菌体生物扩增法测定痰标本结核分枝杆菌利福平耐药性 被引量：1
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作者 谭耀驹 陈虹 +1 位作者 蔡杏珊 姜永玮 《热带医学杂志》 CAS 2008年第11期1141-1143,共3页
目的建立快速测定痰标本中结核分枝杆菌利福平(RFP)耐药性的噬菌体生物扩增法,探讨其在临床应用的可行性。方法噬菌体生物扩增法测定362份涂阳痰标本结核分枝杆菌对RFP的耐药性,并与罗氏绝对浓度法结果进行比较,对不符合的样本,用基因... 目的建立快速测定痰标本中结核分枝杆菌利福平(RFP)耐药性的噬菌体生物扩增法,探讨其在临床应用的可行性。方法噬菌体生物扩增法测定362份涂阳痰标本结核分枝杆菌对RFP的耐药性,并与罗氏绝对浓度法结果进行比较,对不符合的样本,用基因芯片的方法分析rpoB基因的突变情况。结果362份涂阳痰标本,培养阳性360份,菌种初步鉴定有17份样本为非结核分枝杆菌,噬菌体生物扩增法RFP耐药为123份,敏感的196份,两法结果一致的为88.6,如以绝对浓度法药敏结果为标准,则噬菌体生物扩增法测定利福平耐药的敏感性为93.3,特异性为87.9,阴性预测值为96.4,阳性预测值为78.9,准确性为89.7,涂阳等级(1+～3+)与实验的有效性相关。结论噬菌体生物扩增法测定痰标本利福平的耐药性只需2d,可作为快速筛选方法应用于临床。 展开更多
关键词 分枝杆菌 结核 分枝杆菌噬菌体 微生物敏感性试验 利福平
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应用于结核病治疗的分枝杆菌噬菌体D29的免疫原性研究
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作者 杨文慧 温占波 +6 位作者 李劲松 胡凌飞 于龙 刘克洋 王洁 李娜 董晓凯 《中华传染病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期81-84,共4页
目的观察分枝杆菌噬菌体D29采用不同给药途径在豚鼠模型中的免疫原性，为噬菌体应用于结核病治疗奠定基础。方法Hartley豚鼠分别以吸入、滴鼻、皮下注射3种途径分组，在35d内给予分枝杆菌噬菌体D296次，设7H9培养基溶剂为对照组和0．85... 目的观察分枝杆菌噬菌体D29采用不同给药途径在豚鼠模型中的免疫原性，为噬菌体应用于结核病治疗奠定基础。方法Hartley豚鼠分别以吸入、滴鼻、皮下注射3种途径分组，在35d内给予分枝杆菌噬菌体D296次，设7H9培养基溶剂为对照组和0．85％氯化钠溶液为阴性对照组，通过噬斑减少中和实验（PRNT）检测每周豚鼠血清的中和抗体效价，通过ELISA测定第35天血清中IL-2、IL4、IFN-7水平。统计学处理采用方差分析和非参数检验。结果两对照组均未测出中和抗体；吸入组和滴鼻组仅在第7、14天检出-过性低效价中和抗体（〈1：100）；皮下注射组持续产生中和抗体，第35天效价高达1：16365．6。给予分枝杆菌噬菌体D2935d后，各实验组及对照组豚鼠血清中IL-2（X^2-2．7605，P〉0．05）、IL-4（F-2．17，P〉0．05）、IFN-γ（F=0．75，P〉0．05）浓度均差异无统计学意义。结论吸人、滴鼻给药产生的抗噬菌体D29中和抗体效价明显低于皮下注射给药；噬菌体D29未引起细胞因子浓度的变化，提示不会破坏机体Thl／Th2免疫平衡。 展开更多
关键词 分枝杆菌噬菌体 结核 生物因子 注射 皮下 疾病模型 动物
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噬菌体生物扩增法环节中最佳感染时间的探讨
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作者 彭丽 罗永艾 +1 位作者 沈小兵 王国治 《中华检验医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期367-371,共5页
目的探讨影响噬菌体生物扩增法检出结核分枝杆菌敏感性的关键环节，即最佳感染时间。方法观察噬菌体生物扩增法中噬菌体1）29分别感染结核分枝杆菌0．0．5、1、1．5、2、3、4、5、6和8h对噬菌斑数量的影响。并且在电镜下直接观察噬菌体... 目的探讨影响噬菌体生物扩增法检出结核分枝杆菌敏感性的关键环节，即最佳感染时间。方法观察噬菌体生物扩增法中噬菌体1）29分别感染结核分枝杆菌0．0．5、1、1．5、2、3、4、5、6和8h对噬菌斑数量的影响。并且在电镜下直接观察噬菌体D29与结核分枝杆菌和耻垢分枝杆菌中共同孵育0、15、30、60、90、120、180、240、360min时，噬菌体的吸附、感染和增殖情况。综合上述两种方法结果确定噬菌体生物扩增法环节中的最佳感染时间。结果噬菌体感染结核分枝杆菌3—4h时，噬菌斑形成数量达到高峰[（321±2．65）PFU]，4h后噬菌斑开始出现下降，5h时噬菌斑数为（300±5．62）PFU。在电镜下直接观察到噬菌体I）29与耻垢分枝杆菌接触15rain后，即开始吸附耻垢分枝杆菌，3h后完成子代噬菌体的合成。噬菌体D29与结核分枝杆菌接触3～4h时吸附感染部分结核分枝杆菌，6h后完成子代噬菌体合成。结论采用噬菌体生物扩增法检测标本中结核分枝杆菌需要多个环节，并且可以同时检测大量标本，为提高检测的敏感性以3h作为感染时间最为恰当。 展开更多
关键词 分枝杆菌噬菌体 分枝杆菌 结核 时间
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