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分枝杆菌噬菌体生物学特性探讨 被引量：5
1
作者 彭丽 罗永艾 +1 位作者 沈小兵 王国治 《微生物学免疫学进展》 2005年第1期19-23,共5页
为了确定不同分枝杆菌噬菌体的宿主菌以及扩增方法和最佳保存方法,观察了七种分枝杆菌噬菌体对结核分枝杆菌、耻垢分枝杆菌的裂解情况,并分别于感染后 24、48小时采用离心 过滤、孵育 过滤方法收集噬菌体比较扩增效率,采用不同稳定剂对... 为了确定不同分枝杆菌噬菌体的宿主菌以及扩增方法和最佳保存方法,观察了七种分枝杆菌噬菌体对结核分枝杆菌、耻垢分枝杆菌的裂解情况,并分别于感染后 24、48小时采用离心 过滤、孵育 过滤方法收集噬菌体比较扩增效率,采用不同稳定剂对分枝杆菌噬菌体进行液体和冻干保存,在不同时间段采用琼脂双层法检测其效价。结果显示:①D29分枝杆菌噬菌体能同时较高效地裂解结核分枝杆菌和耻垢分枝杆菌;②感染 48小时后采用孵育 过滤方法收集的噬菌体效价高,方法简单;③液体 4℃保存的噬菌体稳定性好, 70℃液体保存和冻干后 4℃、室温、37℃保存依据不同稳定剂而相差较大。因此,在 48小时后采用孵育 过滤方法收集噬菌体具有高效率特性并且简单易行,噬菌体液体 4℃保存简单、有效,值得推荐。 展开更多
关键词 噬菌体 稳定剂 结核分枝杆菌 耻垢分枝杆菌
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用Phage88快速检测结核分枝杆菌 被引量：3
2
作者 吕斌 徐顺清 +3 位作者 周宜开 陈志飞 符志军 李开赏 《疾病控制杂志》 CAS 2000年第1期23-26,共4页
目的　建立一种特异性强、灵敏度高的致病性分枝杆菌的检测及药敏试验方法。方法　应用可表达荧光素酶的结核分枝杆菌噬菌体 Phage88,采用生物发光方法对不同细菌的发光反应和药敏试验进行检测。结果　 Phage88特异地对各种分枝杆菌发... 目的　建立一种特异性强、灵敏度高的致病性分枝杆菌的检测及药敏试验方法。方法　应用可表达荧光素酶的结核分枝杆菌噬菌体 Phage88,采用生物发光方法对不同细菌的发光反应和药敏试验进行检测。结果　 Phage88特异地对各种分枝杆菌发光 ,对非分枝杆菌发光值很低 ,两者差异有显著性 ,不同的分枝杆菌发光值有差异 :卡介苗的发光值最高 ,结核杆菌的发光值最低 ;在含抗结核药物的培养基中 ,耐药结核杆菌的发光强度比非耐药结核杆菌强 ,其强度有明显差异。结论　用 Phage88噬菌体检测结核分枝杆菌是一种快速、敏感的检测和药敏试验方法。 展开更多
关键词 phage88噬菌体 结核分枝杆菌 检测
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分枝杆菌噬菌体重组体TM4-RpfE的构建
3
作者 杜丽娟 杨婷 +4 位作者 徐莉 邢爱英 刘忠泉 张宗德 郭述良 《上海交通大学学报（医学版）》 CSCD 北大核心 2017年第7期930-935,共6页
目的·构建分枝杆菌噬菌体(TM4)与复苏促进因子(Rpf)的重组体(TM4-RpfE),为联合抗结核药物实现杀灭结核休眠菌、缩短结核化疗疗程奠定实验基础。方法·电转化法将pJV53质粒转入耻垢分枝杆菌,制备重组工程菌;提取TM4基因组DNA;重... 目的·构建分枝杆菌噬菌体(TM4)与复苏促进因子(Rpf)的重组体(TM4-RpfE),为联合抗结核药物实现杀灭结核休眠菌、缩短结核化疗疗程奠定实验基础。方法·电转化法将pJV53质粒转入耻垢分枝杆菌,制备重组工程菌;提取TM4基因组DNA;重叠PCR扩增目的融合基因hsp60-RpfE,多步重叠PCR扩增插入长片段HHRH(homologous+hsp60-RpfE+homologous);电转化法将噬菌体DNA与插入长片段HHRH共同转入重组工程菌,挑取单噬菌斑进行PCR和测序验证;SDS-PAGE分析重组噬菌体的蛋白表达。结果·重叠PCR扩增出全长901 bp大小的目的融合基因hsp60-RpfE和1 873 bp大小的插入长片段HHRH;PCR验证重组后的噬菌斑,分别在955 bp和301 bp处出现特异性条带;SDS-PAGE分析显示重组型噬菌体在21 000处出现特异性蛋白条带。结论·分枝杆菌噬菌体重组体TM4-RpfE构建成功,初步验证目的基因RpfE得到表达。 展开更多
关键词 分枝杆菌噬菌体 噬菌体重组 RpfE pJV53质粒 潜伏结核感染
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