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季节变化对仿刺参Toll样受体信号通路基因表达的影响
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作者 肖瑶 高杉 +2 位作者 赵泽龙 蒋经伟 周遵春 《水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期520-530,共11页
为探明季节变化对仿刺参先天性免疫系统中的重要免疫通路——Toll样受体(TLR)信号通路相关基因表达的影响,2018年1—12月,每月中旬从辽宁省海洋水产科学研究院引育种中心的仿刺参单养池塘采集仿刺参样品9只,通过实时荧光定量PCR技术测... 为探明季节变化对仿刺参先天性免疫系统中的重要免疫通路——Toll样受体(TLR)信号通路相关基因表达的影响,2018年1—12月,每月中旬从辽宁省海洋水产科学研究院引育种中心的仿刺参单养池塘采集仿刺参样品9只,通过实时荧光定量PCR技术测定仿刺参TLR信号通路主要因子的转录表达水平,同时测定池塘的主要水环境参数,通过皮尔逊相关性分析方法分析仿刺参TLR信号通路主要因子的转录表达与环境因子季节性变化的相关性。试验结果显示,6月Toll、IRAK4、P105、TAK、IκKβ、Rel、TLR3、TBK及IRF8基因的表达水平较低,表明仿刺参体内TLR信号通路的应答能力在夏初较低。通过相关性分析发现,MyD88和TRAF6基因转录表达的季节性变化与溶解氧水平的季节性变化呈显著正相关、TAK基因和TBK基因转录表达的季节性变化与水环境的氧化还原电位呈显著正相关、IRF8基因转录表达与水温呈显著负相关、SARM基因转录表达与水温呈显著正相关,表明池塘环境因子的季节变化影响仿刺参TLR信号通路相关因子的表达。氧化还原电位影响MyD88依赖途径,且是关键环境因子,溶解氧是影响MyD88依赖途径的关键环境因子,而水温是影响MyD88非依赖途径的关键环境因子。 展开更多
关键词 仿刺参 TLR信号通路 myd88依赖途径 myd88非依赖途径 转录表达 季节性变化
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MyD88依赖途径在膝骨关节炎进程中的基因表达相关性研究 被引量:5
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作者 王欢 王庆甫 +7 位作者 史榕荇 张美丽 杨帆 刘思婷 樊小燕 郭玉茹 丁海涛 唐学章 《中国骨伤》 CAS 2018年第10期933-936,共4页
目的 :探讨MyD88依赖途径的相关基因TLR4、NF-κB与MyD88在膝骨关节炎(osteoarthritis,OA)不同病程下大鼠滑膜组织的表达特点及相关性。方法:将60只Wistar大鼠随机分为6组:空白组(N)、假手术组(F)和模型组[2周组(2W)、4周组(4W)、8周组(... 目的 :探讨MyD88依赖途径的相关基因TLR4、NF-κB与MyD88在膝骨关节炎(osteoarthritis,OA)不同病程下大鼠滑膜组织的表达特点及相关性。方法:将60只Wistar大鼠随机分为6组:空白组(N)、假手术组(F)和模型组[2周组(2W)、4周组(4W)、8周组(8W)、12周组(12W)],每组各10只。各模型组以Hulth法建立大鼠膝OA动物模型,空白组不予手术,假手术组仅打开关节腔。按上述设计时间收集样本,经总RNA的提取及反转录后,用Realtime PCR法对各组滑膜组织中TLR4、NF-κB及MyD88的相对表达量进行检测,分析其相关性。结果 :假手术组各基因的mRNA表达与空白组相比差异均无统计学意义((P>0.05);而各模型组较空白组各基因表达增强(P<0.05)。相关性分析显示:MyD88与TLR4及NF-κB的mRNA相关性系数分别为0.91和0.86,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:MyD88与TLR4、NF-κB的表达均呈显著的正相关性,在通路上起重要的枢纽作用,可通过其表达预测通路上其他基因的表达情况,进一步明确膝OA病理机制。 展开更多
关键词 膝骨关节炎 myd88依赖途径 固有免疫 滑膜炎症
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美沙拉嗪对小鼠溃疡性结肠炎模型中Let-7i-5p/TLR4/MyD88依赖性通路的调控机制
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作者 毛珍珍 刘靖 +5 位作者 张晨华 闫娜娜 赵玲玲 卢军仪 许伟光 王婧 《河北医学》 CAS 2024年第4期549-555,共7页
目的:本研究旨在探讨美沙拉嗪(MSLZ)对小鼠2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)模型中Let-7i-5p和TLR4/MyD88依赖通路的调控机制。方法:采用TNBS/乙醇结肠法建立溃疡性结肠炎(UC)模型。将44只雄性小鼠随机分为对照组、模型组、MSLZ组和Let-7i-5p... 目的:本研究旨在探讨美沙拉嗪(MSLZ)对小鼠2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)模型中Let-7i-5p和TLR4/MyD88依赖通路的调控机制。方法:采用TNBS/乙醇结肠法建立溃疡性结肠炎(UC)模型。将44只雄性小鼠随机分为对照组、模型组、MSLZ组和Let-7i-5p抑制剂组,每组11只。小鼠灌胃或腹腔注射相应的药物或生理盐水,连续14d。采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测小鼠结肠组织中和血清中Let-7i-5p的表达水平。在显微镜下,用苏木精和伊红(HE)染色观察结肠组织的病理病变。分别采用qRT-PCR,Western blot和免疫组化方法检测小鼠结肠组织中TLR4/MyD88依赖通路相关基因的mRNA和蛋白水平。通过ELISA检测小鼠血清中TNF-α和IL-1β的表达水平。结果:根据疾病活跃指数(DAI)、结肠损伤和病理病变的评分,成功构建了小鼠UC模型。模型组小鼠结肠组织中和血清中Let-7i-5p的表达水平显著高于对照组(P<0.0001)。与模型组相比,MSLZ和Let-7i-5p抑制剂处理均能显著抑制Let-7i-5p的表达(P<0.0001)。与对照组相比,模型组小鼠结肠组织中TLR4/MyD88依赖通路相关基因(包括TLR4、MyD88、TRAF-6和NF-κB)的mRNA和蛋白水平显著上调。MSLZ和Let-7i-5p抑制剂处理均能显著抑制这些基因的表达,且MSLZ的抑制作用略强于Let-7i-5p抑制剂。与对照组相比,模型组小鼠结肠组织中IL-1β和TNF-α的mRNA水平和血清中的蛋白水平显著上调,MSLZ和Let-7i-5p抑制剂处理均能抑制IL-1β和TNF-α的表达水平。结论:在TNBS/乙醇诱导的UC小鼠模型中,MSLZ可以抑制结肠组织中和血清中Let-7i-5p的表达。此外,MSLZ还通过抑制UC小鼠的TLR4/MyD88依赖性通路来抑制炎症因子的释放。 展开更多
关键词 溃疡性结肠炎 美沙拉嗪 Let-7i-5p TLR4/myd88依赖性通路
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TLR4–MyD88信号转导途径介导仙人掌多糖免疫调节的机制研究 被引量:2
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作者 李恒 李锐 马景球 《湖南农业大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2021年第4期419-423,共5页
为研究仙人掌多糖(ODPs)对Toll样受体4(TLR4)及其转导的MyD88依赖性信号途径中下游重要元件髓样分化因子88(MyD88)、肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)、IκB激酶β(IKKβ)mRNA和蛋白表达的影响,体外培养小鼠腹腔单核巨噬细胞(RAW264.7)... 为研究仙人掌多糖(ODPs)对Toll样受体4(TLR4)及其转导的MyD88依赖性信号途径中下游重要元件髓样分化因子88(MyD88)、肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)、IκB激酶β(IKKβ)mRNA和蛋白表达的影响,体外培养小鼠腹腔单核巨噬细胞(RAW264.7),用ODPs干预24h,收集细胞,分别采用RT-PCR法和蛋白质印迹Western blot法检测TLR4、MyD88、TRAF6、IKKβmRNA及蛋白表达。结果显示:中、高剂量(100、200μg/mL)ODPs显著增强TLR4、TRAF6及IKKβ的基因表达及TLR4、MyD88、TRAF6的蛋白表达(P<0.05),且具有良好的量效关系;ODPs也显著降低了MyD88的基因表达(P<0.05),对IKKβ的蛋白表达量增强效果不显著。说明非炎性条件下ODPs可促使TLR4高表达,同时激活TLR4胞内信号转导的MyD88依赖性途径。 展开更多
关键词 仙人掌多糖 小鼠腹腔巨噬细胞 myd88依赖性信号通路
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CpG-c41分子对TLR7-MyD88依赖型信号通路的交叉干扰作用 被引量:1
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作者 陈铭 卫国 +2 位作者 祝元锋 沈伟 李彦 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期927-930,共4页
目的探讨TLR9强力拮抗剂CpG-c41分子对TLR7-MyD88依赖型信号通路的交叉干扰作用。方法体外实验采用ELISA法检测CpG-c41对TLR7激动剂ssRNA83刺激RAW264.7细胞24 h诱发的炎症介质TNF-α和IL-6表达的影响,Western blot检测CpG-c41对TLR7-My... 目的探讨TLR9强力拮抗剂CpG-c41分子对TLR7-MyD88依赖型信号通路的交叉干扰作用。方法体外实验采用ELISA法检测CpG-c41对TLR7激动剂ssRNA83刺激RAW264.7细胞24 h诱发的炎症介质TNF-α和IL-6表达的影响,Western blot检测CpG-c41对TLR7-MyD88依赖型信号通路中IκBα蛋白表达的影响;体内实验采用ELISA法检测CpG-c41对ssRNA83攻击BALB/c小鼠2 h诱发血清中TNF-α和IL-6表达的影响作用。结果体内、体外实验均表明,CpG-c41分子能够显著抑制经ssRNA83刺激诱发TLR7-MyD88依赖型信号通路介导的炎症介质TNF-α和IL-6的释放(P<0.01),体外实验表明抑制作用具有量效关系;而Western blot检测显示在CpG-c41作用下,TLR7-MyD88依赖型信号通路中IκBα的降解受干扰。结论 TLR9强力拮抗剂CpG-c41分子通过干扰TLR7-MyD88依赖型信号通路中IκBα的磷酸化降解,抑制炎症介质的释放,发挥对ssRNA攻击小鼠的免疫保护作用。 展开更多
关键词 CpG—c41 ssRNA83 TLR7-myd88依赖型信号通路 交叉干扰
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TLR9,先天免疫中重要的抗微生物受体 被引量:8
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作者 黄巧茹 《中山大学研究生学刊(自然科学与医学版)》 2007年第3期7-15,共9页
先天免疫系统是宿主抵御外来微生物入侵的第一道防线,TLR9是先天免疫系统中识别细菌和病毒CpG DNA的主要受体。TLR9信号转导利用MyD88依赖途径,在IRAK-4、IRAK-1、TRAF6和TAK1等关键信号蛋白的协同作用下,激活NF-κB和MAP途径,诱导产生... 先天免疫系统是宿主抵御外来微生物入侵的第一道防线,TLR9是先天免疫系统中识别细菌和病毒CpG DNA的主要受体。TLR9信号转导利用MyD88依赖途径,在IRAK-4、IRAK-1、TRAF6和TAK1等关键信号蛋白的协同作用下,激活NF-κB和MAP途径,诱导产生一系列促炎细胞因子和趋化因子,最终引起Th1样炎症反应。TLR9除了有抗感染作用,还与自身免疫紊乱和一些恶性肿瘤发生相关。研究TLR9能帮助了解相关疾病发病机理及寻求预防和治疗的手段。 展开更多
关键词 TLR9 先天免疫 TLR9信号转导 myd88依赖途径
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中药复方多糖对不同MHC B-LβⅡ基因型鸡淋巴细胞中TLR4介导的MyD88依赖性途径的影响 被引量:5
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作者 马昭 刘钢 +4 位作者 杨莉 刘晓婷 乔彦杰 朱晓庆 谷新利 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2018年第3期754-762,共9页
试验旨在探讨不同剂量中药复方多糖在不同MHC B-LβⅡ基因型鸡淋巴细胞中对TLR4及下游MyD88依赖性信号转导通路主要元件的影响。采用PCR-SSCP方法将500羽京红1号蛋鸡按MHC B-LβⅡ基因型分组,采集不同MHC B-LβⅡ基因型鸡外周血淋巴细胞... 试验旨在探讨不同剂量中药复方多糖在不同MHC B-LβⅡ基因型鸡淋巴细胞中对TLR4及下游MyD88依赖性信号转导通路主要元件的影响。采用PCR-SSCP方法将500羽京红1号蛋鸡按MHC B-LβⅡ基因型分组,采集不同MHC B-LβⅡ基因型鸡外周血淋巴细胞,分别加入终浓度为100、75、50、0μg/mL(高、中、低剂量组和对照组)中药复方多糖共培养16、24、32、48h收集细胞,应用实时荧光定量PCR方法检测不同MHC B-LβⅡ基因型鸡TLR4、MyD88、TNAF-6基因的表达。结果显示,与对照组相比,中药复方多糖能显著增强不同MHC B-LβⅡ基因型鸡TLR4、MyD88、TNAF-6mRNA的表达量(P<0.05);中、低剂量组AA基因型鸡TLR4、MyD88、TNAF-6基因的表达量高于高剂量组(培养16h时TLR4基因除外),高剂量组BB基因型TLR4、MyD88、TNAF-6基因的表达量高于其他剂量组(培养32和48h时TLR4基因除外)),低剂量组BC基因型TLR4、MyD88、TNAF-6基因的表达量高于其他剂量组(培养16h时TLR4基因除外)。结果表明,中药复方多糖发挥机体免疫调节作用的机制是通过与淋巴细胞表面TLR4结合,激活下游MyD88依赖性信号转导通路,调控细胞免疫,且不同MH-C B-LβⅡ基因型鸡淋巴细胞最适中药复方多糖免疫调节剂量不同。 展开更多
关键词 中药复方多糖 MHC B-LβⅡ基因 鸡淋巴细胞 TLR4 myd88依赖性信号转导通路
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黄芪甲苷对肾纤维化小鼠Toll/MyD88依赖性通路的作用研究 被引量:23
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作者 杨茹茜 徐倩 +4 位作者 杨旖 金晶 卢雨松 罗韬 赵春玲 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2017年第18期3775-3782,共8页
目的观察黄芪甲苷(astragaloside IV)对单侧输尿管结扎(UUO)小鼠肾组织纤维化程度的影响,探讨其作用机制。方法将雄性C57BL/6小鼠50只随机均分为假手术组,模型组,黄芪甲苷高、中、低剂量(50、30、10 mg/kg)组。除假手术组外,其余各组小... 目的观察黄芪甲苷(astragaloside IV)对单侧输尿管结扎(UUO)小鼠肾组织纤维化程度的影响,探讨其作用机制。方法将雄性C57BL/6小鼠50只随机均分为假手术组,模型组,黄芪甲苷高、中、低剂量(50、30、10 mg/kg)组。除假手术组外,其余各组小鼠均行UUO术,从手术当天黄芪甲苷各组ig给药,连续14 d。检测血清肌酐(Cr)和尿素氮(BUN)水平,HE和Masson染色下光镜观察肾组织病理和胶原的沉积;免疫组化和Western blotting方法从蛋白水平观察各组肾脏中Toll/MyD88依赖信号通路相关分子(TLR4、TLR2、MyD88、TRAF-6、NF-κB、TNF-α、IL-6)的表达。结果模型组小鼠患侧肾脏的纤维化程度、病理损害最明显;Toll/MyD88依赖信号通路相关的分子的表达量最多。而随着黄芪甲苷组药物剂量的增加,小鼠肾脏损伤有明显改善,该信号通路相关因子(TLR4、TLR2、MyD88、TRAF-6、NF-κB)蛋白表达水平也在相应减少,且对该信号通路末端炎症因子TNF-α和IL-6的表达有抑制作用。结论黄芪甲苷可能通过抑制Toll/MyD88依赖信号通路及炎症因子TNF-α和IL-6的释放来改善小鼠UUO所致的肾纤维化。 展开更多
关键词 黄芪甲苷 肾纤维化 Toll/myd88依赖信号通路 单侧输尿管结扎 免疫炎症反应
原文传递
雷公藤多苷片对溃疡性结肠炎大鼠miR-146a、miR-146b及TLR4/MyD88依赖信号通路的调控作用研究 被引量:19
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作者 周毅骏 钦丹萍 +5 位作者 杨新艳 杨雪静 张春丽 曹俊敏 李艳平 李珊 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2016年第10期1723-1730,共8页
目的研究雷公藤多苷片(TWPT)对2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)/乙醇溃疡性结肠炎(UC)大鼠微小RNA(mi R-146a、mi R-146b)及TLR4/My D88依赖信号通路的调控作用。方法采用TNBS/乙醇灌肠法制备UC大鼠模型。将90只雄性Wistar大鼠随机分为对照组... 目的研究雷公藤多苷片(TWPT)对2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)/乙醇溃疡性结肠炎(UC)大鼠微小RNA(mi R-146a、mi R-146b)及TLR4/My D88依赖信号通路的调控作用。方法采用TNBS/乙醇灌肠法制备UC大鼠模型。将90只雄性Wistar大鼠随机分为对照组,模型组,TWPT低、中、高剂量(30、60、120 mg/kg)组,硫唑嘌呤(AZA,60 mg/kg)组,每组15只。各组分别ig给予相应药物连续14 d。进行各组大鼠结肠组织大体及镜下病理评分。采用q RT-PCR法检测mi R-146a和mi R-146b的表达情况;Western blotting法和RT-PCR法检测大鼠结肠组织中TLR4/My D88依赖信号通路相关分子(TLR4、My D88、TRAF-6、NF-κB、TNF-α、IL-1β)在m RNA及蛋白水平的表达情况。结果 DAI评分,大体及镜下表现和评分均提示TNBS/乙醇UC大鼠模型造模成功,TWPT对UC大鼠临床症状的改善及黏膜愈合具有一定作用,该作用与AZA相比相当或强于AZA。q RT-PCR结果提示:与对照组相比,模型组中mi R-146a和mi R-146b表达明显增加(P<0.01);与模型组相比,TWPT及AZA均可显著抑制mi R-146a和mi R-146b的表达(P<0.01),其中TWPT中剂量组对2者的抑制作用最强。RT-PCR及Western blotting实验均提示:与对照组相比,模型组中TLR4/My D88依赖信号通路相关的分子无论在m RNA还是蛋白水平表达均显著升高(P<0.01);与模型组相比,TWPT呈剂量依赖性地抑制该信号通路上各节点分子m RNA及蛋白水平的表达,其中TWPT高剂量组中各节点分子m RNA及蛋白表达水平低于模型组(P<0.05)。与AZA组比较,TWPT高剂量组对该信号通路上游因子(TLR4、My D88、TRAF-6、NF-κB)m RNA及蛋白表达水平的抑制作用略好于AZA组,而对末端炎症因子TNF-α及IL-1βm RNA及蛋白水平的抑制作用却略逊于AZA组,但上述2种差异均无统计学意义(P>0.05)。结论在TNBS/乙醇UC大鼠模型中,TWPT能通过抑制mi R-146a和mi R-146b的表达,并能抑制TLR4/My D88依赖信号通路及炎症因子IL-1β及TNF-α释放,对信号 展开更多
关键词 雷公藤多苷片 溃疡性结肠炎 MIR-146A miR-146b TLR4/myd88依赖信号通路
原文传递
基于TLR4-MyD88依赖通路白喉乌头单体Ⅰ抑制树突状细胞成熟的作用机制
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作者 王怡杨 贾贝田 +6 位作者 曹敏 刘海朝 金昱彤 韩露 罗莉 丛珊 边育红 《现代中西医结合杂志》 CAS 2022年第20期2775-2780,共6页
目的研究白喉乌头单体I(Delvestidine)抑制脂多糖(LPS)诱导的小鼠骨髓来源树突状细胞(BMDCs)成熟的分子机制,进一步评价白喉乌头的药效。方法提取小鼠骨髓来源单核细胞,体外LPS诱导为BMDCs,设立正常组、LPS组、LPS+Delvestidine 20μg/m... 目的研究白喉乌头单体I(Delvestidine)抑制脂多糖(LPS)诱导的小鼠骨髓来源树突状细胞(BMDCs)成熟的分子机制,进一步评价白喉乌头的药效。方法提取小鼠骨髓来源单核细胞,体外LPS诱导为BMDCs,设立正常组、LPS组、LPS+Delvestidine 20μg/mL组、LPS+Delvestidine 40μg/mL组、LPS+Delvestidine 80μg/mL组,流式细胞术检测各组BMDCs表面标记CD80、CD86表达情况,筛选Delvestidine最适浓度;设立正常组、LPS组、LPS+Delvestidine 80μg/mL组,ELISA法检测各组BMDCs上清液中细胞因子白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)含量,qRT-PCR和Western blot法检测各组BMDCs中TLR4-MyD88依赖通路关键基因和蛋白的表达情况。结果LPS组CD80+CD86+细胞比例明显高于正常组(P<0.05),LPS+Delvestidine各组CD80+CD86+细胞比例均明显低于LPS组(P均<0.05),且LPS+Delvestidine 80μg/mL组明显低于LPS+Delvestidine 20μg/mL组和LPS+Delvestidine 40μg/mL组(P均<0.05),Delvestidine的最适给药浓度为80μg/mL。与正常组比较,LPS组IL-10含量明显降低(P<0.05),IL-6含量和TLR4-MyD88依赖通路中TLR4、MyD88、IRAK4、TRAF6、Ikk2 mRNA和蛋白相对表达量均明显升高(P均<0.05);与LPS组比较,LPS+Delvestidine 80μg/mL组IL-10含量明显升高(P<0.05),IL-6含量和TLR4-MyD88依赖通路中TLR4、MyD88、IRAK4、TRAF6、Ikk2 mRNA和蛋白相对表达量均明显降低(P均<0.05)。结论Delvestidine可抑制BMDCs的成熟及活化,其作用机制可能与TLR4-MyD88依赖通路有关。 展开更多
关键词 白喉乌头单体I TLR4-myd88依赖通路 树突状细胞 脂多糖
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