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家蝇伴侣蛋白TCP-1基因的序列分析、克隆及诱导表达
被引量:
1
1
作者
赵学军
国果
+2 位作者
吴沁怡
陶如玉
吴建伟
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第10期151-155,共5页
旨在对EST筛选得到的家蝇伴侣蛋白TCP-1(MD-TCPⅠ)基因进行序列分析,克隆其cDNA序列并在大肠杆菌中诱导表达。采用EST测序技术从已构建的家蝇幼虫cDNA质粒文库中筛选到MD-TCPⅠ基因,对其进行序列测定和分析。以该基因的cDNA文库质粒为模...
旨在对EST筛选得到的家蝇伴侣蛋白TCP-1(MD-TCPⅠ)基因进行序列分析,克隆其cDNA序列并在大肠杆菌中诱导表达。采用EST测序技术从已构建的家蝇幼虫cDNA质粒文库中筛选到MD-TCPⅠ基因,对其进行序列测定和分析。以该基因的cDNA文库质粒为模板,通过PCR的方法进行扩增,以pET-28a(+)为载体构建重组质粒,再转化到表达宿主大肠杆菌BL21(DE3)中,IPTG诱导表达。表达产物通过SDS-PAGE进行鉴定。结果显示,MD-TCPⅠ基因ORF全长753 bp,编码250个氨基酸,理论分子量27.07 kD;等电点5.92,该序列编码的蛋白属于热休克蛋白60家族的TCP。构建了正确基因序列MD-TCPⅠ重组表达质粒,重组蛋白在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达。
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关键词
家蝇
tcp
序列分析
基因克隆
表达
下载PDF
职称材料
题名
家蝇伴侣蛋白TCP-1基因的序列分析、克隆及诱导表达
被引量:
1
1
作者
赵学军
国果
吴沁怡
陶如玉
吴建伟
机构
贵阳医学院基础医学院
出处
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第10期151-155,共5页
基金
国家自然科学基金项目(81160204
81360254)
+1 种基金
贵州省科技厅基金项目(黔科合[2010]3160)
高校博士点学科专项科研基金项目(20105215120001)
文摘
旨在对EST筛选得到的家蝇伴侣蛋白TCP-1(MD-TCPⅠ)基因进行序列分析,克隆其cDNA序列并在大肠杆菌中诱导表达。采用EST测序技术从已构建的家蝇幼虫cDNA质粒文库中筛选到MD-TCPⅠ基因,对其进行序列测定和分析。以该基因的cDNA文库质粒为模板,通过PCR的方法进行扩增,以pET-28a(+)为载体构建重组质粒,再转化到表达宿主大肠杆菌BL21(DE3)中,IPTG诱导表达。表达产物通过SDS-PAGE进行鉴定。结果显示,MD-TCPⅠ基因ORF全长753 bp,编码250个氨基酸,理论分子量27.07 kD;等电点5.92,该序列编码的蛋白属于热休克蛋白60家族的TCP。构建了正确基因序列MD-TCPⅠ重组表达质粒,重组蛋白在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达。
关键词
家蝇
tcp
序列分析
基因克隆
表达
Keywords
musca
domestic
tcp
sequence
analysis
gene
cloning
express
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
家蝇伴侣蛋白TCP-1基因的序列分析、克隆及诱导表达
赵学军
国果
吴沁怡
陶如玉
吴建伟
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2014
1
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