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狂犬病病毒CVS-11毒株基质蛋白鼠源和兔源多克隆抗体的制备、鉴定及比较
1
作者
牟韶璐
范家琛
+2 位作者
崔灿
张曦
许运斌
《中国生物制品学杂志》
CAS
CSCD
2024年第3期310-315,共6页
目的制备狂犬病病毒(rabies virus,RV)基质蛋白(M)鼠源和兔源多克隆抗体,并比较其反应原性。方法以RV CVS-11毒株感染细胞后的cDNA为模板构建原核表达载体pET-28a-M,转化E.coli BL21(DE3),IPTG诱导表达M蛋白,经镍柱亲和层析、透析复性后...
目的制备狂犬病病毒(rabies virus,RV)基质蛋白(M)鼠源和兔源多克隆抗体,并比较其反应原性。方法以RV CVS-11毒株感染细胞后的cDNA为模板构建原核表达载体pET-28a-M,转化E.coli BL21(DE3),IPTG诱导表达M蛋白,经镍柱亲和层析、透析复性后,免疫雌性BALB/c小鼠和雌性新西兰大白兔,取全血,分离血清,ELISA法检测鼠源和兔源多克隆抗体效价,Western blot法、间接免疫荧光试验(immunofluorescence assay,IFA)、免疫沉淀(immunoprecipitation,IP)法检测鼠源和兔源多克隆抗体反应原性。结果质粒pET-28a-M经测序鉴定证明构建正确;制备的鼠源和兔源多克隆抗体效价分别为1∶100和1∶256000,与不同RV毒株均具有反应原性。结论成功制备了M蛋白鼠源和兔源多克隆抗体,为探讨M蛋白与宿主蛋白相互作用的关系以及研究RV的致病机制提供了重要的生物学工具。
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关键词
狂犬病病毒
基质蛋白
原核表达载体
鼠源
兔源
多克隆抗体
原文传递
题名
狂犬病病毒CVS-11毒株基质蛋白鼠源和兔源多克隆抗体的制备、鉴定及比较
1
作者
牟韶璐
范家琛
崔灿
张曦
许运斌
机构
遵义医科大学贵州省普通高等学校传染病与生物安全特色重点实验室
出处
《中国生物制品学杂志》
CAS
CSCD
2024年第3期310-315,共6页
基金
国家自然科学基金(31860705)
贵州省科技计划项目(课题)(黔科合基础[2020]1Y061)。
文摘
目的制备狂犬病病毒(rabies virus,RV)基质蛋白(M)鼠源和兔源多克隆抗体,并比较其反应原性。方法以RV CVS-11毒株感染细胞后的cDNA为模板构建原核表达载体pET-28a-M,转化E.coli BL21(DE3),IPTG诱导表达M蛋白,经镍柱亲和层析、透析复性后,免疫雌性BALB/c小鼠和雌性新西兰大白兔,取全血,分离血清,ELISA法检测鼠源和兔源多克隆抗体效价,Western blot法、间接免疫荧光试验(immunofluorescence assay,IFA)、免疫沉淀(immunoprecipitation,IP)法检测鼠源和兔源多克隆抗体反应原性。结果质粒pET-28a-M经测序鉴定证明构建正确;制备的鼠源和兔源多克隆抗体效价分别为1∶100和1∶256000,与不同RV毒株均具有反应原性。结论成功制备了M蛋白鼠源和兔源多克隆抗体,为探讨M蛋白与宿主蛋白相互作用的关系以及研究RV的致病机制提供了重要的生物学工具。
关键词
狂犬病病毒
基质蛋白
原核表达载体
鼠源
兔源
多克隆抗体
Keywords
Rabies
virus(RV)
Matrix
protein(M
protein)
Prokaryotic
expression
vector
murine
source
Rabbit
source
Polyclonal
antibody
分类号
S855.3 [农业科学—临床兽医学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
狂犬病病毒CVS-11毒株基质蛋白鼠源和兔源多克隆抗体的制备、鉴定及比较
牟韶璐
范家琛
崔灿
张曦
许运斌
《中国生物制品学杂志》
CAS
CSCD
2024
0
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