期刊文献+
共找到20篇文章
< 1 >
每页显示 20 50 100
多重实时PCR对宫颈癌及癌前病变HPV-16病毒整合状态的检测 被引量:14
1
作者 郑莹 彭芝兰 +1 位作者 楼江燕 王和 《现代妇产科进展》 CSCD 北大核心 2006年第8期573-577,共5页
目的探讨检测HPV存在状态的理想方法,了解HPV-16整合在宫颈癌发生发展中的作用及其可能的临床应用价值。方法用多重实时PCR同管定量检测HPV-16的E2和E6基因,根据E2/E6判定HPV-16的存在状态;与Southern杂交检测结果进行比较。检测HPV-16... 目的探讨检测HPV存在状态的理想方法,了解HPV-16整合在宫颈癌发生发展中的作用及其可能的临床应用价值。方法用多重实时PCR同管定量检测HPV-16的E2和E6基因,根据E2/E6判定HPV-16的存在状态;与Southern杂交检测结果进行比较。检测HPV-16阳性的宫颈鳞癌51例和宫颈上皮内瘤病变49例的石蜡标本。结果(1)多重实时PCR所得HPV-16E2、E6标准曲线的相关性好,扩增效率均高于95%;(2)确定多重实时PCR以E2/E6比值为0.81作为区分游离型和混合型HPV-16的界值;(3)多重实时PCR与Southern杂交检测的符合率为81.5%(Kappa值为0.844,P<0·001);(4)HPV-16整合发生率与不同程度的宫颈病变有关,CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ和SCC中HPV-16整合发生率分别为42.9%、76.5%、83.3%和90.2%;(5)Ⅱ+Ⅲ期宫颈癌中整合型HPV-16所占比例(88.0%)显著高于Ⅰ期宫颈癌(33.3%)。结论多重实时定量PCR是检测HPV-16病毒存在状态的可靠方法,有准确、省时、简便快速及高通量的优点。 展开更多
关键词 人乳头瘤病毒16 多重实时聚合酶链反应 整合 宫颈肿瘤
下载PDF
3种致病菌多重real-time PCR检测方法的建立及其在散装即食肉制品中的应用 被引量:13
2
作者 范维 高晓月 +4 位作者 李贺楠 董雨馨 李宇轩 刘虹宇 郭文萍 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2022年第2期332-338,共7页
建立一种同时快速检测沙门氏菌、金黄色葡萄球菌和蜡样芽孢杆菌的三重实时聚合酶链式反应(realtime polymerase chain reaction,real-time PCR)方法。以沙门氏菌invA基因、金黄色葡萄球菌Sa442基因和蜡样芽孢杆菌Cereolysin AB基因为靶... 建立一种同时快速检测沙门氏菌、金黄色葡萄球菌和蜡样芽孢杆菌的三重实时聚合酶链式反应(realtime polymerase chain reaction,real-time PCR)方法。以沙门氏菌invA基因、金黄色葡萄球菌Sa442基因和蜡样芽孢杆菌Cereolysin AB基因为靶基因设计引物和TaqMan探针,建立多重real-time PCR方法,对该方法进行方法学验证,并对实际的散装即食肉制品样品进行检测。结果表明,该方法特异性强、灵敏度高、重复性好。对15株非目标菌进行检测,结果均为阴性;3种致病菌的定量线性浓度范围为10^(2)~10^(8) CFU/mL,且定量检测批内和批间的变异系数均小于2%;沙门氏菌、金黄色葡萄球菌和蜡样芽孢杆菌在未增菌的即食肉制品样品中检出限分别为3.8×10^(2)、4.9×10^(2) CFU/mL和5.7×10^(2) CFU/mL,经增菌5 h后,检出限提高到3.8、4.9 CFU/mL和5.7 CFU/mL。对100份实际样品进行检测,结果与标准方法一致,说明建立的多重real-time PCR法可以用于散装即食肉制品中3种致病菌的检测。 展开更多
关键词 沙门氏菌 金黄色葡萄球菌 蜡样芽孢杆菌 多重实时聚合酶链式反应 即食肉制品
下载PDF
多重实时荧光定量PCR对下呼吸道感染病原体检测分析 被引量:11
3
作者 刘馨玉 李萌 +1 位作者 石璞玉 陈明伟 《中华肺部疾病杂志(电子版)》 CAS 2019年第5期559-562,共4页
目的比较多重实时荧光定量PCR(multiplex real-time polymerase chain reaction,MRTPCR)和间接免疫荧光法(indirect immunofluorescence assay,IFA)对成人呼吸道病毒及非典型病原体检测结果。方法收集2014年1月至2017年12月间呼吸内科21... 目的比较多重实时荧光定量PCR(multiplex real-time polymerase chain reaction,MRTPCR)和间接免疫荧光法(indirect immunofluorescence assay,IFA)对成人呼吸道病毒及非典型病原体检测结果。方法收集2014年1月至2017年12月间呼吸内科210例成人呼吸道感染的标本,采用MRTPCR检测8种常见呼吸道病原体,同时应用IFA检测血清8种病原体Ig M抗体,并全部进行PCR及测序分析,比较两种方法的特异性及敏感性,评估MRT-PCR的临床应用价值。结果 210例下呼吸道感染标本经MRT-PCR和IFA检测,阳性率分别为58.57%和38.10%,混合感染率分别为7.62%和4.76%。两种方法的灵敏度分别为94.74%和35.96%,特异度分别为84.38%和59.38%。灵敏度和特异度差异有统计学意义(P<0.05)。结论与IFA相比,MRT-PCR灵敏度、特异度好,检测性能优于IFA。 展开更多
关键词 下呼吸道感染 呼吸道病毒 非典型病原体 间接免疫荧光法 多重实时荧光定量PCR
原文传递
多重实时PCR对宫颈癌组织及SiHa细胞株HPV-16病毒存在状态的检测 被引量:9
4
作者 郑莹 彭芝兰 +1 位作者 楼江燕 王和 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2006年第3期373-377,共5页
背景与目的:人乳头瘤病毒(humanpapillomavirus,HPV)感染与宫颈癌发生发展密切相关,高危型HPV病毒整合入宿主细胞是细胞转化及癌变的关键。病毒整合状态的检测对深入探讨宫颈癌发生发展机制及预测宫颈病变的转归有一定的临床意义。然而... 背景与目的:人乳头瘤病毒(humanpapillomavirus,HPV)感染与宫颈癌发生发展密切相关,高危型HPV病毒整合入宿主细胞是细胞转化及癌变的关键。病毒整合状态的检测对深入探讨宫颈癌发生发展机制及预测宫颈病变的转归有一定的临床意义。然而目前尚没有一种理想的能够用于各种临床标本的HPV存在状态的检测方法。本研究旨在探讨HPV-16存在状态的理想检测方法。方法:以HPV-16质粒为标准品,利用两种不同的荧光报告基团,采用多重实时PCR同管定量检测HPV-16E2和E6基因,根据E2和E6基因拷贝数的比值(E2/E6)来判定HPV-16的存在状态;对HPV-16阳性的宫颈癌SiHa细胞和27例宫颈鳞癌新鲜标本进行多重实时PCR与Southern杂交检测,将两种检测方法的结果进行比较。结果:(1)多重实时PCR所得到的HPV-16E2、E6标准曲线相关性好,相关系数均为1.00,扩增效率均在95%以上。(2)对系列稀释的HPV-16质粒进行重复检测,确定了E2/E6比值为1时该多重实时PCR检测系统的95%参考值范围为0.81~1.29,以0.81作为区分游离型和混合型HPV-16的界值。(3)多重实时PCR与Southern杂交检测均发现SiHa细胞中HPV-16呈整合型,27例鳞癌中22例获得了一致的检测结果,符合率为81.5%,Kappa值为0.844,P<0.001。结论:多重实时定量PCR是一种可靠的、便于临床应用的检测HPV-16病毒存在状态的方法,具有省时、简便快速、高通量的优点,并且能用于石蜡切片以及病灶较小、DNA含量少的宫颈癌前病变组织或宫颈细胞学标本。 展开更多
关键词 人乳头瘤病毒16 多重实时聚合酶链反应 Southem杂交 子宫颈肿瘤
下载PDF
4种植物源性成分多重real-time PCR检测方法的建立及其在食用淀粉中的应用 被引量:2
5
作者 范维 高晓月 +4 位作者 董雨馨 刘虹宇 李贺楠 赵文涛 郭文萍 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2024年第1期210-216,共7页
建立一种可同时快速检测红薯、木薯、马铃薯、玉米源性成分的多重实时聚合酶链式反应(real-time polymerase chain reaction,real-time PCR)方法。分别以红薯g3pdh基因、木薯g3pdh基因、马铃薯UGPase基因、玉米zSSIIb基因为靶基因设计... 建立一种可同时快速检测红薯、木薯、马铃薯、玉米源性成分的多重实时聚合酶链式反应(real-time polymerase chain reaction,real-time PCR)方法。分别以红薯g3pdh基因、木薯g3pdh基因、马铃薯UGPase基因、玉米zSSIIb基因为靶基因设计特异性引物和TaqMan探针,以18S rRNA基因为内参基因,建立多重real-time PCR方法,开展方法学验证,并对不同掺入比例模拟样品和实际淀粉样品进行检测。结果显示,该方法具有高通量、特异性强、灵敏度高等优点。与15种非目标源性均无交叉反应;对目标DNA的检测灵敏度可达到3×10^(-3) ng/μL,且具有良好的线性关系和扩增效率;对淀粉样品的检出限可达0.1%,对50份实际样品进行检测,结果与参比方法一致,说明建立的多重real-time PCR法可用于食用淀粉种类掺假鉴别检测。 展开更多
关键词 多重实时聚合酶链式反应 食用淀粉 木薯 红薯 马铃薯 玉米
下载PDF
4种动物源性成分多重real-time PCR检测方法的建立及其在驴肉制品检测中的应用 被引量:3
6
作者 范维 高晓月 +4 位作者 李贺楠 董雨馨 刘虹宇 李宇轩 郭文萍 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2023年第8期317-323,共7页
建立一种同时快速检测驴、马、猪及鸭源性成分的四重实时聚合酶链式反应(real-time polymerase chain reaction,real-time PCR)方法。分别以4种源性成分的Nad5、ATpase6、ATP8、cytb基因为靶基因设计特异性引物和TaqMan探针,以18S rRNA... 建立一种同时快速检测驴、马、猪及鸭源性成分的四重实时聚合酶链式反应(real-time polymerase chain reaction,real-time PCR)方法。分别以4种源性成分的Nad5、ATpase6、ATP8、cytb基因为靶基因设计特异性引物和TaqMan探针,以18S rRNA基因为内参基因,建立多重real-time PCR方法,并对该方法进行方法学验证,同时对不同掺入比例模拟样品、不同加工工艺模拟样品和实际驴肉样品进行检测。结果显示,该方法具有高通量、特异性强、灵敏度高等优点。当Ct值≤35.0时,方法对16种非目标源性具有良好特异性;灵敏度可检测到质量浓度为2×10^(-4)ng/μL的模板DNA;对生肉的检出限为肉含量的0.001%,对熟肉制品的检出限为肉含量的0.01%;对100份实际样品进行检测,结果与标准方法一致,说明建立的多重real-time PCR法可用于肉及肉制品中常见掺假源性成分的检测。 展开更多
关键词 多重实时聚合酶链式反应 掺假鉴别 驴肉 马肉 猪肉 鸭肉
下载PDF
垂体后叶粉中3种动物源性成分多重real-time PCR检测方法的建立及应用
7
作者 邵长春 潘秀丽 +2 位作者 魏艳芸 王月玲 王蕙 《畜禽业》 2024年第8期1-6,共6页
目的基于三重实时聚合酶链式反应(real-time polymerase chain reaction,real-time PCR)技术同时快速检测垂体后叶粉中的猪、牛、羊性动物源性成分。方法采用CTAB法提取样品及对照品DNA,以线粒体基因为靶基因设计并合成三重real-time PC... 目的基于三重实时聚合酶链式反应(real-time polymerase chain reaction,real-time PCR)技术同时快速检测垂体后叶粉中的猪、牛、羊性动物源性成分。方法采用CTAB法提取样品及对照品DNA,以线粒体基因为靶基因设计并合成三重real-time PCR的引物探针,并对建立方法进行验证,用于检测垂体后叶粉样品是否与标识一致。结果猪、牛、羊源性成分的最低检测浓度为10 pg/μL,采用建立的方法检测3批垂体后叶粉样品,均只检测出猪源性成分。结论建立的方法可用于同时检测垂体后叶粉中的猪、牛、羊源性成分,可为相关工作提供技术支持。 展开更多
关键词 垂体后叶粉 多重实时聚合酶链反应 种属鉴定
下载PDF
多重实时荧光定量聚合酶链式反应在芝麻酱掺假鉴别中的应用
8
作者 陈茵茵 梁颖思 +5 位作者 陈宝欣 丁清龙 苏章庭 韩志杰 陈玥 郑玥 《食品安全质量检测学报》 CAS 2024年第12期199-209,共11页
目的研究基于分子生物学技术,建立多重实时荧光定量聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)技术检测芝麻酱中的植物源性成分,实现芝麻酱的快速掺假鉴别,突破单标准单物种检测的局限性。方法该研究以芝麻2S albumim mRNA基因、花... 目的研究基于分子生物学技术,建立多重实时荧光定量聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)技术检测芝麻酱中的植物源性成分,实现芝麻酱的快速掺假鉴别,突破单标准单物种检测的局限性。方法该研究以芝麻2S albumim mRNA基因、花生Ara b2基因、大豆Lectin基因、玉米adh1基因设计特异性引物和探针,优化反应体系,建立多重实时荧光定量PCR技术检测芝麻酱中的芝麻源性成分、花生源性成分、大豆源性成分、玉米源性成分,并应用于市售的芝麻酱样本检测分析。结果该方法高效低成本,特异性好,对小米、绿豆等10种非目标源性成分无特异性扩增;对芝麻源性成分、花生源性成分、大豆源性成分、玉米源性成分的最低检出限为100 pg/μL,具有较高的灵敏度;应用建立的方法,对市售21份芝麻酱样本进行检测分析,检测结果与标签标注不符合的有4份,标签标注符合率为80.95%,与参比方法检测结果一致。结论建立的多重实时荧光定量PCR技术对加工成品的检测具有较好的适用性,为芝麻酱的掺假鉴别提供了一种新的分子生物学方法。 展开更多
关键词 多重实时荧光定量聚合酶链式反应 芝麻酱 植物源性成分 掺假鉴别
下载PDF
Diagnostic assays developed for the control of foot-andmouth disease in India 被引量:2
9
作者 Gaurav Kumar Sharma Sonalika Mahajan +8 位作者 Rakesh Matura Saravanan Subramaniam Rajeev Ranjan Jitendra Biswal Manoranjan Rout Jajati Keshari Mohapatra Bana Bihari Dash Aniket Sanyal Bramhadev Pattnaik 《World Journal of Virology》 2015年第3期295-302,共8页
Foot-and-mouth disease(FMD) is a highly contagious and economically devastating disease of livestock, primarily affecting cattle, buffalo and pigs. FMD virus serotypes O, A and Asia1 are prevalent in India and systema... Foot-and-mouth disease(FMD) is a highly contagious and economically devastating disease of livestock, primarily affecting cattle, buffalo and pigs. FMD virus serotypes O, A and Asia1 are prevalent in India and systematic efforts are on to control and eventually eradicate the disease from the country. FMD epidemiology is complex due to factors like co-circulation, extinction, emergence and re-emergence of genotypes/lineages within the three serotypes, animal movement, diverse farm practices and large number of susceptible livestock in the country. Systematic vaccination, prompt diagnosis, strict biosecurity measures, and regular monitoring of vaccinal immunity and surveillance of virus circulation are indispensible features for the effective implementation of the control measures. Availability of suitable companion diagnostic tests is very important in this endeavour. In this review, the diagnostic assays developed and validated in India and their contribution in FMD control programme is presented. 展开更多
关键词 Foot-and-mouth DISEASE Diagnosis Serosurveillance Sero-monitoring multiplex polymerase chain reaction real-time polymerase chain reaction LINEAGE differentiating polymerase chain reaction
下载PDF
三重real-time PCR检测副溶血弧菌主要毒力基因 被引量:3
10
作者 陈松 雷舒文 +2 位作者 上官文丹 刘丹 钟青萍 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2021年第22期298-304,共7页
针对编码副溶血弧菌的特异性基因和主要毒力基因tlh、tdh、ureR进行引物及探针设计,通过优化反应条件,建立基于Taqman探针快速检测副溶血弧菌毒力基因的三重实时聚合酶链式反应(real-time polymerase chain reaction,real-time PCR)方... 针对编码副溶血弧菌的特异性基因和主要毒力基因tlh、tdh、ureR进行引物及探针设计,通过优化反应条件,建立基于Taqman探针快速检测副溶血弧菌毒力基因的三重实时聚合酶链式反应(real-time polymerase chain reaction,real-time PCR)方法。利用10株副溶血弧菌和22株非副溶血弧菌对设计的引物及探针进行特异性验证,结果表明设计的引物及探针具有很高的特异性;优化后的引物浓度分别为tdh 0.15μmol/L、tlh 0.15μmol/L、ureR 0.80μmol/L,探针浓度分别为HEX 0.50μmol/L、FAM 0.50μmol/L;该方法即使在高浓度的背景细菌存在下,DNA浓度与Ct值均呈良好的线性关系,检出限为1.8×10^(2)拷贝/mL;以完整菌细胞的悬液为模板时,预变性时间为30 min,扩增检测效果与以基因组DNA(gDNA)为模板相当(ΔCt<1)。本研究建立的三重real-time PCR方法能实现快速定量检测副溶血弧菌,并能有效区分致病性及非致病性副溶血弧菌,为副溶血弧菌的快速定量检测和风险评估提供快速、灵敏、准确的方法。 展开更多
关键词 副溶血弧菌 多重实时聚合酶链式反应 快速检测 毒力基因
下载PDF
基于单核苷酸多态性位点的多重实时荧光定量聚合酶链式反应法鉴别当雄高山牦牛肉 被引量:3
11
作者 刘睿茜 其美次仁 +3 位作者 李家鹏 韦忆萱 李金春 王守伟 《肉类研究》 北大核心 2020年第10期47-52,共6页
通过比对5个不同地区牦牛线粒体基因的差异,筛选出用于鉴定当雄高山牦牛的11个单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms,SNP)位点,将这些SNP位点作为引物3′端,同时引入引物碱基错配理念,设计出8对特异性引物,构建出2个三重和1... 通过比对5个不同地区牦牛线粒体基因的差异,筛选出用于鉴定当雄高山牦牛的11个单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms,SNP)位点,将这些SNP位点作为引物3′端,同时引入引物碱基错配理念,设计出8对特异性引物,构建出2个三重和1个二重实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time polymerase chain reaction,RT-PCR)体系,建立一种基于SNP位点和多重RT-PCR技术鉴别当雄高山牦牛肉的方法。结果表明:该方法特异性较好、简便快捷、结果直观可靠,能够有效鉴别当雄高山牦牛肉;方法中3个RT-PCR反应体系扩增产物对应的熔解温度(melting temperature,Tm)范围分别为反应体系A:73.1~75.2、76.0~77.3、79.0~80.0℃,反应体系B:69.5~72.8、75.0~77.9、78.5~80.0℃,反应体系C:76.1~78.1、79.5~80.7℃;根据3个反应体系中熔解曲线峰的有无以及Tm是否符合取值范围来判定样品是否为当雄高山牦牛肉;市售样品测定结果表明,该方法可用于实际样品中当雄高山牦牛肉的快速鉴别。 展开更多
关键词 当雄高山牦牛 品种鉴别 单核苷酸多态性位点 多重实时荧光定量聚合酶链式反应 熔解曲线
下载PDF
多重实时聚合酶链式反应熔解曲线法同步鉴别蓝鳍金枪鱼、裸盖鱼、异鳞蛇鲭 被引量:2
12
作者 许随根 李家鹏 +7 位作者 李金春 陈曦 杨君娜 熊苏玥 黄鑫 乔晓玲 曲超 王守伟 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2020年第24期259-266,共8页
为实现鱼类及其制品掺假的快速鉴别,以蓝鳍金枪鱼(Thunnus thynnus)线粒体DNA的D-loop区、裸盖鱼(Anoplopoma fimbria)线粒体DNA的16S rRNA基因及异鳞蛇鲭(Lepidocybium flavobrunneum)线粒体DNA的ND4L基因为靶位点,设计扩增产物熔解温... 为实现鱼类及其制品掺假的快速鉴别,以蓝鳍金枪鱼(Thunnus thynnus)线粒体DNA的D-loop区、裸盖鱼(Anoplopoma fimbria)线粒体DNA的16S rRNA基因及异鳞蛇鲭(Lepidocybium flavobrunneum)线粒体DNA的ND4L基因为靶位点,设计扩增产物熔解温度(Tm)具有显著性差异的特异性引物,建立一种快速鉴别鱼类及其制品中蓝鳍金枪鱼、裸盖鱼、异鳞蛇鲭源性成分的3重实时聚合酶链式反应熔解曲线分析法,通过引物特异性、灵敏度及市售样品的检测,对该方法进行检验和评价。结果表明:构建优化的方法具有良好的特异性及灵敏度,单物种DNA检出限为0.001 ng,多物种混合DNA检出限均为0.1 ng,蓝鳍金枪鱼、裸盖鱼、异鳞蛇鲭源性成分的相对检出限分别为0.5%、1%、0.5%,通过对市售样品的检测表明,该方法可用于实际样品掺假的快速鉴别。 展开更多
关键词 鱼类 掺假 多重实时聚合酶链式反应 熔解曲线分析 蓝鳍金枪鱼 裸盖鱼
下载PDF
猪圆环病毒3型检测方法研究进展 被引量:14
13
作者 张爱琼 梁海英 +5 位作者 曾智勇 王彬 徐国 叶百川 何小莉 咸文 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第12期2432-2435,2440,共5页
为了更好地掌握新型猪圆环病毒3型(PCV3)快速、准确而方便的检测方法,现就近两年来国内外相继报道的一种与猪皮炎和肾病综合征、生殖功能衰竭和多系统炎症相关的PCV3主要检测方法包括宏基因组、常规PCR、多重定量实时聚合酶链反应(mqPCR... 为了更好地掌握新型猪圆环病毒3型(PCV3)快速、准确而方便的检测方法,现就近两年来国内外相继报道的一种与猪皮炎和肾病综合征、生殖功能衰竭和多系统炎症相关的PCV3主要检测方法包括宏基因组、常规PCR、多重定量实时聚合酶链反应(mqPCR)、TaqMan实时PCR、实时重组酶聚合酶扩增(rt-RPA)、间接ELISA进行了综述,旨在为PCV3流行情况提供可靠的检测方法。 展开更多
关键词 猪圆环病毒3型 PCR 多重定量实时聚合酶链反应 实时重组酶聚合酶扩增 间接ELISA
原文传递
宫颈癌及癌前病变HPV-16存在状态检测的研究 被引量:10
14
作者 郑莹 彭芝兰 +1 位作者 楼江燕 王和 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2006年第17期961-965,共5页
目的:为建立理想的HPV存在状态检测方法,了解宫颈癌及癌前病变HPV-16DNA的整合状况,初步探讨HPV-16DNA整合在宫颈癌发生发展中的作用及HPV-16整合状态检测可能具有的临床应用价值。方法:采用多重实时PCR同管定量检测HPV-16E2和E6基因,根... 目的:为建立理想的HPV存在状态检测方法,了解宫颈癌及癌前病变HPV-16DNA的整合状况,初步探讨HPV-16DNA整合在宫颈癌发生发展中的作用及HPV-16整合状态检测可能具有的临床应用价值。方法:采用多重实时PCR同管定量检测HPV-16E2和E6基因,根据E2/E6比值来判定HPV-16DNA的存在状态;并对HPV-16阳性的51例宫颈鳞癌和49例宫颈上皮内瘤样病变石蜡标本进行检测。结果:1)HPV-16E2、E6标准曲线相关系数均为1.00,扩增效率均在95%以上。2)确定0.81作为多重实时PCR区分游离型和混合型HPV-16的界值。3)CINⅠ中HPV-16大多以游离方式存在,但仍有整合的发生(42.9%);CINⅡ和CINⅢ中HPV-16以混合型为主;浸润癌中以整合型HPV-16为主。4)HPV-16整合发生率与不同程度的宫颈病变有关,并且随着宫颈病变级别的升高HPV-16整合发生率呈上升趋势。5)Ⅱ+Ⅲ期宫颈癌中整合型HPV-16所占比例显著高于Ⅰ期宫颈癌。结论:1)多重实时定量PCR是一种敏感性高、简便快速的HPV-16病毒存在状态的检测方法。2)HPV-16整合是宫颈癌变的早期事件,与宫颈癌前病变的进展有关。3)宫颈癌中整合型HPV-16的发生可能具有预后价值。 展开更多
关键词 人乳头瘤病毒16 多重实时聚合酶链反应 整合 宫颈癌
下载PDF
食品接触材料中3种致病菌的多重荧光PCR检测 被引量:3
15
作者 柯振华 张雅薇 +4 位作者 陈筱婷 林碧莲 孟鹏 高宇 戴明 《食品研究与开发》 CAS 北大核心 2018年第23期134-141,共8页
建立并优化食品接触材料中金黄色葡萄球菌、沙门氏菌和副溶血性弧菌3种致病菌的多重实时荧光聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)检测方法,评价此方法的特异性和灵敏度,并模拟阳性样品进行检测。结果显示,该方法特异性良好,... 建立并优化食品接触材料中金黄色葡萄球菌、沙门氏菌和副溶血性弧菌3种致病菌的多重实时荧光聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)检测方法,评价此方法的特异性和灵敏度,并模拟阳性样品进行检测。结果显示,该方法特异性良好,检测灵敏度均能达到10~3 CFU/mL,为食品接触材料的微生物检测提供技术保障。 展开更多
关键词 多重实时荧光聚合酶链式反应(PCR) 金黄色葡萄球菌 沙门氏菌 副溶血性弧菌 食品接触材料
下载PDF
饲料微生物添加剂中地衣芽孢杆菌实时荧光PCR检测 被引量:2
16
作者 宋帆 傅德江 +3 位作者 黄姝玲 邱希斌 许任伟 林钊 《福建分析测试》 CAS 2020年第1期54-58,共5页
建立饲料添加剂中地衣芽孢杆菌实时荧光聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)检测方法,评价此方法的特异性和灵敏度,并经实际样品检测。结果显示,该方法特异性良好,检测灵敏度均能达到103 CFU/mL,可用于饲料添加剂中地衣芽孢... 建立饲料添加剂中地衣芽孢杆菌实时荧光聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)检测方法,评价此方法的特异性和灵敏度,并经实际样品检测。结果显示,该方法特异性良好,检测灵敏度均能达到103 CFU/mL,可用于饲料添加剂中地衣芽孢杆菌的快速检测。 展开更多
关键词 多重实时荧光聚合酶链式反应(PCR) 地衣芽孢杆菌 饲料添加剂
下载PDF
多重荧光定量PCR方法在呼吸道合胞病毒和腺病毒检测中的Meta分析 被引量:4
17
作者 赵莉 李贵霞 +4 位作者 赵民 王佶 张瑞卿 冯志山 马学军 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 2018年第5期548-552,共5页
目的通过Meta分析评价多重荧光定量PCR(multiplex real time polymerase chain reaction,MRT—PCR)方法在呼吸道病毒中常见呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)和腺病毒(adenovirus,ADV)感染的诊断价值,为临床... 目的通过Meta分析评价多重荧光定量PCR(multiplex real time polymerase chain reaction,MRT—PCR)方法在呼吸道病毒中常见呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)和腺病毒(adenovirus,ADV)感染的诊断价值,为临床应用提供参考。方法检索数据库包括PubMed、EMBASE、Cochrane、万方、CNKI等,检索2010年1月至2018年1月关于MRT—PCR方法检测呼吸道病毒感染的中英文文献,由2位研究者独立筛选文献、提取资料,并采用QUADAS-2工具评价纳人研究的偏倚风险后,采用Meta—disc1.4对数据进行统计分析。结果本研究纳入10篇文献共2528例样本。Meta分析结果显示,MRT—PCR检测RSV的Sen合并=0.87(95%CI:0.83—0.90)、Spe合并=0.98(95%CI:0.97—0.98)、AUC=1.00。MRT—PCR检测ADV的Sen合并=0.64(95%CI:0.56—0.71)、Spe合并=0.99(95%CI:0.98—0.99)、AUC=0.99、Q=0.96。Deeks漏斗图检验结果提示无明显的发表偏倚。结论MRT-PCR方法检测RSV和ADV的灵敏度有待提高,但检测综合能力较好,对临床上呼吸道病毒感染的早期诊断具有一定的应用价值。 展开更多
关键词 多重荧光定量PCR 呼吸道合胞病毒 腺病毒 META分析
原文传递
驼源性核酸多重快速荧光定量PCR检测方法的建立及检测试剂盒的研制
18
作者 曹新文 王建峰 +6 位作者 刘传强 王春 陆容 张吉红 李秀林 赵秀玲 黄素文 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期664-670,共7页
为准确鉴定骆驼肉乳制品,减少市场中用低价肉乳制品冒充高价肉乳制品的欺诈违法行为,保障食品安全,维护公平合法贸易,建立多重实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)快速高通量检测骆驼核酸的方法。利用多重实时荧光定量PCR法构建肉乳制品中骆... 为准确鉴定骆驼肉乳制品,减少市场中用低价肉乳制品冒充高价肉乳制品的欺诈违法行为,保障食品安全,维护公平合法贸易,建立多重实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)快速高通量检测骆驼核酸的方法。利用多重实时荧光定量PCR法构建肉乳制品中骆驼成分检测方法,设计了哺乳动物18S rRNA基因与骆驼cytB基因的引物探针,对市面上常见肉乳制品进行检测。结果显示,本研究中针对肉乳制品的核酸提取方法不受食品添加剂影响,提取过程简便快捷高效,可于20 min之内完成提取;建立的多重实时荧光定量PCR法具有良好的特异性和灵敏度,在牛奶粉、羊奶粉、驼奶粉、骆驼肉制品、鲜猪肉和鲜骆驼肉6种样本中,成功特异地检测出骆驼成分,且在驼奶粉质量分数为30%、20%、10%、8%、5%、3%、1%和0.5%的条件下进行检测,全部成功检测出,准确度达100%。结果表明,建立的骆驼源性成分多重快速实时荧光定量PCR法可有效鉴别肉乳制品中的骆驼源性基因。 展开更多
关键词 骆驼源制品 TAQMAN探针 多重实时荧光定量PCR 快速核酸检测
原文传递
4种肿瘤标志物mRNA相对表达水平的检测及其在肿瘤化疗疗效评估中的初步应用
19
作者 沈奕 史伟峰 +2 位作者 姜庆波 马锦洪 柳楠楠 《常州实用医学》 2015年第5期281-285,共5页
目的探讨肺癌组织中RRM1、XRCC1、TUBB3和TS mRNA相对表达水平对接受铂类/吉西他滨方案化疗的肺癌患者化疗疗效和预后的影响。方法以β—actin作内参照,应用实时定量RT—PCR技术检测50例癌症患者化疗前肿瘤组织中RRM1、XRCC1、TS和TUB... 目的探讨肺癌组织中RRM1、XRCC1、TUBB3和TS mRNA相对表达水平对接受铂类/吉西他滨方案化疗的肺癌患者化疗疗效和预后的影响。方法以β—actin作内参照,应用实时定量RT—PCR技术检测50例癌症患者化疗前肿瘤组织中RRM1、XRCC1、TS和TUBB3 mRNA表达水平,以RRM1β-actin、XRCC1/β-actin、TS/β-actin和TUBB3/β-actin的比值表示,并跟踪采访21例NSCLC患者的化疗疗效及术后生存率。结果以RRM1、XRRC1、TS、TUBB3 mRNA表达水平的中位数为界,将患者分为高表达组和低表达组。通过统计学分析RRM1、XRRC1、TS、TUBB3 mRNA表达水平与年龄、性别、淋巴结转移及组织学分级均无统计学意义(P〉0.05);铂类药物及吉西他滨药物联合化疗肺癌患者4个周期后,13例(61.9%)肺癌患者疗效显著,8例肺癌患者疗效不显著。通过比较得出,RRM1、XRCC1 mRNA低表达患者的化疗缓解率要显著高于高表达患者(P〈0.05),佟表达水平与缓解率无显著性相关(P〉0.05)。化疗患者中,通过KaplanMeier获得化疗疗效与生存期的生存函数,log—rank检验结果显示,XRCC1、RRM1 mRNA低表达水平比高表达患者有更长的生存期。结论患者RRM1、XRCC1 mRNA化疗前低表达水平比高表达水平对化疗药物有明显的疗效,TS mRNA低表达水平与高表达水平相比对化疗疗效无明显差异;化疗前肺癌肿瘤组织RRM1/β-actin、XRCC1/β-actin、TS/β-actinmRNA水平与化疗疗效呈负相关,是影响肺癌患者化疗疗效的独立因素,联合检测可能具有更好的预测价值。 展开更多
关键词 肿瘤 RRM1/XRCC1/TS/TUBB3 mRNA 化疗疗效 实时定量PCR
下载PDF
多重实时定量PCR同时检测人全血中大肠杆菌与白念珠菌基因方法的建立
20
作者 房嘉宾 康军仁 +2 位作者 马恩陵 郭广亮 崔希增 《中华临床营养杂志》 CAS CSCD 2015年第3期170-175,共6页
目的建立多重实时定量PCR(MRQ—PCR)同时快速检测血中大肠杆菌与白念珠菌DNA的方法,以评估肠屏障损伤可能导致的移位微生物的种类和程度并提供针对性用药的建议。方法选择大肠杆菌β-右旋半乳糖苷酶基因作为检测大肠杆菌的靶基因设... 目的建立多重实时定量PCR(MRQ—PCR)同时快速检测血中大肠杆菌与白念珠菌DNA的方法,以评估肠屏障损伤可能导致的移位微生物的种类和程度并提供针对性用药的建议。方法选择大肠杆菌β-右旋半乳糖苷酶基因作为检测大肠杆菌的靶基因设计引物和探针,选择白念珠菌ITS2基因设计引物和探针。采用QIAamp DNA Blood Mini Kit试剂盒提取大肠杆菌与白念珠菌基因组DNA;建立25μlTaqMan探针MRQ-PCR反应体系;对18份模拟血标本及10份外科发热患者临床标本进行MRQ—PCR检测。结果引物和探针特异性好,大肠杆菌与白念珠菌标准曲线相关系数分别在0.994—0.999和0.994~0.998,扩增效率分别为0.894~1.022和0.905~1.028。标准样品检测限分别为大肠杆菌13.9拷贝/μl和白念珠菌0.8cfu/μl,两种菌的检测灵敏度分别为100%和99.69%,特异度分别为100%和94.73%,标准品中大肠杆菌与白念珠菌特异基因平均回收率分别为(101.89±5.69)%和(103.74±4.64)%,两种菌基因检测的批内变异系数分别为(13.14±10.27)%和(19.18±8.54)%,批间变异系数分别为(14.35±9.34)%和(18.31±10.25)%。全血标本中大肠杆菌与白念珠菌特异基因的检出限分别为12455.2拷贝/ml和800.3cfu/ml,平均回收率分别为(111.60±11.06)%和(99.96±6.16)%,两种菌基因检测的批内变异系数分别为(11.02±5.65)%和(8.14±7.29)%,平均批间变异系数分别为(12.88±7.59)%和(18.62±9.14)%。结论多重实时定量PCR可以同时快速、灵敏、特异地定量检测人全血标本中大肠杆菌与白念珠菌基因,准确度高、重复性好、节省血标本用量及检测成本、总检测时间缩短,在临床全血标本的真菌与细菌快速鉴别检测、抗微生物药物的针对性应用及疗效评估、肠屏障� 展开更多
关键词 多重实时定量PCR 大肠杆菌 白念珠菌 全血
原文传递
上一页 1 下一页 到第
使用帮助 返回顶部