全基因组扩增法应用于低拷贝数DNA检测 被引量：11

1

作者 周怀谷 张晨 《法医学杂志》 CAS CSCD 2006年第1期43-44,47,共3页

目的建立基于多重置换扩增(MDA)技术的全基因组扩增(WGA)方法,实现对低拷贝数(LCN)DNA样品进行分析。方法采用REPLI-g试剂盒对样本进行等温全基因组扩增,扩增产物采用ProfilerPlus试剂盒确定样本的十个STR基因座的等位基因型。结果10pg... 目的建立基于多重置换扩增(MDA)技术的全基因组扩增(WGA)方法,实现对低拷贝数(LCN)DNA样品进行分析。方法采用REPLI-g试剂盒对样本进行等温全基因组扩增,扩增产物采用ProfilerPlus试剂盒确定样本的十个STR基因座的等位基因型。结果10pgDNA模板经全基因组扩增后,能够进行DNA分型。结论全基因组扩增可以用于LCN的DNA分析,帮助提高微量物证的检出成功率。 展开更多

关键词 多重置换扩增 全基因组扩增 低拷贝数

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基于链置换反应的DNA等温扩增技术应用进展 被引量：5

2

作者 何艳 蒋涛 《医学综述》 2010年第1期24-27,共4页

DNA等温扩增是在恒定温度下用非热变性的方法解开DNA双链的一种扩增技术。链置换反应指某些具有链置换活性的DNA聚合酶在延伸新链的同时将下游旧链剥离,它已被用于多种体外等温扩增技术,包括链置换扩增、滚环扩增、多重置换扩增、环介... DNA等温扩增是在恒定温度下用非热变性的方法解开DNA双链的一种扩增技术。链置换反应指某些具有链置换活性的DNA聚合酶在延伸新链的同时将下游旧链剥离,它已被用于多种体外等温扩增技术,包括链置换扩增、滚环扩增、多重置换扩增、环介导的等温扩增等。其主要应用于DNA测序、全基因组扩增、基因芯片、微生物病原体检测等领域。 展开更多

关键词 等温扩增 链置换扩增 滚环扩增 多重置换扩增 环介导的等温扩增

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多重置换扩增——一种新的全基因组扩增技术 被引量：8

3

作者 刘维瑜 金春莲 《国际遗传学杂志》 CAS 2007年第4期265-268,共4页

全基因组扩增技术（MDA）用于扩增大量的DNA以满足遗传检测的需要。在高通量的遗传分型中，处理有限的临床样本的基因组DNA，一直是个瓶颈问题。一种新方法——多重置换扩增，能高度忠实的复制整个基因组DNA，扩增出10～100kb大小的片... 全基因组扩增技术（MDA）用于扩增大量的DNA以满足遗传检测的需要。在高通量的遗传分型中，处理有限的临床样本的基因组DNA，一直是个瓶颈问题。一种新方法——多重置换扩增，能高度忠实的复制整个基因组DNA，扩增出10～100kb大小的片段，能提供大量均一完整的全基因组序列。MDA是一种简单、有效的方法，非常适用于遗传研究、法医学和临床诊断的需要。 展开更多

关键词 全基因组扩增 多重置换扩增 phi29 DNA聚合酶

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多重置换扩增技术用于法医学微量DNA检测效果 被引量：7

4

作者 陈玲 刘超 +1 位作者 王慧君 邱平明 《证据科学》 2008年第6期752-756,共5页

目的探讨多重置换扩增(MDA)技术对法医学微量DNA样品STR检测分型的效果。方法用MDA技术对不同模板量DNA进行全基因组扩增(WGA),扩增产物用实时荧光定量PCR技术定量、用Profiler PlusTM试剂盒检测基因型。结果该方法可对模板DNA增加104～... 目的探讨多重置换扩增(MDA)技术对法医学微量DNA样品STR检测分型的效果。方法用MDA技术对不同模板量DNA进行全基因组扩增(WGA),扩增产物用实时荧光定量PCR技术定量、用Profiler PlusTM试剂盒检测基因型。结果该方法可对模板DNA增加104～106倍。1ng样品DNA的MDA产物可获得9个STR基因座和Amelogenin性别基因座的准确分型结果;低于0.1ng的样品DNA经MDA扩增后,基因座检出数增加,但可见等位基因不平衡或丢失现象。结论MDA技术可有效增加DNA模板量和提高微量DNA分型效果。但样品DNA量低于0.1ng时,MDA产物的STR分型结果判读须慎重。 展开更多

关键词 多重置换扩增 全基因组扩增 微量DNA检测

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多重置换扩增技术在植入前遗传学诊断中的应用 被引量：7

5

作者 彭兆锋 孙莹璞 《国际生殖健康／计划生育杂志》 CAS 2010年第3期235-238,共4页

多重置换扩增技术(MDA)是基于环状滚动扩增的全基因组扩增技术,具有高扩增效率和高保真性等特点。尽管用于单细胞扩增时存在某些缺陷,但其在胚胎植入前遗传学诊断(PGD)实验研究和临床应用中仍取得巨大进展。MDA联合常规PCR技术已成功用... 多重置换扩增技术(MDA)是基于环状滚动扩增的全基因组扩增技术,具有高扩增效率和高保真性等特点。尽管用于单细胞扩增时存在某些缺陷,但其在胚胎植入前遗传学诊断(PGD)实验研究和临床应用中仍取得巨大进展。MDA联合常规PCR技术已成功用于PGD的临床诊断,实现了单次胚胎活检、单个胚胎细胞的性别、部分单基因病的同步诊断。 展开更多

关键词 植入前遗传学诊断 全基因组扩增 多重置换扩增

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在β地中海贫血着床前遗传学诊断中应用多重置换扩增进行预处理的临床分析 被引量：7

6

作者 王静 徐艳文 +3 位作者 曾艳红 丁晨晖 徐建 周灿权 《生殖医学杂志》 CAS 2014年第8期653-657,共5页

目的分析应用多重置换扩增技术(multiple displacement amplification,MDA)进行全基因组扩增的预处理是否影响β地中海贫血着床前遗传学诊断(preimplantation genetic diagnosis,PGD)的准确效能。方法回顾性地分析2009年1月至2013年6月... 目的分析应用多重置换扩增技术(multiple displacement amplification,MDA)进行全基因组扩增的预处理是否影响β地中海贫血着床前遗传学诊断(preimplantation genetic diagnosis,PGD)的准确效能。方法回顾性地分析2009年1月至2013年6月,因双方均为β地中海贫血携带者而行PGD治疗的周期资料,其中34个周期采用多重巢式聚合酶链反应(PCR)结合反向斑点杂交技术对单细胞进行诊断,另有38个周期行MDA进行全基因组扩增的预处理后,再结合反向斑点杂交技术进行诊断。结果两组患者在年龄、获卵数等实验室指标上无统计学差异。MDA组未检出(扩增失败)率为9.79%,低于行巢式PCR组的15.24%,而杂合子率46.33%则略高,但两种方法在诊断结果上并无统计学差异。结论应用MDA技术进行全基因组的预扩增可有效增加检测模板,实现多位点及多种疾病的诊断,而且不影响β地中海贫血地贫基因的诊断效能。 展开更多

关键词 巢式聚合酶链反应 多重置换扩增 Β地中海贫血

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应用全基因组扩增技术对α地中海贫血进行植入前遗传学诊断的效果分析 被引量：6

7

作者 李荣 邓明芬 +5 位作者 徐艳文 曾艳红 王静 许言 潘家富 周灿权 《生殖医学杂志》 CAS 2018年第2期166-170,共5页

目的研究α地中海贫血患者囊胚活检后先进行全基因组扩增后再应用荧光PCR进行诊断的效果。方法回顾分析本中心2015年1月至2016年11月α地中海贫血PGD周期资料,共139个周期,对比分析卵裂球活检后直接应用荧光PCR进行诊断(诊断方法一)与... 目的研究α地中海贫血患者囊胚活检后先进行全基因组扩增后再应用荧光PCR进行诊断的效果。方法回顾分析本中心2015年1月至2016年11月α地中海贫血PGD周期资料,共139个周期,对比分析卵裂球活检后直接应用荧光PCR进行诊断(诊断方法一)与囊胚活检后先进行全基因组扩增后再应用荧光PCR进行诊断(诊断方法二)的结果。结果两组在女方年龄、获卵数、正常受精数均无统计学差异(P>0.05),但方法二(7.61±3.05)的平均活检个数显著小于方法一(9.48±3.66)(P<0.05)。两种方法的正常胚胎率(35.22%vs.25.87%)、杂合子胚胎率(30.11%vs.50.19%)、异常胚胎率(30.11%vs.23.94%)、诊断失败率(16.21%vs.2.81%)有统计学差异(P<0.05),临床妊娠率(50.00%vs.52.17%)无统计学差异(P>0.05)。结论囊胚活检后先进行全基因组扩增后再应用荧光PCR进行诊断的效果明显好于卵裂球活检后直接应用荧光PCR进行诊断。 展开更多

关键词 植入前遗传学诊断 Α地中海贫血 多重置换扩增

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混合斑中精子细胞分离及其DNA制备方法 被引量：5

8

作者 李鑫 胡兰 +1 位作者 冯雪飞 刘晓 《法医学杂志》 CAS CSCD 2007年第4期286-289,共4页

目的尝试建立一种检测混合斑中精子细胞的方法。方法使用显微操作法捕获精子细胞,全基因组扩增(多重置换扩增)精子细胞DNA。结果对10管精斑检材的全基因组扩增,获得了高产、保真的产物。使用50μL体系对20个精子细胞直接进行全基因组扩... 目的尝试建立一种检测混合斑中精子细胞的方法。方法使用显微操作法捕获精子细胞,全基因组扩增(多重置换扩增)精子细胞DNA。结果对10管精斑检材的全基因组扩增,获得了高产、保真的产物。使用50μL体系对20个精子细胞直接进行全基因组扩增,省去了对起始模板的纯化过程,DNA扩增倍数达30000倍以上,片段长度大多在15 kb以上,其STRs复合扩增分型结果有可参照性。结论显微操作法可以有效捕获精子细胞,排除干扰,多重置换扩增可以提供足够量的产物用于法医DNA分析,该方法具有可行性。 展开更多

关键词 法医物证学 显微操作法 混合斑 精子细胞 多重置换扩增 全基因组扩增 短串联重复序列

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微生物单细胞基因组技术及其在环境微生物研究中的应用 被引量：5

9

作者 王铱 徐鹏 戴欣 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第11期1691-1698,共8页

单细胞及单细胞基因组学研究是近年生命科学研究的热点之一,微生物单细胞基因组学研究是继微生物元基因组学(又称宏基因组学,Metagenomics)之后新发展起来的,可有效获取环境中大量无法培养的微生物遗传信息的技术。微生物单细胞基因组... 单细胞及单细胞基因组学研究是近年生命科学研究的热点之一,微生物单细胞基因组学研究是继微生物元基因组学(又称宏基因组学,Metagenomics)之后新发展起来的,可有效获取环境中大量无法培养的微生物遗传信息的技术。微生物单细胞基因组技术包括单细胞获取、全基因组扩增、全基因组测序以及数据分析等步骤,目前该技术在环境微生物研究中的应用主要集中于探索未被元基因组技术或其它常规技术探测到的新型功能基因,或是对环境中物种丰度极小的未培养微生物的发现,以及对微生物细胞生命进化过程的研究等。本文对微生物单细胞基因组技术中单细胞获取和全基因组扩增所涉及到的不同方法以及应用此技术对环境微生物取得的主要研究进展进行综述。 展开更多

关键词 微生物基因组 单细胞基因组扩增技术 多重置换扩增

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采用多重置换扩增进行脊肌萎缩症的植入前遗传学诊断研究 被引量：4

10

作者 沈晓婷 张成 +5 位作者 徐艳文 钟依平 曾艳红 王静 丁晨晖 周灿权 《中国优生与遗传杂志》 2015年第9期93-96,共4页

目的建立一种可靠、准确的植入前遗传学诊断方法,可广泛用于各种类型的脊肌萎缩症。方法采用多重置换扩增(MDA)对单细胞进行全基因组扩增,等位基因特异性扩增SMN1外显子7进行脊肌萎缩症(SMA)致病基因检测及采用与SMN基因紧密连锁的12个... 目的建立一种可靠、准确的植入前遗传学诊断方法,可广泛用于各种类型的脊肌萎缩症。方法采用多重置换扩增(MDA)对单细胞进行全基因组扩增,等位基因特异性扩增SMN1外显子7进行脊肌萎缩症(SMA)致病基因检测及采用与SMN基因紧密连锁的12个短串联重复序列(STR)进行SMA的单体型分析。结果共进行了80单个淋巴细胞及63个单卵裂球的MDA。MDA扩增效率在单淋巴细胞中为97.5%(78/80),在单卵裂球为96.8%(61/63)。在单淋巴细胞及单卵裂球MDA产物中,总的PCR扩增效率和等位基因脱扣率(ADO)为分别为96.2%(587/610)和8.7%(52/597),95.5%(722/756)和9.9%(54/547)。在单淋巴细胞MDA产物中,SMN1外显子7的PCR结果均与外周血结果相符,而单个卵裂球MDA产物中,有一个PCR扩增失败,扩增效率为98.4%(60/61)。结论该方法可用于常见的缺失型的SMA的PGD,而且可以应用于突变型的为SMA的PGD,为进一步的临床应用奠定了基础。 展开更多

关键词 脊肌萎缩症 植入前遗传学诊断 多重置换扩增 单体型分析 等位基因脱扣

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不同样本前处理方法对高通量测序检测HBV、HCV、TTV结果的影响 被引量：3

11

作者 王伟 安小平 +3 位作者 裴广倩 陈禹保 史套兴 童贻刚 《生物技术通讯》 CAS 2015年第2期236-240,共5页

目的:探索不同样品前处理方法对于不同类型病毒检测的效果。方法:分别将携带乙肝病毒(双链环状DNA病毒)、丙肝病毒(单正链RNA病毒)、TTV(Torque teno virus)(单链环状DNA病毒)的血清等比例混合,模拟混合感染,然后分别采用多重置换扩增(M... 目的:探索不同样品前处理方法对于不同类型病毒检测的效果。方法:分别将携带乙肝病毒(双链环状DNA病毒)、丙肝病毒(单正链RNA病毒)、TTV(Torque teno virus)(单链环状DNA病毒)的血清等比例混合,模拟混合感染,然后分别采用多重置换扩增(MDA)和随机锚定PCR扩增并进行高通量测序,同时以原始样品(未扩增)直接高通量测序作为对照。结果:原始样品(未扩增)直接测序,产出的数据大部分为人类的序列;MDA方法中绝大部分数据为TTV、乙肝病毒;随机锚定PCR扩增方法中绝大部分数据为乙肝病毒。结论:MDA方法适合扩增环状病毒,随机锚定PCR扩增适合含量高的病毒,不做任何处理直接高通量测序检测病毒效果最差。本研究可为指导不同类型病原体如何选择扩增方案提供借鉴。 展开更多

关键词 多重置换扩增 随机锚定PCR 高通量测序

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MDA-PCR检测痕量结核分枝杆菌核酸方法的建立 被引量：2

12

作者 周林甫 万群 +1 位作者 赵钢 张红鸭 《广东医学》 CAS 2022年第6期702-706,共5页

目的建立基于多重置换扩增及PCR(MDA-PCR)技术检测痕量结核分枝杆菌(M.tb)核酸的方法。方法制备含有M.tb插入序列IS6110和IS1081的不同稀释浓度的质粒DNA标准品。MDA-PCR分别通过检测质粒DNA标准品和其他细菌标准株基因组DNA来验证该方... 目的建立基于多重置换扩增及PCR(MDA-PCR)技术检测痕量结核分枝杆菌(M.tb)核酸的方法。方法制备含有M.tb插入序列IS6110和IS1081的不同稀释浓度的质粒DNA标准品。MDA-PCR分别通过检测质粒DNA标准品和其他细菌标准株基因组DNA来验证该方法的敏感度及特异性。另外,通过对模拟结核性脑膜炎(TBM)患者脑脊液(CSF)标本检测,评价该方法检测临床标本的可行性。结果MDA-PCR方法对质粒DNA标准品IS6110、IS1081基因的最低检测下限分别为10、25拷贝,其检测敏感度是ST-PCR方法的40~100倍。另外,该方法对5种其他细菌标准株基因组DNA的检测结果均为阴性,无非特异性反应发生。MDA-PCR对模拟TBM患者CSF中M.tb IS6110及IS1081基因的最低检测下限均为1 CFU,其检测敏感度是ST-PCR的10^(4)~10^(5)倍。结论MDA-PCR方法可提高对CSF中痕量M.tb核酸的检测效率,为TBM早期诊断提供了一种新的研究策略。 展开更多

关键词 多重置换扩增 PCR 结核性脑膜炎 脑脊液

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Bst DNA聚合酶大片段在全基因组扩增中的应用 被引量：2

13

作者 张心愿 邓佳 +3 位作者 刘馨 陈琳 林峻 蔡伟文 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期48-54,共7页

Bst DNA聚合酶大片段作为一种常用的DNA聚合酶,因其独特的特点:能引发链置换反应、高保真、耐高温等,而成为一种重要的DNA多重置换扩增酶。目的:为减少成本,设计一种高产,方便且扩增活性高的Bst DNA聚合酶大片段表达体系;探究该酶应用... Bst DNA聚合酶大片段作为一种常用的DNA聚合酶,因其独特的特点:能引发链置换反应、高保真、耐高温等,而成为一种重要的DNA多重置换扩增酶。目的:为减少成本,设计一种高产,方便且扩增活性高的Bst DNA聚合酶大片段表达体系;探究该酶应用于胃癌石蜡包埋组织基因组DNA的扩增条件。方法:采用p TWIN1质粒作为载体克隆表达Bst DNA聚合酶大片段,应用几丁质亲和层析柱纯化该酶,使用该酶对人类基因组DNA进行不同温度下扩增,探究其最适反应温度,并据此对胃癌石蜡包埋组织基因组DNA进行扩增。结果:由此得到的Bst DNA聚合酶大片段能运用于胃癌石蜡包埋组织基因组DNA的扩增,扩增效率可达200倍,并能应用于a CGH芯片。结论:扩增得到保真性高,覆盖基因组范围大的DNA扩增产物。该应用与a CGH结合,使得对少量的癌症石蜡包埋组织DNA样本进行全基因组扩增,并进行其基因拷贝数变异研究成为可能。 展开更多

关键词 BST DNA聚合酶大片段 多重置换扩增 石蜡包埋组织 全基因组扩增

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全基因组扩增技术在植入前遗传学诊断中的应用 被引量：2

14

作者 周怡雯 赵晓明 《国际生殖健康／计划生育杂志》 CAS 2009年第2期110-113,共4页

全基因组扩增技术是一种对微量DNA进行均衡扩增的方法,用于各类遗传检测,对于获取细胞数目及DNA量非常有限的植入前遗传学诊断是十分可贵的。该项技术主要包括经热循环扩增和恒温扩增两类方法,其中恒温扩增的多重置换扩增法为近几年发... 全基因组扩增技术是一种对微量DNA进行均衡扩增的方法,用于各类遗传检测,对于获取细胞数目及DNA量非常有限的植入前遗传学诊断是十分可贵的。该项技术主要包括经热循环扩增和恒温扩增两类方法,其中恒温扩增的多重置换扩增法为近几年发展起来的技术,目前多重置换扩增法在植入前遗传学诊断中的应用正备受关注。对全基因组扩增技术的常用方法,尤其对多重置换扩增法及其在植入前遗传学诊断中的应用现状做综述。 展开更多

关键词 全基因组扩增 多重置换扩增 植入前遗传学诊断

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多重置换扩增在植入前遗传学诊断中的应用及展望 被引量：2

15

作者 张印峰 罗海宁 +1 位作者 黎小佩 张云山 《中华医学遗传学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期431-434,共4页

多重置换扩增是一种新兴的全基因组扩增技术，能对单个细胞进行全基因扩增，产生大量的优质DNA，具有高扩增效率和高保真性等特点。多重置换扩增联合常规PCR已被成功用于植入前遗传学诊断，进一步扩展了后者的应用范围。

关键词 多重置换扩增 植入前遗传学诊断 全基因组扩增

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微阵列比较基因组杂交技术用于植入前胚胎非整倍体筛查的初步观察 被引量：2

16

作者 吕永焕 宋学茹 +3 位作者 鲁琳琳 赵晓徽 吕睿 白晓红 《中国计划生育学杂志》 2013年第9期618-623,共6页

目的：探讨微阵列比较基因组杂交（aCGH）技术在植入前胚胎非整倍体筛查中的应用.方法：选取就诊于天津医科大学总医院生殖中心行体外受精-胚胎移植患者冻存的正常8细胞胚胎4枚,患者夫妇均自愿捐献冻存胚胎用于科研并签订知情同意书.分... 目的：探讨微阵列比较基因组杂交（aCGH）技术在植入前胚胎非整倍体筛查中的应用.方法：选取就诊于天津医科大学总医院生殖中心行体外受精-胚胎移植患者冻存的正常8细胞胚胎4枚,患者夫妇均自愿捐献冻存胚胎用于科研并签订知情同意书.分别从4枚冻融胚胎中获取卵裂球进行多重置换扩增,扩增产物经过酶切、荧光标记、纯化、定量后与处理后的正常女性单个淋巴细胞扩增产物共同杂交（采用aCGH芯片）,利用Agilent扫描仪扫描芯片、获取图像并通过软件读取和分析数据,将重复/缺失区域在染色体上定位.结果：胚胎1的1～4号样本中1号样本的aCGH结果为47,XX,del（5）（p15.33-p12）,del（9）（q13-q34.13）,＋21;2～4号样本均为46,XX.胚胎2的5、6号样本结果均为47,XX,＋19.胚胎3的7、8号样本结果均为46,XX.胚胎4的9、10号样本结果均为46,XY.结论：aCGH能够用于检测植入前胚胎单个卵裂球细胞全基因组的非整倍体筛查. 展开更多

关键词 植入前遗传学筛查 微阵列比较基因组杂交 体外受精-胚胎移植 非整倍体 多重置换扩增

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男性不育患者卵裂期胚胎Y染色体微缺失检测分析 被引量：2

17

作者 张伟伟 卓胜楠 +1 位作者 张云山 罗海宁 《中国计划生育学杂志》 2013年第11期746-750,共5页

目的:探讨男性不育患者行卵胞浆内单精子注射(ICSI)技术治疗后卵裂期胚胎Y染色体微缺失情况。方法:对行ICSI助孕治疗的19例严重少精和无精症患者行外周血Y染色体微缺失(AZF)检测,并选取其第3天移植后剩余的无冷冻价值的双原核(2pn)和单... 目的:探讨男性不育患者行卵胞浆内单精子注射(ICSI)技术治疗后卵裂期胚胎Y染色体微缺失情况。方法:对行ICSI助孕治疗的19例严重少精和无精症患者行外周血Y染色体微缺失(AZF)检测,并选取其第3天移植后剩余的无冷冻价值的双原核(2pn)和单原核(1pn)胚胎,通过显微操作获得单个卵裂球,通过多重置换扩增(MDA)技术进行全基因组扩增,采用多重聚合酶链反应(PCR)进行性别鉴定,对男性胚胎行AZF微缺失检测。结果:①AZF缺失占2/19;②MDA扩增成功率为93.2%(41/44);③对23例男性胚胎行AZF缺失检测,SRY基因扩增成功率为87.0%(20/23),9个男性胚胎发生AZF缺失(9/23),其中3个为垂直遗传,1个缺失范围扩大,5个为新生缺失。结论:Y染色体微缺失可通过ICSI技术从父代遗传给子代,并可在遗传过程中发生Y染色体新生微缺失和缺失范围扩大。 展开更多

关键词 多重置换扩增(MDA) Y染色体微缺失 卵胞浆内单精子注射

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短串联重复序列在染色体罗氏易位植入前遗传学诊断的应用 被引量：2

18

作者 沈晓婷 吴海涛 +5 位作者 徐艳文 钟依平 曾艳红 王静 丁晨晖 周灿权 《实用妇产科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第11期830-833,共4页

目的：采用多重置换扩增（MDA）结合短串联重复序列（STR）建立一种基于PCR技术诊断染色体罗氏易位的植入前遗传学诊断（PGD）方法。方法：选择位于易位染色体上的STR位点，对家系采用荧光PCR进行分析，选择有多态性的位点，再采用MDA... 目的：采用多重置换扩增（MDA）结合短串联重复序列（STR）建立一种基于PCR技术诊断染色体罗氏易位的植入前遗传学诊断（PGD）方法。方法：选择位于易位染色体上的STR位点，对家系采用荧光PCR进行分析，选择有多态性的位点，再采用MDA对单细胞进行全基因组扩增，根据家系分析的结果，对具有多态性的STR位点进行分析诊断。结果：对3个家系进行了4个取卵周期（3个PGD周期），每个家系分别采用7～15个具有多态性的STR位点进行分析，共对24个胚胎进行诊断。PGD的诊断效率为95．8％（23／24），平衡胚胎占52．2％（12／23），异常胚胎占47．8％（11／23），共移植了6个胚胎，获得2例临床妊娠，临床妊娠率为66．7％（2／3），出生了2个健康婴儿，染色体核型均正常。结论：采用依赖于STR的PCR分析法可以用于染色体罗氏易位的PGD。 展开更多

关键词 植入前遗传学诊断 多重置换扩增 短串联重复序列 染色体罗氏易位

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Phi29DNA聚合酶最新应用研究进展 被引量：1

19

作者 练杜娟 仇建萍 +2 位作者 张平静 朱远源 李谦 《药物生物技术》 CAS 2016年第2期150-154,共5页

phi29 DNA聚合酶来源于枯草芽孢杆菌噬菌体phi29,具有连续合成和链置换性质,且具有高保真性。它是DNA扩增包括滚环扩增和多重置换扩增的理想工具。文章从phi29 DNA聚合酶的来源和结构与功能、近期对于phi29 DNA聚合酶的应用研究入手,综... phi29 DNA聚合酶来源于枯草芽孢杆菌噬菌体phi29,具有连续合成和链置换性质,且具有高保真性。它是DNA扩增包括滚环扩增和多重置换扩增的理想工具。文章从phi29 DNA聚合酶的来源和结构与功能、近期对于phi29 DNA聚合酶的应用研究入手,综述了phi29 DNA聚合酶的结构与功能的关系及其用于核酸测序,病毒检测,miRNA检测方面的应用前景。 展开更多

关键词 phi29 DNA聚合酶 滚环扩增 多重置换扩增 测序 病毒检测 miRNA检测

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多重置换扩增技术及其法医学应用展望 被引量：1

20

作者 杨华昕 丁梅 +3 位作者 王保捷 庞灏 姜航航 刘欣 《中国法医学杂志》 CSCD 2012年第5期379-382,共4页

多重置换扩增技术(multiple displacement amplification,MDA)是一种新型的全基因组扩增技术,具有操作简单、产物质量好、产物量稳定和扩增较均衡的优点,可以扩增低拷贝、混合、降解、含抑制物的DNA检材,为后续分析提供良好的高质量的... 多重置换扩增技术(multiple displacement amplification,MDA)是一种新型的全基因组扩增技术,具有操作简单、产物质量好、产物量稳定和扩增较均衡的优点,可以扩增低拷贝、混合、降解、含抑制物的DNA检材,为后续分析提供良好的高质量的扩增产物,在法医物证学领域具有很大的应用潜力,本文对该项技术的研究进展及应用前景进行综述。 展开更多

关键词 法医物证学 全基因组扩增 多重置换扩增

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