环γ-聚谷氨酸的制备及美白活性研究

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作者 王梦灿 朱希强 林剑 《食品与药品》 CAS 2024年第1期49-56,共8页

目的 制备环γ-聚谷氨酸,研究其美白活性。方法 以谷氨酸(Fmoc-Glu-OTBU)为原料,制备四元、八元和十元的环γ-聚谷氨酸(cyclo-γ-PGA),通过体外和细胞内实验,研究3种不同相对分子质量(M_(r))的cyclo-γ-PGA的酪氨酸酶抑制活性。结果 测... 目的 制备环γ-聚谷氨酸,研究其美白活性。方法 以谷氨酸(Fmoc-Glu-OTBU)为原料,制备四元、八元和十元的环γ-聚谷氨酸(cyclo-γ-PGA),通过体外和细胞内实验,研究3种不同相对分子质量(M_(r))的cyclo-γ-PGA的酪氨酸酶抑制活性。结果 测得3种产物四元cyclo-γ-PGA、八元cyclo-γ-PGA和十元cyclo-γ-PGA纯度分别为98.31%,95.29%,95.67%,M_(r)分别为516.39,1032.83,1291.28。以γ-PGA为对照品,3种不同M_(r)的cyclo-γ-PGA均具有不同程度的酪氨酸酶抑制活性,其中十元cyclo-γ-PGA酪氨酸酶活性在体外和细胞内均最强。结论 cyclo-γ-PGA具有美白活性,美白活性随着M_(r)的增大而增加,且在细胞内的特性表现更优异;cyclo-γ-PGA的美白活性要高于γ-PGA,为后续cyclo-γ-PGA用于皮肤美白和化妆品领域中提供理论基础。 展开更多

关键词 环γ-聚谷氨酸 美白活性 酪氨酸酶抑制 小鼠黑色素瘤细胞

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人hCGβ真核表达载体的构建及稳定转染B16细胞系的建立 被引量：2

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作者 张亮 王宇 +4 位作者 江乐 阎瑾琦 王越 胡明明 于继云 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期623-626,共4页

目的：构建人hCGβ真核表达载体，稳定转染入小鼠黑色素瘤B16细胞，建立稳定表达人hCGβ的小鼠黑色素瘤细胞系。方法：采用PCR方法扩增出人hCGβ全长基因的cDNA编码区序列，利用DNA重组技术将其定向插入到真核表达载体pIRES—neo中，并... 目的：构建人hCGβ真核表达载体，稳定转染入小鼠黑色素瘤B16细胞，建立稳定表达人hCGβ的小鼠黑色素瘤细胞系。方法：采用PCR方法扩增出人hCGβ全长基因的cDNA编码区序列，利用DNA重组技术将其定向插入到真核表达载体pIRES—neo中，并加入酶切位点和6×His标签，得到重组表达质粒pIRES—neo—hCGβ-（His）6。利用阳离子脂质体介导法将其稳定转染入小鼠黑色素瘤B16细胞，经G418加压筛选出阳性克隆。RT—PCR、Western blot及免疫荧光检测人hCGβ在B16细胞中的表达。结果：经限制性内切酶鉴定及序列分析，pIRES—neo—hCGβ一（His）6重组体构建正确，最终建立的表达人hCGβ基因的B16细胞系阳性率高于90％。结论：成功构建了真核表达载体plRES—neo—hCGβ-（His）6，建立的稳定转染人hCGβ小鼠黑色素瘤细胞系能够高效表达hCGβ基因。该稳定转染细胞系的建立为进一步研究人hCGβ抗肿瘤基因疫苗的功能提供了良好的实验基础，为hCGβ在肿瘤免疫治疗中的应用奠定了研究基础。 展开更多

关键词 HCGΒ 稳定转染 小鼠黑色素瘤细胞 肿瘤免疫治疗

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B16-F10-luc-G5黑色素瘤细胞生物学特性的研究 被引量：2

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作者 苏云术 周鸿敏 徐利军 《现代肿瘤医学》 CAS 2013年第10期2169-2173,共5页

目的:探讨B16-F10-luc-G5黑色素瘤细胞的生物学特性。方法:倒置荧光显微镜下连续观察B16-F10-luc-G5细胞生长动态。流式细胞术检测冻存复苏后、培养基漂浮细胞、胰酶消化损伤后的细胞死亡率以评价其对实验损伤的耐受性。1×104/孔B1... 目的:探讨B16-F10-luc-G5黑色素瘤细胞的生物学特性。方法:倒置荧光显微镜下连续观察B16-F10-luc-G5细胞生长动态。流式细胞术检测冻存复苏后、培养基漂浮细胞、胰酶消化损伤后的细胞死亡率以评价其对实验损伤的耐受性。1×104/孔B16-F10-luc-G5细胞按1∶2梯度稀释至0.78×102/孔,加入底物荧光素后检测其生物发光特性。Babl/C和C57 bl/6雄性小鼠各10只接种该细胞,目测肿瘤生长速度和活体成像监测Babl/C小鼠移植瘤生长动态以评价其成瘤特性。结果:B16-F10-luc-G5细胞生长动态符合典型B16-F10细胞特性,无自发及激发荧光。B16-F10-luc-G5细胞冻存、漂浮细胞及对数生长期细胞消化后死亡率分别为23.8%、35.8%和4.8%。B16-F10-luc-G5细胞数与实测平均光子数之间存在线性回归关系,检测光子数可反映细胞数目。两组小鼠移植成瘤率均为100%,平均肿瘤出现时间差异显著(t=9.05,P<0.05),移植瘤病理符合B16黑色素瘤典型生长特点;活体成像监测可灵敏监测移植瘤生长动态。结论:B16-F10-luc-G5细胞具有生长快、对各种实验操作耐受性好、标记生物发光基因易追踪等优点,且其一般特性与B16-F10细胞基本相同,是肿瘤学研究良好的实验材料。 展开更多

关键词 B16-F10-luc-G5 黑色素瘤细胞 生物学特性 活体成像

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PMA及乏氧诱导VEGF上调的细胞模型构建及用于RNAi研究

4

作者 杨艳 吕国军 +5 位作者 郭昕 张德蒙 于炜婷 张英 刘袖洞 马小军 《现代生物医学进展》 CAS 2012年第2期265-269,共5页

目的:探讨佛波酯(PMA)与乏氧诱导对小鼠黑色素瘤细胞B16-F10中血管内皮细胞生长因子(VEGF)表达量的影响,构建适合RNA干扰(RNAi)的体外细胞模型。方法:通过酶联免疫吸附试验(ELISA法)在蛋白质水平上检测细胞分泌的VEGF量,并用激光共聚焦... 目的:探讨佛波酯(PMA)与乏氧诱导对小鼠黑色素瘤细胞B16-F10中血管内皮细胞生长因子(VEGF)表达量的影响,构建适合RNA干扰(RNAi)的体外细胞模型。方法:通过酶联免疫吸附试验(ELISA法)在蛋白质水平上检测细胞分泌的VEGF量,并用激光共聚焦显微镜观察小干扰RNA(siRNA)转染的细胞胞吞及细胞形态。结果:1 M PMA处理细胞2 h能明显上调B16-F10细胞中VEGF蛋白的合成及分泌,与常规培养相比,细胞可增加50%的VEGF水平。再经乏氧诱导48 h,稳定释放到培养液里的VEGF浓度大幅提高200%,范围在55-65 pg/mL/h。结论:经PMA和乏氧诱导后,B16-F10细胞稳定的VEGF分泌量与一定时间内分泌的稳定性均表明其适合作为RNAi的体外细胞模型。初步的RNAi结果表明,TKO/siRNA纳米粒与壳聚糖/siRNA纳米粒对于VEGF的沉默效率达40%。 展开更多

关键词 小鼠黑色素瘤细胞 血管内皮细胞生长因子 PMA诱导 乏氧诱导 RNAi模型

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金纳米粒子对黑色素瘤细胞的重离子辐射增敏效应研究

5

作者 张鹏程 刘岩 +2 位作者 金晓东 陈卫强 李强 《原子核物理评论》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期492-498,共7页

采用配体交换法合成了粒径15 nm左右的11-巯基十一烷酸包被的金纳米粒子(mAuNPs),使用透射电镜和纳米粒度电位仪对合成后的金纳米粒子进行了表征,然后用MTT法检测了mAuNPs对体外培养小鼠黑色素瘤B16-F10细胞的毒性。在传能线密度(LET)为... 采用配体交换法合成了粒径15 nm左右的11-巯基十一烷酸包被的金纳米粒子(mAuNPs),使用透射电镜和纳米粒度电位仪对合成后的金纳米粒子进行了表征,然后用MTT法检测了mAuNPs对体外培养小鼠黑色素瘤B16-F10细胞的毒性。在传能线密度(LET)为50 keV/μm的碳离子束照射下,利用香豆素-3-羧酸(3CCA)作为荧光探针检测mAuNPs对水溶液中羟自由基的增强效应、二氯荧光素双醋酸盐(DCFHDA)检测mAuNPs对细胞内活性氧(ROS)的增强效应、克隆形成法检测mAuNPs对B16-F10细胞的辐射增敏效应。实验结果表明:mAuNPs对小鼠黑色素瘤B16-F10细胞基本无毒;mAuNPs对水溶液中的羟自由基产额增强为1.08~2.95倍;在共培养浓度为5μg/mL情况下mAuNPs增加了胞内活性氧水平,mAuNPs在10%细胞存活水平下的辐射增敏比(SER)为1.15。因此,mAuNPs在黑色素瘤细胞中展现出对重离子的辐射增敏效应。 展开更多

关键词 金纳米粒子(AuNPs) 小鼠黑色素瘤细胞 辐射增敏效应 碳离子辐射

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呋喃骈呋喃木脂素的体外抗肿瘤活性 被引量：16

6

作者 赵晨阳 邱嵘 郑荣梁 《兰州大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2000年第4期66-68,共3页

利用 MTT快速比色法 ,以长春新碱 (Vincristin Sulfas)为阳性对照 ,研究了从玄参科(Scrophulariaceae)兰石草属兰石草 (L ancea tibetica Hook Fet Thoms)中提取的呋喃骈呋喃木脂素对人肝癌细胞 (SMMC- 772 1) ,人宫颈癌细胞 (Hela) ,... 利用 MTT快速比色法 ,以长春新碱 (Vincristin Sulfas)为阳性对照 ,研究了从玄参科(Scrophulariaceae)兰石草属兰石草 (L ancea tibetica Hook Fet Thoms)中提取的呋喃骈呋喃木脂素对人肝癌细胞 (SMMC- 772 1) ,人宫颈癌细胞 (Hela) ,中国仓鼠肺成纤维细胞 (V79)及小鼠黑色素肉瘤细胞 (B16 )的体外抗肿瘤活性 .结果显示 :呋喃骈呋喃木脂素 L C1对 4种细胞均有较强的抑制作用 ,IC50 在 4 0 .2～ 87.9μg/ m L范围 ,它对 B16的抑制作用强于长春新碱 .但是 ,L C2和 L C3均无抗癌活性 (>4 0 0 μg/ m L) ,可能 L C2和 L C3的酚羟基上的 H被糖基取代而使抗癌活性丧失 . 展开更多

关键词 呋喃骈呋喃木脂素 抗肿瘤药 抗肿瘤活性

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原儿茶酸对小鼠黑色素瘤B16细胞酪氨酸酶活力及黑色素生成的抑制效应 被引量：11

7

作者 杨美花 石艳 +2 位作者 李智聪 王秋红 陈清西 《厦门大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期842-845,共4页

酪氨酸酶是生物体内黑色素合成的关键酶,其抑制剂有着广泛的应用前景.从天然药物的有效成分中筛选安全的酶抑制剂具有重要意义.以小鼠黑色素瘤B16细胞为模型,研究了天然药物有效成分原儿茶酸对黑色素生成和酪氨酸酶活力的影响.实验结果... 酪氨酸酶是生物体内黑色素合成的关键酶,其抑制剂有着广泛的应用前景.从天然药物的有效成分中筛选安全的酶抑制剂具有重要意义.以小鼠黑色素瘤B16细胞为模型,研究了天然药物有效成分原儿茶酸对黑色素生成和酪氨酸酶活力的影响.实验结果显示:原儿茶酸可显著降低细胞的黑色素含量,浓度为10μmol/L时使黑色素含量降低60%.进一步研究发现,原儿茶酸对小鼠黑色素瘤B16细胞粗提取和共培养体系中的酪氨酸酶均有较强的抑制作用.对粗提酪氨酸酶的活力半抑制浓度(IC50)约为160μmol/L,与共培养体系中酪氨酸酶活力的抑制、抑制剂浓度和作用时间有关,10μmol/L作用54h可使酪氨酸酶活力下降88%.本研究为原儿茶酸作为酪氨酸酶抑制剂的开发应用奠定了基础. 展开更多

关键词 小鼠黑色素瘤B16细胞(B16细胞) 酪氨酸酶 黑素生成 原儿茶酸

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甘草查尔酮B诱导小鼠黑色素瘤细胞凋亡作用 被引量：9

8

作者 冉芳 王爱华 +5 位作者 袁萱 蒋江涛 杨帆 王振华 张波 郑秋生 《中国实验方剂学杂志》 CAS 北大核心 2013年第9期220-224,共5页

目的:研究甘草查尔酮B(licochalcone B)诱导小鼠黑色素瘤细胞(B16F0)凋亡作用并初步探讨其机制。方法:取对数生长期B16F0细胞按5 000个/孔接种于96孔板中,MTT染色法检测甘草查尔酮B(5,7.5,10,12.5,15 mg.L-1)作用24 h后,对B16F0细胞的... 目的:研究甘草查尔酮B(licochalcone B)诱导小鼠黑色素瘤细胞(B16F0)凋亡作用并初步探讨其机制。方法:取对数生长期B16F0细胞按5 000个/孔接种于96孔板中,MTT染色法检测甘草查尔酮B(5,7.5,10,12.5,15 mg.L-1)作用24 h后,对B16F0细胞的增殖抑制作用;取对数生长期B16F0细胞按1×105个/孔接种于6孔板中,甘草查尔酮B(7.5,15mg.L-1)作用24 h后,Hoechst 33258染色法观察细胞凋亡形态;取对数生长期B16F0细胞按5×105个/瓶接种于细胞培养瓶中,甘草查尔酮B(5,7.5,10,12.5 mg.L-1)作用24 h后,流式细胞仪检测细胞凋亡率;RT-PCR法检测与凋亡相关基因Bcl-2相关X蛋白(Bax),B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)mRNA表达;荧光法检测半胱氨酸蛋白酶蛋白9(Caspase-9)和半胱胺酸蛋白酶蛋白3(Caspase-3)相对活性。结果:甘草查尔酮B能有效抑制B16F0细胞增殖,作用24 h后对细胞的生长有明显的抑制作用,IC5011.3 mg.L-1,在5～15 mg.L-1表现出明显的剂量依赖,细胞出现明显凋亡特征,随甘草查尔酮B浓度的增加凋亡率逐渐升高;甘草查尔酮B(10,12.5 mg.L-1)能明显下调Bcl-2/Bax,上调Caspase-3,Caspase-9的表达,其中7.5 mg.L-1甘草查尔酮B引起Caspase-9,Caspase-3的活化程度较12.5 mg.L-1高。结论:甘草查尔酮B可能通过激活线粒体调控的凋亡通路诱导B16F0细胞凋亡。 展开更多

关键词 甘草查尔酮B 黑色素瘤 B16F0细胞 凋亡

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C57BL/6J小鼠黑色素瘤肺转移模型的构建 被引量：9

9

作者 孟星君 李孝东 +5 位作者 刘俊 周康熙 崔庆亚 胡仁萍 闫荣 戴克胜 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期139-144,共6页

目的探讨建立C57BL/6 J小鼠黑色素瘤肺转移模型的影响因素,包括肿瘤的接种方式、细胞接种数量和成瘤周期。方法体外培养小鼠黑色素瘤细胞B16F10。1)取6~8周龄,雄性小鼠18只,随机分三组,每组6只,分别采取尾静脉注射、腹腔注射和皮下注射... 目的探讨建立C57BL/6 J小鼠黑色素瘤肺转移模型的影响因素,包括肿瘤的接种方式、细胞接种数量和成瘤周期。方法体外培养小鼠黑色素瘤细胞B16F10。1)取6~8周龄,雄性小鼠18只,随机分三组,每组6只,分别采取尾静脉注射、腹腔注射和皮下注射方式,每只小鼠注射100μL(3×10~6个细胞)B16F10细胞悬液,2周后,解剖小鼠并观察黑色素瘤的生长和转移情况;2)分3组,同上,经尾静脉分别注射3×10~6个细胞、1×10~6个细胞、3×10~5个细胞,2周后,解剖小鼠并观察黑色素瘤的生长和转移情况;3)分3组,同上,尾静脉注射1×10~6个细胞,分别于1周、2周、3周解剖小鼠,观察黑色素瘤的生长和转移情况。结果 1)尾静脉注射小鼠黑色素瘤细胞,小鼠发生肺转移的成功率为100%,而腹腔注射和皮下注射未发生肺转移。2)接种小鼠黑色素瘤细胞数量为1×10~6时,发生肺部转移的黑色素瘤细胞数量适中;接种细胞数量为3×10~6时,发生肺部转移的黑色素瘤细胞数量过多;接种细胞数量为3×10~5时,发生肺部转移的黑色素瘤细胞数量较少。3)尾静脉注射1×10~6个小鼠黑色素瘤细胞,饲养2周后,可以观察到黑色素瘤细胞明显的肺部转移,且不会导致小鼠死亡;饲养3周,黑色素瘤细胞肺部转移数量过多,且小鼠死亡过半;饲养1周,黑色素瘤细胞肺部转移数量较少。结论经尾静脉注射1×10~6个小鼠黑色素瘤细胞,生长2周时间,为构建C57BL/6 J小鼠黑色素瘤肺转移模型的推荐方法。 展开更多

关键词 C57BL/6 J小鼠 小鼠黑色素瘤细胞B16F10 肺转移 肿瘤模型

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刺梨不同提取成分对B16细胞增殖及酪氨酸酶活性的影响 被引量：8

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作者 许梦捷 刘祖望 +3 位作者 李祯鑫 黄真 程汝滨 钟晓明 《浙江中医药大学学报》 CAS 2018年第11期883-889,共7页

[目的]评价刺梨不同提取成分对小鼠黑色素瘤B16细胞增殖和细胞内酪氨酸酶活性的影响,为刺梨在美白化妆品领域的开发应用奠定基础。[方法]分别采用水提法、醇提法和超声提取法获得刺梨多糖、黄酮和多酚,分别采用苯酚-硫酸法、亚硝酸钠-... [目的]评价刺梨不同提取成分对小鼠黑色素瘤B16细胞增殖和细胞内酪氨酸酶活性的影响,为刺梨在美白化妆品领域的开发应用奠定基础。[方法]分别采用水提法、醇提法和超声提取法获得刺梨多糖、黄酮和多酚,分别采用苯酚-硫酸法、亚硝酸钠-硝酸铝-氢氧化钠法和Folin-Ciocaltean法检测其纯度。以刺梨多糖(200、400、800、1 600μg·mL-1)、刺梨黄酮(30、60、120、240μg·m L-1)、刺梨多酚(40、80、160、320μg·mL-1)及维生素C干预B16细胞,采用MTT法检测B16细胞增殖活性,倒置显微镜观察B16细胞形态和数量,多巴氧化法检测酪氨酸酶活性。[结果]刺梨多糖的提取率最高,可达45.33%;刺梨黄酮的纯度最高,可达52.50%。刺梨不同提取成分对B16细胞增殖和酪氨酸酶活性均有一定的抑制作用,且呈现显著的浓度依赖性,与正常组比较,具有统计学差异(P<0.05)。刺梨不同提取成分各剂量组均可抑制B16细胞的增殖,增加细胞碎片,且呈显著的浓度依赖性;药物处理48h后,刺梨多糖、刺梨黄酮和刺梨多酚抑制B16细胞增殖的IC50分别为649.83、105.87、134.16μg·m L-1,抑制酪氨酸酶活性的IC50分别为376.13、57.51、82.42μg·mL-1,其中刺梨黄酮(60、120、240μg·mL-1)和刺梨多酚(80、160、320μg·mL-1)对B16细胞酪氨酸酶的抑制作用优于阳性对照维生素C,具有统计学差异(P<0.05)。[结论]刺梨的不同提取成分对小鼠黑色素瘤B16细胞增殖和酪氨酸酶活性均有一定的抑制作用,其中刺梨黄酮的活性最佳,刺梨多酚次之,提示刺梨在皮肤美白等方面具有潜在的研究价值。 展开更多

关键词 刺梨不同提取成分 小鼠黑色素瘤B16细胞 细胞增殖 细胞形态 酪氨酸酶活性 美白

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虎耳草对小鼠B16细胞酪氨酸酶活性的影响

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作者 颜怡冰 文培华 王文君 《食品工业》 CAS 2024年第6期136-140,共5页

为了阐明虎耳草不同极性溶剂提取物对小鼠B16黑色素瘤细胞增殖及酪氨酸酶活性的影响,用虎耳草提取物干预B16细胞,利用倒置显微镜观察给药后细胞的形态和数量,通过噻唑蓝(MTT)法分析虎耳草对细胞增殖活性的影响,通过多巴氧化法分析虎耳... 为了阐明虎耳草不同极性溶剂提取物对小鼠B16黑色素瘤细胞增殖及酪氨酸酶活性的影响,用虎耳草提取物干预B16细胞,利用倒置显微镜观察给药后细胞的形态和数量,通过噻唑蓝(MTT)法分析虎耳草对细胞增殖活性的影响,通过多巴氧化法分析虎耳草对细胞内酪氨酸酶活性的影响。研究结果表明,虎耳草不同溶剂提取物对B16细胞的增殖活性均表现出一定的抑制作用,呈现浓度依赖性,虎耳草样品1~4对细胞增殖活性产生50%的抑制(IC_(50))时对应的质量浓度分别为74.52,103.48,109.60和65.54μg/mL,样品4抑制细胞增殖能力最强。虎耳草样品1~5对B16细胞内酪氨酸酶活性均表现为抑制作用,其中样品1~2和4~5的IC_(50)值依次为163.79,107.36,362.64以及307.50μg/mL,样品2抑制细胞内酪氨酸酶能力最好。综上所述,虎耳草不同极性溶剂提取物对小鼠B16黑色素瘤细胞增殖和细胞内酪氨酸酶活性都存在一定的抑制作用。 展开更多

关键词 虎耳草 小鼠B16黑色素瘤细胞 细胞形态 酪氨酸酶活性

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大蒜生理活性物质对胃癌细胞和黑色素瘤细胞抑制作用的研究 被引量：4

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作者 王霞 苟萍 +2 位作者 孙桂琳 孙素荣 索菲娅 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期557-561,共5页

目的:研究大蒜生理活性物质对人胃癌细胞MGC-9和小鼠黑色素瘤细胞B16细胞增殖及细胞周期的影响。方法:用倒置显微镜观察细胞形态,噻唑蓝(MTT)比色法测定细胞增殖抑制率;流式细胞仪检测B16细胞周期分布的影响。结果:经大蒜素及其前体物... 目的:研究大蒜生理活性物质对人胃癌细胞MGC-9和小鼠黑色素瘤细胞B16细胞增殖及细胞周期的影响。方法:用倒置显微镜观察细胞形态,噻唑蓝(MTT)比色法测定细胞增殖抑制率;流式细胞仪检测B16细胞周期分布的影响。结果:经大蒜素及其前体物质蒜氨酸、蒜氨酸酶和蒜氨酸+蒜氨酸酶处理后,MGC-9和B16细胞不同程度变圆,体积缩小,脱壁细胞增多;除蒜氨酸酶外,蒜氨酸、大蒜素和蒜氨酸+蒜氨酸酶都能诱导MGC-9和B16产生时间和剂量依赖性的增殖抑制作用,其中蒜氨酸+蒜氨酸酶的作用尤为显著。大蒜素和蒜氨酸+蒜氨酸酶阻滞B16细胞于G0/G1期。结论:本文由大蒜提取物处理后结果与已发表的临床研究相一致。 展开更多

关键词 大蒜 大蒜素 蒜氨酸 蒜氨酸酶 人胃癌细胞MGC-9 小鼠黑色素瘤细胞B16 细胞增殖 细胞周期

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蛇毒金属蛋白酶抑制剂对小鼠黑色素转移瘤血管生成拟态形成的影响 被引量：3

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作者 徐剑文 林建银 +3 位作者 林旭 黄清玲 赵蓉 齐元麟 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期466-468,共3页

目的：研究蛇毒金属蛋白酶抑制剂BJ46a对血管生成拟态形成的影响。方法：将BJ46a基因转染B16细胞，建立稳定转染的B16／pcDNA3．1HisC-BJ46a细胞株，通过C57BL／6小鼠实验性肺转移模型，模拟肿瘤细胞降解局部细胞外基质、进而侵袭转移... 目的：研究蛇毒金属蛋白酶抑制剂BJ46a对血管生成拟态形成的影响。方法：将BJ46a基因转染B16细胞，建立稳定转染的B16／pcDNA3．1HisC-BJ46a细胞株，通过C57BL／6小鼠实验性肺转移模型，模拟肿瘤细胞降解局部细胞外基质、进而侵袭转移过程，应用光镜和超薄切片透射电镜技术观察BJ46a基因转染对血管生成拟态形成的影响。结果：小鼠黑色素瘤内存在血管生成拟态，稳定转染的B16／pcDNA3．1HisC—BJ46a细胞株抑制其肿瘤血管生成拟态的形成。结论：BJ46a通过抑制血管生成拟态形成，从而抑制肿瘤的侵袭转移。 展开更多

关键词 蛇毒金属蛋白酶抑制剂 血管生成拟态 超微结构 小鼠黑色素瘤 B16细胞 侵袭和转移

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Na_6PMo_(11)FeO_(40)对小鼠黑色素瘤B16细胞内黑色素合成抑制及抑菌活性研究 被引量：3

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作者 邓阳阳 陈丙年 +4 位作者 王芳 邢蕊 李莉莉 谢乐芳 王力 《分子科学学报》 CSCD 北大核心 2017年第2期108-113,共6页

研究了过渡金属取代的Kiggen型结构的杂多酸盐Na_6PMo_(11)FeO_(40)对体外培养的小鼠黑色素瘤B16细胞的生物学效应,并分析了其对4种细菌的抗菌活性.结果显示:不同浓度的Na_6PMo_(11)FeO_(40)对B16细胞的细胞形态和数量有不同程度的影响,... 研究了过渡金属取代的Kiggen型结构的杂多酸盐Na_6PMo_(11)FeO_(40)对体外培养的小鼠黑色素瘤B16细胞的生物学效应,并分析了其对4种细菌的抗菌活性.结果显示:不同浓度的Na_6PMo_(11)FeO_(40)对B16细胞的细胞形态和数量有不同程度的影响,对B16细胞的增殖率、酪氨酸酶活性以及黑色素合成量的抑制呈现出明显的浓度效应.浓度为50~200μmol/L的Na_6PMo_(11)FeO_(40)能显著抑制B16细胞增殖(P<0.05或P<0.01);浓度为200μmol/L的Na_6PMo_(11)FeO_(40)对酪氨酸酶活性抑制极显著(P<0.01),IC50为166.5μmol/L;Na_6PMo_(11)FeO_(40)对藤黄八叠球菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌和大肠杆菌均有抗菌作用,且对球菌的抑制效果优于杆菌.实验结果表明,Na_6PMo_(11)FeO_(40)可作为具有防腐抑菌功能的新型酪氨酸酶抑制剂. 展开更多

关键词 杂多酸盐 小鼠黑色素瘤B16细胞 抗菌活性 酪氨酸酶

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GM3通过MMP-9调节B16细胞的运动性 被引量：1

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作者 王璞 张景海 +1 位作者 山形贞子 山形达也 《沈阳药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期229-235,共7页

目的通过不同的方法来研究GM3对MMP-9的调节作用。并进一步验证了GM3对细胞运动性的调节。方法分别用RT-PCR,Zymography,HPTLC,western blotting和transwell的方法来检测MMP-9的mRNA表达水平,MMP-9的活性,GM3,Akt的磷酸化以及细胞的运... 目的通过不同的方法来研究GM3对MMP-9的调节作用。并进一步验证了GM3对细胞运动性的调节。方法分别用RT-PCR,Zymography,HPTLC,western blotting和transwell的方法来检测MMP-9的mRNA表达水平,MMP-9的活性,GM3,Akt的磷酸化以及细胞的运动性。结果通过几种不同的方法来研究是否GM3参与MMP-9的调空:a.通过转染半乳糖转移酶的顺反序列来调节GM3的表达,从而初步证明GM3可以调节MMP-9的表达;b.通过外加GM3可以清楚的观察到MMP-9的表达量升高;c.神经节苷脂抑制剂D-PDMP的加入更进一步的证明了MMP-9的表达始终与GM3的表达相关;另外,通过PI3K抑制剂的试验进一步证明了GM3通过PI3K来调节MMP-9的表达。在此基础上,更进一步的证明了神经节苷脂可以调节细胞的运动性。结论GM3可以通过PI3K/Akt信号传导途径来正调控MMP-9的表达,并且调节细胞的运动性。 展开更多

关键词 神经节苷脂GM3 小鼠黑色素瘤细胞B16 金属蛋白酶MMP-9 P13K/Akt信号转导途径 细胞运动性

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利用CRISPR-Cas9系统敲除小鼠黑色素瘤细胞系MATP基因的初步研究

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作者 殷慧慧 李丹 +7 位作者 李钰 孙菲 董施施 孔江峰 王洪宝 曾林 法云智 孙兆增 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2017年第4期52-55,共4页

目的利用CRISPR/Cas9系统,敲除小鼠黑色素瘤细胞系的MATP基因,为MATP基因的功能研究奠定基础。方法利用http://crispr.mit.edu/网站,设计针对MATP的特异性引物,并将引物链接到pCAS9/gRNA1载体。将阳性载体转染小鼠黑色素瘤细胞系B16F10... 目的利用CRISPR/Cas9系统,敲除小鼠黑色素瘤细胞系的MATP基因,为MATP基因的功能研究奠定基础。方法利用http://crispr.mit.edu/网站,设计针对MATP的特异性引物,并将引物链接到pCAS9/gRNA1载体。将阳性载体转染小鼠黑色素瘤细胞系B16F10,利用无限稀释的方法获得转染后的单克隆细胞株。提取不同细胞株的基因组,通过测序的方法进一步筛选出发生MATP基因切割的细胞株,并利用Western-blot的方法验证MATP的表达情况。结果成功获得了3株MATP基因敲除的细胞株,Western-blot结果表明,该细胞株不表达MATP蛋白。结论利用pCAS9/gRNA1载体,可以实现B16F10细胞系MATP基因的敲除。 展开更多

关键词 CRISPR-Cas9 黑色素瘤细胞 MATP 研究

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小鼠黑色素瘤功能异常CD8^+T细胞基因调控网络构建与分析

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作者 韩鹏勇 塔娜 +1 位作者 宝鲁日 于海泉 《中国农业科技导报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期42-47,共6页

疾病是全球范围内危害畜禽健康的主要问题,解析免疫系统调控相关基因成为当前抗病分子育种的研究热点。为研究小鼠黑色素瘤模型功能异常CD8^+T细胞对免疫抗体处理的应答机制,通过基因调控网络方法筛选功能异常CD8^+T细胞在Ig G和PD1抗... 疾病是全球范围内危害畜禽健康的主要问题,解析免疫系统调控相关基因成为当前抗病分子育种的研究热点。为研究小鼠黑色素瘤模型功能异常CD8^+T细胞对免疫抗体处理的应答机制,通过基因调控网络方法筛选功能异常CD8^+T细胞在Ig G和PD1抗体处理的特定基因、转录因子和细胞表面受体。结果发现对照组、PD1抗体与Ig G抗体处理组分别有28、17、33个特定表达基因。与对照组相比,Ig G和PD1处理组有2个转录因子Zfx、Zfhx3关闭表达,PD1处理组细胞表面受体Raet1b表达。Raet1b基因的表达可能使小鼠黑色素瘤功能异常CD8^+T细胞恢复功能,结果为抗病育种的相关基因研究提供理论基础。 展开更多

关键词 抗病育种 基因调控网络 小鼠黑色素瘤 功能异常CD8^+T细胞 特有基因

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NHDC的美白性能分析及其在美白护肤品中的初步应用

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作者 王卓娅 傅强 +2 位作者 梁高卫 罗欣茹 吴培诚 《贵州师范大学学报（自然科学版）》 CAS 2015年第4期105-107,120,共4页

目的对新橙皮苷二氢查尔酮(NHDC)的美白性能进行分析,探讨其作为美白产品添加剂的可能性。方法以β-熊果苷、VC、以及曲酸这3种常用美白剂为对照,体外氧化多巴反应法观察NHDC对酪氨酸酶的抑制活性,NaOH裂解法测定其对B16小鼠黑色素瘤细... 目的对新橙皮苷二氢查尔酮(NHDC)的美白性能进行分析,探讨其作为美白产品添加剂的可能性。方法以β-熊果苷、VC、以及曲酸这3种常用美白剂为对照,体外氧化多巴反应法观察NHDC对酪氨酸酶的抑制活性,NaOH裂解法测定其对B16小鼠黑色素瘤细胞黑色素合成能力的抑制作用。进而以NHDC为主要有效成分制备面膜液,测定各种指标并进行人体安全性测试。结果与β-熊果苷、VC、和曲酸相比,NHDC的酪氨酸酶抑制率最高。NHDC对生成的抑制能力与VC和曲酸接近,为β-熊果苷的3倍。以NHDC为主要有效成分所制成的面膜液,可通过人体安全性测试。结论与β-熊果苷,VC,和曲酸等常用美白活性物质相比,NHDC具有更为卓越的综合性能,是一种具有应用潜力的新型美白剂,可作为主要活性成分用于新型美白护肤品的开发中。 展开更多

关键词 黄酮类化合物 新橙皮苷二氢查尔酮 美白 酪氨酸酶 B16黑色素瘤细胞

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十种苯丙氨酸衍生物对小鼠黑色素瘤细胞系B16的作用研究

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作者 陈冉 闫春玲 +3 位作者 王彬彬 闫文娟 王书佩 徐存拴 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期573-579,共7页

该文研究了十种苯丙氨酸(Phe)的对位衍生物Fp、Clp、Bp、Ip、Ap、Np、Sp、Mp、Pp、Cp对小鼠黑色素瘤细胞系B16的细胞毒性、诱导细胞凋亡作用和抑制细胞成集落作用。结果表明,它们的细胞毒性大小依次为Pp、Fp、Mp、Ip、Sp、Ap、Bp。其中M... 该文研究了十种苯丙氨酸(Phe)的对位衍生物Fp、Clp、Bp、Ip、Ap、Np、Sp、Mp、Pp、Cp对小鼠黑色素瘤细胞系B16的细胞毒性、诱导细胞凋亡作用和抑制细胞成集落作用。结果表明,它们的细胞毒性大小依次为Pp、Fp、Mp、Ip、Sp、Ap、Bp。其中Mp和Ip的毒性相近,Sp和Ap的毒性相近。它们诱导细胞凋亡的作用强弱依次为Fp、Mp、Ip。其中Mp和Ip的作用相近。它们抑制细胞成集落的作用大小依次为Pp、Fp、Ip、Mp、Sp、Bp、Np、Ap。其中Pp、Fp、Ip、Mp的作用相近,Sp、Bp、Np的作用相近。初步的细胞毒理分析表明,Fp、Mp、Ip能够诱导B16细胞凋亡和抑制B16细胞形成集落。 展开更多

关键词 苯丙氨酸衍生物 小鼠黑色素瘤细胞系B16 细胞毒性(IC50) 细胞凋亡 细胞成集落

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