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植物平台生产单克隆抗体的优化策略
1
作者 陈子晴 刘德 +1 位作者 于荣敏 朱建华 《生命的化学》 CAS 2024年第7期1205-1215,共11页
治疗性单克隆抗体主要为免疫球蛋白G(immunoglobulin G,IgG)。作为重组蛋白生物药物,IgG具有广泛的临床适应性。植物平台为治疗性重组蛋白的生产提供了快速、灵活和易于扩展的替代平台,在个性化治疗蛋白的生产和流行性疾病药物开发时期... 治疗性单克隆抗体主要为免疫球蛋白G(immunoglobulin G,IgG)。作为重组蛋白生物药物,IgG具有广泛的临床适应性。植物平台为治疗性重组蛋白的生产提供了快速、灵活和易于扩展的替代平台,在个性化治疗蛋白的生产和流行性疾病药物开发时期受到广泛关注。由于单克隆抗体在生产过程中容易受到多种翻译后修饰途径的影响,植物平台生产的重组单克隆抗体可能存在微观异质性,从而影响抗体的稳定性、生物活性或引起不必要的免疫原性。本文就以下两方面展开综述:植物平台中特异性β-1,2-木糖和核心α-1,3-岩藻糖的消除、β-1,4-半乳糖基化途径的引入和其他糖基化修饰方式的修改等优化策略进展;植物源重组抗体表达体系、培养体系和下游加工方式的优化策略进展,以提高植物源单抗的有效性、安全性和生产条件。 展开更多
关键词 植物平台 重组蛋白 单克隆抗体 植物糖工程 生产优化
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鼠抗人Fas单克隆抗体的制备及鉴定 被引量：2
2
作者 宋建勋 朱锡华 +1 位作者 陈克敏 郑萍 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第3期200-203,共4页
采用Ｊｕｒｋａｔ细胞免疫Ｂａｌｂ／ｃ小鼠制备了１株抗人ＦａｓｍＡｂ２Ａ１，它能特异性识别Ｊｕｒｋａｔ、Ｒａｊｉ、ＴＨＰ－１细胞膜表面５０ＫＤ左右的蛋白，并能与ＳｒＦａｓ标准蛋白反应，其识别的细胞膜蛋白与单抗特异性抗人... 采用Ｊｕｒｋａｔ细胞免疫Ｂａｌｂ／ｃ小鼠制备了１株抗人ＦａｓｍＡｂ２Ａ１，它能特异性识别Ｊｕｒｋａｔ、Ｒａｊｉ、ＴＨＰ－１细胞膜表面５０ＫＤ左右的蛋白，并能与ＳｒＦａｓ标准蛋白反应，其识别的细胞膜蛋白与单抗特异性抗人ＦａｓＰｃＡｂＮ－１８相一致。经Ｉｇ类与亚类及型检测试剂盒测定为ＩｇＧ１、κ型，杂交瘤细胞染色体数目平均为１０２。 展开更多
关键词 FAS抗原 单克隆抗体 制备 鉴定
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补料优化降低抗体生产过程中宿主细胞蛋白残留的研究 被引量：1
3
作者 支文标 李巍巍 +2 位作者 李士杭 陶菊红 Strubbe Steven 《现代生物医学进展》 CAS 2020年第9期1656-1662,共7页
目的:通过上游工艺中补料培养基优化以降低单克隆抗体生产中的宿主细胞蛋白(HCP)水平。方法:本文在3 L反应器的工艺开发过程中考察了不同的商品化补料培养基和细胞接种密度对HCP水平的影响,筛选出最优条件后,进行了补料工艺的优化和金... 目的:通过上游工艺中补料培养基优化以降低单克隆抗体生产中的宿主细胞蛋白(HCP)水平。方法:本文在3 L反应器的工艺开发过程中考察了不同的商品化补料培养基和细胞接种密度对HCP水平的影响,筛选出最优条件后,进行了补料工艺的优化和金属离子的添加试验,最后将优化后的工艺放大至200 L中试规模。结果:在小试阶段发现Cellvento 4Feed可以显著降低HCP,同时CuSO4可以进一步促进HCP降低的水平,最终将工艺放大至200 L中试进行生产并取得了相似的结果,验证了工艺的稳定性和可放大性,中试规模的HCP水平相比最初的工艺降低了65%左右。结论:补料培养基优化可以有效降低细胞对HCP的比生产速率,使收获液中整体的HCP水平显著下降。 展开更多
关键词 宿主细胞蛋白 补料优化 工艺放大 抗体生产 蛋白残留
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工程原核生物和酵母菌中生产单克隆抗体和抗体片段研究进展 被引量：1
4
作者 赵妍淑 张金华 宋浩 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第8期74-83,共10页
抗体药物和抗体片段药物在药物市场占据了重要的地位,主要通过哺乳动物细胞系统进行生产,操作复杂并且成本高。为了能够克服哺乳动物细胞系统生产抗体药物的弊端,越来越多的抗体及抗体片段在原核细胞及酵母菌中生产,但是产率往往不高并... 抗体药物和抗体片段药物在药物市场占据了重要的地位,主要通过哺乳动物细胞系统进行生产,操作复杂并且成本高。为了能够克服哺乳动物细胞系统生产抗体药物的弊端,越来越多的抗体及抗体片段在原核细胞及酵母菌中生产,但是产率往往不高并且没有糖基化。从基因转录和翻译的优化、分子伴侣的共表达和抑制蛋白水解降解等方面概述了在原核生物表达系统及酵母菌中提高单克隆抗体和抗体片段产量的研究进展,为未来利用原核生物和酵母菌实现工业化生产单克隆抗体及抗体片段奠定基础。 展开更多
关键词 单克隆抗体 抗体片段 原核生物 酵母菌 工业化生产
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单抗药物发展趋势及工程设计分析
5
作者 陈凯 《当代化工研究》 2021年第3期167-168,共2页
单抗产业正进入关键的发展时期,未来随着医保对于单抗药物的覆盖加大以及国内单抗产业的发展,市场将继续维持高速增长。本文简要介绍了单抗药物生产过程中上游工艺、下游工艺和制剂工艺的工艺流程,并对上游工艺和下游工艺的主要工艺区... 单抗产业正进入关键的发展时期,未来随着医保对于单抗药物的覆盖加大以及国内单抗产业的发展,市场将继续维持高速增长。本文简要介绍了单抗药物生产过程中上游工艺、下游工艺和制剂工艺的工艺流程,并对上游工艺和下游工艺的主要工艺区域进行详细介绍,最后结合人物流设计、空调系统及公用工程系统设计对单抗生产车间的设计做简要分析。 展开更多
关键词 单抗 生产工艺 人物流 空调系统 公用工程系统
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抗AIB1-N单克隆抗体的制备及鉴定 被引量：6
6
作者 庞秋霞 彭晓东 +5 位作者 郄明容 朱月明 彭旭红 董薇 张林 屈艺 《四川大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期278-280,297,共4页
目的获得有生物活性的抗乳腺癌扩增性抗原1氮端(amplifiedinbrestcancer1-Nterminal,AIB1-N)单克隆抗体。方法以谷胱甘肽转硫酶耦联的抗乳腺癌扩增性抗原1氮端蛋白(GST-AIB1-N)为免疫原,免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术制备抗AIB1-N单克... 目的获得有生物活性的抗乳腺癌扩增性抗原1氮端(amplifiedinbrestcancer1-Nterminal,AIB1-N)单克隆抗体。方法以谷胱甘肽转硫酶耦联的抗乳腺癌扩增性抗原1氮端蛋白(GST-AIB1-N)为免疫原,免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术制备抗AIB1-N单克隆抗体,用间接ELISA和Western-blot鉴定其亚类和抗原结合特异性。结果成功筛选出一株稳定分泌抗AIB1-N单克隆抗体的杂交瘤细胞株,其分泌抗体亚类为IgG1,经Western-blot鉴定该McAb特异性高,亲和力强。结论成功制备了抗AIB1-N单克隆抗体,为深入研究AIB1的表达及临床应用提供了有力的工具。 展开更多
关键词 AIB1-N蛋白 单克隆抗体 制备和鉴定
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创新单抗药物申报临床试验病毒安全性相关监管指南调研与技术考量 被引量：1
7
作者 崔靖 宋丽娜 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第8期2308-2314,共7页
随着我国生物制药自主创新能力的不断提高,越来越多的创新型单抗药物申报注册临床试验,同时国外已上市和/或国外开展临床试验的单克隆抗体药物在国内申报注册临床的数量也不断增加。2018年国家药品监督管理局对外发布了《新药Ⅰ期临床... 随着我国生物制药自主创新能力的不断提高,越来越多的创新型单抗药物申报注册临床试验,同时国外已上市和/或国外开展临床试验的单克隆抗体药物在国内申报注册临床的数量也不断增加。2018年国家药品监督管理局对外发布了《新药Ⅰ期临床试验申请技术指南》(2018年第16号),该指南对创新药申报临床试验阶段药学研究及申报资料提出了相关要求,极大提高了生物创新药的申报质量。但相比美国药品监管机构和欧盟药品监管机构,我国针对创新药申报临床阶段细化的技术指南尚不完善,如生物技术产品申报临床阶段的病毒安全性评价。本文调研了2018~2020年申请人针对创新单抗药物申报临床阶段的一般性技术问题,发现申请人聚焦的问题包括生产终末细胞和/或细胞收获液检定以及病毒去除或灭活验证。同时,审评中也发现由于申请人对国内外技术指南阶段性要求理解的差异,导致申报资料也存在一定差异。结合我国和美国、欧盟药品监管机构病毒安全性相关技术指南的调研并基于技术考量,本文对生产过程中外源病毒因子检测和病毒去除或灭活验证提出个人建议,旨在确保创新单抗药物在申报临床试验阶段的病毒安全性。 展开更多
关键词 创新单抗药物 申报临床试验 病毒安全性 生产终末细胞和/或细胞收获液 病毒去除或灭活验证 技术考量
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人心肌脂肪酸结合蛋白单克隆抗体的制备与鉴定
8
作者 郑杰 龚成 赵肃清 《广东化工》 CAS 2015年第22期32-33,共2页
目的制备人心肌脂肪酸结合蛋白(H-FAB)单克隆抗体。方法利用重组H-FABP蛋白免疫BALB/c小鼠,取免疫后的小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞(SP2/0细胞)在PEG的作用下进行融合,通过杂交瘤细胞的筛选,细胞的亚克隆以及扩大培养建立分泌抗H-FABP特异性... 目的制备人心肌脂肪酸结合蛋白(H-FAB)单克隆抗体。方法利用重组H-FABP蛋白免疫BALB/c小鼠,取免疫后的小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞(SP2/0细胞)在PEG的作用下进行融合,通过杂交瘤细胞的筛选,细胞的亚克隆以及扩大培养建立分泌抗H-FABP特异性抗体的单克隆细胞株。将细胞接种入小鼠体内制备腹水抗体,纯化后得到抗H-FABP单克隆抗体并对其性质进行鉴定分析。得到3株稳定分泌H-FAB抗体的单克隆细胞株,命名为2C06、2F08、6G03,非竞争性ELISA测定亲和力常数得知三株抗体的亲和力常数都达到108以上,三株抗体的亲和力较好。交叉实验表明三株单克隆抗体与牛血清、猪血清、鼠血清均无交叉反应,western blot实验证明对H-FABP有较好的特异性。成功得到3株特异性识别H-FAB单克隆细胞株,可用于H-FAB的检测研究。 展开更多
关键词 人心肌脂肪酸结合蛋白 单克隆抗体 制备 鉴定
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水稻细菌性条斑病菌单克隆抗体的制备及特性 被引量：3
9
作者 种藏文 程由铨 +4 位作者 王长方 卢同 李怡英 吴平 朱哲大 《福建农业学报》 CAS 1990年第2期7-11,共5页
用7株水稻细菌性条斑病菌（Xanthomonas campestris pv.oryzicola）分别免疫BALB/C小白鼠。建立了15株分泌抗水稻细菌性条斑病菌特异性抗体的杂交瘤细胞株。杂交瘤细胞株的细胞染色体数范围为98—104。酶联免疫吸附试验（ELISA）培养液... 用7株水稻细菌性条斑病菌（Xanthomonas campestris pv.oryzicola）分别免疫BALB/C小白鼠。建立了15株分泌抗水稻细菌性条斑病菌特异性抗体的杂交瘤细胞株。杂交瘤细胞株的细胞染色体数范围为98—104。酶联免疫吸附试验（ELISA）培养液中的抗体滴度为10<sup>2</sup>—10<sup>3</sup>,腹水中抗体滴度10<sup>5</sup>—10<sup>6</sup>。这些单克隆抗体（McAb）的免疫球蛋白亚类分别属于IgG2a、IgG2b、IgG<sub>3</sub>和IgM。McAb与水稻细菌性条斑病菌发生特异性反应;与水稻白叶枯病菌（X.c.pv.oryzea）等黄单胞杆菌属的其它变种菌株无交叉反应;与植物病原细菌其它4个属的测定菌株无交叉反应;与稻叶、稻种上分离的杂菌也无交叉反应。 展开更多
关键词 水稻细菌性条斑病菌 单克隆抗体 制备
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药物单克隆抗体的制备及在药物分析中应用 被引量：4
10
作者 杨金娥 袁宗辉 《江西农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期305-308,共4页
概述了药物(含激素类药物)半抗原合成人工免疫原方法以及采用B-淋巴细胞杂交瘤技术制备药物单克隆抗体的要点,着重介绍了药物单克隆抗体作为几种免疫分析方法的核心试剂,在临床药理学研究及生物样品的药物残留分析中的应用,并对其进行... 概述了药物(含激素类药物)半抗原合成人工免疫原方法以及采用B-淋巴细胞杂交瘤技术制备药物单克隆抗体的要点,着重介绍了药物单克隆抗体作为几种免疫分析方法的核心试剂,在临床药理学研究及生物样品的药物残留分析中的应用,并对其进行了评述,以期了解药物单克隆抗体的应用现况及前景。 展开更多
关键词 药物单克隆抗体 制备 药物免疫分析 应用
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