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肠道病毒分子分型研究进展 被引量:17
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作者 卫海燕 许玉玲 +1 位作者 黄学勇 马宏 《中国病毒病杂志》 CAS 2012年第1期72-76,共5页
肠道病毒(enterovirus,EV)属于小RNA病毒科肠道病毒属,包括脊髓灰质炎病毒(polio-virus,PV)、埃柯病毒(Echovirus)、柯萨奇病毒(CVA、CVB)、新型肠道病毒,共106个血清型。根据生物学及遗传特性将其分为4个组(spe-cies)[1]:... 肠道病毒(enterovirus,EV)属于小RNA病毒科肠道病毒属,包括脊髓灰质炎病毒(polio-virus,PV)、埃柯病毒(Echovirus)、柯萨奇病毒(CVA、CVB)、新型肠道病毒,共106个血清型。根据生物学及遗传特性将其分为4个组(spe-cies)[1]:肠道病毒A组(EV-A)包括21个血清型,肠道病毒B组(EV-B)包括60个血清型,肠道病毒C组(EV-C)包括21个血清型,将PV 3种血清型包括在内,肠道病毒D组(EV-D)包括4个血清型。 展开更多
关键词 肠道病毒 分子分型 鉴定
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基于基因组序列的3种沙门菌分子血清分型方法比较研究 被引量:9
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作者 陈丹妮 韩营营 +2 位作者 李杰 李臻鹏 闫梅英 《疾病监测》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期468-474,共7页
目的比较3种沙门菌分子血清分型方法,获得一种准确度较高的方法用来替代传统的血清凝集技术用于沙门菌血清型判定。方法对覆盖50个血清型的509株沙门菌提取核酸进行全基因组测序,根据全基因组序列分别利用多位点序列分型(MLST)、SalmonS... 目的比较3种沙门菌分子血清分型方法,获得一种准确度较高的方法用来替代传统的血清凝集技术用于沙门菌血清型判定。方法对覆盖50个血清型的509株沙门菌提取核酸进行全基因组测序,根据全基因组序列分别利用多位点序列分型(MLST)、SalmonSeroPredicition以及SISTR(Salmonella in silico typing resource)3种方法在线预测获得每株菌的血清型,然后与传统血清凝集获得的血清型进行一致性比较分析,评估每种方法血清型预测的准确度。结果SISTR、MLST以及SalmonSeroPredicition预测血清型的准确率分别为96.67%、93.52%、69.16%。常见沙门菌血清型印第安纳沙门菌和鼠伤寒沙门菌血清型预测正确率最高,为100%,德尔卑沙门菌、肠炎沙门菌血清型预测正确率分别为99.17%、95.74%。3种方法均预测错误的血清型有肠炎沙门菌、德尔卑沙门菌和沙门菌的萨拉姆亚种、亚利桑那亚种和双相亚利桑那亚种等;预测错误原因主要是基因序列丢失和鞭毛抗原基因未表达。结论基于基因组序列的SISTR血清型预测方法具有较高的血清型预测准确度,在传统血清凝集难以开展或沙门菌鞭毛基因不表达的情况下,可以替代血清凝集试验进行沙门菌血清型判定。 展开更多
关键词 沙门菌 全基因组测序 Salmonella in silico typing resource 多位点序列分型 分子血清分型
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广州地区ST17无乳链球菌的分子流行病学特征及快速鉴定 被引量:8
3
作者 程招敏 柯培锋 +4 位作者 蓝锴 周强 曹楠楠 秦笙 张文 《中华医院感染学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第8期1210-1216,共7页
目的了解广州地区ST17无乳链球菌的分子流行病学特征,运用基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱(Matrix assisted laser desorption/ionization time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)建立其快速筛查方法。方法收集侵袭性无乳... 目的了解广州地区ST17无乳链球菌的分子流行病学特征,运用基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱(Matrix assisted laser desorption/ionization time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)建立其快速筛查方法。方法收集侵袭性无乳链球菌98株,进行多位点序列分型(Multilocus sequence typing,MLST)和分子血清学分型,进行药敏试验并检测红霉素和克林霉素耐药基因(ermB、ermA/E、ermTR和linB基因),运用MALDI-TOF MS分析ST17菌株的特征质谱峰。结果所有菌株被分为10个ST,来源于7个克隆群,其中ST17占16.3%。ST17菌株均为血清学Ⅲ型。ST17菌株对红霉素与克林霉素耐药率分别为93.8%和87.5%,检出ermB和mefA/E两种耐药基因,阳性率分别为100.0%和20.0%,未检出ermTR和linB基因。ST17菌株与非ST17菌株对红霉素和克林霉素耐药性以及ermB和mefA/E携带率的差异均具有统计学意义(P<0.05)。10种ST中,仅ST17在7620 Da处有特征质谱峰。结论广州地区流行的侵袭性无乳链球菌具有较高遗传多样性。ST17/血清学Ⅲ型菌株是该地区流行的主要侵袭性菌株之一,对红霉素和克林霉素耐药率高,红霉素耐药主要由ermB介导。MALDI-TOF MS可用于ST17菌株的快速筛查。 展开更多
关键词 无乳链球菌 多位点序列分型 分子血清分型 耐药基因 基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱
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辽宁省2021—2022年食品中单核细胞增生李斯特氏菌分子血清分型及耐药性分析
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作者 孙婷婷 李雪 +2 位作者 王伟杰 魏彤竹 刁文丽 《中国热带医学》 CAS 北大核心 2024年第4期468-471,498,共5页
目的分析辽宁省食品监测网中食源性单核细胞增生李斯特氏菌(Listeria monocytogenes,LM)分离株分子血清分型及耐药性,为食源性疾病的暴发识别和溯源提供参考依据。方法对采自我省2021—2022年15个监测点2797份食品中检出的67株LM进行分... 目的分析辽宁省食品监测网中食源性单核细胞增生李斯特氏菌(Listeria monocytogenes,LM)分离株分子血清分型及耐药性,为食源性疾病的暴发识别和溯源提供参考依据。方法对采自我省2021—2022年15个监测点2797份食品中检出的67株LM进行分离株鉴定;应用VITEK生化鉴定仪进行生化鉴定;采用PCR扩增技术进行分子血清分型,并按照血清诊断使用说明书进行验证操作。采用微量肉汤稀释法测定试验菌株对氨苄西林、青霉素、美罗培南、复方磺胺甲恶唑、红霉素等的药物敏感性。结果辽宁省2021—2022年食品中LM携带分子血清分型为1/2a(3a)、1/2b(3b,7)、1/2c(3c)和4b(4d,4e),主要血清型为1/2a型(62.7%,42/67)和1/2b型(28.4%,19/67),其中4b型分离到3株(4.5%,3/67)。辽宁省2021年和2022年LM的优势菌株都是1/2a(3a)型和1/2b(3b,7)型,其中肉及肉制品携带的分型最多。67株LM中,对复方磺胺甲恶唑和红霉素双重耐药有8株(11.9%),只对复方磺胺甲恶唑耐药有6株(9.0%)。结论辽宁省2021—2022年食品中LM存在具有致病性的血清型1/2a(3a)、1/2b(3b,7)、1/2c(3c)和4b(4d,4e),并具有一种及双重耐药菌株,说明我省食品中存在LM引起的食品安全问题,可能存在引起LM感染风险,应该优化溯源检测方法并加强LM的暴发确认。 展开更多
关键词 单核细胞增生李斯特氏菌 分子血清分型 耐药性 辽宁
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副猪嗜血杆菌血清4型和13型的分子血清分型研究 被引量:4
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作者 李忍 郭芳芳 +3 位作者 郭杰 崔一芳 曹晓亚 徐福洲 《动物医学进展》 北大核心 2021年第2期6-11,共6页
为在临床诊断中快速鉴定副猪嗜血杆菌(HPS)血清4型和13型等优势流行血清型,分子血清分型方法较常规的基于特异性抗血清的血清分型方法更加准确和高效。根据HPS血清4型脂多糖合成蛋白基因wcip 4和血清13型糖脂转移蛋白基因gltP序列设计... 为在临床诊断中快速鉴定副猪嗜血杆菌(HPS)血清4型和13型等优势流行血清型,分子血清分型方法较常规的基于特异性抗血清的血清分型方法更加准确和高效。根据HPS血清4型脂多糖合成蛋白基因wcip 4和血清13型糖脂转移蛋白基因gltP序列设计特异性引物,分别建立了简便快速鉴定HPS血清4型和13型的环介导等温扩增方法(LAMP)。特异性检测结果显示,HPS血清4型或13型参考菌株检测为阳性,而其他HPS血清型参考菌株及19种其他细菌检测均为阴性;敏感性检测结果显示,在25μL反应体系中,HPS血清4型和13型基因组DNA检测限分别为1 pg和2.5 pg。对已知血清型的22株HPS临床分离株检测结果显示,13株血清4型和5株血清13型分别检测均为阳性,而其他血清型分离株检测均为阴性。结果表明,建立的LAMP方法可用于HPS血清4型和13型的快速鉴定,有助于HPS优势流行血清型的快速调查及疫苗防控。 展开更多
关键词 副猪嗜血杆菌 分子血清分型 环介导等温扩增 特异性 敏感性
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揭阳地区妊娠期妇女定植无乳链球菌分子流行特征及耐药特点 被引量:3
6
作者 徐勇锋 黄旭东 +3 位作者 陈楚兵 黄燕青 黄春明 洪钦明 《广东医学》 CAS 2021年第6期671-676,共6页
目的了解揭阳地区妊娠期妇女无乳链球菌的分子流行特征和耐药特征,为其引起感染的防控提供依据。方法收集揭阳地区妊娠35~37周妇女的阴道直肠拭子,对分离到的无乳链球菌进行多位点序列分型(multilocus sequence type,MLST)、分子血清分... 目的了解揭阳地区妊娠期妇女无乳链球菌的分子流行特征和耐药特征,为其引起感染的防控提供依据。方法收集揭阳地区妊娠35~37周妇女的阴道直肠拭子,对分离到的无乳链球菌进行多位点序列分型(multilocus sequence type,MLST)、分子血清分型、进行药敏试验并检测红霉素和克林霉素耐药基因(ermA、ermB、ermA/E和linB基因)。结果无乳链球菌检出率为9.6%(103/1076),共发现21个序列型(sequence type,ST),来源于8个克隆群(clonal complexes,CCs),CC103占16.6%。共检出5个血清型,以Ⅲ(49.5%)、Ia(24.3%)和Ib(12.6%)为主。红霉素、克林霉素耐药率及多重耐药率分别为:71.8%、60.2%和62.1%。红霉素耐药菌均检出耐药基因,ermA、ermB和mefA/E阳性率为16.2%、83.8%和25.7%;linB基因阳性率为54.8%。共检出cMLSB、iMLSB和M型等3种红霉素耐药表型,分别占73.0%、8.1%和18.9%。结论揭阳地区的定植无乳链球菌具有较高的遗传多样性,其多重耐药率高,红霉素耐药以ermB基因介导的cMLSB型为主,部分克林霉素耐药由linB基因介导。CC103已成为该地区流行的主要CC之一;ST17/血清学Ⅲ型为该地区流行的主要定植菌株之一。 展开更多
关键词 无乳链球菌 多位点序列分型 分子血清分型 耐药基因
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光唇鱼源无乳链球菌的分离鉴定及遗传特征 被引量:3
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作者 蔺凌云 潘晓艺 +4 位作者 姚嘉赟 尹文林 曹铮 刘忆瀚 沈锦玉 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第10期3159-3172,共14页
【目的】为查明浙江养殖光唇鱼大量死亡的病原,了解病原的遗传特征。【方法】本工作对患病光唇鱼进行病原分离,结合形态特征、生理生化特性和16S rRNA基因序列同源性,对分离菌株进行鉴定;采用人工回感试验确定其病原性,并对分离株的血... 【目的】为查明浙江养殖光唇鱼大量死亡的病原,了解病原的遗传特征。【方法】本工作对患病光唇鱼进行病原分离,结合形态特征、生理生化特性和16S rRNA基因序列同源性,对分离菌株进行鉴定;采用人工回感试验确定其病原性,并对分离株的血清型、多位点序列分型(multilocus sequence typing,MLST)、毒力基因型和表面蛋白抗原基因型等遗传特征进行分析;此外,还测试了菌株的药敏特性。【结果】从患病光唇鱼体中分离得到优势菌株ACRO-0708,为革兰氏阳性球菌,不溶血,分子与生化鉴定为无乳链球菌(Streptococcus agalactiae);人工感染试验证实其对光唇鱼有较强的致病性,LD_(50)为6.47×10^(3)CFU/g,属于血清型Ⅰb和MLST型ST261,毒力基因型为sip+bibA+cfb+hylB+iagA+fbsA+fbsB+bac–bca–cylE–scpB–lmb–,不携带所检测的6种表面蛋白基因。药敏试验结果显示,对青霉素、氨苄西林等8种药物较敏感,对氯霉素、复方新诺明等7种药物耐药。【结论】引起浙江养殖光唇鱼死亡的病原菌为无乳链球菌,其分子特征与水产动物主要流行的无乳链球菌株具有显著差异,生产中可选用氨苄西林、氟苯尼考等药物进行防治。 展开更多
关键词 光唇鱼 无乳链球菌 分子血清型 MLST 毒力基因
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2000—2018年福建省单核细胞增生李斯特菌分离株血清型及脉冲场凝胶电泳分型 被引量:2
8
作者 陈伟伟 郑盈翔 +3 位作者 叶玲清 陈泽辉 陈惠龙 叶素贞 《中国食品卫生杂志》 CSCD 北大核心 2020年第6期615-619,共5页
目的分析福建省食品、临床病例和环境中单核细胞增生李斯特菌分离株的血清型和脉冲场凝胶电泳(PFGE)分型,为食源性疾病的暴发识别和溯源提供参考依据。方法采用多重聚合酶链式反应(PCR)血清学分型、免疫血清凝集和PFGE方法对2000—2018... 目的分析福建省食品、临床病例和环境中单核细胞增生李斯特菌分离株的血清型和脉冲场凝胶电泳(PFGE)分型,为食源性疾病的暴发识别和溯源提供参考依据。方法采用多重聚合酶链式反应(PCR)血清学分型、免疫血清凝集和PFGE方法对2000—2018年分离的单核细胞增生李斯特菌进行分型。结果117株单核细胞增生李斯特菌分为4组血清型,包括1/2a(3a)、1/2b(3b)、1/2c(3c)和4b(4d,4e),占比分别为67.5%(79/117)、23.1%(27/117)、5.1%(6/117)和4.3%(5/117)。9株病例分离株血清型为1/2a(6株)、4b(2株)和1/2b(1株)。采用Asc I限制性内切酶将117株单核细胞增生李斯特菌分为83种不同PFGE型别,其中10株具有独特单一的型别。9株病例分离株分为8种不同PFGE型别。结论福建省食品和病例中分离的单核细胞增生李斯特菌,1/2a血清型占主导地位,4b血清型应引起关注。 展开更多
关键词 单核细胞增生李斯特菌 多重聚合酶链式反应 分子血清分型 脉冲场凝胶电泳
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69株食源性致病菌单核细胞增生李斯特氏菌的分子血清分型、二元基因分型与多位点序列分型研究 被引量:2
9
作者 李秀娟 高伟利 +2 位作者 史艳 崔玲玲 潘琢 《医学动物防制》 2016年第9期996-1000,共5页
目的对多种分子分型方法在单核细胞增生李斯特氏菌(Listeria monocytogenes,Lm)分型中的应用进行分析和比较,确定适合于不同实验室的分型检测方法,并进一步掌握食源性Lm的病原特征。方法采用分子血清分型、二元基因分型与多位点序列分... 目的对多种分子分型方法在单核细胞增生李斯特氏菌(Listeria monocytogenes,Lm)分型中的应用进行分析和比较,确定适合于不同实验室的分型检测方法,并进一步掌握食源性Lm的病原特征。方法采用分子血清分型、二元基因分型与多位点序列分型方法对分离自食品的69株Lm进行分型检测,并对结果进行分析。结果 69株Lm食品分离株中,1/2a型菌株有29株,1/2b型有19株,1/2c型有7株,4b型有14株。二元基因分型法将69株Lm食品分离株分为19个二元基因型(Binary type,BT型),DI值为91.60%;主要的BT型为BT146、BT254、BT222、BT82、BT159和BT190。多位点序列分型法将69株Lm食品分离株分为16个序列型(Sequencing type,ST型),DI值为89.98%;主要的ST型为ST8、ST87、ST2、ST1、ST3和ST9。结论分子血清学方法和二元基因分型方法具有操作简便、检测结果易于分析、较快提供检测结果的优点,可作为实验室的一线技术用以对李斯特氏菌病暴发的发现和确认。 展开更多
关键词 食源性致病菌 单核细胞增生李斯特氏菌 分子血清分型 二元基因分型 多位点序列分型 溯源检测
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联合应用分子血清分型与二元基因分型检测单核细胞增多性李斯特菌的研究 被引量:2
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作者 崔玲玲 李秀娟 +2 位作者 徐保红 高伟利 田会方 《中国卫生检验杂志》 CAS 2015年第5期664-668,共5页
目的了解食品中单核细胞增多性李斯特菌(LM)的分子血清型分布,并探索二元基因分型方法在LM分型检测中的意义。方法对2005年-2012年间河北省分离自食品的154株LM进行分子血清分型与二元基因分型分析。结果 154株LM中,1/2a型菌株最多,占52... 目的了解食品中单核细胞增多性李斯特菌(LM)的分子血清型分布,并探索二元基因分型方法在LM分型检测中的意义。方法对2005年-2012年间河北省分离自食品的154株LM进行分子血清分型与二元基因分型分析。结果 154株LM中,1/2a型菌株最多,占52.60%,其次为1/2c型(22.08%)、1/2b型(15.58%)和4b型(9.74%)。二元基因分型可将154株LM分为31个BT(Binary Type)型,分辨力(DI值)为92.28%。二元基因型与分子血清型综合分析,可将154株LM分为34个型别,DI值为92.56%。通过对进化树分析可见,大多数BT型仅见于一种血清型,仅少数BT型见于2种血清型,提示二元基因型和分子血清型是否存在一种紧密的关系,尚需进一步研究证明。结论分子血清分型与二元基因分型综合应用于LM的分型研究,分型能力强,且具有操作简便、快速、高通量的优势,便于推广,可应用于暴发确认与溯源检测。 展开更多
关键词 单核细胞增多性李斯特菌 分子血清分型 二元基因分型
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沙门菌属特异性检测靶点碱基差异位点的识别及其血清型决定力 被引量:2
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作者 石秀清 周秀娟 +2 位作者 施春雷 张芬 史贤明 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2017年第24期47-52,共6页
以美国国家生物技术信息中心(NCBI)已公布的28株沙门菌(14个血清型)全基因组序列为研究对象,对前期研究获得的7个沙门菌属特异性检测靶点在不同血清型间的单核苷酸多态性进行比较分析,结果表明,S9和S69为碱基差异位点最多的两个靶点,具... 以美国国家生物技术信息中心(NCBI)已公布的28株沙门菌(14个血清型)全基因组序列为研究对象,对前期研究获得的7个沙门菌属特异性检测靶点在不同血清型间的单核苷酸多态性进行比较分析,结果表明,S9和S69为碱基差异位点最多的两个靶点,具有沙门菌分子血清分型的潜在能力。随后,通过分析S9和S69在沙门菌不同血清型菌株中的差异位点,分别绘制两个血清分型靶点的差异位点表,从而获得了这两个靶点同时用于14个沙门菌血清型的快速分子血清分型的差异位点组合。在这些组合中,同一血清型具有相同的差异位点,不同血清型可以通过差异位点得以区分。最后,采集食品样品192份,用国标方法获得疑似沙门菌21株;利用血清分子分型靶点S9和S69进行快速分型,并同时用传统玻片凝集反应鉴定方法进行验证,两种方法鉴定结果的符合率为100%。鉴定结果为:21株沙门菌共包括4个不同血清型,其中肠炎沙门菌10株、鼠伤寒沙门菌7株、鸡沙门菌2株、纽波特沙门菌2株。基因组序列分析结果和分离株分型结果均表明,沙门菌特异分子检测靶点S9和S69相结合具备沙门菌的分子血清分型能力,以差异位点表为基础建立的血清分型方法有望替代传统的玻片凝集血清分型这一繁杂步骤,从而降低沙门菌血清鉴定的时间与成本,为聚合酶链式反应技术应用于沙门菌分子血清分型提供新思路。 展开更多
关键词 沙门菌 分子血清分型 特异性检测靶点 食品样品 血清鉴定
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人源性CC103无乳链球菌主要ST的耐药特点及分子流行特征
12
作者 程招敏 蓝锴 +3 位作者 王云秀 黎小琼 柯培锋 李亮 《国际检验医学杂志》 CAS 2021年第14期1700-1704,共5页
目的了解广州地区妊娠期女性CC103无乳链球菌主要序列型(ST)的耐药特点及分子流行特征。方法收集137株试验菌株,进行多位点序列分型(MLST)、药敏试验、分子血清分型、红霉素和克林霉素耐药基因(ermB、mefA/E、ermTR、linB)及毒力基因(cf... 目的了解广州地区妊娠期女性CC103无乳链球菌主要序列型(ST)的耐药特点及分子流行特征。方法收集137株试验菌株,进行多位点序列分型(MLST)、药敏试验、分子血清分型、红霉素和克林霉素耐药基因(ermB、mefA/E、ermTR、linB)及毒力基因(cfb、bca、bac、scpB、lmb)检测。结果共检出19种ST,来自7个克隆群(CC)。CC103占26.30%,由ST485、ST862、ST651、ST103组成。CC103与非CC103菌株对红霉素、左氧氟沙星和四环素的耐药率比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。ST651和ST862对红霉素和克林霉素的耐药率及多重耐药率均>60.00%。ST651的红霉素耐药株,仅携带ermB基因,而ST862还携带mefA/E基因。ST103和ST485均为Ⅰa型,而ST651和ST862均为Ⅲ型。ST103、ST485、ST651、ST862主要毒力基因谱依次为:bca-cfb-lmb、bca-cfb、bca-cfb-bac、bca-cfb-scpB-lmb。结论CC103已成为广州地区主要的人源性菌株之一。其中ST651和ST862对红霉素和克林霉素的耐药率和多重耐药率较高,两者红霉素耐药机制不同。此外,不同ST的血清型和毒力基因分布存在差异。 展开更多
关键词 无乳链球菌 多位点序列分型 分子血清分型 耐药基因 毒力基因
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云南省副猪嗜血杆菌分离鉴定及其16S rRNA生物信息学分析 被引量:2
13
作者 赵津 吴林蔚 +4 位作者 李珂 赵国洪 杨锁柱 王洪伟 韩建强 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2021年第2期412-420,共9页
【目的】研究掌握云南省规模化猪场副猪嗜血杆菌的流行血清型及敏感药物,为该省副猪嗜血杆菌防控提供依据。【方法】应用TSA培养基从云南规模化养猪场疑似副猪嗜血杆菌病例样品中分离到2株细菌(DYJ20160901、CH20190501),观察细菌形态... 【目的】研究掌握云南省规模化猪场副猪嗜血杆菌的流行血清型及敏感药物,为该省副猪嗜血杆菌防控提供依据。【方法】应用TSA培养基从云南规模化养猪场疑似副猪嗜血杆菌病例样品中分离到2株细菌(DYJ20160901、CH20190501),观察细菌形态学、进行生化试验、观察卫星生长现象、进行特异性片段PCR扩增和药敏试验,以及对菌株进行mPCR分子血清定型和16S rRNA序列分析。【结果】2菌株培养特性、形态学特性及生化试验与副猪嗜血杆菌相似,且均扩增出了1090 bp的特异性片段;通过mPCR分子血清定型在5/12型泳道扩增出了450 bp的特异性片段,通过16S rRNA序列分析显示2菌株与Genbank中已公布的不同血清型HPS菌株同源性为97.3%~99.6%,分别与Genbank登录号FJ667952、AB078972的两株血清5型的菌株构成一个分支,同源性高达99.1%和99.6%。2菌株药敏试验高度敏感率达100%的药物:强力霉素、大观霉素、头孢噻肟、氟苯尼考、头孢曲松钠,耐药率为100%的药物:林可霉素。【结论】DYJ20160901、CH20190501菌株均为副猪嗜血杆菌血清5型;二者都高度敏感的药物是强力霉素、大观霉素、头孢噻肟、氟苯尼考、头孢曲松钠。 展开更多
关键词 云南省 副猪嗜血杆菌 分离 鉴定 mPCR分子血清分型 药敏试验
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中国南方地区罗非鱼无乳链球菌的分子流行病学研究 被引量:67
14
作者 郭玉娟 张德锋 +3 位作者 樊海平 陈学年 李彤彤 李爱华 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期399-406,共8页
从广东省以及海南省等地区养殖的患病罗非鱼体内分离、收集到多株致病菌,经生化分析和分子生物学鉴定,均为无乳链球菌。对这些菌株分别进行了耐药谱测定、分子分型试验以及分子血清型分析。药敏试验结果表明,2007—2010年分离到的无乳... 从广东省以及海南省等地区养殖的患病罗非鱼体内分离、收集到多株致病菌,经生化分析和分子生物学鉴定,均为无乳链球菌。对这些菌株分别进行了耐药谱测定、分子分型试验以及分子血清型分析。药敏试验结果表明,2007—2010年分离到的无乳链球菌耐药谱基本相似;多位点可变数目串联重复序列分析(MLVA)试验中,选择5个高变异指数的可变数目重复位点(VNTR)进行分子分型,结果表明,所有鱼源无乳链球菌菌株为同一MLVA型,而作为对照的牛源无乳链球菌则明显不同;为了对这些菌株进一步分型,分别进行了分子血清型和表面蛋白抗原基因的检测,结果表明,鱼源无乳链球菌的分子血清型均为Ⅰa型,表面蛋白抗原均为alpha-C蛋白。这进一步说明了不同年份和不同地区的鱼源无乳链球菌在基因水平上为同一分子类型,具有相同的起源或传染源。同时也说明,我国南方地区罗非鱼无乳链球菌在这几年中未发生明显的遗传变异。这些结果为罗非鱼无乳链球菌病疫苗研制,疫病监测及药物防治的研究提供理论依据。 展开更多
关键词 罗非鱼 无乳链球菌 MLVA 分子血清型
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海南罗非鱼无乳链球菌血清型及耐药性研究 被引量:21
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作者 霍欢欢 可小丽 +4 位作者 卢迈新 李庆勇 高风英 朱华平 黄樟翰 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期350-354,共5页
为研究罗非鱼无乳链球菌(S.agalactiae)的血清型与耐药性之间的关系,本研究对2010年~2011年从海南省各地罗非鱼养殖场中分离到的24株病原菌进行常规细菌鉴定,结果显示,病原菌革兰染色阳性、球形、短链状,β溶血,结合16S rRNA基因鉴定确... 为研究罗非鱼无乳链球菌(S.agalactiae)的血清型与耐药性之间的关系,本研究对2010年~2011年从海南省各地罗非鱼养殖场中分离到的24株病原菌进行常规细菌鉴定,结果显示,病原菌革兰染色阳性、球形、短链状,β溶血,结合16S rRNA基因鉴定确认24株病原菌均为无乳链球菌。PCR法扩增菌株荚膜多糖(cps)基因鉴定其血清型,表明24株无乳链球菌血清型均为Ⅰa型。采用K-B纸片扩散法检测分离菌株对31种常用抗生素的敏感性,结果表明多数菌株对氨基糖苷类和喹诺酮类药物敏感率低,对强力霉素敏感。对于多数抗生素,2011年分离的菌株敏感率明显低于2010年分离的菌株。本研究表明近两年海南省罗非鱼无乳链球菌血清型与菌株耐药性之间无直接相关关系。该结论为罗非鱼无乳链球菌耐药性监测、血清分型及综合防控提供实验依据。 展开更多
关键词 无乳链球菌 耐药性监测 血清型 罗非鱼 海南省 分离菌株 16SrRNA 基因鉴定
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中国罗非鱼主养区无乳链球菌的分子流行特征及其传播方式 被引量:21
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作者 张德锋 袁伟 +5 位作者 可小丽 刘志刚 曹建萌 卢迈新 王淼 衣萌萌 《中国水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期606-614,共9页
为分析2007—2015年中国罗非鱼主养区无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)的分子特征和流行情况,分离并收集了248株罗非鱼源无乳链球菌。通过分子血清型、MLST、毒力基因和前噬菌体等分型方法对248株无乳链球菌进行了分子遗传特征分... 为分析2007—2015年中国罗非鱼主养区无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)的分子特征和流行情况,分离并收集了248株罗非鱼源无乳链球菌。通过分子血清型、MLST、毒力基因和前噬菌体等分型方法对248株无乳链球菌进行了分子遗传特征分析。结果表明,229株无乳链球菌(92.3%)的分子血清型是Ⅰa型,其余19株均是Ⅰb型(7.7%)。MLST分析结果表明,所有Ⅰa型无乳链球菌都是ST7型,所有Ⅰb型无乳链球菌都是ST261型。毒力基因检测结果发现,229株Ⅰa-ST7型无乳链球菌的毒力基因型相同,即V1型;19株Ⅰb-ST261型无乳链球菌的毒力基因型相同,即V2型。前噬菌体检测结果表明,Ⅰa-ST7型无乳链球菌可分为两种前噬菌体基因型,分别是P1型(36株)和P2型(193株);Ⅰb-ST261型无乳链球菌的10个前噬菌体基因都是阴性,即P3型。根据以上4种分子分型方法可将248株无乳链球菌分为3种基因型,即Ⅰa-ST7-V1-P1型、Ⅰa-ST7-V1-P2型和Ⅰb-ST261-V2-P3型。2010—2011年主要流行菌株由Ⅰa-ST7-V1-P1型转变为Ⅰa-ST7-V1-P2型,其中Ⅰa-ST7-V1-P1型是2011年之前的主要流行菌株,Ⅰa-ST7-V1-P2型在2011年及之后成为主要流行菌株。研究表明,近年来我国罗非鱼源无乳链球菌发生了明显的遗传变异,同时,根据我国罗非鱼主养区无乳链球菌的流行特点,推测我国罗非鱼源无乳链球菌是通过苗种或水体等介质进行传播的,属于输入性传播方式。 展开更多
关键词 罗非鱼 无乳链球菌 分子血清型 MLST 毒力基因 前噬菌体
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中国七种水生动物源无乳链球菌的分子特征及其对斑马鱼的致病性 被引量:7
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作者 张德锋 可小丽 +4 位作者 刘志刚 王世锋 袁伟 石存斌 卢迈新 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第11期1788-1797,共10页
为了解中国水生动物源无乳链球菌的分子流行特征,揭示其传播和流行规律,本实验对分离得到并鉴定的10株7种水生动物源无乳链球菌通过分子血清型、多位点序列分型(MLST)分型、毒力基因型和前噬菌体分型等方法进行分子分型;其次,通过斑马... 为了解中国水生动物源无乳链球菌的分子流行特征,揭示其传播和流行规律,本实验对分离得到并鉴定的10株7种水生动物源无乳链球菌通过分子血清型、多位点序列分型(MLST)分型、毒力基因型和前噬菌体分型等方法进行分子分型;其次,通过斑马鱼评价7种水生动物源无乳链球菌的致病性。分子血清型分析结果表明,10株无乳链球菌可分为3种血清型,即Ⅰa、Ⅰb和Ⅲ型;MLST分型结果表明,Ⅰa型无乳链球菌均为ST7型,Ⅰb无乳链球菌均是ST261型,只有Ⅲ型无乳链球菌是ST739型。进一步分型结果表明,10株无乳链球菌可分为3种毒力基因型和4种前噬菌体基因型。根据4种分型结果可知,10株水生动物源无乳链球菌可分为4种类型,其中虎纹蛙源无乳链球菌具有独立的分子血清型、MLST型、毒力基因型和前噬菌体基因型,即Ⅲ-ST739-V1-P3;罗非鱼源无乳链球菌的基因型有3种,即Ⅰa-ST7-V2-P1、Ⅰa-ST7-V2-P2和Ⅰa-ST7-V3-P4;红尾皇冠鱼、鳙和罗非鱼源无乳链球菌的基因型相同:Ⅰa-ST7-V2-P2;卵形鲳鲹、宝石鲈和罗非鱼源无乳链球菌具有相同的基因型:Ⅰa-ST7-V2-P1;鲮和罗非鱼源无乳链球菌的基因型相同,即Ⅰb-ST261-V3-P4。致病性研究表明,7种水生动物源无乳链球菌对斑马鱼均有强致病性。研究表明,两栖类虎纹蛙源无乳链球菌和鱼源无乳链球菌的基因型明显不同,它们之间遗传变异较大,因此,无乳链球菌在两栖类和鱼类之间相互传播的可能性较小。鱼源无乳链球菌有3种基因型,且这3种基因型均在罗非鱼中流行,这表明无乳链球菌在鱼类中相互传播的可能性较大,尤其是在罗非鱼与其他鱼类之间。 展开更多
关键词 斑马鱼 无乳链球菌 流行病学 分子血清型 MLST 毒力基因
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