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微小RNA-148a-3p靶向调控MAP3K9表达及对胃癌细胞增殖和凋亡的影响
被引量：
6
1
作者
牛虹
田同德
+4 位作者
唐静雯
岳光星
李华华
范伊晓
周浩本
《临床肿瘤学杂志》
CAS
北大核心
2019年第2期108-112,共5页
目的探讨微小RNA-148a-3p(miR-148a-3p)对丝裂原活化蛋白激酶激酶激酶9(MAP3K9)的靶向调控作用及对胃癌细胞增殖和凋亡的影响。方法向对数生长期胃癌细胞株MGC-803转染miR-148a-3p模拟物(mimics组)和阴性对照(NC组),以未转染的MGC-803...
目的探讨微小RNA-148a-3p(miR-148a-3p)对丝裂原活化蛋白激酶激酶激酶9(MAP3K9)的靶向调控作用及对胃癌细胞增殖和凋亡的影响。方法向对数生长期胃癌细胞株MGC-803转染miR-148a-3p模拟物(mimics组)和阴性对照(NC组),以未转染的MGC-803细胞为对照组;采用实时定量PCR(QPCR)检测各组miR-148a-3p水平以评价转染效率,MTT法检测各组细胞增殖能力,流式细胞术检测各组细胞凋亡情况,分别采用QPCR和Western blotting检测Bcl-2、Bax、caspase-3及MAP3K9 mRNA和蛋白水平,同时采用双荧光素酶报告实验验证miR-148a-3p与MAP3K9的靶向作用关系。结果QPCR结果显示,对照组、NC组和mimics组的miR-148a-3p水平分别为1. 021±0. 123、1. 087±0. 196和2. 854±0. 368,与对照组和NC组比较,mimics组的miR-148a-3p水平升高(P<0. 05)。mimics组MGC-803细胞的增殖活力较其余两组减弱(P<0. 05)。mimics组MGC-803细胞凋亡率为(15. 2±1. 6)%,高于对照组的(3. 5±0. 9%)%和NC组的(4. 5±1. 1)%,差异具有统计学意义(P<0. 05)。与对照组和NC组比较,mimics组的MAP3K9和Bcl-2的mRNA和蛋白水平均下调,而Bax和caspase-3的mRNA和蛋白水平均上调(P<0. 05);双荧光素酶报告实验证实MAP3K9是miR-148a-3p的直接作用靶点。结论 MiR-148a-3p可抑制胃癌细胞MGC-803的增殖并诱导其凋亡,可能通过靶向MAP3K9来发挥抑癌作用,调控miR-148a-3p/MAP3K9轴在胃癌防治中有一定应用前景。
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关键词
胃癌
微小RNA-148a-
3
p
丝裂原活化蛋白激酶激酶激酶
9
增殖
凋亡
下载PDF
职称材料
miR-380调控羊驼黑色素细胞MAPK/ERK信号通路
被引量：
1
2
作者
杜斌
刘学贤
+4 位作者
姬凯元
杨姗姗
刘博
张俊珍
范瑞文
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第8期876-883,共8页
miR-380是不同羊驼毛色中差异表达的基因之一,但是否与黑色素生成有关未见报道。为了丰富调控黑色素生成的机制,挖掘黑色素生成路径中所涉及到的更多新的基因并揭示miR-380在黑色素细胞中的功能,本实验通过生物信息学方法预测出MAPK信...
miR-380是不同羊驼毛色中差异表达的基因之一,但是否与黑色素生成有关未见报道。为了丰富调控黑色素生成的机制,挖掘黑色素生成路径中所涉及到的更多新的基因并揭示miR-380在黑色素细胞中的功能,本实验通过生物信息学方法预测出MAPK信号通路的成员MAP3K6是miR-380的靶基因之一。在293T细胞中共转染miR-380和MAP3K6后,与对照组相比双荧光报告酶活性下降(28.92±25.63)%(P<0.01),下降趋势明显,说明MAP3K6可能是miR-380的靶基因之一;在羊驼黑色素细胞中转染miR-380后,MAP3K6、MEK1、ERK1/2、CREB和MITF在转录水平的表达量与NC组相比具有显著下降趋势,其中CREB下降趋势尤为显著(64.20±54.30)%(P<0.01),Western印迹检测MAP3K6、p-MEK1、p-ERK1/2、CREB和MITF在蛋白质水平的表达与NC组相比下降趋势明显且p-MEK1和CREB基因下降极为显著,分别为(29.09±10.68)%(P<0.001)和(47.12±6.70)%(P<0.001),抑制组则反之。通过Masson-Fontana黑色素颗粒染色法检测miR-380抑制黑色素细胞产生黑色素颗粒,用紫外分光度法检测真黑素(eumelanin,EM)和褐黑素(pheomelanin,PM),含量结果提示EM与PM含量分别下降为(38.63±2.00)%(P<0.01),(54.10±5.73)%(P<0.001)且PM含量下降极为显著。综上所述miR-380通过靶向抑制MAP3K6等基因的表达,从而对MAPK/ERK信号通路起调控作用,最终影响黑色素生成生物学功能,此研究对哺乳动物毛色形成机制和防止皮肤受紫外辐射有重要意义。
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关键词
miR-
3
80
丝裂原活化蛋白激酶激酶激酶6
丝裂原活化蛋白激酶
胞外信号调节激酶1/2
c
AMP反应元件结合蛋白质
小眼畸形转录因子
黑色素细胞
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职称材料
题名
微小RNA-148a-3p靶向调控MAP3K9表达及对胃癌细胞增殖和凋亡的影响
被引量：
6
1
作者
牛虹
田同德
唐静雯
岳光星
李华华
范伊晓
周浩本
机构
郑州大学附属肿瘤医院中西医结合肿瘤内科
出处
《临床肿瘤学杂志》
CAS
北大核心
2019年第2期108-112,共5页
文摘
目的探讨微小RNA-148a-3p(miR-148a-3p)对丝裂原活化蛋白激酶激酶激酶9(MAP3K9)的靶向调控作用及对胃癌细胞增殖和凋亡的影响。方法向对数生长期胃癌细胞株MGC-803转染miR-148a-3p模拟物(mimics组)和阴性对照(NC组),以未转染的MGC-803细胞为对照组;采用实时定量PCR(QPCR)检测各组miR-148a-3p水平以评价转染效率,MTT法检测各组细胞增殖能力,流式细胞术检测各组细胞凋亡情况,分别采用QPCR和Western blotting检测Bcl-2、Bax、caspase-3及MAP3K9 mRNA和蛋白水平,同时采用双荧光素酶报告实验验证miR-148a-3p与MAP3K9的靶向作用关系。结果QPCR结果显示,对照组、NC组和mimics组的miR-148a-3p水平分别为1. 021±0. 123、1. 087±0. 196和2. 854±0. 368,与对照组和NC组比较,mimics组的miR-148a-3p水平升高(P<0. 05)。mimics组MGC-803细胞的增殖活力较其余两组减弱(P<0. 05)。mimics组MGC-803细胞凋亡率为(15. 2±1. 6)%,高于对照组的(3. 5±0. 9%)%和NC组的(4. 5±1. 1)%,差异具有统计学意义(P<0. 05)。与对照组和NC组比较,mimics组的MAP3K9和Bcl-2的mRNA和蛋白水平均下调,而Bax和caspase-3的mRNA和蛋白水平均上调(P<0. 05);双荧光素酶报告实验证实MAP3K9是miR-148a-3p的直接作用靶点。结论 MiR-148a-3p可抑制胃癌细胞MGC-803的增殖并诱导其凋亡,可能通过靶向MAP3K9来发挥抑癌作用,调控miR-148a-3p/MAP3K9轴在胃癌防治中有一定应用前景。
关键词
胃癌
微小RNA-148a-
3
p
丝裂原活化蛋白激酶激酶激酶
9
增殖
凋亡
Keywords
Gastric
cancer
MicroRNA-148a-
3
p
mitogen-activated protein kinase
9
(
map
3
k
9
)
Proliferation
Apoptosis
分类号
R735.2 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
miR-380调控羊驼黑色素细胞MAPK/ERK信号通路
被引量：
1
2
作者
杜斌
刘学贤
姬凯元
杨姗姗
刘博
张俊珍
范瑞文
机构
山西农业大学动物科技学院
出处
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第8期876-883,共8页
基金
山西省回国留学人员科研资助(No.2017-072)
山西省“青年三晋学者”人才专项资助
文摘
miR-380是不同羊驼毛色中差异表达的基因之一,但是否与黑色素生成有关未见报道。为了丰富调控黑色素生成的机制,挖掘黑色素生成路径中所涉及到的更多新的基因并揭示miR-380在黑色素细胞中的功能,本实验通过生物信息学方法预测出MAPK信号通路的成员MAP3K6是miR-380的靶基因之一。在293T细胞中共转染miR-380和MAP3K6后,与对照组相比双荧光报告酶活性下降(28.92±25.63)%(P<0.01),下降趋势明显,说明MAP3K6可能是miR-380的靶基因之一;在羊驼黑色素细胞中转染miR-380后,MAP3K6、MEK1、ERK1/2、CREB和MITF在转录水平的表达量与NC组相比具有显著下降趋势,其中CREB下降趋势尤为显著(64.20±54.30)%(P<0.01),Western印迹检测MAP3K6、p-MEK1、p-ERK1/2、CREB和MITF在蛋白质水平的表达与NC组相比下降趋势明显且p-MEK1和CREB基因下降极为显著,分别为(29.09±10.68)%(P<0.001)和(47.12±6.70)%(P<0.001),抑制组则反之。通过Masson-Fontana黑色素颗粒染色法检测miR-380抑制黑色素细胞产生黑色素颗粒,用紫外分光度法检测真黑素(eumelanin,EM)和褐黑素(pheomelanin,PM),含量结果提示EM与PM含量分别下降为(38.63±2.00)%(P<0.01),(54.10±5.73)%(P<0.001)且PM含量下降极为显著。综上所述miR-380通过靶向抑制MAP3K6等基因的表达,从而对MAPK/ERK信号通路起调控作用,最终影响黑色素生成生物学功能,此研究对哺乳动物毛色形成机制和防止皮肤受紫外辐射有重要意义。
关键词
miR-
3
80
丝裂原活化蛋白激酶激酶激酶6
丝裂原活化蛋白激酶
胞外信号调节激酶1/2
c
AMP反应元件结合蛋白质
小眼畸形转录因子
黑色素细胞
Keywords
miR-
3
80
protein
kinase
kinase
1binding
protein
（CREB）
mitogen-activated protein kinase
kinase
kinase
6
（
map
3
k
6）
mitogen
-
activated
（
ME
k
1
）
extracellular
regulated
kinase
s
（ER
k
1/2）
cAMP-responsive-element
microphthalmia-associated
transcription
factor（MITF）
melanocyte
分类号
S852.2 [农业科学—基础兽医学]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
微小RNA-148a-3p靶向调控MAP3K9表达及对胃癌细胞增殖和凋亡的影响
牛虹
田同德
唐静雯
岳光星
李华华
范伊晓
周浩本
《临床肿瘤学杂志》
CAS
北大核心
2019
6
下载PDF
职称材料
2
miR-380调控羊驼黑色素细胞MAPK/ERK信号通路
杜斌
刘学贤
姬凯元
杨姗姗
刘博
张俊珍
范瑞文
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2018
1
下载PDF
职称材料
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