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微小RNA-4699-3p靶向调控MRPS23表达对卵巢癌细胞增殖和迁移的影响 被引量：2
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作者 魏峰 张锦 +3 位作者 张逸群 郑蓉 冷小飞 方彩云 《中国医师杂志》 CAS 2021年第7期1044-1048,共5页
目的探讨微小RNA(miRNA,miR)-4699-3p在卵巢癌细胞株中的表达,观察其靶向调控线粒体核糖体蛋白S23(MIRPS23)表达的能力及对卵巢癌细胞迁移和增殖的影响。方法实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miR-4699-3p在卵巢癌细胞株(OVCAR-3、... 目的探讨微小RNA(miRNA,miR)-4699-3p在卵巢癌细胞株中的表达,观察其靶向调控线粒体核糖体蛋白S23(MIRPS23)表达的能力及对卵巢癌细胞迁移和增殖的影响。方法实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miR-4699-3p在卵巢癌细胞株(OVCAR-3、SKOV-3、H0-8910、OC3、A2780)和正常卵巢上皮细胞(I0SE80)中的表达。采用脂质体转染法分别将miR-4699-3p模拟物或阴性对照miR-NC转染至miR-4699-3p表达最低的细胞株.定义为实验组和对照组。qRT-PCR验证转染效率。生物信息学技术预测miR-4699-3p的候选靶基因,双荧光素酶报告基因实验鉴定其对靶基因的调控能力。qRT-PCR和Westerm blot检测MRPS23在mRNA和蛋白水平的表达变化。细胞计数法(CCK-8)和Transwell迁移实验分别检测miR4699-3p对卵巢癌细胞增殖和迁移能力的影响。结果miR-4699-3p在卵巢癌细胞株中的表达明显低于正常卵巢上皮细胞(P<0.05),在OVCAR-3细胞中的表达最低(P<0.01)。转染miR 4699-3p后,实验组OVCAR-3细胞中miR 4699-3p表达量显著升高(P<0.01),证明转染成功。生物信息学软件预测,miR4699-3p的候选靶基因可能是线粒体核糖体蛋白S23(MRPS23),双荧光素酶报告基因实验证实miR-4699-3p可直接靶定MRPS23基因mRNA的3'-非翻译区(UTR)(P<0.01)。与对照组OVCAR-3细胞相比,实验组过表达miR-46993p后,MRPS23基因在mRNA和蛋白表达水平均明显降低(P<0.01),细胞转移和细胞周期调控蛋白Twist、Slug、CDK6、Cyclin D3表达均降低(P<0.05),OVCAR-3细胞的增殖能力降低(P<0.05),0VCAR-3细胞迁移能力降低(P<0.01)。结论miR-4699-3p在卵巢癌细胞株中低表达,上调OVCAR-3细胞中的miR4699-3p表达可通过F扰MRPS23基因表达,抑制卵巢癌细胞增殖和迁移能力。 展开更多
关键词 卵巢肿瘤 肿瘤细胞 培养的 miRNA-4699-3p 线粒体核糖体蛋白S23 细胞增殖 细胞迁移
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