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氢醌/Cu^(2+)对小鼠骨髓细胞线粒体氧化损伤的研究 被引量：13
1
作者 李芳红 杨杏芬 《中华劳动卫生职业病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期53-55,共3页
目的　研究在Cu2 +存在的条件下 ,氢醌 (HQ)对小鼠骨髓细胞线粒体的氧化损伤。方法　染毒 :(1)在 1μmol/LCu2 +存在的条件下 ,小鼠骨髓细胞用 0、10、2 0和 40 μmol/LHQ染毒 30min ;(2 ) 1μmol/LCu2 +存在的条件下 ,2 0 μmol/LHQ染... 目的　研究在Cu2 +存在的条件下 ,氢醌 (HQ)对小鼠骨髓细胞线粒体的氧化损伤。方法　染毒 :(1)在 1μmol/LCu2 +存在的条件下 ,小鼠骨髓细胞用 0、10、2 0和 40 μmol/LHQ染毒 30min ;(2 ) 1μmol/LCu2 +存在的条件下 ,2 0 μmol/LHQ染毒 30、6 0、12 0min。观察骨髓细胞死亡率 (CDR)、活性氧(ROS)生成、线粒体酶活力和线粒体膜电位 (MMP)的改变。结果　在 1μmol/LCu2 +存在的条件下 ,HQ在最低剂量组 (10 μmol/L)和最短染毒时间 (30min,2 0 μmol/L)即表现出ROS生成增加 (为对照组的374%和 5 41% )、CDR增加 (为对照组的 115 %和 117% )、线粒体酶活力下降 (为对照组的 5 4%和 30 % )和MMP降低 (为对照组的 6 7%和 71% ) ,与对照组的差异均有显著性 (P <0 .0 5 )。上述各指标与HQ之间存在剂量、时间的依赖关系 (ROS :r =0 .941,r =0 .981;CDR :r =0 .886 ,r =0 .886 ;线粒体酶活力 :r =- 0 .842 ,r=- 0 .90 2 ;MMP :r=- 0 .844 ,r=- 0 .96 1) ,ROS生成与MMP、CDR和线粒体酶活力间相关密切(r分别为 - 0 .90 2 ,0 .943,- 0 .977)。结论　在Cu2 +存在的情况下 ,HQ可导致小鼠骨髓细胞线粒体氧化损伤。 展开更多
关键词 氢醌 CU^2+ 线粒体氧化损伤 活性氧 线粒体膜电位 骨髓细胞毒性 苯
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槲皮素抑制异烟肼诱导的L-02细胞线粒体氧化应激性DNA损伤 被引量：6
2
作者 卢春凤 王淑秋 +4 位作者 陈廷玉 张明远 王淑湘 王建杰 袁庆 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期308-312,共5页
目的:探讨活性氧(ROS)介导的线粒体氧化损伤在异烟肼(INH)诱导L-02细胞DNA损伤中的作用及槲皮素对细胞的保护作用。方法:建立体外培养INH致肝细胞L-02损伤的模型,将细胞分为对照(control)组、INH组、槲皮素低剂量(Que low)及高剂量(Que ... 目的:探讨活性氧(ROS)介导的线粒体氧化损伤在异烟肼(INH)诱导L-02细胞DNA损伤中的作用及槲皮素对细胞的保护作用。方法:建立体外培养INH致肝细胞L-02损伤的模型,将细胞分为对照(control)组、INH组、槲皮素低剂量(Que low)及高剂量(Que high)组。利用彗星试验评价细胞DNA损伤;制备L-02细胞线粒体,应用荧光探针DCFH-DA和rhodamine 123检测细胞线粒体ROS水平及线粒体膜电位(ΔΨm);采用TBA法测定丙二醛(MDA)含量;应用黄嘌呤氧化酶法测定超氧化物歧化酶(SOD)的活性;采用Western blotting法检测细胞中Bcl-2和Bax蛋白表达,计算Bax/Bcl-2值。结果:INH可诱导L-02细胞DNA损伤,使细胞线粒体ROS水平、细胞MDA含量及Bax/Bcl-2值明显增高,并使细胞ΔΨm值和SOD活性明显下降。而槲皮素能减轻细胞DNA损伤,减少细胞ROS水平,增加细胞ΔΨm值,降低细胞MDA含量,增加SOD活性,减少Bax/Bcl-2值。结论:INH可通过诱导细胞线粒体氧化应激导致L-02细胞DNA损伤。槲皮素能减轻INH诱导L-02细胞的DNA损伤,对L-02细胞具有保护作用,可能与其抑制ROS介导的线粒体氧化损伤有关。 展开更多
关键词 槲皮素 异烟肼 线粒体氧化损伤 L-02细胞 DNA损伤
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石蒜碱调控线粒体氧化损伤介导人乳腺癌细胞自噬及凋亡作用机制
3
作者 辛国松 侯妍秀 +4 位作者 王毛毛 于淼 季宇彬 李文兰 李海茹 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2024年第12期4056-4064,共9页
目的研究石蒜碱介导人乳腺癌MDA-MB-231细胞自噬及凋亡的作用机制。方法采用CCK-8法检测石蒜碱对MDA-MB-231细胞增殖的影响;倒置显微镜、荧光显微镜和激光共聚焦扫描显微镜(laser scanning confocal microscopy,LSCM)观察细胞形态;细胞... 目的研究石蒜碱介导人乳腺癌MDA-MB-231细胞自噬及凋亡的作用机制。方法采用CCK-8法检测石蒜碱对MDA-MB-231细胞增殖的影响;倒置显微镜、荧光显微镜和激光共聚焦扫描显微镜(laser scanning confocal microscopy,LSCM)观察细胞形态;细胞集落实验检测细胞克隆形成能力;划痕实验检测细胞迁移能力;流式细胞仪检测细胞凋亡率、细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平、线粒体膜电位;LSCM检测线粒体膜通透性转换孔(mitochondrial permeability transition pore,MPTP)开放情况;Western blotting检测线粒体自噬相关蛋白[线粒体内膜转位酶(translocase of inner membrane,TIM)、线粒体外膜转位酶(translocase of outer membrane,TOM)、E3泛素连接酶(E3 ubiquitin protein ligase,PARKIN)、PTEN诱导的激酶1(PTEN induced putative kinase 1,PINK1)、微管相关蛋白轻链3(microtubule-associated protein light chain 3,LC3-B)、p62]和凋亡相关蛋白[半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(cystein-asparate protease-3,Caspase-3)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)、B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、细胞色素C(cytochrome-C,Cyt-C)]的表达。结果石蒜碱对MDA-MB-231细胞具有生长抑制作用,其半数抑制浓度(half inhibitory concentration,IC50)值为6.21μmol/L;石蒜碱能够改变细胞形态,部分细胞出现凋亡迹象;石蒜碱能够显著抑制细胞的增殖和迁移能力(P<0.01);与对照组比较,随着石蒜碱给药浓度的增加,细胞凋亡率随之升高(P<0.01),ROS水平升高(P<0.01),线粒体膜电位下降(P<0.01),MPTP开放(P<0.01);石蒜碱给药48 h后,细胞内TIM、TOM、p62和Bcl-2蛋白表达量下调(P<0.01),PARKIN、PINK1、LC3-B、Caspase-3、Bax和Cyt-C蛋白表达量上调(P<0.01),且呈浓度相关性。结论石蒜碱对MDA-MB-231细胞具有生长抑制作用,并可通过调控线粒体氧化损伤介导MDA-MB-231细胞的自噬及凋亡。 展开更多
关键词 石蒜碱 乳腺癌 线粒体氧化损伤 细胞自噬 细胞凋亡
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紫檀芪激活血红素加氧酶-1减轻小鼠脑缺血再灌注后线粒体氧化损伤 被引量：6
4
作者 甄恩迪 张勇 +4 位作者 刘阳阳 毛崇丹 张海峰 郝广志 董玉书 《神经解剖学杂志》 CSCD 北大核心 2017年第3期285-292,共8页
目的:探索紫檀芪(pterostilbene,PTE)对小鼠脑缺血再灌注(IR)后线粒体氧化损伤的作用及可能机制。方法:通过双侧颈总动脉阻断法建立小鼠脑IR模型,腹腔注射PTE或Zn PP(血红素加氧酶-1抑制剂),动物随机均分为IR组、PTE+IR组、PTE+Zn PP+I... 目的:探索紫檀芪(pterostilbene,PTE)对小鼠脑缺血再灌注(IR)后线粒体氧化损伤的作用及可能机制。方法:通过双侧颈总动脉阻断法建立小鼠脑IR模型,腹腔注射PTE或Zn PP(血红素加氧酶-1抑制剂),动物随机均分为IR组、PTE+IR组、PTE+Zn PP+IR组、Zn PP+IR组,并且PTE有2.5 mg/kg、5 mg/kg、10 mg/kg三个剂量组。然后,进行神经功能评分;通过干湿比重法测定脑水肿;火焰光度法测定Na^+含量;Neu N和TUNEL法测定细胞存活和凋亡;通过线粒体膜电位(MMP)、线粒体活性氧(ROS)产物和线粒体复合物I和IV活性测定来检测线粒体的氧化应激损伤;通过Western Blot检测血红素加氧酶-1(HO-1)、NADPH醌氧化还原酶-1(NQO1)、谷胱甘肽S-转移酶(GST)、线粒体和胞浆细胞色素c蛋白的表达。结果:PTE可以提高小鼠的神经功能评分、减轻脑水肿和降低脑Na^+含量。PTE上调HO-1、NQO1和GST的表达,提高MMP、线粒体复合体I/IV活性和线粒体细胞色素c水平,减少线粒体ROS产物和降低胞浆细胞色素c水平,并且有一定的剂量依赖性。但是,PTE的这些作用可以被HO-1的抑制剂Zn PP逆转。结论:在脑IR模型小鼠,PTE通过激活HO-1信号减轻线粒体氧化应激损伤和细胞死亡,从而发挥脑保护作用。 展开更多
关键词 紫檀芪 血红素加氧酶-1 缺血再灌注 线粒体氧化损伤 小鼠
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白藜芦醇减轻衰老小鼠听皮层线粒体氧化损伤 被引量：1
5
作者 高进良 彭梦萍 +1 位作者 刘成 陈锡铭 《中华耳科学杂志》 CSCD 北大核心 2023年第4期509-513,共5页
目的研究沉默信息调节因子2相关酶1(sirtuin1,SIRT1)激动剂白藜芦醇对D-半乳糖诱导的衰老小鼠听皮层线粒体氧化损伤的作用。方法24只5周龄雄性C57BL/6J小鼠适应性喂养1周后随机分成3组(8只/组):①对照组:小鼠每日皮下注射生理盐水1次,连... 目的研究沉默信息调节因子2相关酶1(sirtuin1,SIRT1)激动剂白藜芦醇对D-半乳糖诱导的衰老小鼠听皮层线粒体氧化损伤的作用。方法24只5周龄雄性C57BL/6J小鼠适应性喂养1周后随机分成3组(8只/组):①对照组:小鼠每日皮下注射生理盐水1次,连续6周;②D-半乳糖组:小鼠每日皮下注射1000mg/kg D-半乳糖1次,连续6周;③D-半乳糖+白藜芦醇组:小鼠每日皮下注射1000mg/kg D-半乳糖1次,饲料中添加白藜芦醇400mg/kg,连续6周。造模结束后,我们利用听性脑干反应(auditory brain response,ABR)检测各组小鼠听功能,利用免疫印迹检测各组小鼠听皮层SIRT1蛋白水平的表达,利用酶化学法检测H2O2水平和总超氧化物歧化酶(Total superoxide dismutase,T-SOD)活性,利用免疫组织化学检测DNA氧化损伤标记物8-羟基-2-脱氧鸟苷(8-hydroxy-2-deoxyguanosine,8-OHdG)的水平,利用透射电镜观察各组小鼠听皮层线粒体超微结构。结果和对照组相比较,D-半乳糖诱导的衰老小鼠90 dB SPL声强下ABR-I波幅值显著降低(P=0.000<0.01),ABR-I波潜伏期显著延长(P=0.004<0.01),听皮层组织中SIRT1蛋白表达显著降低(P=0.000<0.01),H2O2生成显著增加(P=0.000<0.01),T-SOD活性显著降低(P=0.000<0.01),线粒体DNA氧化损伤标记物8-OHdG显著增加(P=0.000<0.01),部分线粒体超微结构呈现空泡化。和D-半乳糖组相比较,D-半乳糖+白藜芦醇组小鼠90 dB SPL声强下ABR-I波幅值显著升高(P=0.012<0.05),ABR-I波潜伏期显著缩短(P=0.002<0.01),听皮层组织中SIRT1蛋白表达显著增加(P=0.000<0.01),H2O2生成显著减少(P=0.000<0.01),T-SOD活性显著增加(P=0.013<0.05),8-OHdG显著降低(P=0.000<0.01),线粒体超微结构基本正常,仅表现为电子密度降低。结论SIRT1激动剂白藜芦醇可有效减轻衰老过程中听皮层线粒体氧化损伤。 展开更多
关键词 白藜芦醇 SIRT1 老年性聋 听皮层 线粒体氧化损伤
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罗布麻宁减轻D-半乳糖诱导的老化大鼠听皮层线粒体氧化损伤 被引量：3
6
作者 杜政德 熊伟 +2 位作者 于树夔 柳柯 龚树生 《中华耳科学杂志》 CSCD 北大核心 2019年第2期243-247,共5页
目的研究NADPH氧化酶抑制剂罗布麻宁(Apocynin, APO)对D-半乳糖诱导的老化大鼠听皮层线粒体氧化损伤的作用。方法 36只1月龄雄性Sprague-Dawley大鼠适应性喂养1周后随机分为3组(每组12只):①对照组:大鼠颈背部皮下注射生理盐水,每日1次... 目的研究NADPH氧化酶抑制剂罗布麻宁(Apocynin, APO)对D-半乳糖诱导的老化大鼠听皮层线粒体氧化损伤的作用。方法 36只1月龄雄性Sprague-Dawley大鼠适应性喂养1周后随机分为3组(每组12只):①对照组:大鼠颈背部皮下注射生理盐水,每日1次,连续8周;②D-半乳糖组:大鼠颈背部皮下注射500mg/kg D-半乳糖,每日1次,连续8周;③D-半乳糖+罗布麻宁组:大鼠颈背部皮下注射500mg/kg D-半乳糖+腹膜内注射50mg/kg罗布麻宁,每日1次,连续8周。我们利用酶化学法检测H2O2、总超氧化物歧化酶(Total superoxide dismutase, T-SOD)活性、ATP和线粒体膜电位水平,利用免疫组织化学法检测DNA氧化损伤标记物8-羟基-2-脱氧鸟苷(8-hy?droxy-2-deoxyguanosine, 8-OHdG),利用透射电子显微镜观察听皮层线粒体超微结构。结果和对照组相比较,D-半乳糖组大鼠听皮层H2O2和8-OHdG水平显著增加,而T-SOD活性、ATP和线粒体膜电位水平则显著降低。和D-半乳糖组相比较,D-半乳糖+罗布麻宁组大鼠听皮层H2O2和8-OHdG水平显著降低,而T-SOD活性、ATP和线粒体膜电位水平则显著增加。同时,我们也观察到罗布麻宁可有效保护D-半乳糖诱导的老化大鼠听皮层线粒体超微结构。结论罗布麻宁可有效保护中枢听觉系统老化过程中线粒体氧化损伤。 展开更多
关键词 老年性聋 听皮层 线粒体氧化损伤 罗布麻宁 D-半乳糖
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人芽囊原虫感染肠上皮细胞超微结构变化动态观察 被引量：2
7
作者 裴培 辛致炜 +5 位作者 廖德君 卢韵宇 刘静 薛飒 刘登宇 傅晓茵 《热带医学杂志》 CAS 2020年第5期596-602,共7页
目的电镜下动态观察人芽囊原虫感染大鼠盲肠超微结构损伤,并探索其可能的损伤机制。方法30只SD大鼠随机分为:感染后1周组、3周组、6周组、9周组及对照组,每组6只。以108个/mL密度的人芽囊原虫滋养体经口感染各实验组大鼠,对照组经口灌... 目的电镜下动态观察人芽囊原虫感染大鼠盲肠超微结构损伤,并探索其可能的损伤机制。方法30只SD大鼠随机分为:感染后1周组、3周组、6周组、9周组及对照组,每组6只。以108个/mL密度的人芽囊原虫滋养体经口感染各实验组大鼠,对照组经口灌胃等体积磷酸缓冲液(PBS)。于感染后不同时间点取各组大鼠盲肠组织,利用透射电镜观察其结构变化,并采用qPCR检测盲肠组织中8-羟基鸟嘌呤DNA糖苷酶(OGG1)、脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶1(Apex1)、信号传导与转录激活因子(Stat3)、蛋白酪氨酸激酶(Src)及紧密连接胞质蛋白(ZO⁃1)的mRNA表达水平。结果透射电镜下观察各组大鼠盲肠肠上皮细胞的超微结构,可见线粒体的形态改变最为明显:对照组中可见线粒体形态呈规则圆形,超微结构正常;1周组中可见线粒体明显肿胀,线粒体嵴弯曲或消失,损伤与其他感染组相比最为严重;3周组中线粒体的肿胀程度较一周组线粒体肿胀程度稍轻;6周组中仅部分线粒体出现肿胀变形,且病变程度明显减轻;9周组中出现异常形态的线粒体最少,且仅见轻微变形,损伤最轻。进一步采用qPCR检查线粒体损伤相关分子的表达,结果显示:与对照组相比,OGG1、Apex1及Stat3的mRNA表达于感染后1周和3周显著升高,差异有统计学意义(P<0.05),其中1周升高最为明显,而感染后6周和9周时表达差异无统计学意义(P>0.05);Src于感染后1周显著升高(P<0.05),之后随着感染时间的延长表达量逐渐降低;ZO⁃1的表达于感染后第1周和第3周较对照组显著下降(P<0.05),而6周和9周表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论人芽囊原虫感染可导致大鼠盲肠上皮超微结构损伤,且急性感染期损伤程度最为严重,其损伤机制可能与线粒体损伤有关。 展开更多
关键词 人芽囊原虫 盲肠上皮细胞 线粒体氧化损伤 透射电子显微镜
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D-半乳糖诱导的小鼠耳蜗带状突触损伤 被引量：8
8
作者 杜政德 宋青玲 +2 位作者 韩曙光 柳柯 龚树生 《中华耳科学杂志》 CSCD 北大核心 2019年第2期154-158,共5页
目的研究D-半乳糖诱导的衰老小鼠耳蜗带状突触数量的变化。方法 1)D-半乳糖诱导的衰老小鼠模型的构建:24只5周龄雄性C57BL/6J小鼠适应性喂养1周后随机分为2组(每组12只):①对照组:小鼠颈背部皮下注射同体积的生理盐水,每日1次,连续6周;... 目的研究D-半乳糖诱导的衰老小鼠耳蜗带状突触数量的变化。方法 1)D-半乳糖诱导的衰老小鼠模型的构建:24只5周龄雄性C57BL/6J小鼠适应性喂养1周后随机分为2组(每组12只):①对照组:小鼠颈背部皮下注射同体积的生理盐水,每日1次,连续6周;②D-半乳糖组:小鼠颈背部皮下注射1000mg/kg D-半乳糖,每日1次,连续6周;2)ABR检测听小鼠听功能;3)免疫组织化学染色检测小鼠耳蜗线粒体DNA氧化损伤产物8-羟基-2-脱氧鸟苷(8-hydroxy-2-deoxyguanosine, 8-OHdG)的表达;4)免疫组织化学染色检测小鼠耳蜗带状突触突触前标记物CtBP2的数量;5)Western blot检测小鼠耳蜗CtBP2蛋白的表达。结果 1)D-半乳糖诱导的衰老小鼠听功能表现为ABR I波幅值的降低,而无阈值的改变;2)8-OHdG在D-半乳糖诱导的衰老小鼠耳蜗表达明显增加;3)D-半乳糖耳蜗带状突触数量明显减少;4)CtBP2蛋白在D-半乳糖诱导的衰老小鼠耳蜗表达明显减少。结论耳蜗带状突触是D-半乳糖诱导的衰老小鼠耳蜗早期出现的病变部位,D-半乳糖诱导的衰老小鼠可作为研究老年性聋耳蜗带状突触损伤的动物模型。 展开更多
关键词 老年性聋 带状突触 线粒体DNA氧化损伤 D-半乳糖
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体质性发育迟缓男童邻苯二甲酸酯暴露与线粒体DNA拷贝数及氧化损伤的关联性研究 被引量：2
9
作者 谢长明 高连连 +4 位作者 赵岩 陈姣 汪秀 蔡德培 张蕴晖 《环境与职业医学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第10期926-930,共5页
[目的]采用病例对照研究方法,观察邻苯二甲酸酯暴露对男童线粒体DNA氧化损伤及线粒体DNA拷贝数的影响,探索邻苯二甲酸酯影响男性性发育的可能机制。[方法]将2013—2014年经上海市某三级甲等医院确诊为体质性发育迟缓的8~15岁男童纳入研... [目的]采用病例对照研究方法,观察邻苯二甲酸酯暴露对男童线粒体DNA氧化损伤及线粒体DNA拷贝数的影响,探索邻苯二甲酸酯影响男性性发育的可能机制。[方法]将2013—2014年经上海市某三级甲等医院确诊为体质性发育迟缓的8~15岁男童纳入研究,共48例病例,匹配以同一年龄段同一医院就诊于外科的正常男童60例作为对照。采用高效液相色谱-串联质谱法检测病例和对照男童尿液中邻苯二甲酸单丁酯（Mn BP）、邻苯二甲酸甲酯（MMP）、邻苯二甲酸乙酯（MEP）邻苯二甲酸（2-乙基己基）单酯（MEHP）、邻苯二甲酸（2-乙基-5羟基己基）单酯（MEHHP）、邻苯二甲酸（2-乙基-5氧己基）单酯（MEOHP）浓度。运用t检验及多元线性回归模型分析邻苯二甲酸酯水平与线粒体DNA氧化损伤、线粒体DNA拷贝数在病例和对照中的差异及两者间的关联。[结果]病例组男童尿液Mn BP、MMP、MEHP、Sum DEHP浓度显著高于正常对照组（P值分别为0.017、0.008、0.038、0.020）。病例组男童线粒体DNA拷贝数高于对照组（P=0.001）,两组线粒体DNA氧化损伤水平差异无统计学意义。男童尿液MMP、MEHP、Sum DEHP浓度与线粒体DNA拷贝数存在显著正相关（P〈0.05）,但未发现线粒体DNA氧化损伤水平与邻苯二甲酸酯暴露水平间显著关联。[结论]体质性发育迟缓男童体内邻苯二甲酸酯暴露水平和线粒体DNA拷贝数显著升高,邻苯二甲酸酯暴露可能是线粒体功能受损的一个危险因素。 展开更多
关键词 体质性发育迟缓 邻苯二甲酸酯 线粒体DNA氧化损伤 线粒体DNA拷贝数
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